褪黑素通过调控p53介导的细胞早衰抑制紫外线诱导的HaCaT细胞中黑色素合成

目的 探索褪黑素对中波紫外线（UVB）引起人永生化表皮角质形成（HaCaT）细胞黑色素合成的影响及机制,为褪黑素的皮肤保护机制提供理论基础。方法 80 mJ/cm² UVB照射10^-5 mol/L褪黑素预处理的HaCaT细胞,照后48和72 h,利用NaOH法检测细胞黑色素水平。照后72 h,利用β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测早衰阳性细胞并分析其比例,蛋白免疫印迹法检测衰老相关蛋白p53和酪氨酸酶（TYR）的表达变化。80 mJ/cm² UVB照射分别经毛细血管扩张性共济失调突变激酶/毛细血管扩张性共济失调Rad3相关激酶（ATM/ATR）抑制剂、p53抑制剂和褪黑素预处理的HaCaT细胞,照后72 h检测细胞早衰阳性比例和黑色素水平变化。结果 褪黑素抑制UVB诱导的黑色素水平增加（t=56.65、13.39,P<0.05）,同时抑制UVB诱导的TYR表达增加（t=16.46,P<0.05）;并可缓解UVB诱导的HaCaT细胞早衰（t=6.37,P<0.05）,抑制UVB诱导的p53表达增加（t=19.08,P<0.05）;ATM/ATR抑制剂、p53抑制剂和褪黑素预处理均可抑制UVB诱导的HaCaT细胞黑色素水平升高（t=13.88、7.86、8.96,P<0.05）。结论 褪黑素通过调控p53介导的细胞早衰,抑制UVB诱导的HaCaT细胞黑色素水平增加。     

14-3-3σ在中波紫外线诱导的HaCaT细胞增殖和周期中的作用

目的 初步研究14-3-3σ在中波紫外线(UVB)照射诱导的HaCaT细胞增殖和周期阻滞中的作用。方法 不同剂量UVB(0、10、20、30、40、50、60和80 mJ/cm²)照射HaCaT细胞和14-3-3σ稳定干扰细胞系(HaCaT^KD14-3-3σ,以下简称HaCaT^KD)。照后48 h,结晶紫染色法观察细胞生长密度。30 mJ/cm²UVB照射后,CCK-8法检测HaCaT和HaCaT^KD细胞的增殖变化,流式细胞术分析细胞G₂/M期细胞比例的变化,Western blot检测UVB照射后两种细胞的14-3-3σ、Cdc2、Cdc25c和Cyclin B1蛋白表达水平。结果 UVB照后48 h,两种细胞存活率均呈剂量依赖性下降,且HaCaT^KD在10 mJ/cm²即可出现明显下降(t=8.83~49.63,P<0.05)。HaCaT^KD细胞的增殖能力显著低于HaCaT细胞(F=32.89,P<0.05);30 mJ/cm²的UVB照射后,HaCaT细胞在24 h后恢复增殖能力,但HaCaT^KD细胞在72 h仍未见增殖变化。HaCaT^KD细胞在各观察点G₂/M期细胞比例均未改变(P>0.05);30 mJ/cm²UVB照射后,HaCaT细胞在6~18 h发生G₂/M期阻滞(t=7.41、9.22、9.16,P<0.05),HaCaT^KD细胞G₂/M期细胞比例未发生改变(P>0.05)。UVB照后6、12、18、24 h和照前相比,HaCaT细胞中14-3-3σ表达量上调(t=5.42~9.57,P<0.05);HaCaT和HaCaT^KD两种细胞中的Cdc25c和Cyclin B1的表达水平在照后均下调(t=3.95~11.21,P<0.05);Cdc2在HaCaT细胞中下调(t=4.93~5.37,P<0.05),在HaCaT^KD细胞中无变化(P>0.05)。结论 UVB照射或不照射,14-3-3σ的表达情况均能影响HaCaT细胞的增殖变化和细胞周期,UVB照射能诱导HaCaT细胞发生G₂/M期阻滞,这种阻滞可能是由14-3-3σ的表达所介导,进而引起周期相关蛋白Cdc2、Cdc25c和Cyclin B1的表达改变而引发的。     

