亚低温对于心肺复苏后大鼠海马神经细胞ROS产生量和Caspase-3mRNA表达的影响

目的观察亚低温（Hypothermia,HT）对心肺复苏（Cardiopulmonaryresuscitation,CPR）后大鼠海马神经细胞活性氧（Reactiveoxygenspecies,ROS）产生量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）mRNA表达的影响。方法37只健康成年雄性SD大鼠随机分为3组：空白对照组、常温CPR组、亚低温CPR组。CPR组再分2个亚组：即自主循环恢复（ReturnofSpontaneousCirculation,ROSC）后12h、24h组,除空白对照组为5只大鼠外,余各亚组大鼠均为8只。亚低温CPR组在ROSC后立即行亚低温干预。到达各观察时相点时立即取材,应用流式法检测大鼠海马单细胞悬液中活性氧水平,逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术测定海马神经细胞Caspase-3mRNA的表达水平。结果亚低温CPR组ROSC后12h、24h的ROS产生量和Caspase-3 mRNA表达与相同时相点常温CPR组比较均显著降低（P〈0．05）。结论HT能减少CPR后大鼠神经细胞ROS的产生,并能通过抑制Caspase-3mRNA表达而使神经细胞凋亡减少。     

大鼠伽玛刀照射后AQP4的表达及其与脑水肿的相关性研究

目的探讨大鼠伽玛刀照射后AQP4的表达及其与脑水肿的相关性。方法Wistar大鼠随机分成对照组和实验组。实验组通过伽玛刀照射尾状核头部（100Gy，4mm）制成大鼠脑水肿模型。观察时间点选定于照射后1、3、7、15、30和45d。干湿比重法检测脑含水量，免疫组化、原位杂交检测AQP4及其mRNA的表达。结果AQP4及其mRNA在软脑膜下星形胶质细胞、脉络膜丛、室管膜及血管周围星形胶质细胞胞膜上均有表达。照射后，上述部位AQP4及其mRNA表达显著增强，30d达高峰。AQP4 mRNA及AQP4，AQP4与脑含水量的变化呈显著正相关。结论伽玛刀照射大鼠尾状核后，可促使特定区域内AQP4及其mRNA表达增加，其意义之一可能在于参与脑水肿的发生发展。     

经鼻腔给予IGF-1对缺血缺氧性脑损伤大鼠caspase-3表达和细胞凋亡的影响

目的探讨经鼻腔给予IGF-1对缺血缺氧性脑损伤大鼠caspase-3表达和细胞凋亡的影响。方法取30只7日龄SD大鼠随机分为3组：假手术组、模型组和实验组,10只／组。模型组和实验组大鼠制成脑缺血缺氧模型;实验组在造模1h后经鼻腔给予50μgIGF-1,模型组和假手术组在造模1h后给予等体积的PBS。1周后处死大鼠,免疫组织化学方法测定caspase-3的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果假手术组大鼠caspase-3阳性细胞显著少于模型组和实验组（P〈0．05）,且实验组caspase-3阳性细胞显著少于模型组（P〈0．05）;假手术组大鼠脑内凋亡细胞显著少于模型组和实验组（P〈0．05）,且实验组凋亡细胞显著少于模型组（P〈0．05）。结论IGF-1经鼻腔给药可以抑制缺血缺氧大鼠脑组织caspase-3的表达,减少神经细胞凋亡,对缺血缺氧性脑损伤具有明显的保护性作用。     

早期高压氧暴露对大鼠脑外伤后脑组织水通道蛋白-4和半胱天冬酶-3表达的影响

目的观察早期高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）暴露对实验大鼠脑外伤后水通道蛋白-4（aquaporin-4，AQP-4）和半胱天冬酶-3（caspase-3）的影响，探讨高压氧对脑外伤的治疗作用及脑保护的分子生物机制。方法采用Feeney自由落体法建立大鼠脑外伤模型，将大鼠随机分为假手术组、创伤组和HBO组，HBO组在损伤后1h内给予高压氧治疗，第4天用干湿重法测脑组织含水量、免疫组织化学法及图像分析技术检测AQP-4和caspase-3，用双重染色免疫组化法检测AQP-4与S100。结果与创伤组比较，大鼠脑外伤后早期给予高压氧能显著降低脑含水量及AQP-4和caspase-3的表达（P〈0．05）。结论早期高压氧治疗能减少大鼠脑外伤后AQP-4和caspase-3的表达，高压氧对创伤性脑损伤的脑保护机制可能与减轻神经胶质细胞介导的细胞性脑水肿、减少神经细胞凋亡有关。     

