HA1077对骨髓间质干细胞促愈作用的影响

目的 探讨HA1077对骨髓间质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)促愈作用的影响及其机制. 方法 (1)体外实验:体外分离培养大鼠BMSCs,随机分为正常对照组、诱导组和HA1077组.对照组加入DMEIM完全培养液;诱导组:70%DMEM完全培养液+30%大鼠成纤维细胞上清液+含8 μg/L表皮细胞生长因子(EGF)的培养液;HA1077组:在诱导组培养液基础上加入终浓度为10 μmol/L的HA1077.取培养7 d的细胞,流式细胞检测CK19表达,细胞周期和核增殖抗原(PCNA)表达.(2)在体实验:按前述方法 制备兔BMSCs.取新西兰大耳白兔8只,在背部制备6个直径为3 cm的圆形皮肤缺损(每侧各3个),深至皮下.创面随机分为空白对照组(A组):创面应用等渗盐水;EGF对照组(B组):创面外用EGF,50 U/cm2;BMSCs治疗组(C组):除用EGF外,创面注射BMSCs细胞悬液1 ml,2×106/ml;BMSCs+HA1077治疗组(D组):除应用C组措施外,创面注射0.5 ml HA1077,浓度为20 μmol/L.伤后3,7,14 d计算愈合指数(WCI). 结果 (1)体外实验:诱导组CK19的阳性率为(11.13±2.14)%,HA1077组为(40.31±0.81)%,明显高于诱导组(P<0.01).HA1077组PCNA阳性率明显高于诱导组,细胞周期分析显示S期细胞数量最多.(2)在体实验:D组伤后14 d的创面愈合指数为86.20±1.92,效果明显好于B组、C组和对照组. 结论 HA1077可以促进BMSCs细胞表达PCNA进入S期,进而分化表达CK19;在体表联合应用HA1077和BMSCs,可以明显促进创面愈合.     

MEBT/MEBO对大鼠慢性难愈合模型创面病理学改变影响的实验研究

目的 探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面肉芽组织的影响及其可能的作用机制.方法 SPF级SD雄性大鼠45只,简单随机抽样方法分为MEBO组、贝复济组、模型组,每组15只.用药后第8d观察创面愈合情况:①肉芽组织生长情况;②光镜下创面组织变化情况;③电镜下观察创面组织变化情况.结果 MEBO组创面愈合时间为20.13 d±1.41 d,短于贝复济组的22.07 d±1.62d,明显短于模型组的30.40d±1.18d,均有统计学意义(P＜0.01);光学显微镜下观察:与贝复济组及模型组比较,MEBO组创面毛细血管计数较多,MEBO组、贝复济组、模型组毛细血管分别为(12.13±2.26)条、(9.87±1.99)条、(7.60±1.50)条,MEBO组与贝复济组及模型组比较有统计学意义(P＜0.01);透射电镜结果示:MEBO组治疗的创面成纤维细胞、成纤维细胞线粒体结构情况明显好于贝复济组及模型组.结论 MEBT/MEBO能明显促进大鼠慢性难愈合创面成纤维细胞的增殖,促进新生毛细血管的增殖,调节创面修复基质的形成等作用而发挥MEBO的综合调控机制,最终促进肉芽组织形成,加速创面愈合.     