12C重离子束对人淋巴细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的 探讨¹²C重离子束对人淋巴细胞增殖以及周期、凋亡的影响.方法 ¹²C重离子束照射人淋巴细胞Peng-EBV,吸收剂量分别为0(对照组)、0.5、2.0 Gy.照射后用MTS法检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡.结果 与对照组相比,0.5 Gy照射可以增加细胞增殖活力(t=2.66~14.45, P<0.05),而2.0 Gy照射降低了细胞活力(t=7.65~64.45, P<0.05).受照射细胞的活力存在一个恢复和下降过程,受照后48 h内,细胞数量呈增加趋势,但72 h时细胞数量下降.照射后48 h,两组细胞G₂/M期呈明显上升趋势,高于对照组(t=2.01~99.80,P<0.05),且2.0 Gy组的周期阻滞较0.5 Gy组严重;照射后30 d,细胞周期阻滞恢复到正常水平.照射后12、24、48 h,两照射组与对照组相比,细胞凋亡率差异有统计学意义(t=-3.05~-1.05,P<0.05),在照后24 h最高,48 h明显下降,30 d恢复到对照水平.结论 ¹²C离子束辐射影响人淋巴细胞增殖,诱导人淋巴细胞发生明显的G₂/M期阻滞,并且明显地促进细胞凋亡.     

靶向Erk/Slug信号上调PUMA表达增强乳腺癌MDA-MB-231细胞对γ射线的敏感性

目的 研究Erk/Slug信号通路在乳腺癌细胞MDA-MB-231放射敏感性中的作用。方法 通过以NF-κB p65 siRNA、PUMA siRNA或Slug siRNA转染MDA-MB-231细胞,或以U0126处理该细胞之后,以4 Gy γ射线进行照射,在照射后的不同时间点检测细胞内Erk1/2、NF-κB p65、Slug和PUMA蛋白的表达,以MTT比色法检测细胞存活率,以TUNEL法检测细胞凋亡。 结果 与单纯照射组相比,NF-κB p65 siRNA/4 Gy 组,细胞PUMA表达明显下降;U0126/4 Gy组,细胞Erk1/2和Slug蛋白表达明显降低,PUMA表达明显升高;Slug siRNA/4 Gy组,Erk1/2蛋白表达无变化,但PUMA蛋白表达明显增加;同时,U0126/4 Gy组和Slug siRNA/4 Gy组,细胞照射48 h后存活率降至最低点,分别为19.78±2.71（F=11.39,P<0.05）和17.41±4.58（F=15.31,P<0.05）,细胞凋亡率升至最高点,分别为28.61±4.70（F=9.84,P<0.05）和 27.55±6.41（F=10.31,P<0.05）;NF-κBp65 siRNA/4 Gy组和PUMA siRNA/4 Gy组,细胞照射24h后存活率分别为85.65±9.60（F=12.31,P<0.05）和87.53±11.50（F=13.68,P<0.05）,细胞凋亡率明显下降,分别为3.28±0.78（F=10.83,P<0.05）和3.46±0.84（F=9.92,P<0.05）。结论 γ 射线照射后24 h内,MDA-MB-231细胞敏感性与依赖于NF-κB上调的PUMA表达有关;而照射24 h后,细胞的辐射抵抗性与依赖于Erk1/2上调的Slug表达有关,后者对PUMA表达有明显的抑制作用。     

60Co γ射线照射正常人外周血基因组合表达模型的建立

目的 探讨基因组合表达模型作为辐射生物剂量计的可行性。方法 0~8 Gy ⁶⁰Co γ射线照射正常人外周血,利用实时荧光定量PCR检测10个辐射敏感基因表达变化,应用逐步回归方法建立基因组合表达模型;双盲法验证模型估算剂量的准确性。结果 照后6和12 h,10个辐射敏感基因的表达水平随受照剂量的增加而增加,均呈现良好的剂量-效应关系（R²=0.61~0.97,P< 0.05）;TNFSF4、PHPT1和FDXR基因相对表达量存在较大的个体间差异;照后6 h,PCNA、CCNG1、TNFSF4、PHPT1、GADD45A和FDXR建立的基因组合表达模型R²为0.88（F=54.8,P<0.001）;照后12 h,PCNA、CCNG1、TNFSF4、MDM2、GDF15和TNFRSF10B建立的基因组合表达模型R²为0.82（F=42.767,P<0.001）;各时间点基因组合表达模型估算的受照剂量均接近于真实照射剂量。结论 基因组合表达模型具备作为辐射生物剂量计的基本条件。     

