广西崇左市葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因突变型研究

目的 研究广西崇左市葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的发生率及基因突变类型.方法 对广西崇左市510例病例采用四氮唑蓝定量法筛查G6PD活性.对诊断为G6PD缺乏的病例采用PCR/限制性内切酶消化试验检测出G1376T、G1388A、A95G、G871A和C1024T 5种常见G6PD基因突变类型,用DNA直接测序法检测未确定突变类型的标本.结果 在广西崇左市510名居民中筛查出52例G6PD缺乏症,其缺乏率为10.20％.在52例G6PD缺乏症标本中,检出G1376T突变14例、G1388A突变12例、A95G突变13例、G871A突变6例、C1024T突变1例,C1360T突变1例、C519T突变l例,未定型4例.结论 G6PD缺乏症在广西崇左市的发病率为10.20％.G1388A、G1376T、A95G也是广西崇左市G6PD缺乏症最常见的基因突变.发现G6PDUnion 1例,很可能属于零星分布.     

成都市54 025例早产儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查结果及分子遗传学特征分析

目的 分析成都市早产儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD）缺乏症筛查结果及基因突变分布情况,探讨早产儿人群G6PD筛查流程改进方案。方法 采用干血斑G6PD荧光分析法,对成都市2015年1月1日至2019年12月31日出生的54 025例早产儿足跟血样本进行G6PD缺乏症筛查,对213例筛查阳性患儿联合运用G6PD酶学和基因检测进行诊断分析。结果 在54 025例早产儿中,确诊G6PD缺乏症患儿192例,发病率为3.55‰。早产儿G6PD缺乏症的发病率高于同期足月儿,且有逐年增高趋势（P < 0.05）。夏季出生、胎龄<32周、出生体重<2 500 g为筛查假阳性率增加的影响因素（P < 0.05）。女性患儿基因检测法的确诊符合率高于酶活性检测法（P < 0.05）。成都地区共检出9种基因突变,未检出复合杂合突变,女性患儿未检出纯合突变。80例检出基因突变的患儿中,检出率最高的前3种基因突变类型为：c.1388G>A 26例（32%）、c.1376G>T 21例（26%）、c.1024C>T 13例（16%）,共占比75%。3种基因突变类型的致病性分类情况差异有统计学意义（P < 0.001）;两两比较结果显示c.1024C>T比c.1376G>T、c.1388G>A基因突变的致病性分类程度更轻（P < 0.0167）,提示c.1376G>T与c.1388G>A对G6PD酶活性的影响大于c.1024C>T。结论 应重视早产儿G6PD缺乏症筛查工作;建议夏季采用冷链运输标本以降低G6PD缺乏症筛查的初筛假阳性率;在女性筛查阳性儿中推广基因检测,以提高女性早产儿G6PD缺乏症检出率;成都地区早产儿G6PD缺乏症基因突变的类型呈多样化分布,c.1024C>T患儿病情程度较轻。     

浙江地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的遗传学分析

目的　分析浙江地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD）缺乏症的基因突变特点，探讨其遗传多样性。方法　以2015年3月至2017年9月在浙江地区出生、经浙江省新生儿遗传代谢筛查中心G6PD缺乏症筛查发现的2242例患儿为对象，收集其新生儿筛查的G6PD活性值与剩余干滤纸血斑，并提取其血斑的基因组DNA。采用MassARRAY技术检测35个G6PD突变位点。采用SPSS 22.0软件统计分析基因型与G6PD活性的关系，P＜0.05为差异有统计学意义。结果　2163例检出突变，总检出率为96.47%，其中男性为96.51%（1995/2067），女性为96%（168/175）。共检出21种突变位点，44种变异基因型，其中男性半合子19型，女性杂合子14型，女性纯合子3型，女性复合杂合8型。95.93%的G6PD突变位于12、9、2、5外显子，其中c.1376G＞T、c.1388G＞A、c.1024C＞T、c.95A＞G、c.871G＞A、c.392G＞T占92.96%。c.1376G＞T、c.1388G＞A、c.1024C＞T、c.95A＞G四种基因型的G6PD活性差异有统计学意义（P＜0.0001）。结论　浙江地区G6PD缺乏症存在基因突变热点，c.1024 C＞T的突变频率具有明显地域特征，MassARRAY技术检测特定G6PD突变位点可推荐为G6PD缺乏症的二级筛查方法之一。     