皮肤再生医疗技术对大鼠慢性难愈合创面组织中VEGFR-2表达的动态调控作用

目的动态观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed bum ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中VEGFR-2表达水平的影响,探讨MEBT/MEBO促进创面愈合的分子学机制。方法按照随机数表法将90只健康成年SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组(18只)、对照组(18只)、模型组(18只)、MEBO组(18只)和贝复济组(18只),其中空白组仅做备皮处理,对照组做全层皮肤缺损创面模型,模型组、MEBO组和贝复济组做慢性难愈合创面模型;模型建立后,空白组大鼠备皮后皮肤予以生理盐水纱布湿敷,对照组及模型组大鼠创面予以生理盐水纱布覆盖治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱覆盖治疗,贝复济组大鼠创面予以贝复济药纱覆盖治疗,并分别于治疗后第3、7、14天检测、对比各组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA的表达水平。结果创面处理后第3、7、14天,空白组大鼠皮肤组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平均无明显变化,P均0.05,差异无统计学意义;而对照组、模型组、MEBO组及贝复济组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平变化均较明显,P均0.05,差异具有统计学意义,其中对照组、MEBO组及贝复济组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平均呈先升高后降低的趋势,而模型组则呈递增趋势。治疗第3、7、14天,MEBO组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白和VEGFR-2 mRNA表达水平均高于模型组,P均0.05.差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可通过上调创面组织中VEGFR-2的表达水平,促进创面愈合。     

MEBT/ MEBO 对大鼠慢性难愈性皮肤溃疡创面肉芽组织EGF、EGFR 表达的影响

目的　探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/ MEBO) 及配套产品湿润烧伤膏(MEBO) 对大鼠慢性难愈性皮肤溃疡创面肉芽组织表皮生长因子(EGF)、表皮细胞生长因子受体(EGFR) 表达的影响。方法　SPF 级SD 雄性大鼠45 只, 参照付小兵大鼠慢性性皮肤溃疡创面模型制作方法制作模型, 成模后再采用随机数字法随机分为模型组(15 只)、MEBO 组(15 只)、贝复剂组(15 只), 造模后第2 天开始用药, 观察用药后各组创面愈合情况、肉芽组织生长情况, 记录创面愈合时间; 常规病理切片观察创面炎症、成纤维细胞数量、血管改变情况; 透射电镜观察成纤维细胞及其线粒体形态结构; 换药后第7、14 天取创面组织, 采用免疫组织化学法(SP法) 观察MEBO 对创面肉芽组织EGF、EGFR 表达的影响。结果　MEBO 组大鼠的创面愈合情况明显好于模型组与贝复济组; 创面愈合时间明显短于模型组及贝复济组(P <0． 05; P <0． 01); 病理学观察: MEBO 组与贝复剂组及模型组比较, 炎症反应轻、肉芽组织生长良好, 纤维增生程度低; 换药后第7、14 天, MEBO 组大鼠创面肉芽组织中EGF 和EGFR 蛋白表达阳性染色指数分别较模型组和贝复济组大鼠创面肉芽组织中EGF 和EGFR 蛋白表达阳性染色指数提高, 差异有统计学意义(P < 0． 05)。结论　MEBO 能增加慢性皮肤溃疡创面肉芽组织中EGF、EGFR 的表达量, 从而促进慢性皮肤溃疡愈合。     

碱性成纤维细胞生长因子复合骨髓问充质干细胞的促创面愈合作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在体内是否具有诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向皮肤组织分化的作用及其在皮肤创面愈合中的作用. 方法抽取小型猪骨髓,体外分离、纯化、培养MSCs,并用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)进行标记.6只小型猪共做48个创面,随机分为bFGF MSCs治疗组(A组)、MSCs治疗组(B组)、bFGF治疗组(C组)和等渗盐水对照组(D组),观察伤后愈合情况.在伤后3,7,14,21,42 d取标本,并用病理学、免疫组化方法对创面的修复质量进行评估. 结果 A组的皮肤创面愈合速度明显快于B、C和D组;A组在皮肤愈合的组织病理等级评分上优于B、C组;A组双染阳性细胞多于B组. 结论在皮肤修复过程中,bFGF具有促进MSCs向血管内皮细胞分化,促进皮肤愈合的作用.     