纳米氧化铈对γ射线诱导小鼠免疫系统损伤的影响

目的 研究纳米氧化铈在γ射线诱导小鼠免疫系统损伤中的影响。方法 BALB/c小鼠120只按随机号法分为健康对照、照射、阳性药物与纳米氧化铈100、300和900 mg/kg组,共6组,每组20只。小鼠经3.5 Gy ⁶⁰Co γ射线一次性全身照射,照射前两周至照射后处死前连续口服灌胃给药。流式细胞术检测胸腺淋巴细胞凋亡率、外周血白细胞介素-2（IL-2）和干扰素-γ（IFN-γ）阳性率,二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测自然杀伤细胞（NK）活性。结果 与照射组相比,受照后3 d,纳米氧化铈各剂量组的细胞死亡率均降低,纳米氧化铈300 mg/kg组差异有统计学意义（F=4.50,P<0.05）,纳米氧化铈300 mg/kg组的IFN-γ表达显著增多（t=2.26,P<0.05）;受照后8 d,纳米氧化铈900 mg/kg组的细胞死亡率明显降低（F=4.07,P<0.05）,纳米氧化铈100 mg/kg组细胞早期凋亡率显著下降（F=3.47,P<0.05）,纳米氧化铈300 mg/kg组IFN-γ表达显著增多（t=2.47,P<0.05）,各剂量组IL-2表达均呈降低趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）;纳米氧化铈各剂量组和阳性药物组的NK细胞活性均显著升高,差异有统计学意义（t=3.40、5.40、3.40、5.20,P<0.05）。结论 纳米氧化铈在一定程度上降低受照小鼠胸腺淋巴细胞凋亡率和死亡率,促进IFN-γ表达量增高,增强NK细胞活性,可提高机体免疫力,对辐射损伤有一定防护作用。     

龙葵碱对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响

目的 研究龙葵碱对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响。方法 用龙葵碱处理骨肉瘤细胞,同时给予6 MV X射线照射,噻唑蓝（MTT）方法测定细胞增殖变化,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot检测细胞中Ki-67、PCNA、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平,JC-1法检测线粒体膜电位,DCFH-DA法检测细胞中ROS水平,平板克隆实验测定放射敏感性。结果 与未经龙葵碱和照射后的细胞比较,龙葵碱或照射处理后骨肉瘤细胞增殖能力和Ki-67、PCNA蛋白水平均降低（F=55.165、50.667、23.389,P<0.05）,细胞凋亡率和Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平均升高（F=54.588、42.924、51.541,P<0.05）,线粒体膜电位下降（F=40.762,P<0.05）,细胞中ROS水平升高（F=79.055,P<0.05）。与龙葵碱或单纯照射的细胞比较,龙葵碱联合照射处理后的骨肉瘤细胞增殖能力和Ki-67、PCNA蛋白水平降低（F=55.165、50.667、23.389,P<0.05）,细胞凋亡率和Bax、Cleaved Caspase-3水平升高（F=54.588、42.924、51.541,P<0.05）,线粒体膜电位降低（F=40.762,P<0.05）,ROS水平升高（F=79.055,P<0.05）。龙葵碱对骨肉瘤细胞的放射增敏比为1.786。结论 龙葵碱抑制骨肉瘤细胞增殖并诱导凋亡,提高骨肉瘤细胞放射敏感性。     

电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响

目的 研究电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响。方法 0、0.5、3和8 Gy ⁶⁰Co γ射线照射A549细胞后,利用JC-1探针检测照射后肺腺癌细胞A549线粒体膜电位的变化;使用ATP试剂盒检测辐射对A549细胞ATP生成的影响;利用实时定量PCR方法检测线粒体拷贝数。结果 在照射后24 h,各剂量组A549细胞膜电位出现明显改变（F=243.44,P<0.05）,与0 Gy照射组相比,0.5和3 Gy照射的A549细胞线粒体膜电位显著升高（t=-10.12、-5.59,P<0.05）,而8 Gy照射的线粒体膜电位显著降低（t=15.22,P<0.05）,照后48 h各照射组线粒体膜电位基本恢复正常（F=10.36,P<0.05）;照射后24 h ATP水平与膜电位变化趋势一致（F=97.08,P<0.05）,其中0.5和3 Gy A549细胞中ATP水平升高（t=1.66、7.27,P<0.05）,8 Gy照射组降低（t=-8.24,P<0.05）;照射后48 h,ATP水平也发生变化（F=39.49,P<0.05）,0.5和3 Gy照射后A549细胞中ATP水平显著高于0 Gy组（t=4.60、8.53,P<0.05）。照射后24 h线粒体拷贝数显著增加,其中0.5 Gy mtDNA拷贝数增加至对照组的12倍（t=0.02,P<0.05）,3和8 Gy组mtDNA拷贝数分别增加至对照组的7和10倍（t=9.68、15.10,P<0.05）。结论 大剂量电离辐射会导致A549细胞线粒体膜电位降低,从而影响ATP的生成,中等剂量以下的照射会导致A549细胞线粒体膜电位代偿性增高,从而使ATP的生成增多,8 Gy以内的电离辐射可使mtDNA拷贝数代偿性升高。     