光动力疗法影响大鼠C6胶质瘤AQP4表达的实验研究

目的研究光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）治疗大鼠c6脑胶质瘤后水通道蛋白4（aquaporin4,AQP4）的变化,并探究其与脑水肿之间的关系。。方法培养C6胶质瘤细胞,建立c6大鼠胶质瘤模型,分成PDT组、单纯激光照射组、单纯光敏剂组、空白对照组进行实验,术后24h分别用鼠脑干湿重法及Westernblot进行脑水肿对比和AQP4蛋白定量测定。结果PDT组鼠脑组织含水量大于其他三组,而单纯激光照射组与单纯光敏剂组之间无明显差异,但大于空白对照组。AQP4与脑水肿密切相关。AQP4在PDT组表达明显高于单纯激光照射组和单纯光敏剂组,远高于空白对照组。结论光动力治疗脑胶质瘤可加重脑水肿的发生,AQP4在光动力治疗脑胶质瘤术后表达增高,与脑水肿成正相关。AQP4介导了光动力治疗脑胶质瘤术后脑水肿的加重,因而调控AQP4的表达有可能成为光动力治疗脑胶质瘤的新的探索方向。     

大鼠弥漫性轴突损伤早期淀粉样前体蛋白(β-APP)表达的实验研究

目的 观察大鼠弥漫性轴突损伤（DAI）早期脑内各部位淀粉样前体蛋白（β-APP）表达的变化。方法 应用瞬间旋转致伤装置使16只SD大鼠发生DAI，并于伤后3h、6h分批处死（每时间点8只），另取8只大鼠作为正常对照，在24h后处死。取各组大鼠脑标本进行免疫组织化学观察，检查损伤后早期不同时间皮质下白质、海马、胼胝体、脑干区域的病理学改变。各部位（胼胝体、海马、脑干）的切片在显微镜下（200倍）进行半定量分析。结果 损伤后3h，大脑皮质下白质、胼胝体和脑干β-APP呈弱阳性表达；损伤后6h，轴突局部免疫反应阳性较前明显增强，范围增大，半定量分析显示，胼胝体、海马、脑干的免疫反应均强于3h组。结论 β-APP在DAI早期（伤后3h）即有明确表达，并呈逐渐增强趋势，可作为DAI早期的标志物。     

一氧化碳暴露对Wistar大鼠脑中p53基因表达的影响

目的 观察一氧化碳（CO）暴露对大鼠脑中p53基因的影响。方法 用Wistar大鼠制成CO中毒动物模型，分别在染毒后当天，第2，3天处死，取脑制成切片，用地高辛p53 mRNA探讨原位杂交，观察p53的信号分布。结果 p53 mRNA的表达在海马，大脑皮层和胼胝体比较明显，其中海马的表达信号最强，大脑皮层次之，胼胝体最弱，其他部位呈散在的弱信号。相应区域在各个时间的差异无显著性。对照组未见表达。结论 CO暴露对海马，大脑皮层和胼胝体的损害最为明显；凋亡的过程是一个阶段性持续的过程。     

虎纹捕鸟蜘蛛毒素对全脑缺血大鼠海马神经元细胞形态及bax、bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察蛛网膜下腔注射虎纹捕鸟蜘蛛毒素(HWTX-I)对全脑缺血再灌注大鼠海马神经细胞线粒体和CA1区锥体细胞形态、凋亡相关因子bax和bcl-2 mRNA及蛋白表达的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组及HWTX-I组,采用改良的Pulsinelli四血管阻断全脑缺血损伤结合蛛网膜下腔置管术模型,对大鼠海马神经细胞线粒体进行超微结构及Nissl染色形态学观察,免疫组织化学法检测Bax、Bcl-2蛋白表达,RT-PCR法检测baxb、cl-2 mRNA表达。结果:(1)HWTX-I能够使全脑缺血大鼠海马神经细胞线粒体基本维持正常形态。(2)HWTX-I能稳定全脑缺血大鼠海马CA1区锥体细胞分布。(3)HWTX-I能够下调全脑缺血再灌注大鼠海马组织bax mRNA及蛋白表达,上调bcl-2 mRNA及蛋白表达。结论:蛛网膜下腔注射HWTX-I对全脑缺血再灌注所致的大鼠海马神经元损伤有明显的保护作用。     

