三碘甲状腺原氨酸对兴奋毒性脑损伤模型小鼠学习记忆行为的影响

目的：有研究表明甲状腺功能减退大鼠学习、记忆功能的损伤与神经元局部三碘甲状腺原氨酸（triiodothyronine,T3）缺乏有关。该研究探讨左旋三碘甲状腺原氨酸（L-T3）对新生小鼠兴奋毒性脑损伤后学习、记忆行为的影响。方法：5日龄ICR种小鼠71只,用鹅膏蕈氨酸（ibotenic acid,IA）建立兴奋毒性脑损伤模型,随机分为磷酸盐缓冲液（PBS）组（n=14,脑内及腹腔注射PBS 10 mL/kg）、IA组（n=14,脑内注射IA+腹腔注射PBS 10 mL/kg）、低剂量T3组（n=14,脑内注射IA+腹腔注射L-T3 0.2 μg/kg）、中剂量T3组（n=15,脑内注射IA+腹腔注射L-T3 0.5 μg/kg）、高剂量T3组（n=14,脑内注射IA+腹腔注射L-T3 1 μg/kg）。腹腔注射时间为小鼠脑内注射后1、24、48、72、96 h。小鼠于生后第33、34天进行Y-迷宫分辨学习实验。结果：PBS组、IA组、低、中、高剂量L-T3组小鼠学会所需次数分别为15.0±4.7、21.3±6.3、20.5±6.0、21.0±6.5、15.8±4.5,高剂量L-T3组小鼠“学会”所需次数明显低于IA组和中、低剂量L-T3组（P<0.05）;记忆正确率分别为(90.7±7.3)%、(79.3±10.0)%、(77.9±14.2)%、(80.7±12.2)%、(91.4±9.5)%,高剂量L-T3组小鼠记忆正确率明显高于IA组和中、低剂量L-T3（P<0.05）。结论：高剂量L-T3（1 μg/kg）能促进兴奋毒性脑损伤小鼠的学习记忆行为。［中国当代儿科杂志,2010,12（4）：284-286］     

三碘甲腺原氨酸对新生小鼠兴奋毒性脑损伤病理改变及Caspase-3和髓鞘碱性蛋白表达的影响

目的 探讨腹腔注射不同剂量三碘甲腺原氨酸(T3)对新生小鼠兴奋毒性脑损伤脑组织病理改变和Caspase-3、髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响.方法 72只新生5日龄(P5)ICR小鼠随机分为PBS对照组(PBS组)、兴奋毒性脑损伤模型组(IA组)、T3低剂量治疗组(LT组)、T3中剂量治疗组(MT组)和T3高剂量治疗组(HT组).模型组及T3各剂量治疗组脑内注射鹅膏蕈氨酸建立兴奋毒性脑损伤模型,模型建立后腹腔注射3种不同剂量(2 μg·kg-1、5 μg·kg-1、10 μg·kg-1)T3共5 d干预治疗.于脑内注射后120 h(P10)、30 d(P35)各取6只小鼠处死,HE染色观察其脑组织病理改变.免疫组织化学法检测小鼠脑组织损伤区Caspase-3及MBP的表达.结果 P10时,MT组脑白质及皮质损伤较IA组均明显减轻(Pa＜0.01),HT组脑皮质损伤较IA组减轻(P＜0.05);IA组Caspase-3表达较PBS组明显增强(P＜0.001),MT组和HT组Caspase-3表达与IA组比较明显减低(P＜0.01);P10和P35时,IA组MBP表达较PBS组均明显减弱(P＜0.001),MT组和HT组MBP表达较IA组均明显增强(P＜0.05).LT组脑组织病理损伤程度及Caspase-3、MBP表达与IA组比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).结论 腹腔注射中剂量及高剂量T3可减轻小鼠兴奋毒性脑损伤病理损伤程度,减少细胞凋亡,促进髓鞘的形成;低剂量T3对新生小鼠兴奋毒性脑损伤程度、细胞凋亡及髓鞘形成均无影响.     