细胞外信号调节激酶信号通路在血小板源生长因子促进糖尿病大鼠创面愈合中的作用

目的观察重组人血小板源生长因子(rhPDGF)促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的信号通路：方法26只糖尿病大鼠背部各制备4个全层皮肤缺损创面，创面随机分成A和B两组，A组对照组，B组为rhPDGF(7．0μg／Cm2)治疗组。观察伤后3，7，14d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎症细胞浸润情况，并采用免疫荧光技术观察创周和创基修复细胞内细胞外信号调节激酶1／2(extracellular signal—regulated kinase1／2，ERK1／2)的表达，用免疫组织化学方法检测原癌基因e—fos、增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen，PCNA)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase，FAK)的变化情况。结果组织学检查显示，rhPDGF治疗的创面大量的炎症细胞浸润，毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组，胶原沉积明显，肉芽组织生长活跃，创面收缩显著。免疫学研究显示，伤后3d，rhPDGF治疗组ERK1／2和c—fos的表达明显增强，7d时，ERK1／2和c—fos进一步增强，14d后开始减弱。rhPDGF治疗组各时相点修复细胞PCNA和FAK的表达明显强于对照组：结论ERK1／2信号通路在rhPDGF促糖尿病大鼠创面愈合中起一定作用，并在细胞增殖与迁移中充当重要角色。     

MEBT/MEBO对血管内皮细胞粗面内质网影响的实验研究

目的:本课题旨在进一步探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)对皮肤溃疡局部血管内皮细胞粗面内质网结构的影响,以期可以从不同侧面揭示MEBT/MEBO的改善微循环、祛腐生肌、促进创面再生与修复作用的分子生物学机制.方法:将40只SPF级SD雄性大鼠随机分为美宝湿润烧伤膏(MEBO)治疗组和贝复济对照组,每组20只,造模后于次日开始用药,观察用药后治疗组和对照组溃疡创面愈合情况、肉芽组织生长情况,并记录创面愈合时间.在造模后第8天,取两组同时相点创面组织,用电镜观察标本的超微结构,主要观察血管内皮细胞中粗面内质网的结构形态.结果:MEBO组大鼠的皮肤溃疡创面愈合情况明显好于贝复济组,创面愈合时间明显短于贝复济组,有显著性差异(P<0.05).组织病理学检测MEBO组治疗的创面,造模后第8天标本中血管内皮细胞中粗面内质网结构形态多于贝复济组.结论:MEBO较贝复济能明显的缩短实验性SPF级SD雄性大鼠体表皮肤溃疡模型皮肤慢性难愈合创面的修复愈合时间,具有促进创面愈合,减少瘢痕愈合的作用.其部分愈合机制:促进新生毛细血管的增殖等以加速肉芽组织形成.     

p53介入治疗对VX2兔肝癌侵袭转移特性的影响

目的 探讨p53介入治疗对VX2兔肝癌侵袭转移的影响.方法 开腹方法将VX2瘤细胞分别植入48只新西兰大白兔的肝左叶,建立VX2兔肝癌模型,随机分为4组(12只/组),分别进行肝动脉插管介入治疗,对照组注入生理盐水、A组、B组、C组分别注入水化碘油、Ad-p53、Ad-p53+水化碘油.术后1周处死肿瘤兔,免疫组化方法测定基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果 实验组(A,B,C组)观测到肿瘤生长受到明显抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).单纯碘油栓塞后,肿瘤区MMP-2、PCNA表达略有降低,VEGF表达略有升高,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);Ad-p53组与Ad-p53+水化碘油组的MMP-2、PCNA及VEGF的表达阳性率降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);转移组的MMP-2、PCNA及VEGF的表达阳性率均高于无转移组(P<0.05);MMP-2与VEGF及PCNA之间均存在相关性(P<0.05).绪论MMP-2、VEGF及PCNA的增高预示着肿瘤高转移、高增殖能力,肿瘤血管高形成能力.Ad-p53及Ad-p53+碘油介入治疗可抑制肿瘤的生长,抑制肿瘤新生血管形成,减少转移.     