电离辐射对皮肤细胞铁死亡的影响及其抑制剂Ferrostatin-1的防护作用研究

目的 探讨电离辐射对皮肤细胞铁死亡的影响以及铁死亡抑制剂Ferrostatin-1（Fer-1）对受照射皮肤细胞的保护作用及机制。方法 为检测Fer-1对人永生化角质形成细胞（HaCaT）辐照后的影响,按照射与给药方式分为对照组、Fer-1组、单纯照射组、照射+Fer-1组。采用CCK-8法和乳酸脱氢酶（LDH）释放检测X射线照射以及Fer-1处理对HaCaT细胞存活和细胞死亡的影响。采用流式细胞术检测X射线照射以及Fer-1处理后对HaCaT细胞脂质过氧化水平的影响。利用结晶紫染色法检测X射线照射以及Fer-1处理对HaCaT细胞克隆形成能力的影响。Western blot检测X射线照射以及Fer-1处理对铁死亡相关蛋白ACSL4和GPX4表达的影响。结果 单纯照射组经不同剂量的X射线照射后细胞存活率明显降低（t=5.63、8.74,P<0.05）,LDH的释放明显增加（t=3.98、5.08、9.27,P<0.05）,Fer-1能够提高受照射皮肤细胞存活率（t=5.79,P<0.05）,降低LDH的释放量（t=12.36、11.96、18.13、9.96,P<0.05）。单纯照射组经10 Gy的X射线照射后细胞的脂质过氧化水平明显升高（t=9.59,P<0.05）,克隆存活能力明显减弱（t=4.26,P<0.05）,而Fer-1能够降低X射线照射引起的脂质过氧化水平的升高（t=6.48、17.04,P<0.05）,增加受照射皮肤细胞的克隆存活能力（t=3.96,P<0.05）。10 Gy的X射线照射会导致ACSL4表达水平的升高和GPX4的表达水平的降低,而Fer-1的治疗能促进ACSL4和GPX4的表达水平恢复正常（t=5.23、7.16、4.78、8.29、6.43,P<0.05）。结论 铁死亡抑制剂Fer-1在细胞水平上能够通过抑制电离辐射后铁死亡的发生而保护皮肤细胞,为放射性皮肤损伤的防护提供了一种新的策略。     

紫外线B辐射敏感的miR-365在皮肤鳞癌发生中的作用研究

目的 探讨紫外线(UVB)辐射敏感miR-365在皮肤鳞状细胞癌发生中的作用.方法 取对数生长期正常人皮肤角质细胞HaCaT分为对照组和照射组,照射组给予50 J/m²的UVB照射.照射后培养不同时间,分析miRNA的表达谱.实时荧光定量PCR分析HaCaT细胞和皮肤鳞癌细胞系A431、Tca8113和HSC-1的miR-365的表达.平板克隆形成实验和Transwell小室细胞运动实验分别检测细胞的克隆形成能力和体外运动能力.构建miR-365高表达的HaCaT细胞系HaCaT^{pre-miR-365-2}.裸鼠皮下注射HaCaT^{pre-miR-365-2}观察其成瘤能力.结果 UVB照射后,HaCaT差异表达的miRNAs共30个,其中miR-365最敏感,且照后6 h升高最明显,为对照的6.7倍;皮肤鳞癌细胞系A431、Tca8113和HSC-1的miR-365的表达均高于HaCaT细胞(P<0.05),其中,A431增加最多,为(15.67±1.12)倍,Tca8113最少,为(4.72±0.85)倍;抑制皮肤鳞癌细胞系miR-365的表达可以显著抑制其克隆形成能力(t=13.68,P<0.05)和体外细胞迁移能力(t=19.98,P<0.05),而提高HaCaT的miR-365的表达则可以显著提高其克隆形成能力(t=7.11,P<0.05)和体外细胞迁移能力(t=22.03,P<0.05),且能够在裸鼠皮下成功地成瘤.结论 miR-365是一种皮肤鳞状细胞癌的促癌基因.     