氟西汀和氟哌啶醇对DOI诱导头部抽动的小鼠模型的作用

目的：建立并评价拟抽动秽语综合征动物模型,探讨氟西汀和氟哌啶醇对该动物模型的作用。方法：将40只小鼠随机分为实验组和对照组,实验组小鼠腹腔注射DOI建立抽动秽语综合征小鼠模型,对照组注射生理盐水。应用高效液相－电化学法检测脑纹状体内多巴胺及其代谢产物高香草酸的含量。将80只小鼠随机分为4组,分别注射氟西汀、氟哌啶醇、氟西汀加氟哌啶醇和等体积生理盐水,每组取10只给药20 min后注射DOI,通过急性实验观察药物的作用;另外10只给药21 d后注射DOI,通过慢性实验观察药物的作用。结果：与对照组比,DOI诱导的头部抽动小鼠纹状体内多巴胺和高香草酸含量降低（58.16±14.51 ng/mg vs 45.00±11.24 ng/mg,12.82±2.66 ng/mg vs 10.54±1.86 ng/mg,均 P<0.05）。无论是急性实验还是慢性实验,与生理盐水组相比,预先应用氟哌啶醇的小鼠注射DOI后抽动行为显著减少（P<0.05）,预先应用氟西汀的小鼠注射DOI后抽动行为无明显改变（P>0.05）。结论：DOI诱导的头部抽动小鼠脑内多巴胺神经递质含量减少,可部分模拟抽动秽语综合征病人的神经生化和行为学改变。氟哌啶醇可抑制DOI诱导的小鼠抽动行为,氟西汀无明显作用。［中国当代儿科杂志,2007,9（5）：469-472］     

美金胺治疗对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠长期预后的影响研究

目的：动物实验已证明美金胺对缺氧缺血脑损伤具有神经保护作用,但是美金胺治疗能否改善脑缺氧缺血大鼠的长期预后,目前尚无有关研究资料。该研究应用Morris水迷宫测试探讨缺氧缺血后即刻使用美金胺对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠长期预后的影响,以期对美金胺的有效性做出全面而客观的评价,为今后建立安全有效的新生儿缺氧缺血性脑损伤的治疗方案提供依据。方法：60只7日龄SD大鼠随机分为对照组、缺氧缺血组(HI组)和美金胺20mg/kg治疗组(治疗组)。各组分别于23日龄始连续5d进行Morris水迷宫测试训练,于28日龄和35日龄正式测试,比较各组的逃逸潜伏期(EL)。结果：28日龄各组EL(s)值分别为:35.1±5.3(HI组)、20.6±3.4(治疗组)以及23.1±21.8(对照组),其中HI组与对照组在EL值之间的差异有显著性(P<0.05)。35日龄各组EL值(s)分别为:35.6±32.3(HI组)、16.3±13.2(治疗组)以及19.7±16.7(对照组),其中HI组与对照组EL值之间的差异有显著性(P<0.05),HI组和用药组则差异有非常显著性(P<0.01)。结论：新生大鼠在脑缺氧缺血后即刻使用美金胺可显著增强其空间辨识和学习记忆功能,改善其长期预后。     

三碘甲状腺原氨酸对兴奋毒性脑损伤新生鼠游泳行为的影响

目的探讨三碘甲状腺原氨酸(T3)对兴奋毒性脑损伤新生鼠游泳行为的影响。方法出生5d(P5)新生小鼠71只随机分为对照组、模型组和治疗组,脑内注射兴奋性脑毒素——鹅膏蕈氨酸(IA)建立兴奋毒性脑损伤模型。治疗组再分为低剂量组、中剂量组和高剂量组,并分别于造模后1h、24h、48h、72h、96h腹腔注射2μg·kg-1、5μg·kg-1、10μg·kg-1左旋三碘甲状腺原氨酸(L-T3)。设对照组,PBS替代IA和L-T3,方法同模型组和治疗组。于出生10d、12d(P10、P12)进行游泳实验,比较各组之间的差别。结果P10游泳实验总分:低剂量组、中剂量组及高剂量组与模型组比较均差异无统计学意义(Pa>0.05);P12游泳实验总分:低剂量组及中剂量组与模型组比较差异无统计学意义(Pa>0.05),但高剂量组评分高于模型组(P<0.05);P10四肢运动评分:低剂量组、中剂量组及高剂量组与模型组比较均差异无统计学意义(Pa>0.05);P12四肢运动评分:低剂量组与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),但中剂量组高于模型组(P<0.05),高剂量组明显高于模型组(P<0.01)。结论高剂量T3促进了兴奋...     