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面组织内Nrf2 / HO-1 / NQO1 信号通路的影响

【摘要】 目的 探讨皮肤再生医疗技术 (MEBT/ MEBO) 对大鼠慢性难愈合创面组织内核转录因子红系 2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)/ 醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的影响。 方法 选取90只SPF级 Wistar雄性大鼠适应性饲养1周后,采用随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO 组和贝复新组,每组18只。 其中空白组大鼠只做备皮处理, 对照组大鼠建立急性创面模型, 模型组、MEBO组和贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理, MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理,贝复新组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶药纱换药处理, 对比观察各组大鼠创面愈合率、组织病理学变化情况以及皮肤/ 创面组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白与 HO-1、NQO1 mRNA 表达水平。结果 干预第 3 天, 各组大鼠创面愈合率尤以对照组最高、贝复新组次之 (P均＜0.05); 干预第 7、14 天, 各组大鼠创面愈合率尤以 MEBO 组最高、贝复新组次之 (P均＜0.05)。 HE 染色结果显示, 干预第 3、7、14 天,对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内坏死细胞及炎性细胞逐渐减少, 成纤维细胞与毛细血管逐渐增多,而模型组大鼠创面组织内坏死细胞和炎性细胞减少不明显; Masson 染色结果显示, 干预第 3、7、14 天, 对照组?MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内胶原纤维由细少且紊乱逐渐趋于粗大且平整, 而模型组大鼠创面组织内胶原纤维虽逐渐增粗、增多, 但排列仍较紊乱。 干预第 7 天, 对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 MDA 表达水平均明显低于模型组 (P均＜0.05); 干预第 3、7 天, 对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 SOD 表达水平均明显高于模型组 (P均＜0.05)。 干预第 3、7 天, MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白以及 HO-1、NQO1 mRNA 表达水平均明显高于空白组、对照组和模型组 (P均＜0.05), 且干预第 7天, MEBO 组大鼠创面组织内 Nrf2、HO-1 蛋白以及 HO-1 mRNA 表达水平均明显低于贝复新组 (P均＜0.05)。结论 MEBT/ MEBO 可能能够通过激活 Nrf2 / HO-1 / NQO1 信号通路减轻大鼠慢性难愈合创面氧化应激损伤, 促进创面再生修复。     

HA1077联合骨髓间充质干细胞治疗难愈创面观察

 目的 将HA1077联合自体MSCs治疗慢性皮肤溃疡创面,观察能否促进创面愈合.方法 体外分离人MSCs.慢性皮肤创面病人4例,15个创面,随机分为对照组、HA1077组、细胞移植组.对照组,基本外科换药治疗.HA1077组创面局部外用0.5 ml HA1077注射液.细胞治疗组除HA1077治疗外,还局部应用骨髓间充质干细胞.治疗后3、7、14 d计算愈合指数(WCI).结果应用HA1077复合MSCs细胞组,在14 d时的创面愈合指数为36.32±9.92,效果好于单纯应用HA1077组和对照组,而HA1077组与对照组差别不大.结论 HA1077可促进MSCs细胞修复慢性皮肤创面.     

大鼠肝肿瘤放疗及酒精治疗MRI动态灌注表现

目的 研究大鼠肝肿瘤放疗及无水酒精注射治疗后MRI动态灌注表现及其半定量指标最大相对信号强度增减率(MRSI)与免疫组织化学指标增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞生成因子(VEGF)及CD34的相关性. 材料与方法 (1)选取45只肝肿瘤大鼠,随机分成放疗组、酒精注射组及未治疗组,每组15只,分1天、3天、7天共3个时间点观察;(2)每组大鼠每个时间点均采集MRI动态灌注图像, 后处理得到灌注曲线及MRSI;(3)MRI检查后取标本送病理及免疫组织化学(PCNA,VEGF,CD34)检查;(4)将免疫组织化学结果与MRI图像对照分析. 结果 (1)放疗组PCNA染色增殖指数较未治疗组下降, VEGF染色阳性率稍减低, CD34染色阳性表达的微血管数减少及MRSI下降; 且MRSI与PCNA染色增殖指数、CD34染色阳性表达微血管数及VEGF表达阳性率呈正相关.(2)酒精注射组PCNA染色增殖指数较未治疗组下降明显,并见CD34染色阳性表达的微血管数显著减少,VEGF染色阳性率及MRSI明显减低;MRSI与PCNA、VEGF及CD34呈正相关. 结论 放疗及酒精注射治疗对大鼠肝肿瘤新生血管有抑制作用,MRI动态增强能反映肿瘤的血供情况.     