浙江地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的遗传学分析

目的　分析浙江地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD）缺乏症的基因突变特点，探讨其遗传多样性。方法　以2015年3月至2017年9月在浙江地区出生、经浙江省新生儿遗传代谢筛查中心G6PD缺乏症筛查发现的2242例患儿为对象，收集其新生儿筛查的G6PD活性值与剩余干滤纸血斑，并提取其血斑的基因组DNA。采用MassARRAY技术检测35个G6PD突变位点。采用SPSS 22.0软件统计分析基因型与G6PD活性的关系，P＜0.05为差异有统计学意义。结果　2163例检出突变，总检出率为96.47%，其中男性为96.51%（1995/2067），女性为96%（168/175）。共检出21种突变位点，44种变异基因型，其中男性半合子19型，女性杂合子14型，女性纯合子3型，女性复合杂合8型。95.93%的G6PD突变位于12、9、2、5外显子，其中c.1376G＞T、c.1388G＞A、c.1024C＞T、c.95A＞G、c.871G＞A、c.392G＞T占92.96%。c.1376G＞T、c.1388G＞A、c.1024C＞T、c.95A＞G四种基因型的G6PD活性差异有统计学意义（P＜0.0001）。结论　浙江地区G6PD缺乏症存在基因突变热点，c.1024 C＞T的突变频率具有明显地域特征，MassARRAY技术检测特定G6PD突变位点可推荐为G6PD缺乏症的二级筛查方法之一。     

海南省妇女儿童医学中心5246名女性新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因型与酶活性分析

目的　分析海南省妇女儿童医学中心女性新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的基因突变特点,探讨基因型与酶活性的关系。方法　以2017—2019年在海南省妇女儿童医学中心新生儿疾病筛查中心完成G6PD初筛的女性新生儿血样本为研究对象,收集G6PD酶缺乏的干血斑样本2153份,同时为提高女性杂合子的检出率,随机抽取酶活性正常的干血斑样本3093份,共计5246份样本纳入研究。提取脱氧核糖核酸（DNA）,采用多色探针荧光聚合酶链反应（PCR）熔解曲线法（MMCA法）检测G6PD基因突变。结果　在5246份女性新生儿样本中共检出基因突变2801份,总检出率为53.39%（2801/5246）,其中酶活性正常者占26.24%（735/2801）。发现13个突变位点的变异,有32种突变基因型,包括杂合突变型12种,纯合突变型6种和复合突变型14种。前７位最常见的突变位点依次是c.1376G>T、c.1388G>A、c.871G>A、c.95A>G、c.1024C>T、c.392G>T、c.519C>T,其中c.871G>A的检出率高于c.95A>G。同时发现1例罕见的突变位点c.593G>A。女性新生儿中复合突变和纯合突变与严重的G6PD缺乏症有关,它们的酶活性均明显低于单杂合突变的活性（P<0.001）,而单杂合突变女性的G6PD活性分布非常广泛,无明显可分辨的界限值。结论　海南省妇女儿童医学中心女性新生儿G6PD缺乏症的基因突变型复杂多样,热点突变是c.1376G>T、c.1388G>A、c.871G>A,其中c.871G>A具有海南地区的地域特性和女性特征。结合酶活性检测和MMCA法分析DNA,能有效提高女性G6PD缺乏症的检出率。该研究数据可为基因型和临床表型之间关系的研究以及群体遗传学的研究提供参考。     

广西地区地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿G6PD基因突变型的初步研究

目的 了解广西地区地中海贫血合并葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症患儿G6PD基因突变的类型。方法 采用自然或错配引物介导的聚合酶链反应（PCR）／限制性内切酶分析，检测11例地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿G1388A、G1376T和A95G三种G6PD基因突变类型。结果 11例地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿中，检出G1388A突变4例，G1376T突变3例，A95G突变1例，未定型3例。结论 广西地区地中海贫血合并G6PD缺乏症与单纯的G6PD缺乏症的基因突变型比较差异不明显，推测地中海贫血患儿的G6PD缺陷可能是原发性改变。婚前检查及产前诊断对减少地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿的出生具有十分重要的意义。     