高氧环境下未成熟大鼠视网膜的脂质过氧化损伤

目的：探讨氧化应激在视网膜脂质过氧化损伤发生机制中的作用。方法：21 d出生的60只未成熟SD大鼠随机分为空气组和高氧组(每组30只)。空气组在空气中饲养;高氧组置于高浓度氧（95％）中饲养。ELISA方法检测大鼠血浆8-异-前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）含量,透射电镜观察视网膜超微结构改变。结果：在空气组,未成熟新生大鼠生后第3天、7天和14天血浆8-iso-PGF2α分别为19.09±5.57,18.24±5.91,17.00±5.58 pg/mL,差异无显著性（F=1.024,P=0.3634）;在高氧组,未成熟新生大鼠生后第3天、7天和14天血浆8-iso-PGF2α含量分别为28.33±5.59,51.20±15.01和84.54±14.85 pg/mL,差异具有显著性（F=150.7, P<0.01）,并明显高于同一时间点空气组水平（t=2.863,P<0.05;t=5.073,P<0.01;t=11.006,P<0.01）。空气组未成熟大鼠的视网膜超微结构正常;高氧组未成熟新生大鼠在生后第3天视网膜超微结构即发生变化,表现为膜盘结构疏松、扭曲、断裂及线粒体显著肿胀等。结论：氧化应激可导致未成熟视网膜脂质过氧化损伤,血浆8-iso-PGF2α水平升高与视网膜损伤程度相关。［中国当代儿科杂志,2007,9（2）：174-176］     

急性肠套叠患儿术后血浆白蛋白浓度的变化及意义

目的：探讨急性肠套叠患儿术后血浆白蛋白浓度的变化及意义。方法：用全自动生化分析仪分别测定32例轻症、21例重症急性肠套叠患儿术后第1天和治疗干预后术后第5天血浆白蛋白浓度及30例正常对照儿童血浆白蛋白浓度,并将轻重肠套叠两组患儿术后第1天的血浆白蛋白浓度与小儿危重评分进行相关性分析。结果：与正常对照组比较,轻症组与重症组血浆白蛋白浓度均下降,轻症组：（34.2±6.5）g/L vs （37.1±4.1）g/L,差异有显著性(P<0.05）;重症组：（25.8±7.5）g/L vs （37.1±4.1）g/L, P<0.01;重症组血浆白蛋白浓度明显低于轻症组,差异有显著性（P<0.05）。术后第5天,轻症组白蛋白浓度为（37.1±11.4）g/L高于术后第1天,差异有显著性（P<0.05）;重症组血浆白蛋白浓度术后第5天与术后第1天比较,差异无显著性（t=1.675,P＞0.05）。术后第1天血浆白蛋白浓度与小儿危重评分之间成正相关（r=0.879, P<0.01）。结论：急性肠套叠患儿术后第1天血浆白蛋白有不同程度的降低,并与急性肠套叠患儿术后严重程度相关;重症病例低白蛋白血症持续时间长,并与治疗干预无关。血浆白蛋白浓度测定可作为急性肠套叠患儿术后严重程度的预警指标。［中国当代儿科杂志,2009,11（4）：277-279］     

