胰岛淀粉样多肽对培养大鼠胰岛细胞分泌胰岛素的影响

胰岛淀粉样多肽（ＩＡＰＰ）是一种新发现的由胰岛β细胞分泌的激素，在非胰岛素依赖型糖尿病的发生发展中具有重要意义。本研究旨在观察ＩＡＰＰ对培养的新生大鼠胰岛细胞单层培养物胰岛素分泌的影响。取新生大鼠胰腺，用胰蛋白酶和胶原酶（Ⅴ型）反复消化分散细胞，ＲＰＭＩ１６４０培养液培养，碘乙酰去除成纤维细胞。于培养后７ｄ选生长一致、形态良好的单层细胞培养物用于ＩＡＰＰ实验。结果ＩＡＰＰ与培养７ｄ的胰岛细胞单层培     

力竭性游泳对大鼠胰岛 A、B 细胞形态学变化的影响——免疫组化及原位分子杂交结果分析

采用免疫组化及原位分子杂交技术，本文研究了负重力竭性游泳对大鼠胰岛Ａ、Ｂ细胞分泌功能的影响。主要结果发现：力竭状态下，①大鼠胰岛Ｉｎｓ－ＩＲ细胞呈色反应强度增加，而Ｇｌｕ－ＩＲ细胞呈色反应强度降低，说明Ｂ细胞Ｉｎｓ释放被抑制，Ａ细胞Ｇｌｕ释放增多。②大鼠胰岛Ｂ细胞内Ｐｒｏ－ＩｎｓｍＲＮＡ杂交信号明显减弱，说明Ｐｒｏ－Ｉｎｓ－ｍＲＮＡ转录受到抑制，Ｉｎｓ合成受抑。③Ｉｎｓ－ＩＲ和ＩＡＰＰ－ＩＲ细胞未呈现相同程度的呈色反应变化，提示Ｂ细胞内存在着含ＩＡＰＰ／Ｉｎｓ不同比率的分泌颗粒，可随机体的机能状态需要而分别释放。     

特技飞行对血清胰岛素、皮质醇、血管紧张素Ⅱ和胃泌素的影响

为观察特技飞行对胰岛素、皮质醇、血管紧张素Ⅱ和胃泌素等激素的影响。２０名健康男性飞行员（年龄２４～３０岁），复杂特技飞行时最大加速度为＋６．０Ｇｚ，分别在飞行前２ｈ，飞行后即刻、６ｈ及飞行后２４ｈ采血。用放射免疫法测定上述激素。结果发现，飞行后即刻血清胰岛素含量（２６．４±３．６８μＩＵ／ｍｌ）较飞行前（１３．１±０．４８μＩＵ／ｍｌ）有明显升高（Ｐ＜０．０１），飞行后２４ｈ胰岛素含量（１７．２±１．３７μＩＵ／ｍｌ）明显下降，与飞行后即刻比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５），但与飞行前比较，无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。飞行后即刻６ｈ血清胃泌素明显升高（９６．４±２２．０，１１０．７±２８。７ｐｇ／ｍｌ）与飞行前（３５．３±１５，０ｐｇ／ｍｌ比较，有显著差异（Ｐ＜０．０５）。飞行后２４ｈ血清胃泌素明显下降，与飞行后即刻比较有显著差异（Ｐ＜０．０５）。飞行前后血清皮质醇和血管紧张素Ⅱ均无显著性变化（Ｐ＞０．０５）。飞行后即刻胰岛素及胃泌素含量均明显高于飞行后２４ｈ，二者同为上午１０时抽取的标本，说明其升高不是正常日节律所致，与饮食亦无明显关系。有研究发现，特技飞行后即刻血液中胃动素含量明显升高，胃动素能促进胰岛     

海藻酸钠—多聚赖氨酸—海藻酸钠微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿 …

采用Ｓｕｎ海藻酸钠－多聚赖氨酸－海灌酸钠（ＡＰＡ）微囊制作技术，分别包裹大鼠胰岛素分泌细胞系，移植于糖尿病小鼠腹腔。结果表明ＡＰＡ微囊化大鼠胰岛或胰岛素分泌细胞，均可使糖尿病小鼠血糖降低至拉近正常水平达３周至１１０天，移植微囊无明显的组织学反应。证明该ＡＰＡ微囊化胰岛细胞移植具有较好的治疗效果，微囊具有较好的生物相容性和免疫隔离作用。进一步发展生物型人工胰尊定了基础。     