Caspase-3抑制剂 z-DEVD-fmk对大鼠脑损伤的保护作用

目的研究caspase-3抑制剂z—DEVD—fmk对大鼠外伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）后神经细胞凋亡、脑含水量影响。方法分为假手术组、等渗盐水组、抑制剂组，采用改良的Feeney自由落体损伤模型，于损伤前后各30min右侧脑室注射z—DEVD—fmk或等渗盐水，72h后，断头取脑，用HE染色及电镜观察形态学变化，用干湿法测量脑含水量，流式细胞（Annexin—V／PIFCM）及末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸缺口末端标记（TUNEL）法检测神经细胞凋亡。结果在外伤中心区可见大量神经细胞坏死；损伤周围区神经细胞数量减少，出现细胞凋亡的特征，少量细胞出现坏死，等渗盐水组相对于抑制剂组较为明显；假手术组以正常细胞为主。抑制剂组大鼠损伤周围脑组织凋亡细胞数及脑含水量明显高于假手术组；但较等渗盐水组明显减少。结论大鼠脑损伤后在损伤周围区存在大量神经细胞凋亡；使用z—DEVD—fmk抑制caspase-3活性以后，能减少凋亡、减轻脑水肿，起到脑保护作用。     

MgSO4对大鼠急性放射性脑损伤后NSE和S-100蛋白表达的影响

目的探讨MgSO4对电离辐射诱发的脑组织损伤的保护作用。方法将成熟的SD大鼠36只随机分为空白对照组、实验对照组和MgSO4实验用药组，用6MeV电子线对实验大鼠行20Gv全脑单次垂直照射，吸收剂量率为200cGy／min；实验用药组大鼠于照射前1d、照射后即刻、照后连续3d分别给予10％的MgSO4腹腔注射，分别于照射后1、7、14和30d处死大鼠，取其脑组织，用免疫组织化学法测定神经元特异性稀醇化酶（NSE）、S-100蛋白的相对含量，并与对照组进行比较。结果在上述时间点，脑内海马区S-100和NSE表达有时间规律，照射后1周S-100蛋白的表达和照射后24hNSE的表达组间存在一定差别。与空白对照组相比，实验对照组大鼠脑组织中NSE表达显著下降（P〈0．05），S-100表达显著升高（P〈0．05）；与实验对照组相比，在照射后7d，MgSO4可明显抑制S-100的表达（P〈0．05），诱导NSE的表达（P〈0．05）。结论 脑组织中S-100和NSE表达水平的变化是辐射诱导的急性脑损伤的敏感指标，MgSO4可降低S-100的表达水平并升高NSE在神经元中的含量，早期使用对急性放射性脑损伤有保护作用。     

艾司洛尔对心肺复苏大鼠心肌线粒体ATP酶活性的影响

目的 探讨艾司洛尔对心肺复苏后大鼠心肌线粒体ATP酶活性的影响.方法 66只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、肾上腺素(AD)组、肾上腺素 艾司洛尔(AD Es)组,每组22只,制备窒息致大鼠心跳骤停模型,窒息10min后行心肺复苏,测定复苏后30、120、180min心肌线粒体ATP酶活性.复苏期间监测心电图、心率、体温、平均动脉压.结果 与Sham组相比,AD组复苏后心率加快(P＜0.01),AD、AD Es组复苏后心肌线粒体ATP酶活性降低(P＜0.01);与AD组相比,AD Es组ATP酶活性升高(P＜0.05或0.01).结论 艾司洛尔有保护复苏后大鼠心肌线粒体ATP酶活性的作用.     

联合应用药物加超长时程心肺复苏的疗效分析

目的 探讨联合应用肾上腺素、多巴胺和多巴酚丁胺,并且进行超长时程心肺复苏（CPR）的临床疗效.方法 将91例心搏骤停患者随机分为4组：对照组（肾上腺素组）、治疗Ⅰ组（肾上腺素＋超长CPR）、治疗Ⅱ组（肾上腺素＋多巴胺＋多巴酚丁胺）、治疗Ⅲ组（肾上腺素＋多巴胺＋多巴酚丁胺＋超长CPR）,分别观察比较各组的自主循环恢复率、24h存活率及出院存活率.结果 治疗Ⅲ组的自主循环恢复率、24h 存活率、出院存活率明显高于对照组（P＜0.01或P＜0.05）.结论 联合应用肾上腺素、多巴胺和多巴酚丁胺,并且进行超长时程CPR可提高CPR的成功率.     