31例G6PD缺乏症患儿基因突变与临床表现分析

目的研究31例G6PD缺乏症患儿的基因突变类型,探讨基因型与临床表现的关系。方法应用二代测序技术进行基因测序,了解基因突变类型,并对临床资料进行回顾性分析。结果31例G6PD缺乏症患儿(男27例,女4例)参与基因检测,检出29例基因突变(男25例,女4例),2例未检出突变,检出率为93.5%。单个基因位点突变28例,单基因突变率为96.6%,8例为c.G1388A(28.57%),7例c.G1376T(25.00%),4例c.G487A(14.29%),4例c.G871A(14.29%),2例c.A95G(7.14%),2例c.C1024T(7.14%),1例c.G392T(3.57%)。发现1例c.G1388A合并c.G77A(SNP:rs368832112)复合杂合突变,系国内首次报道,复合位点突变率3.4%。31例患儿临床表现主要为蚕豆病,或感染等因素诱发的溶血性贫血。结论本组G6PD缺乏症患儿的常见基因突变类型为G1388A、G1376T、G487A及G871A,临床表现为蚕豆等诱发的急性溶血性贫血。     

基因芯片技术用于广西柳州地区G-6PD缺乏症基因突变的检测

目的明确广西柳州地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症基因突变类型.方法聚合酶链反应扩增柳州地区籍44例G6PD缺乏症足月新生儿和30例G6PD活性对照者的DNA标本相应片断,扩增产物与G6PD缺乏症诊断芯片杂交,扫描仪检测荧光信号强度,作出基因诊断.结果44例G6PD缺乏症的DNA标本中,检出1388G→A20例(基因频率43.1%)、1376G→T9例(基因频率21.6%)、95A→G 6例(基因频率15.7%)、392G→T 5例(基因频率11.8%)、1024C→T 1例(基因频率1.9%)、未知突变3例(基因频率5.8%).结论基因芯片诊断技术是检测G6PD缺乏症基因突变的有效方法,可在临床推广应用.     

重庆市新生儿高胆红素血症患儿G6PD基因突变类型及临床特点

目的研究重庆市新生儿黄疸儿G6PD三种常见基因突变与其临床表现特点之间的关系。初步估计其基因突变频率并探讨其临床意义和遗传学特征。方法应用突变特异性扩增系统(ARMS)法,检测54例重庆市新生儿黄疸儿的G6PD基因突变类型。结果检出G1388A突变39例(72%),G1376T突变8例(15%),未定型者7例(13%)。未检出G95A。结论本研究首次对重庆市新生儿黄疸儿进行G1388A、G1376T和A95G突变检测。提示G1388A和G1376T为重庆市新生儿黄疸儿G6PD缺乏症基因突变的主要类型。ARMS法是一种简便、快速、经济的检测G6PD已知基因突变的方法。本研究发现这两种突变类型仅见于中国人和华裔人群,具有遗传学及临床意义。     

广西百色地区42例壮族新生儿G6PD基因突变分析

目的 了解百色地区出生的壮族新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症基因突变特点,以提高诊断水平.方法 用速率法筛查新生儿G6PD活性,选择2012年2～12月在我院产科出生或入住新生儿病房的G6PD缺乏症壮族新生儿,用PCR加反向点杂交技术快速检测中国人常见的基因突变类型G1388A、G1376T、C1024T、C1004T、G871A和A95G.结果 共诊断49例G6PD缺乏症患儿,检出突变类型42例,单个位点突变40例,其中G1388A 10例(23.8％)、G1376T11例(26.2％)、A95G 14例(33.3％)、C1024T 5例(11.9％);复合位点突变2例(4.8％)均为G1388A+ A95G.结论 百色地区为少数民族聚集区,基因突变有其较为特殊的类型.     

逆转录-PCR-变性梯度凝胶电泳法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因缺陷女性携带者

目的：探讨应用逆转录-PCR-变性梯度凝胶电泳法(RT-PCR-DGGE)对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因缺陷女性携带者人群进行分子诊断的可行性。方法：对54例G6PD基因缺陷可疑携带女性的血液标本,应用外周血提取总RNA并逆转录成cDNA;针对已报道的中国人群17种突变位点,以cDNA为模版,分段设计6对DGGE引物,PCR扩增、DGGE筛查分型,必要时进行测序验证。结果：54例可疑标本共检出1例1024C/T、20例1376G/T、12例1388G/A ,共检出杂合突变标本33例,总检出率为61.1%。结论： RT-PCR-DGGE对G6PD基因缺陷女性携带者人群具有较高的检出率,具有临床诊断意义。［中国当代儿科杂志,2009,11（8）：613-616］     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因启动子甲基化研究