天花粉蛋白对小鼠单纯疱疹病毒感染性脑损伤的保护作用

目的：探讨天花粉蛋白对小鼠实验性单纯疱疹病毒感染性脑损伤的保护作用。方法：动物随机分为3组,空白对照组(空白组),模型对照组(模型组),模型+天花粉蛋白处理组(治疗组)。小鼠颅内接种单纯疱疹病毒I型(HSV-1)建立病毒性脑炎模型,于接种HSV-1前30min腹腔注射天花粉蛋白注射液,接种病毒后1,12,24,48h、4和7d测定脑组织含水量;感染后7d测定脑组织病毒滴定度,观察脑组织形态变化及动物神经症状评分。结果：天花粉蛋白治疗组于接种HSV-1后48h至7d脑组织含水量明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05),治疗组脑组织病毒滴度为1.16±0.45,明显低于模型组的2.89±0.44,差异有显著性;治疗组神经缺陷症状评分也明显低于对照组,病理形态观察治疗组脑组织间质水肿较轻,神经元无浓染、无坏死。结论：天花粉蛋白对小鼠实验性单纯疱疹病毒感染性脑损伤具有保护作用。     

健康新生儿的胃电图研究

目的：研究健康新生儿的胃电图。方法：20个健康足月新生儿胎龄37～39周,男11例,女9例,出生时阿氏评分平均为9.3±0.4分,无窒息,无器质性疾病,母乳喂养。采用体表胃电图,分别于出生后第1（第12小时）,7,14,21,28 天记录空腹和餐后体表胃电图各30 min。计算胃电图的以下参数: 主频、不同慢波节律的百分比、主频不稳定系数、功率比。结果：在所有新生儿均可记录到与成人类似的体表胃电图波形,新生儿出生后第1~28天餐前的正常胃电节律为（38. 2±4.9）%～（39.7±3.5）%,胃动过速节律为（23.7±5.4）%～（23.5±4.3）%,胃动过缓节律为（38.1±5.5）%～（36.8±3.9）%,不同年龄时期餐前与餐后相比无明显差别（P>0.05）。新生儿出生后第1~28天餐前主频为2.38±0.5 cpm～2.59±0.1 cpm ,餐后与餐前相比差异无显著性（P>0.05）,第14,21,28天餐前、餐后的主频较第1,7天高(P<0.05);生后第21,28天餐前、餐后的主频不稳定系数较第1,7,14天低(P<0.05),餐后与餐前相比差异无显著性（P>0.05）,生后第1～28天餐后餐前功率比差异无显著性（P>0.05）。结论：健康新生儿的胃电图参数与健康成人、儿童明显不同,胃电主频、正常胃电节律百分比较低,胃电主频随年龄增长逐渐升高。［中国当代儿科杂志,2007,9（4）：364-366］     

卵清蛋白诱导的过敏小鼠模型中多不饱和脂肪酸代谢变化

目的：观察卵清蛋白（OVA）诱导的过敏小鼠模型中多不饱和脂肪酸（PUFA）代谢的变化。方法：以缺乏n-3 PUFA饲料饲养雌鼠的仔鼠（21日龄）24只,随机分为空白组、OVA组和PBS组,各8只。实验第1 d,空白组心脏采血处死。实验第1 和15 d,OVA组腹腔注射含50 μg OVA和1.3 mg氢氧化铝凝胶的PBS 0.2 mL,PBS组腹腔注射等量PBS。实验第29~39 d,OVA组以含50 mg OVA的PBS 0.3 mL隔日灌胃,共6次;PBS组予等量PBS灌胃。实验第39 d末次灌胃后,OVA组和PBS组均心脏采血处死,取空肠组织和脾组织。 OVA过敏小鼠模型成功建立的判断标准：观察灌胃后小鼠腹泻情况,对空肠组织切片进行形态学观察（HE染色）和肥大细胞计数（甲苯胺蓝染色）,血清sIgE水平检测（ELISA 法）,脾组织中IL-4和IFN-γ检测（ELISA法）。提取各组小鼠血清中的脂肪酸,采用液相色谱法检测α 亚麻酸（ALA）、二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）、花生四烯酸（AA）和亚油酸（LA）水平。结果：①成功建立OVA诱导过敏小鼠模型：与PBS组比较,OVA组在灌胃后发生急性腹泻;小肠绒毛有大量炎症细胞浸润,潘氏细胞脱颗粒,固有层中肥大细胞聚集脱颗粒,肥大细胞数目增加（P＜0.05）;血清OVA-sIgE 水平、脾细胞培养上清中IL-4和IL-4/IFN-γ升高（P＜0.05）。②PBS组血清DHA、EPA和LA水平较空白组降低,AA水平升高,差异均有统计学意义,OVA组较PBS组血清DHA水平降低。结论：OVA过敏小鼠出现以DHA降低为主的脂肪酸代谢紊乱。     