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面组织中CK14及CK19表达水平的影响

目的探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中CK14及CK19表达水平的影响。方法按照随机数表法将90只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、急创组、慢创组、rb-bFGF组及MEBO组,每组18只,空白组大鼠仅做背部备皮处理,急创组大鼠建立急性创面模型,慢创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠建立慢性创面模型;造模成功后,空白组大鼠备皮处皮肤以及急创组与慢创组大鼠创面予以生理盐水纱布湿敷,rb-bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor,rb-bFGF)凝胶治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)治疗。分别于局部处理第3、7、14天取各组大鼠皮肤或创面组织行Masson染色,观察组织形态学差异,并进行Western blotting及RT-PCR检测,对比CK14、CK19蛋白表达及其mRNA转录水平。结果 (1) Masson染色结果显示,急创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织形态学差异不明显,均可见炎性细胞逐渐减少,新生血管及皮肤附属器逐渐形成,创面组织形态逐渐接近正常,而慢创组大鼠创面组织中炎性细胞消散及新生血管生长较慢,逐渐形成瘢痕组织形态。(2)局部处理第3、7、14天,急创组、慢创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织中CK14蛋白表达及其mRNA转录水平均呈逐渐升高的趋势(P均0.05),至局部处理第14天,急创组、rb-bFGF组及MEBO组均升高至空白组水平(P均0.05),而慢创组仍低于其它各组(P均0.05)。(3)局部处理第3、7、14天,急创组、慢创组、rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织中CK19蛋白表达及其mRNA转录水平均呈先升高后降低的趋势(P均0.05),至局部处理第14天,急创组、rb-bFGF组及MEBO组均降低至空白组水平(P均0.05),而慢创组仍高于其它各组(P均0.05)。结论MEBT/MEBO能够促进慢性难愈合创面愈合,调控创面组织中CK14及CK19的表达水平可能是其部分作用机制。     

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面组织中CK15表达水平的影响

目的通过检测大鼠慢性难愈合创面组织中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)15的动态表达水平,探讨皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)促进慢性难愈合创面愈合的部分作用机制。方法选取SPF级健康成年雄性Wistar大鼠90只适应性喂养7 d后,按照随机数表法随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO组与rb-bFGF组,每组18只,其中空白组大鼠只做背部备皮处理,对照组大鼠于背部建立急性创面模型,模型组、MEBO组和rb-bFGF组大鼠于背部建立慢性难愈合创面模型;模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以0.9%氯化钠注射液纱布湿敷,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱换药治疗,rb-bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor,rb-bFGF)药纱换药治疗。分别于治疗第3、7、14天,采用Western blotting技术及Real-time PCR技术检测各组大鼠皮肤或创面组织中CK15蛋白及CK15mRNA的表达水平。结果空白组大鼠皮肤组织中CK15蛋白及CK15 mRNA表达水平无明显变化(F=0.054、1.333,P=0.948、0.293),其他各组大鼠创面组织中CK15蛋白及CK15 mRNA表达水平均呈先降低后升高的趋势(CK15蛋白:F=192.766、58.065、126.888、118.244,P均=0.000;CK15 mRNA:F=580.869、272.569、569.254、736.054,P均=0.000)。治疗第3、7天,对照组、MEBO组、rb-bFGF组大鼠创面组织中CK15蛋白及CK15 mRNA表达水平均显著低于模型组(P均<0.05),而治疗第14天对照组、MEBO组、rb-bFGF组大鼠创面组织中CK15蛋白及CK15 mRNA表达水平均显著高于模型组(P均<0.05);治疗第3、7、14天,MEBO组与rb-bFGF组大鼠创面组织中CK15蛋白及CK15 mRNA表达水平均无明显差异(P均>0.05)。结论通过调控创面组织中CK15的表达水平促进表皮干细胞的增殖可能是MEBT/MEBO加快慢性难愈合创面愈合的部分作用机制,且其治疗效果与rb-bFGF相当,作用机制与rb-bFGF相似。     

