VEGF对大鼠慢性高眼压视网膜神经节细胞的作用

目的：探讨血管内皮生长因子（vascular endothelium growth factor, VEGF）对大鼠视网膜色素上皮生长因子（pigment epithelium-derived factor, PEDF）表达的影响及VEGF对慢性高眼压条件下神经节细胞（retinal ganglion cells, RGCs）的保护作用和可能途径。方法：雌性SD大鼠30只,随机分为高眼压＋VEGF组A(包括A3d,A14d)、高眼压＋安慰剂组B(包括B3d,B14d)和正常＋VEGF组C(包括C3d,C14d),A、B组模型制作应用巩膜浅层静脉烧烙法建立慢性高眼压模型,C组只剪开球结膜,不烧烙巩膜浅静脉。A、C组在模型建立后即刻用10μL微注射器于大鼠角膜缘后2mm处刺入玻璃体腔,抽出玻璃体2μL,再向玻璃体腔内注射2μL（0.05μg/μL）重组大鼠VEGF,B组同法注入等量的去离子水。在3d和14d后处死动物,取眼球,冰冻切片,免疫组织化学法观察视网膜PEDF的表达,用TUNEL染色检测各组视网膜神经节细胞的凋亡,免疫荧光双标观察PEDF染色阳性的细胞是何细胞。结果：术后眼压明显升高(P<0.05),术后3d和14d的眼压无显著性差异。视网膜PEDF染色阳性细胞,B组多于A组,A组多于C组;TUNEL荧光染色显示VEGF高眼压组RGCs的凋亡明显的少于高眼压组。 结论：玻璃体腔注射VEGF可减少高眼压视网膜神经节细胞的凋亡。     

色素上皮衍生因子对大鼠慢性高眼压视网膜神经节细胞的保护作用

目的探讨色素上皮衍生因子（PEDF）对慢性高眼压条件下大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）的作用。方法雌性SD大鼠36只,随机分为高眼压＋PEDF组（A组）、高眼压＋去离子水组（B组）和假手术＋PEDF组（C组）,A组、B组模型的制作应用巩膜浅层静脉烧烙法建立慢性高眼压模型,C组仅剪开球结膜,不烧烙巩膜浅静脉。A组、C组在模型建立后即刻用10μL微量注射器于大鼠角膜缘后2mm处刺入玻璃体腔,抽出玻璃体2μL,再向玻璃体腔内注射0．05g／L重组大鼠PEDF2μL,B组同法注入等量的去离子水。在3d和14d后处死动物,摘除眼球,将视网膜组织行冰冻切片,用TUNEL法及Fluoro—Jade（FJ）荧光染色检测各组RGCs的凋亡和变性。结果术后3d、14d时A组和B组眼压均明显升高,与同时间点C组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）;各组术后3d和14d间的眼压比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。TUNEL检测显示,A组、C组3d和14d RGCs的凋亡数目均明显少于同时间点B组（P〈0．05）,A组14d的凋亡细胞数明显少于3d（P〈0．05）。FJ荧光染色结果显示,A组、C组3d和14d变性RGCs数均明显少于B组（P〈0．05）,A组14d的变性细胞数较3d时明显减少（P〈0．05）。结论玻璃体腔注射PEDF可减少慢性高眼压大鼠RGCs的凋亡和变性。     

外加压在处理巩膜穿通伤手术中的应用

目的:探讨缝合巩膜穿通伤同时行巩膜外加压术,以减少外伤后视网膜脱离的手术方法。方法:Ⅲ区巩膜穿通伤28例,手术缝合巩膜裂口并做裂伤处外加压(同种异体巩膜)。结果:患者28例中,11例未出现视网膜脱离(随访3～6mo),17例增生性玻璃体视网膜病变,二次行玻璃体手术治疗。结论:该手术方法治疗Ⅲ区巩膜穿通伤,可使部分患者避免视网膜脱离,有临床应用价值。     

Ahmed引流阀植入联合玻璃体腔注射Bevacizumab治疗NVG

目的：观察Ahmed引流阀植入联合玻璃体腔注射bevacizumab(贝伐珠单抗)治疗新生血管性青光眼(neovascular glaucoma,NVG)的疗效。

方法：对22例22眼新生血管性青光眼患者先进行玻璃体腔注射bevacizumab 0.1mL(2.5mg),待虹膜新生血管消退后行Ahmed青光眼阀门植入术。术后观察视力、眼压、虹膜新生血管消退情况、术中及术后并发症,随访6～36(平均24)mo。

结果：玻璃体腔注药后1wk内22眼虹膜新生血管均有不同程度消退,Ahmed引流阀植入术后随访22眼中仅有3眼联合使用1～3种抗青光眼药物,眼压控制在21mmHg之内,1眼因眼压失控而行睫状体光凝术(810激光),其余18眼均无需加用抗青光眼药物眼压控制在正常范围内,最后一次随访,平均眼压15.59±3.21mmHg,与术前平均眼压(45.36±8.13mmHg)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。视力提高者9眼(41%),保持术前视力者13眼。全部病例在玻璃体腔注射bevacizumab及Ahmed引流阀植入术中术后均未观察到严重手术并发症。

结论：Ahmed引流阀植入联合玻璃体腔注射bevacizumab治疗NVG安全有效,手术成功率高,并发症少,有利于保护残留视功能。     

色素上皮衍生因子在慢性高眼压大鼠视网膜的表达

目的: 探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在大鼠视网膜的表达及其与慢性高眼压视神经损伤的关系.方法: 雌性SD大鼠102只,随机分为实验组G(包括G1 h,G12 h,G1 d,G3 d,G7 d,G14 d,G21 d,G28 d),对照组C(包括C1 h,C12 h,C1 d,C3 d,C7 d,C14 d,C21 d,C28 d) 和空白对照组D,各组均为6只,随机选一只眼为实验眼.应用巩膜浅层静脉烧烙法制作慢性高眼压(elevated intraocular pressure, EIOP)模型,用免疫组织化学染色法观察视网膜各层结构PEDF的表达和变化规律.结果: 免疫组化染色显示,G组术后1 d 大鼠视网膜PEDF染色阳性的细胞增多 (P﹤0.05),并且呈现递增趋势,到7 d 达到高峰(P﹤0.05),并持续至28 d 之后(P﹤0.05),而C和D组视网膜PEDF阳性细胞数量没有显著变化(P﹥0.05).C和D组PEDF阳性细胞主要分布在视网膜的色素上皮层(RPE)、视杆视锥细胞层(PRL)、外界膜(OLM)、外颗粒层(ONL)、内颗粒层(INL)、内网状层(IPL)、神经节细胞层(RGCL)、神经纤维层(RNFL).G组PEDF除了在上述的结构有相同的表达以外,在RGCL,RNFL显著增多.结论: 视网膜PEDF阳性细胞表达的变化与EIOP损伤有一定的时效和空间关系,视网膜PEDF阳性细胞表达的增强可能是EIOP损伤的应激反应.     

剥脱综合征性青光眼患者血清和房水中NO浓度的测定

目的:测定剥脱综合征性青光眼(peseudoexfoliation glaucoma,PEG)患者血清及房水一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度,并探讨其在PEG发病中的作用。方法:应用硝酸还原酶法测定PEG患者（实验组）及白内障患者（对照组）血清及房水NO浓度。结果:实验组血清及房水NO浓度明显低于对照组（P<0.01）。结论:PEG患者血清及房水NO浓度降低,可能是导致房水滤过阻力增高的原因之一。