海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病的实验研究

采用Ｓｕｎ海藻酸钠－多聚赖氨酸－海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊制作技术,分别包裹大鼠胰岛和胰岛素分泌细胞系,移植于糖尿病小鼠腹腔。结果表明ＡＰＡ微囊化大鼠胰岛或胰岛素分泌细胞移植,均可使糖尿病小鼠血糖降低至接近正常水平达３周至１１０天;移植微囊无明显的组织学反应。证明该ＡＰＡ微囊化胰岛细胞移植具有较好的治疗效果,微囊具有较好的生物相容性和免疫隔离作用。为进一步发展生物型人工胰岛奠定了基础。     

烟碱对大鼠脑突触体摄取钙离子的影响

在大鼠脑突触体上，０．０１～１００μｍｏｌ／Ｌ的Ｎ受体激动剂烟碱可浓度依赖性地增加对同浓度４５Ｃａ２＋（１．０μｍｏｌ／Ｌ）的摄取量，并为１．０μｍｏｌ／ＬＮ受体拮抗剂美加明所对抗。相同条件下，１．０μｍｏｌ／Ｌ烟碱也可显著增加脑突触体对不同浓度４５Ｃａ２＋（０．１～１００μｍｏｌ／Ｌ）的摄取量。提示烟碱作用于脑Ｎ受体，可增加脑突触体对钙离子的摄取量     

雌激素替代疗法对绝经后妇女冠心病患者血脂及胰岛素抵抗的近期影响

为探索小剂量雌激素（Ｅ）及Ｅ与孕激素（Ｐ）联合应用对妇女冠心病（ＣＨＤ）的防治机制。将１０８例绝经１年以上的ＣＨＤ患者随机分为３组各３６例，甲组口服ｐｒｅｍａｒｉｎ（倍美力）０．６２５ｍｇ１／ｄ，乙组口服ｌｉｖｉａｌ（利维爱）２．５ｍｇ，１／ｄ，丙组口服安慰剂１片／ｄ，于服药前及服药第３、６个月末检测血浆性激素、血脂谱、糖代谢等各项指标的变化情况。结果显示，ｐｒｅｍａｒｉｎ治疗３个月后可使ＴＣ降低１２．８％，ＴＧ降低１７％，ＬＤＬ－Ｃ降低２９％，ＨＤＬ－Ｃ上升１４．６％，Ｉｎｓ降低３７．８％，１／ＳＧ．Ｉｎｓ上升１倍（Ｐ均＜０．０１），６个月时与３个月治疗效果相同。而ＳＧ治疗前后无显著变化（Ｐ＞０．０５）。ｌｉｖｉａｌ治疗３个月及６个月时ＴＣ降低８．７％，ＴＧ分别降低１５．６４及３３．８％、ＨＤＬ－Ｃ降低１９．７％及２８．３％（Ｐ均＜０．０１），ＬＤＬ－Ｃ、Ｉｎｓ、ＳＧ水平１／ＳＧ．Ｉｎｓ比值治疗前后无显著变化。安慰剂组治疗前后各指标均无显著变化。表明单用小剂量Ｅ可显著改善绝经后妇女ＣＨＤ患者的异常血脂谱、胰岛素抵抗，其作用显著优于Ｅ＋Ｐ联合疗法。     

胰高糖素—胰岛素疗法治疗重症肝炎的探讨

通过对１０８例病毒性肝炎患者的空腹血糖（Ｇｌｕ），胰岛素（Ｉｎｓ），胰高糖素（Ｇｌ）的检测，探讨胰高糖素—胰岛素疗法（Ｇ—Ｉ疗法）对重症肝炎的治疗意义。结果：重症肝炎组的Ｇｌｕ４．４１±０．９６ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｉｎｓ：１３．９１±３．２５ｍｕ／Ｌ，Ｇｌ：４８２．５６±１５８．６４ｎｇ／Ｌ，与正常人对照Ｐ＜０．０１。三者之间调节紊乱，普通型肝炎则无影响。结果提示在重症肝炎中应用Ｇ—Ｉ疗法是不恰当的。     

外源一氧化氮对大鼠胰岛细胞损伤机制研究

目的：研究外源NO对胰岛细胞的损伤机制和功能的影响。方法：采用DNA电泳技术以及单细胞电泳检测NO对胰岛细胞的凋亡和DNA的损伤作用；通过测定胰岛素含量检测胰岛细胞在NO作用下的合成和分泌功能。结果：外源NO能导致胰岛细胞DNA的断裂形成彗星细胞，DNA电泳显示典型梯状条带，大剂量NO形成死亡条带；同时NO能抑制胰岛细胞合成和分泌胰岛素。结论：外源NO可导致胰岛细胞凋亡、DNA断裂损伤并抑制其合成分泌胰岛素的功能。     