P53蛋白与P21蛋白在翼状胬肉中的表达

目的：探讨P53蛋白与P21蛋白在翼状胬肉中的表达。方法：应用免疫组化法检测30例翼状胬肉和正常结膜中P53蛋白与P21蛋白的表达。结果：30例翼状胬肉中P53蛋白和P21蛋白的阳性表达平均秩次分别为45．12和15．50;30例正常结膜中P53蛋白和P21蛋白的阳性表达平均秩次分别为15．88和45．50。P53蛋白与P21蛋白阳性表达在翼状胬肉中与正常结膜两组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：P53蛋白与P21蛋白在翼状胬肉及正常结膜中均有阳性表达,且P53蛋白在翼状胬肉中高表达,P21蛋白在翼状胬肉中低表达,说明翼状胬肉是一种组织增殖性疾病。     

基于P2P和C/S集成模式的机构知识共享平台的研究与实现

本文通过分析目前存在的几种主流知识共享模式,提出了一种符合机构知识共享需求的P2P和C/S相集成的模式,并对利用Java语言实现的机构知识共享平台原型系统进行了介绍。随后对该平台的概念模型和系统架构进行了说明,论述了网络拓扑、全文检索、知识管理规则、导航方法等平台实现中的关键技术。实际使用表明,该平台能够实现机构内部各类知识的深度和准确的共享,并能将机构内的知识合理、有序地展示给机构内用户。     

P16、P21蛋白表达与肝细胞癌预后的关系

 目的 研究P16、P21蛋白表达与肝细胞癌(HCC)预后的关系.方法 采用免疫组化SABC法染色检测46例HCC组织与38例癌旁组织P16、P21蛋白的表达情况,并分析其与预后的关系.结果 P16蛋白的阳性表达率在HCC(41.3%)显著低于癌旁组织(65.8%)(P＜0.05),P16蛋白阳性表达在术后3年复发组(17.4%)显著低于无复发组(73.7%)(P＜0.01),在3年存活组(64%)显著高于死亡组(11.8%,P＜0.01).P21蛋白的阳性表达率在HCC(19.6%)显著低于癌旁组织(52.6%)(P＜0.01),P21蛋白阳性表达在术后3年复发与无复发组差异无统计学意义,在术后3年存活组与死亡组差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 P16、P21蛋白的表达缺失同HCC的发生密切相关.且P16蛋白表达缺失与HCC的预后相关.P16蛋白的表达缺失是HCC预后的一个可靠因子.     

力竭运动对大鼠大脑P2X_2、P2X_4和P2X_6受体表达的影响

目的:探讨一次和反复力竭游泳运动后大鼠大脑ATP受体P2X之三个亚型P2X2、P2X4和P2X6的时相性变化特点。方法:健康成年雄性SD大鼠68只,分为一次力竭游泳运动组和反复力竭游泳运动组及安静对照组,反复力竭组大鼠每日负重3%体重进行力竭游泳运动,共训练2周。运动组分别于力竭运动后即刻、4小时、12小时和24小时取材,采用实时荧光定量PCR方法测定力竭运动后大鼠P2X2、P2X4和P2X6受体亚型mRNA水平。结果:(1)反复力竭运动后12小时组P2X2相对表达率达到峰值,与反复力竭其它各组及安静对照组、一次力竭12小时组均有显著差异(P<0.01)。(2)一次力竭即刻组P2X4相对表达率与安静对照组、4小时组、12小时组比较有显著统计学差异(分别为P<0.01、P<0.05、P<0.01)。(3)反复力竭运动后12小时组P2X6相对表达率达到峰值。结论:3种受体亚型在一次力竭运动和反复力竭运动后12小时出现峰值或峰值趋势,提示在力竭运动后12小时,这3种P2X受体亚型所参与的中枢神经生理生化活动在此时可能会达到一个活跃期。     