腺病毒介导VEGF165基因转移对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：研究腺病毒介导的血管内皮生长因子（VEGF）165基因转移对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的神经保护作用。方法：采用细菌内同源重组技术构建Ad-VEGF腺病毒重组载体。7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成4组，假手术组（n=20）、HIBD组（n=25）、病毒缓冲液移植组（Buffer组，n=20），Ad-VEGF移植组（Ad-VEGF组，n=25）。使用Rice法制成HIBD模型，Ad-VEGF移植组和Buffer组在HIBD后3 d于大鼠左侧感觉运动皮层区分别立体定位注射2 μL重组体腺病毒悬液或病毒缓冲液；移植后7 d采用RT-PCR法检测鼠脑VEGF165 mRNA的表达；采用原位缺口末端标记法（TUNEL法）检测鼠脑皮质神经元凋亡情况； 采用免疫组织化学法分别检测VEGF蛋白表达及CD34表达计数大脑皮质微血管密度；30日龄时采用放射型迷宫觅水试验进行行为学测试，35日龄采用苏木精-伊红染色观察鼠脑组织病理学。结果：Ad-VEGF组VEGF165基因表达较HIBD组及Buffer组明显增高（P<0.05）；Ad-VEGF组脑细胞凋亡数目较HIBD组及Buffer组减少(P<0.05)；Ad-VEGF组平均大脑皮质微血管数及VEGF蛋白表达较HIBD组及Buffer组明显增多(P<0.05)； Ad-VEGF组行为学测试成绩较HIBD组及Buffer组改善(P<0.05)； Ad-VEGF组鼠脑皮层神经元变性坏死较HIBD组及Buffer组减轻。结论：腺病毒载体介导的VEGF165基因转移可增加新生鼠脑组织VEGF165 mRNA及VEGF蛋白的表达，减少脑细胞凋亡、增加新生脑血管形成，减轻缺氧缺血性脑损伤，改善远期学习记忆功能。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后的远期行为学测试

目的：目前对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型的研究多采用病理学和生化指标,而缺乏功能评价手段。该研究对新生大鼠HIBD后的行为学改变及其测定方法进行探讨,为新生大鼠HIBD的研究提供功能评价的方法。方法：24只7日龄新生SD大鼠随机分为对照组(n=12)和HIBD组(n=12),HIBD组大鼠予以缺氧缺血,对照组大鼠仅予以假手术。生后3周,两组大鼠予以T迷宫测试及感觉运动测试对学习记忆、空间能力和感觉运动功能进行评估。然后处死两组大鼠,取脑组织切片行尼氏染色,计数海马DG区和皮层区单位面积神经元的数目,并对行为学和组织学的结果进行相关分析。结果：在行为测试中,HIBD组大鼠的成绩显著低于正常鼠。在T迷宫测试中,两组在第3,4d的正确率有显著差异(P=0.049,P<0.001),HIBD组的正确率(68.3%±26.2%,66.7%±15.6%)显著低于对照组(86.7%±15.6%,98.3%±5.7%)。在感觉运动测试中,与正常鼠比较,HIBD鼠在足错误和肢体放置测试中表现出左右运动的不对称(均P<0.001),姿势反射也显示出了运动功能异常(P=0.032)。缺氧缺血导致了神经元损伤,使海马DG区(39.7±5.9vs50.9±4.1,P<0.001)和皮层单位面积内神经元(12.7±3.3vs18.2±3.3,P<0.001)数目显著减少。但行为学测试结果与组织学改变无相关性。结论：新生鼠缺氧缺血会造成远期学习记忆,空间能力和感觉运动功能障碍,T迷宫测试和三项感觉运动测试可以作为大鼠HIBD模型的评价指标。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤远期行为学和超微结构改变