新型钙通道拮抗剂尼卡地平衍生物的心血管效应

根据尼卡地平结构特征，设计并合成了三个衍生物，化合物代号分别为９２０１、９２０２和９２０３。在体外血管、工作心脏和清醒大鼠多种实验模型上，研究这三个新化合物对心血管系统的作用特点。在大鼠主动脉环上，尼卡地平、９２０１、９２０２和９２０３抗氯化钾４０ｍｍｏｌ／Ｌ缩血管作用的ＥＣ５０值分别为１．１，０．４，１．２，７．２μｍｏｌ／Ｌ；抗氯化钙２５ｍｍｏｌ／Ｌ缩血管作用的ＥＣ５０值分别为４６，６，１．１，２．８μｍｏｌ／Ｌ；浓度在０．１～１００μｍｏｌ／Ｌ范围内，不对抗去甲肾上腺素５．５μｍｏｌ／Ｌ诱发血管收缩的作用；浓度增至１０ｍｍｏｌ／Ｌ也不对抗去甲肾上腺素０．６μｍｏｌ／Ｌ在无钙孵育液中的缩血管效应。在大鼠工作心脏上，９２０２作用强度与尼卡地平相当，浓度在０．１～１．０μｍｏｌ／Ｌ时可减慢心率，抑制心脏收缩和舒张功能，９２０１和９２０３的作用比尼卡地平弱９０％以上。在清醒大鼠上，灌胃给予尼卡地平及其三个衍生物３ｍｇ／ｋｇ均可使收缩压下降２．０～２．７ｋＰａ，降压至少可持续３ｈ，且对心率的影响轻。提示尼卡地平及这三个衍生物具有较强的扩血管作用，其中９２０１和９２０３对心脏的作用较轻，口服可产生确切的降压效应。     

游离脂肪酸对大鼠胰岛细胞Leptin受体的影响

目的　探讨游离脂肪酸是否会影响胰岛细胞Leptin受体的基因和蛋白表达及酪氨酸磷酸化 ,进而导致胰岛素抵抗及葡萄糖代谢的异常。方法　分离、培养新生SD大鼠胰岛细胞 ,分别与软脂酸 (0 2 5mmol/L)或油酸(0 12 5mmol/L)孵育 12、2 4、36h ,提取蛋白后用Western印迹法检测Leptin受体(OB R)的蛋白水平 ,用RT PCR检测胰岛细胞内OB RRNA含量的变化 ,用免疫沉淀法检测OB R的酪氨酸磷酸化程度。结果　软脂酸和油酸孵育后大鼠胰岛细胞OB R的蛋白表达水平在孵育 2 4、36h后均下调 (P <0 0 5 ) ;Leptin受体的RNA水平和酪氨酸磷酸化程度在各个时间点均下调 (P <0 0 5 )。结论　游离脂肪酸可对OB R的基因和蛋白表达水平及磷酸化程度产生一定的抑制作用 ,这种抑制作用可能是游离脂肪酸导致胰岛素抵抗的因素之一     

不同浓度的胰岛素对SW480肿瘤细胞分泌IGF-1的影响

目的探讨不同浓度的胰岛素对SW480肿瘤细胞IGF-1表达的影响。方法体外常规培养SW480肿瘤细胞。根据所用培养液外加胰岛素浓度的不同,将实验细胞分为七组：0组（对照组）RPMI1640培养液;第1组RPMI1640培养液＋5p,IU／ml胰岛素;第2组RPMI1640培养液＋25μIU／m1胰岛素;第3组RPMI1640培养液＋50pJU／ml胰岛素;第4组RPMI1640培养液＋75μIU／ml胰岛素;第5组RPMl1640培养液＋100μIU／m1胰岛素;第6组RPMI1640培养液＋125μlU／ml胰岛素。每组设3个复孔,置3＇7℃、5％C02饱和湿度的培养箱培养48h,培养结束后收集细胞培养上清,ELISA法检测IGF-1的浓度。结果高浓度的胰岛素组（第5组、第6组,培养液中分别含100、125μIU／ml的胰岛素）tGF．1的表达（286．18±23．98、296．28±32．57）高于无胰岛素的对照组（193．22±22．77）,差异有统计学意义（P〈0．01）;而1、2、3、4组（培养液中分别含5pAU／ml、25μIU／ml、50txIU／ml、75μJU／ml的胰岛素）IGF-1的表达（（192．19±25．98、201．10±20．42、204．88±20,40、207．05±30．44）与无胰岛素的对照组（193．22±22．77）比较,差异无统计学意义（P〉0．05）结论高浓度的胰岛素增加了SW480肿瘤细胞IGF-1的分泌。     