Vascular endothelial growth factor in the early stage of skin incision wounds in cyclophosphamide-induced leukocytopenic rats

Wound healing evaluation is important in forensic pathology. We have already shown that vascular endothelial growth factor (VEGF) is produced in the rat skin incision wounds. In this study, we used cyclophosphamide hydrate (CPM) to induce leukocytopenia in rats, and measured VEGF in the skin incision wound area to assess the involvement of leukocytes in the early production of VEGF. Male Sprague–Dawley (SD) rats were intraperitoneally administered CPM 75 mg/kg body weight on day 0 and 5, and dorsal skin incision wounds were made on day 5. One and 3 days after the skin incision, leukocytes counts were determined and skin specimens from the wounds were collected for measurements of total proteins, VEGF proteins, and semi-quantification of VEGF mRNA. VEGF immunohistochemistry and in situ hybridization for VEGF mRNA were also performed. VEGF proteins were smaller in the amount statistically significantly in the 1- and 3-day-old wounds of CPM-induced leukocytopenic rats, whereas VEGF mRNA was increased compared with saline-treated control rats. Immunohistochemically, VEGF was positive in leukocytes and mesenchymal cells including fibroblasts and endothelial cells in the 3-day-old wound of saline-administered control rats, while a few fibroblasts and endothelial cells were positively stained in CPM-administered rats. In situ hybridization showed the localization of VEGF mRNA in mesenchymal cells including fibroblasts and endothelial cells in the 1-day-old wound of CPM-administered rats, whereas saline-administered control rats also showed VEGF mRNA positivity in leukocytes. Our study indicates that leukocytes may be the major source of VEGF in the early stage of the rat skin incision wound.     

芦荟提取物对大鼠烫伤创面微血管形成的影响

目的探讨芦荟提取物对大鼠烫伤创面修复过程中微血管形成的影响。方法Wistar大鼠48只,随机分为8组,每组6只。每只背部造成4处直径3 cm深Ⅱ度烫伤创面,分别外涂质量分数分别为5%、10%、1%的芦荟粗多糖膏、芦荟凝胶膏、磺胺嘧啶银(SD-Ag)霜等渗盐水作空白对照,测量和计算烫伤后第10,14,18,21天创面面积,计算创面愈合率,并于烫伤前、伤后4 h、12 h、24 h、48 h和7 d、14 d、21 d分别取大鼠创面皮肤测定创面组织中血管内皮生长因子(VEGF)含量,采用Ⅷ因子免疫组织化学染色计算微血管密度(MVD)。结果5%芦荟粗多糖组和10%芦荟凝胶组(简称前者)与SD-Ag霜组和等渗盐水组(简称后者)相比,烫伤后14,18, 21 d,前者创面愈合率显著大于后者(P<0.05);烫伤后48 h、7 d、14 d和21 d,前者比后者创面VEGF含量显著增加(P<0.05);在烫伤后14 d和21 d,前者创面微血管密度显著大于后者(P< 0.05);而5%芦荟粗多糖组与10%芦荟凝胶组间、SD-Ag霜组与等渗盐水组间比较,差异无统计学意义。结论芦荟粗多糖和芦荟凝胶能通过增加烫伤创面组织VEGF的合成与释放,增加创面的微血管形成,促进创面愈合。     

Ultrasound-mediated microbubble destruction enhances VEGF gene delivery to the infarcted myocardium in rats