目的：建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型,观察远期行为学及超微结构改变。方法：60只7日龄新生Sprague-Dawley大鼠随机分为HIBD组和假手术组,每组30只。生后5周进行Morris水迷宫试验及感觉功能测试;取脑组织切片行尼氏染色计数神经元数目;取皮层、海马行透射电镜,观察突触结构,测量突触后致密区（PSD）厚度及活性区长度,并与行为学结果进行相关分析。结果：Morris水迷宫试验中,HIBD组大鼠寻找平台潜伏期时间明显长于假手术组（P<0.05）;HIBD组大鼠穿越平台次数较假手术组少（P<0.05）。感觉运动功能试验中,HIBD组测试结果明显差于假手术组。尼氏染色提示HIBD组神经元数目明显减少（P<0.01）。电镜显示HIBD组大鼠突触数量减少,PSD厚度及活性区长度变薄变短。HIBD组大鼠PSD厚度与Morris水迷宫试验寻找平台潜伏期时间呈负相关（r=-0.861,P<0.01）,与三项感觉功能评估得分之和亦呈负相关（r=-0.758,P<0.05）。结论：缺氧缺血可致新生鼠远期神经元减少和超微结构损伤,造成远期行为学功能障碍。     

电刺激对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织血管内皮细胞生长因子及其受体表达的影响

目的探讨电刺激对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体表达的影响。方法新生7日龄健康SD大鼠75只。随机分成假手术组(对照组)、缺氧缺血组(模型组)及电刺激组,每组25只。采用结扎其左侧颈总动脉并吸入氮氧混合气体2 h,制作新生大鼠HIBD动物模型。电刺激组大鼠于术后12 h开始予小脑顶核电刺激,30 min.次-1,1次.d-1,时长分别为1 d、3 d、7 d、14 d、21 d。模型组、对照组不予电刺激,相应时段仅予捕捉固定。电刺激结束后,分别与相应时段各取5只大鼠处死后,应用免疫组织化学技术观察其脑组织海马区VEGF及其受体fam样酪氨酸激酶受体(flt-1/VEGFR1)、胎肝激酶受体(flk-1/KDR/VEGFR2)的表达变化情况。应用SPSS15.0软件进行统计学处理。结果电刺激组各时间点VEGF及VEGFR1、VEGFR2表达均显著高于模型组和对照组(Pa<0.05);模型组各时间点VEGF及VEGFR1、VEGFR2表达均显著高于对照组(Pa<0.05);电刺激组和模型组VEGF表达于第3天达高峰,持续14 d开始下降,至21 d仍有表达,VEG...     

Deleterious effects of IL-9-activated mast cells and neuroprotection by antihistamine drugs in the developing mouse brain

Elevated mean IL-9 serum levels have been observed in human neonates who will later develop cerebral palsy. In earlier studies, using a newborn mouse model of excitotoxic lesions mimicking those described in human cerebral palsy, we found that IL-9 pretreatment exacerbated brain damage produced by intracerebral injections of the glutamatergic analog ibotenate. Among its different cell targets, the Th2 cytokine IL-9 is a mast cell growth and differentiation factor that can cause mast cells to release various substances including histamine. In the present study, we sought to determine whether the deleterious effects of IL-9 in our mouse model were mediated by mast cells through histamine release. All mouse pups were pretreated with intraperitoneal injections of IL-9 or saline between postnatal days (P) P1 and P5. Immunohistochemistry for murine mast cell protease-1 performed on P5 showed an increased density of labeled cells in the neopallium of IL-9-treated Swiss pups as compared with controls. Western blot analysis confirmed the increased murine mast cell protease-1 brain content of IL-9-treated Swiss mice. IL-9 pretreatment had no significant effect on ibotenate-induced excitotoxic brain lesions in mast cell-deficient P5 pups (WBB6F1/J kit(W/W-v)), whereas IL-9 exacerbated these lesions in the control littermates with normal mast cell populations. Finally, cromoglycate or antihistamine drugs significantly reduced ibotenate-induced brain lesions in IL-9-treated Swiss pups. Taken together, these data suggest that recruitment of cerebral mast cells with histamine release may contribute to the exacerbation of neonatal excitotoxic brain lesions produced by IL-9. Neuroprotective strategies targeting mast cells may be useful in some neonates at risk for cerebral palsy.     