Contrast media-induced chromosomal damage in human lymphocyte cultures

Ionic (diatrizoate, ioxaglate) and nonionic (iohexol, iosimide, iopromide, and iotrolan) contrast media (CM) were evaluated for their cytogenetic effects in lymphocytes. Heparinized blood was mixed with culture medium RPMI-1640 supplemented with phytohemagglutinin, fetal calf serum, and antibiotics. Plastic tubes containing blood samples were incubated at 37 degrees C in 5% CO2 humidified air for 48 hours. To these cultures, increasing amounts of CM were added and cells incubated for an additional 24 hours. After this exposure, red blood cells were lysed with hypotonic KC1, lymphocyte smears fixed on glass slides and stained with May-Grünwald Giemsa. Chromosomal damage was analyzed by a micronucleus test. All CM tested induced micronuclei in lymphocytes quite significantly (P less than .001) when compared with the frequency of micronuclei in controls. These observations on the genotoxic potential of nonionic CM suggest that factors other than ionic composition and osmolality are involved in clastogenesis; further studies are needed to establish the molecular mechanisms in CM induced chromosomal damage.     

雷公藤甲素及地塞米松对哮喘豚鼠体外嗜酸细胞凋亡与Fas mRNA表达的影响

目的：观察雷公藤甲素及地塞米松在体外对哮喘豚鼠肺泡灌洗液中不同密度嗜酸细胞（Eos）凋亡及Fas mRNA表达的影响，探讨其促进哮喘Eos凋亡的机制。方法：卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48h后行支气管肺泡灌洗，分离不同密度Eos。雷公藤甲素（TP）（10^-7～10^-4mot／L）或地塞米松（DM）（10^-10～10^-5mot／L）干预24h，原位杂交检测Eos的Fas mRNA表达。TUNEL法检测细胞凋亡。结果：TP或DM干预24h，Eos凋亡增加，Fas mRNA表达增强，并且呈剂量依赖性。Fas mRNA的表达与Eos凋亡呈正相关。结论：TP及DM可提高Fas mRNA表达，促进Eos凋亡。Fas可能是TP及DM调节Eos凋亡的通路之一。     

雌激素对软骨细胞胶原表型表达的影响

目的 :观察雌激素对体外培养兔关节软骨细胞胶原表型表达的影响。方法 :体外培养雌兔关节软骨细胞 ,随机分为A、B两组 ,A组中加入 1 7β -雌二醇 0mol/L、1 0 - 6 mol/L、1 0 - 7mol/L、1 0 - 8mol/L、1 0 - 9mol/L、1 0 - 10 mol/L、1 0 - 11mol/L、1 0 - 12 mol/L干预 72小时 ;B组先用 1 0ng/mlIL - 1 β干预 2 4小时 ,随后分别加入 0mol/L、1 0 - 6 mol/L～ 1 0 - 12 mol/L 1 7β -雌二醇作用 72小时。采用RT-PCR方法观察软骨细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原表达。结果 :1 0 - 6 mol/L雌二醇或单用IL - 1 β均抑制正常软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA表达 ,低浓度雌二醇 (1 0 - 11、1 0 - 12 mol/L)能够对抗IL - 1 β的抑制作用 ;所有软骨细胞均未表达Ⅲ型胶原mRNA ;几乎所有浓度雌二醇 (1 0 - 12 mol/L除外 )均诱导软骨细胞表达Ⅰ型胶原。结论 :雌激素对关节软骨细胞胶原表型表达的调控作用随其浓度变化而不同。对变性软骨细胞而言 ,低于生理浓度的雌激素 (1 0 - 12 mol/L)对维持其胶原表型最适宜。     