目的 了解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因启动子区甲基化改变特点,探讨甲基化改变与G6PD缺乏症的关系。方法 将2013年8月至2014年7月期间195例贫血查因或体检儿童分为G6PD缺乏组(130例)和对照组(65例)。荧光定量PCR检测G6PDmRNA表达情况。甲基化敏感性高分辨率熔解曲线分析(MS-HRM)结合重亚硫酸盐PCR测序法(BSP)等方法分析G6PDmRNA表达偏低的G6PD缺乏症患者的基因启动子甲基化改变情况,另对G6PDmRNA表达正常的44例女性标本(G6PD缺乏组7例和正常对照组37例)的G6PD基因启动子甲基化情况进行分析。结果 22例(16.9%,22/130)G6PD缺乏症患者的G6PDmRNA表达偏低,其中的16例男性均无甲基化、6例女性均存在部分甲基化。44例G6PDmRNA表达正常的G6PD缺乏组及对照组女性中,40例检测到部分甲基化,4例无甲基化(G6PD缺乏组1例,对照组3例)。结论 基因启动子区甲基化与男性G6PD缺乏症没有关联。女性人群G6PD基因存在部分甲基化与无甲基化,提示甲基化改变对女性G6PD缺乏症可能有一定影响。     

A novel G473A mutation in the glucose‐6‐phosphate dehydrogenase gene

Hereditary deficiency in human glucose‐6‐phosphate dehydrogenase (G6PD) is mostly caused by single nucleotide change in the G6PD gene which leads to single amino acid substitution. In 104 cases of Chinese children with G6PD deficiency, RT‐PCR‐DGGE (denaturing gradient gel electrophoresis) combined with DNA sequencing was carried out to screen the mutations within the coding region of G6PD gene. A novel missense mutation (G473A), predicting a Cys‐to‐Tyr substitution at codon 158, was identified in a male infant patient and confirmed in his mother. This G6PD variant (158 Tyr) showed decreased enzyme activity, belonging to WHO Class II. We designated this variant as G6PD Shenzhen by the birthplace of the propositus. Pediatr Blood Cancer. 2010;55:383–385. © 2010 Wiley–Liss, Inc.     

国人常见的两种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变及其临床表现

目的 探讨中国人中两种常见葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因突变与临床表现的关系。方法 应用突变扩增系统（ＡＲＭＳ）法。研究１５例云南籍汉族Ｇ６ＰＤ缺乏症患儿两种常见Ｇ６ＰＤ基因突变,并对其临床表现进行分析,结果 １５例中检出,ｃＤＮＡＧ１３８８Ａ突变９例,ｃＤＮＡＧ１３７６Ｔ突变５例,未定型１例,所有患者都具有急性溶血性贫血,黄疸等临床表现不同程度的血红蛋白尿,Ｇ６酶活性降低,结论 Ｇ６ＰＤ     

8例囊性纤维化患儿临床及基因突变分析北大核心CSCD

目的总结分析囊性纤维化(cystic fibrosis,CF)患儿的临床及基因突变位点,以提高对CF的认识,减少误诊、漏诊。方法回顾性分析河北省儿童医院2018~2021年确诊的8例CF患儿的病历资料。结果8例患儿(男5例,女3例),诊断年龄为3~48个月(中位年龄8个月),发病年龄为0~24个月(中位年龄2.5个月)。临床表现为反复呼吸道感染7例,鼻窦炎3例,支气管扩张4例,腹泻8例,脂肪泻3例,可疑胰腺功能不全6例,胰腺CF 1例,营养不良5例,假性Bartter综合征4例。最常见的呼吸道病原为铜绿假单胞菌(4例)。经高通量测序、多重连接探针扩增技术和Sanger测序验证共发现16个变异位点,包括移码突变5个,无义突变4个,错义突变4个,外显子缺失2个,剪接突变1个。8例患儿均检出CFTR基因突变。最常见的基因突变类型是p.G970D(3例),观察到1例F508del基因突变。检出4个新发现的变异:deletion exon15、c.3796_3797dupGA(p.I1267Kfs*12)、c.2328dupA(p.V777Sfs*2)、c.2950G>A(p.D984N)。结论p.G970D为CF患儿最常见的突变类型。对于临床上反复呼吸道感染,合并或不合并消化系统表现和假性Bartter综合征,以及呼吸道病原学检测示铜绿假单胞菌阳性的患儿,需警惕CF。