早期环境刺激对缺氧缺血性脑损伤大鼠学习记忆的影响

目的探讨生命早期丰富环境和触摸干预对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠空间参考学习记忆能力及海马CA1区神经元数量的影响。方法生后7 d大鼠,建立HIBD动物模型,随机分为未干预组、丰富环境组、早期触摸组、联合干预组;另设假手术组,每组各14只大鼠。HIBD后7 d开始给予大鼠不同干预,于生后35 d行Morris水迷宫测试;同时,采用尼氏染色法观察各组大鼠海马CA1区神经元数量的变化。结果在Morris水迷宫隐蔽平台测试中,丰富环境组和联合干预组大鼠到达平台的平均潜伏期时间明显短于未干预组和早期触摸组,差异有统计学意义(P均<0.05);而早期触摸组与未干预组的差异无统计学意义。在Morris水迷宫探索测试中,丰富环境组和联合干预组大鼠在目标象限停留的百分比较未干预组显著增高,差异有统计学意义(P均<0.01),而早期触摸组和未干预组的差异无统计学意义。HIBD大鼠损伤侧海马CA1区神经元较假手术组明显减少,差异有统计学意义(P<0.001);其中联合干预组和丰富环境组大鼠损伤侧海马CA1区神经元的数目较未干预组和早期触摸组增加,差异有统计学意义(P<0.05);丰富环境组大鼠非损伤侧神经元数目增加,与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生仔鼠HIBD后1周开始的丰富环境仍可促进仔鼠脑功能恢复;新生仔鼠HIBD后早期短暂的触摸并不能增加丰富环境干预的疗效。     

丹参联合骨髓间充质干细胞移植治疗新生鼠缺氧缺血性脑损伤的实验研究

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)植入缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑后,植入MSCs在脑组织中的迁移、神经细胞抗原分化率的变化,探讨丹参联合MSCs移植治疗新生儿HIE的可行性.方法 将36只7日龄新生SD大鼠随机分为正常对照组(8只)、HIE组(8只)、MSCs移植组(10只)、MSCs移植+丹参组(10只).在MSCs移植后18 d取脑组织后做石蜡切片,免疫组织化学法检测并计数进入脑组织的MSCs,观察植入细胞在脑组织中的分布、迁移;免疫荧光双标记法检测植入细胞神经元巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,观察其向神经细胞的分化,并进行组间比较.结果 植入MSCs主要分布于HIBD组左侧大脑皮质区,MSCs移植+丹参组标本中MSCs更多向右侧大脑半球迁移,且分布范围更广,与MSCs移植组比较,不同脑组织层面、两侧大脑半球MSCs计数均有统计学差异(Pa＜0.05);免疫荧光双标记法观察MSCs主要在左侧大脑皮质、海马等部位分化为神经细胞,Nestin、NSE、GFAP均可表达.MSCs移植+丹参组植入MSCs的Nestin、NSE分化率更高,且有统计学意义;MSCs移植组和MSCs移植+丹参组GFAP分化率比较差异无统计学意义.结论 MSCs植入HIBD新生大鼠脑组织后能存活,并在脑组织中移行,植入MSCs主要在HIBD新生鼠左侧脑皮质、海马等部位分化为神经细胞,表达Nestin、NSE及GFAP,加用丹参后可促进植入MSCs表达Nestin及NSE,对GFAP表达无影响.