具PPARγ和PPARα双重激动作用的ARB类药物的筛选

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体(AT1R)阻滞剂(ARB)类药物对过氧化酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和过氧化酶体增殖物激活受体α(PPARα)的激活作用。方法以COS-7细胞构建PPARγ-荧光素酶基因报告系统及PPARα-荧光素酶基因报告系统,然后分别加入不同浓度(0、0.01、0.1、1、10、100μmol/L)的缬沙坦、氯沙坦、厄贝沙坦、替米沙坦,或先与10、30μmol/L的PPARγ拮抗剂GW9662共孵育1h后再分别加入不同浓度(0.1、1、10μmol/L)的厄贝沙坦、替米沙坦,继续培养12、24、36、48、60h后,用双荧光素酶基因报告系统检测荧光素酶活性,以反映PPARγ及PPARα的表达活性。3T3-L1细胞经诱导分化为脂肪细胞,分别加入10μmol/L的缬沙坦、氯沙坦、厄贝沙坦及替米沙坦培养细胞24h后,采用RT-PCR和Westernblotting检测细胞内PPARγ、PPARαmRNA及蛋白的表达水平。结果缬沙坦、氯沙坦不能增加COS-7细胞PPARγ及PPARα荧光素酶的活性。厄贝沙坦、替米沙坦均可增加COS-7细胞PPARγ及PPARα荧光素酶的活性,其中100μmol/L...     

人参皂甙Rd对脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤的作用观察

目的 探讨人参皂甙Rd对体外培养的脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤的作用.方法 分离胎龄15d的SD大鼠的脊髓运动神经元,培养6d后分为4组:对照组,培养基中不加药液;谷氨酸(Glu)组,培养基中加入300μmol/L谷氨酸;人参皂甙Rd+谷氨酸(GSRd+Glu)组,培养基中预先加入10μmol/L人参皂甙Rd孵育30min,再加入300μmol/L谷氨酸;丙二醇+谷氨酸(Vehicle+Glu)组,培养基中预先加入等容量丙二醇孵育30min,再加入300μmol/L谷氨酸.继续培养24h,相差显微镜下观察神经元形态及生长状况,进行细胞计数,测定神经元存活率及培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果 Glu组存活的脊髓运动神经元数目少,偶有突起形成,细胞受损严重;GSRd+Glu组脊髓运动神经元数目明显增多(P＜0.05),突起较多,只少数死亡细胞;Vehicle+Glu组神经元形态与Glu组相似.Glu组及Vehicle+Glu 组脊髓运动神经元存活率分别为22.7％±2.3％、23.6％±2.1％,明显低于对照组(l00％±0％,P＜0.05)及GSRd+Glu组(58.6％±2.3％,P＜0.05),而Glu组与Vehicle+Glu组比较、对照组与GSRd+Glu组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).Glu组及Vehicle+Glu组培养上清中LDH活性分别为142.50±3.55、139.20±2.75U/L,明显高于对照组(42.3±3.6U/L)及GSRd+Glu组(84.2±2.5U/L,P＜0.05),而Glu组与Vehicle+Glu组比较、对照组与GSRd+Glu组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 人参皂甙Rd对脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤具有保护作用.     

雌激素对软骨细胞蛋白多糖表型表达的影响

目的 :观察雌激素对体外培养兔关节软骨细胞蛋白多糖表型表达的影响。方法 :体外培养雌兔关节软骨细胞 ,随机分为A、B两组 ,A组中加入 1 7β-雌二醇 0mol/L、1 0 -6mol/L、1 0 -7mol/L、1 0 -8mol/L、1 0 -9mol/L、1 0 -10 mol/L、1 0 -11mol/L、1 0 -12 mol/L干预 72小时 ;B组先用 1 0ng/mlIL-1 β干预 2 4小时 ,随后分别加入 0mol/L、1 0 -6mol/L～ 1 0 -12 mol/L 1 7β-雌二醇作用 72小时。采用RT-PCR方法观察软骨细胞核心蛋白、Decorin、BiglycanmRNA的表达。结果 :A组中 ,1 0 -6mol/L雌二醇组不表达Decorin,1 0 -9～1 0 -11mol/L雌二醇组Decorin表达量较正常对照减少 ;BiglycanmRNA表达量与空白对照无明显差异。B组中 ,IL -1 β +1 0 -7、1 0 -8mol/L雌二醇组核心蛋白mRNA表达量较空白对照明显减少 ;IL -1 β +1 0 -7～ -11mol/L雌二醇组DecorinmRNA表达量较单用IL -1 β组有所增加 ;除IL -1 β +1 0 -12 mol/L组外 ,其余各组表达BiglycanmRNA明显减少。结论 :雌激素对关节软骨细胞蛋白多糖表型表达的调控作用随其浓度变化而不同。高浓度雌激素 (1 0 -6mol/L)抑制正常软骨细胞蛋白多糖合成。对变性软骨细胞而言 ,低于生理浓度的雌激素对维持其蛋白多糖表型较适宜。