参麦注射液联合极化液对大鼠复苏后脑组织的影响

目的探讨参麦注射液联合极化液对心肺复苏后脑保护的作用。方法建立成年雄性SD大鼠心脏骤停-心肺复苏模型,随机分为对照组（A组）、复苏组（B组）、极化液组（C组）、参麦组（D组）和联合用药组（E组）,每组8只。复苏后24 h进行神经功能评分,并观察脑组织细胞结构,测定脑组织含水量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）及Na＋-Ka＋-ATP酶活力的变化。结果 B组脑组织含水量、MDA含量较各治疗组显著增高,SOD及Na＋-Ka＋-ATP酶活力减低（P〈0.05）,E组各项指标检测较C组、D组好（P〈0.05）、脑组织超微结构改变轻微。结论参麦注射液联合极化液对心肺复苏后脑组织有一定程度的保护作用。     

高湿环境致大鼠肾功能损害与水通道蛋白-2的表达

目的 观察高湿环境对SD大鼠肾功能的影响,探讨水通道蛋白-2（AQP2）和加压素受体-2（V2R）在高湿环境大鼠肾脏中的表达及其意义.方法 20只SD大鼠随机分为对照组和高湿组,每组10只.高湿组大鼠每日放入人工气候箱10 h[温度25 ℃,相对湿度（RH）为（90±2）%],对照组置常温常湿环境[温度（25±2）℃,RH（55±5）%].处理20 d后,荧光定量PCR检测肾髓质AQP2和V2R mRNA表达水平,Western blot法检测肾髓质AQP2、磷酸化AQP2（p-AQP2）以及V2R的蛋白表达水平.结果 与对照组相比,高湿组大鼠血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）显著升高（P＜0.05）;肾髓质AQP2和V2R mRNA表达较对照组显著降低（P＜0.01）,AQP2、V2R的蛋白表达水平和AQP2的磷酸化水平较对照组显著降低（P＜0.05）.结论 高湿环境可对大鼠肾功能造成一定损害,且使V2R和AQP2的表达水平降低,AQP2磷酸化水平也降低,提示V2R和AQP2可能参与了高湿环境引起的肾功能损害的发生发展.     

高原地区大鼠烫伤延迟复苏后Peyer氏结中Bax表达及其意义

目的：探讨不同海拔高度大鼠烫伤延迟复苏后回肠Peyer氏结淋巴细胞凋亡和Bax基因表达的意义。方法：Wistar大鼠132只,分别在海拔1517m和3848m随机分为延迟复苏组（DFR）、即时复苏组（IFR）和假伤组（SG）,建立TBSA 30％Ⅲ度烫伤模型,分别于伤后6、12、24、48和72h取材。采用TUNEL、免疫组化与图象分析技术,观察Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率及Bax表达。结果：淋巴细胞凋亡率在各海拔高度DFR组和IFR组均高于SG组,随海拔高度上升凋亡率有所上升;DFR组凋亡率高于同海拔IFR组,海拔3848m各实验组分别高于海拔1517m（P〈0．05）;Bax表达强度变化平行于淋巴细胞凋亡率变化,但在伤后6h和72h海拔3848m各实验组分别高于海拔1517m（P〈0．05）。结论：高原地区烫伤延迟复苏后Bax表达增高可能是Peyer氏结T淋巴细胞凋亡增加的重要原因之一。     