OBJECTIVE: To investigate the possibility of improving the delivery of vascular endothelial growth factor (VEGF) gene to the myocardium in rats by using ultrasound-mediated microbubble destruction (UMMD). METHODS: Fifteen male Wistar rats underwent left anterior descending coronary artery ligation in this study. The rats were divided into three groups 3 days after ligation. Ultrasound microbubble vectors (UMVs) attaching to pcD2VEGF121 gene were injected into the tail vein of rats with or without simultaneous echocardiographic microbubble destruction in two groups. The third group was used as control group. VEGF protein expression and formation of new blood vessels were evaluated by immunohistochemical technique during autopsy on 15 rats at 2 weeks after gene transformation. Microvascular density (MVD) in the area with myocardial infarction was counted under a microscope. RESULTS: VEGF protein expression and MVD in the ischemic myocardium were higher in the rats receiving UMMD than in the group that did not receive UMMD. CONCLUSION: UMMD is a noninvasive method to effectively improve the delivery of targeted genes to the heart.     

负载VEGF 、bFGF的聚乳酸-羟基乙酸纳米微囊复合体对放射性损伤创面愈合的作用

 目的 探讨负载VEGF、bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)纳米微囊复合体对放射性损伤创面愈合的影响。方法 以PLGA为支架联合应用bFGF、VEGF构建纳米微囊,作用于小鼠放射性损伤创面作为实验组,单纯应用PLGA为支架,未用bFGF、VEGF的作为对照组,观察两组创面愈合率、创面的病理改变;于伤后不同时间点检测创面新生血管细胞数目、毛细血管截断面积及成纤维细胞数量;RT-PCR检测创面VEGF mRNA 、bFGF mRNA的表达水平;观察其对放射性创面愈合的影响。结果 实验组创面愈合率明显高于对照组;实验组创面组织中VEGF mRNA、bFGF mRNA的表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);对创面组织进行HE染色,发现实验组肉芽组织增多增厚,成纤维细胞数量及密度均高于对照组;伤后第8天、第15天,实验组的新生毛细血管数量及毛细血管横截面积均较对照组有所增加,实验组的成纤维细胞计数也明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 采用负载VEGF、bFGF的PLGA纳米微囊复合体可以促进小鼠放射性损伤创面的愈合。     

小鼠急性皮肤缺损创面粒-巨噬细胞集落刺激因子表达特点及其作用机制

目的 探讨创面愈合过程中粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)的表达变化及其在创面愈合中的作用和机制.方法采用小鼠全层皮肤缺损伤模型.肌肉麻醉后在背部中线近颈侧制作1.0 cm×1.0 cm大小皮肤缺损伤创而.50只雄性...     

微氧联合负压封闭辅助伤口闭合技术在骨科慢性难愈性创面中的应用效果

目的研究微氧联合负压封闭辅助伤口闭合技术治疗骨科慢性难愈性创面的临床效果。方法选取2017年1月至2018年7月中国人民解放军第九八八医院收治的30例骨科慢性难愈性创面患者作为研究对象,并按照随机数表法将其随机分为观察组(15例)与对照组(15例),其中观察组患者采用微氧联合负压封闭辅助伤口闭合技术治疗局部创面,对照组患者单纯采用负压封闭辅助伤口闭合技术治疗局部创面,对比两组患者创面渗液pH值、创面温度、肉芽组织覆盖率、临床疗效以及创面愈合时间。结果治疗10 d后,观察组患者创面渗液pH值明显低于对照组(t=3.587,P=0.001),而创面温度及肉芽组织覆盖率明显高于对照组(t=10.230、8.110,P均=0.000)。治疗2周后,观察组患者治疗总有效率为93.3%,明显高于对照组患者的治疗总有效率53.3%(χ^2=6.136,P=0.013)。最终两组患者创面均完全愈合,且观察组患者创面愈合时间明显短于对照组(t=2.119,P=0.043)。结论微氧联合负压封闭辅助伤口闭合技术治疗骨科慢性难愈性创面,可明显改善创面pH值、温度等微环境,有效促进肉芽组织生长,加快创面愈合,疗效显著,值得临床推广应用。