增生性瘢痕组织P物质及其受体分布的免疫组织化学研究

目的研究Ｐ物质（ＳＰ）及其受体（ＳＰＲ）在人皮肤增生性瘢痕组织中的分布。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白－过氧化酶连接法检测增生性瘢痕、非增生性瘢痕及正常皮肤组织中ＳＰ和ＳＰＲ的分布；并用图像分析仪对染色结果进行半定量分析。结果皮肤及瘢痕组织中均能检测到ＳＰ和ＳＰＲ，增生性瘢痕组织中ＳＰ和ＳＰＲ分布密度显著高于非增生性瘢痕及正常皮肤，ＳＰ和ＳＰＲ在同一部位分布并不完全一致。结论ＳＰ和ＳＰＲ在增生性瘢痕发病过程中可能具有重要作用     

P27、P53及FAK的表达与肝癌肝移植后肿瘤复发与转移关系的研究

 目的探讨P27、P53及粘着斑激酶(FAK)的表达与原发性肝细胞性肝癌(HCC)行肝移植治疗后肿瘤复发与转移的关系.方法应用免疫组织化学方法,检测其切除的肝癌标本中P27、P53与FAK的表达,分析其表达与移植后肿瘤复发与转移之间的关系和意义.结果 P27与P53的表达同中晚期肿瘤复发与转移具有一定的关系,有明显的协同作用(趋性χ2检验,P＜0.05);而FAK的表达在两组间无差异(P＜0.05).结论 P27低表达的HCC行肝移植后肿瘤更易于复发与转移,P27可能是评价预后的重要指标,P27与P53的联合检测更有助于预测移植后肿瘤的复发与转移.     

乳腺癌X线表现特征与P53表达的相关性研究

目的分析乳腺癌X线表现特征与P53表达的相关性。方法经乳腺X线摄影及手术病理证实的76例乳腺癌,将X线所见分为肿块(大小、边缘、形态)与钙化(分布、形态)进行描述,并与P53的表达进行对照,分析其相关性。结果乳腺癌P53阳性表达的X线特征为肿块直径>2.0 cm、钙化沿导管走行分布、杆状钙化。结论乳腺癌P53的表达与肿块大小、钙化分布、钙化形态相关,根据X线表现可推测乳腺癌P53的表达情况。     

P16对正常及骨关节炎软骨细胞的调控作用研究

Ｐ１６是一种ＣＤＫ４及ＣＤＫ６激酶的抑制蛋白，可以抑制细胞的增殖，促进细胞的分化。为了研究Ｐ１６在正常及骨关节炎软骨组织中对软骨细胞的调控作用，本文用免疫组化的方法，观察了Ｐ１６在正常及骨关节炎软骨组织中的表达及分布状况。结果显示：Ｐ１６在正常软骨组织的移行层及柱状层上层表达，而在骨关节炎组织中，Ｐ１６表达紊乱。结论：Ｐ１６与软骨细胞的生长调控有关。骨关节炎软骨组织中Ｐ１６的表达紊乱说明了软骨细胞增殖与分化的紊乱，造成了软骨组织中各结构成份的分布不一致，导致软骨组织的破坏。     

肝硬化患者B超结果与血清HA、PⅢP水平的相关探讨

目的：探讨了肝硬化患者B超结果与血清HA、PⅢP的相关性和临床意义。方法：观察经肝活检证实的慢性乙肝肝硬化患者B超声像图改变并应用放免法检测血清HA和PⅢP水平，将两者进行相关性分析。结果：B超示肝硬化患者血清HA、PⅢP水平均非常显著地高于正常人组（P〈0．01）。B超异常组的HA、PⅢP水平高于B超正常组（P〈0．01）。结论：B超声像图结果与血清HA、PⅢP测定综合分析是临床诊断肝硬化的良好相关性指标。     

外源性P物质诱导的表皮干细胞P物质自分泌现象研究

目的 研究表皮干细胞P物质(substance P,SP)自分泌特点.方法 体外培养表皮干细胞,给予外源性SP刺激,采用免疫荧光、ELISA、Western blot、定量PCR等方法检测刺激后细胞的SP基因、蛋白以及外周环境中SP蛋白的表达变化.结果 外源性SP刺激后,表皮干细胞及其培养液中SP蛋白表达上调,24 h达到峰值,浓度明显高于外加的SP浓度;SP基因在6 h即已达到峰值;封闭自然杀伤(NK)细胞受体后给予刺激,则SP表达不上调.结论 给予外源性SP能诱导表皮干细胞自身的SP自分泌.