Macintosh喉镜联合纤支镜双人操作在麻醉下经口气管插管

目的在麻醉下经口气管插管中,以Macintosh喉镜＋纤支镜双人操作和单人纤支镜操作进行对比研究。方法2010～2011年间连续收入的择期腹部手术的全麻成年患者400例,ASAⅠ～Ⅱ级。随机分成两组：A组双人操作Macintosh喉镜＋纤支镜,B组单人纤支镜插管,每组200例。采用静脉麻醉诱导,待患者意识丧失肌肉松弛后插入喉镜,评出CormackLehane（C-L）分级。观察指标：（1）术前两组患者人口学资料、张口度、甲颏间距,并评定Mallampati分级。（2）声门暴露时间、置管时间、暴露一次成功率、置管一次成功率、插管满意度评分。（3）短期气管插管相关并发症：口齿损伤、气管导管染血、咽喉疼、声嘶。结果有392例（98%）进入统计。A组C-L分级Ⅲ和Ⅳ级分别有9例（4.6%）、4例（2.0%）;B组8例（4.1%）,4例（2.1%）。声门暴露及置管指标（时间、一次成功率）,A组明显优于B组（P〈0.05）;插管满意度评分,A组也显著高于B组（P〈0.05）;气管导管染血、咽喉疼及术后声嘶,A组明显少于B组（P〈0.05）。结论使用Macintosh喉镜辅助可显著提高麻醉状态下纤支镜经口气管插管的一次插管及置管成功率,并减少短期气管插管相关并发症。     

不同时间采用NPPV治疗COPD合并呼吸衰竭的疗效观察

目的探讨不同时间采用无创正压通气（NPPV）治疗慢性阻塞性肺病急性加重期（AECOPD）合并呼吸衰竭的临床疗效。方法选择2011年1月～2013年11月在我院住院的AECOPD合并呼吸衰竭患者168例,根据NPPV治疗时间的早晚分为早期治疗组69例和延迟治疗组56例,另外43例未采用NPPV的设为对照组。治疗3 d后观察3组患者的呼吸频率、心率、pH、PaCO2、PaO2的变化,同时比较3组的住院时间、气管插管率和病死率。结果与治疗前比较,3组的呼吸频率、心率、pH、PaCO2、PaO2均有所改善（P〈0.05）;3组之间比较,NPPV早期治疗组的上述指标改善最明显,延迟治疗组次之,对照组最小（P〈0.01）。NPPV早期治疗组的住院时间、气管插管率及病死率均比对照组短或低（P〈0.05或P〈0.01）;早期治疗组与延迟治疗组比较差异无统计学意义。结论 NPPV治疗AECOPD合并呼吸衰竭,能纠正缺氧,改善CO2潴留,缩短住院时间,降低气管插管率和病死率,并且早期治疗效果更好,值得临床推广应用。     

体外缺氧／复氧对星形胶质细胞AQP4表达的影响及葛根素干预的实验研究

目的观察缺氧,复氧条件下星形胶质细胞形态和AQP4mRNA的表达变化以及葛根素对其表达变化的影响,探讨脑缺血再灌注损伤与AQP4的关系以及葛根索的干预作用。方法原代培养星形胶质细胞,用5％CO2＋95％N2混合气体造成缺氧．以LDH漏出率及M1Tr降解率作为细胞受损指标,应用RT-PCR技术检验星形胶质细胞缺氧／复氧各个时间点AQP4mRNA的表达变化及葛根素的干预效果。结果体外培养的星形胶质细胞在缺氧环境下损伤不明显,随着复氧时间的延长细胞损害加重。AQP4mRNA在缺氧时表达与正常对照组无明显差异。复氧后表达升高并随时间延长呈增高趋势（P〈0．05）。葛根素干预组AQP4mRNA表达丰度与缺氧,复氧组无明显差异（P〉0．05）。结论星形胶质细胞AQP4mRNA表达变化与细胞损伤有明显的相关性,葛根素对星形胶质细胞损伤的保护作用不是通过改变AQP4的表达来实现的。     

急性酒精中毒大鼠脑干部DTI与AQP4表达的相关性研究

目的:探讨急性酒精中毒大鼠脑干部水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)表达与DTI参数ADC值及部分各向异性(fractional anisotropy,FA)值的相关性。方法:30只SD大鼠随机分为对照组(n=5)和急性酒精中毒组(n=25),急性酒精中毒组于造模后1、3、6、12、24h行MRI扫描。MRI检查序列包括T2WI、T1WI及DTI序列,病理学检查包括HE染色、AQP4免疫组化染色,对DTI及病理结果进行分析。结果:急性酒精中毒组ADC值、FA值、AQP4表达光密度值变化表现为先持续降低后逐步回升趋势,在3h达最低点。1、3、6h的ADC值与对照组之间差异有统计学意义(P<0.01),各实验组FA值与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05),3、6h的AQP4表达光密度值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DTI检查能够反映急性酒精中毒早期的细胞毒性水肿,同时间段AQP4表达下调与ADC值下降的演变趋势表明AQP4在细胞毒性水肿演变过程中具有保护性机制。