中药单体与抗菌药物联合应用对抗泛耐药鲍曼不动杆菌的作用

目的超级细菌-泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)造成的公共卫生安全问题是当前全世界共同面临的挑战。本文研究中药单体槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷对PDR-AB生物被膜形成能力及粘附作用的影响,探讨中药单体与四种抗菌药物(亚胺培南、美罗培南、替加环素、多粘菌素)联合应用对抗PDR-AB的协同效应。方法应用微量肉汤稀释法检测三种中药单体对9株临床PDR-AB的最低抑菌浓度(MIC),采用96孔细胞培养板和导尿管模型并结合结晶紫染色法检测三种中药单体对PDR-AB生物被膜形成能力的影响,构建导尿管模型并结合平板菌落计数法测定三种中药单体对PDR-AB黏附能力的影响,应用微量棋盘稀释法检测三种中药单体分别与四种抗菌药物联合应用的协同效应。结果 (1)三种中药单体对PDR-AB MIC分别为512,512,1024 mg·L~(-1)。(2)三种中药单体分别在64,32,128 mg·L~(-1)的亚抑菌浓度下抑制PDR-AB的生物被膜的形成以及对医用材料导尿管的粘附。(3)槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷三种中药单体分别与亚胺培南联用时78%,89%,78%表现为协同作用,亚胺培南的MIC值从64 mg·L~(-1)下调到8 mg·L~(-1);与美罗培南联用时89%,89%,56%表现为协同作用,MIC值从32 mg·L~(-1)下调到4 mg·L~(-1);与替加环素联用时56%,22%,100%表现为协同作用,MIC值从1 mg·L~(-1)下调到0.25 mg·L~(-1);与多粘菌素B联用时100%表现为拮抗作用,22%表现为协同作用,33%为拮抗作用。结论在亚抑菌浓度下三种中药单体均能抑制PDR-AB生物被膜的形成能力以及对医用材料的黏附,而且三种中药单体与亚胺培南、美罗培南、替加环素联用后对PDR-AB的抗菌活性有不同程度的协同作用,尤其是黄芩苷与替加环素联用时表现出显著的抗菌协同效应,这对PDR-AB感染的防治提供新的治疗思路。     

替加环素单药及与5种抗菌药物联用对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的体外抑菌及生物膜清除作用研究#br#

目的 评价替加环素单用及与其他5种临床常用抗菌药物分别联合使用，对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenems-resistant Acinetobacter baumannii, CRAB)的体外抑菌及生物膜清除作用。方法 微量肉汤稀释法测定替加环素、阿米卡星、美罗培南、环丙沙星、黏菌素和舒巴坦对42株CRAB的最低抑菌浓度(minimal inhibititory concentration, MIC)和最低生物被膜清除浓度(minimal biofilm eradication concentration, MBEC)。棋盘稀释法测定替加环素分别联用阿米卡星、美罗培南、环丙沙星、黏菌素和舒巴坦对42株CRAB的MIC值和MBEC值，并计算分级抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index, FICI)和分级生物膜清除浓度指数(fractional eradication concentration index, FECI)。结果 替加环素与5种抗菌药物分别联用后，对CRAB的抑菌作用和生物被膜清除作用表现为协同或无关，均未发现拮抗现象。其中替加环素与阿米卡星联用后具有较高的协同抑菌率(47.6%, 20/42)，而替加环素与环丙沙星联用后则具有较高的生物膜协同清除率(30.9%, 13/42)。结论 与单药相比，替加环素与5种药物分别联用，对CRAB的体外抑菌及生物膜清除作用具有一定的增强效果。     

替加环素和多黏菌素对产KPC酶肺炎克雷伯菌的抗菌效应研究

目的 评价替加环素、多黏菌素对产KPC酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究,指导临床正确选择并合理使用抗菌药物。方法 收集2012—2016年期间分离自温州医科大学附属第三医院临床样本中对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌109株,采用Vitek-2 compact和Vitek MS进行菌种鉴定及药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)法检测菌株的KPC酶耐药基因并采用琼脂稀释法药敏试验分别检测替加环素、多黏菌素等药物的单药最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)值。结果 所分离的109株均为产KPC-2肺炎克雷伯菌,经过Vitek-2 compact和KB法试验可知109株肺炎克雷伯菌对阿米卡星的耐药率为82.57%,对亚胺培南、美罗培南等其他药物的耐药率均为100%。琼脂稀释法药敏结果显示109株肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南耐药率均为100%;对阿米卡星耐药率为89%;对替加环素的敏感率为65.1%,29.4%中介;对多黏菌素的敏感率为100%。结论 产KPC-2型肺炎克雷伯菌对多黏菌素和替加环素较为敏感,可作为临床用药参考。     

鲍曼不动杆菌对米诺环素等抗菌药物的耐药性研究

目的 初步探讨米诺环素等16种临床常用抗菌药物对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性,为临床合理用药提供实验依据.方法 四川大学华西医院抗感染药物研究室分离自临床感染患者的115株非重复多重耐药鲍曼不动杆菌菌株,采用琼脂二倍稀释法进行16种临床常用抗菌药物体外抗菌活性测定.结果 米诺环素和多黏菌素B对鲍曼不动杆菌有很好的抗菌活性,MIC50分别为4μg/mL与0.25μg/mL,MIC90分别为16μg/mL与4μg/mL,亚胺培南等碳青霉烯类抗生素对多重耐药的鲍曼不动杆菌也有较强的抗菌活性,MIC50为2μg/mL,MIC90为32μg/mL.结论 米诺环素、多黏菌素B、亚胺培南对临床分离鲍曼不动杆菌具有良好的抗菌活性,可作为治疗选择药物.     

某院鲍曼不动杆菌血流感染治疗方案的制定

目的：制定某院鲍曼不动杆菌血流感染的治疗方案。方法：收集某院2015-2016年血标本培养出的鲍曼不动杆菌39株,测定对氨苄西林舒巴坦,替加环素,亚胺培南,美罗培南的最低抑菌浓度。运用蒙特卡洛方法计算不同方案的达标概率（PTA）和累积反应分数（CFR）。结果：氨苄西林舒巴坦3 g q6h对鲍曼不动杆菌的CFR为66.05%,替加环素50 mg q12h,100 mg q12h的CFR分别为95.75%和99.77%,亚胺培南1 g q8h,q6h和美罗培南1 g q8h,q6h的CFR分别是67.74%,96.56%和74.19%,88.8%。结论：某院鲍曼不动杆菌血流感染时,经验选择可用替加环素50 mg q12h,100 mg q12h和亚胺培南1 g q6h方案。目标治疗应根据最低抑菌浓度（MIC）情况选择方案。     

舒巴坦联合9种抗菌药物对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌体外抗菌活性研究

目的：评价舒巴坦与9种临床常用抗菌药物联合用药对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）的体外抗菌效应。方法：从临床分离得到24株CRAB。采取微量肉汤稀释法测定10种抗菌药物单一用药对CRAB的最低抑菌浓度（MIC）。采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定舒巴坦分别联合9种抗菌药物对CRAB的MIC,并计算部分抑菌浓度指数（FIC）判定联合效应。结果：9种抗菌药物联用舒巴坦后的MIC均比单用时降低;联用后替加环素、多西环素、环丙沙星、左氧氟沙星的MIC₅₀均低于对应单药敏感折点,替加环素的MIC₉₀达到单药的敏感折点。舒巴坦与9组联合用药均未出现拮抗作用;舒巴坦联合阿米卡星的协同作用最强,其次为美罗培南、帕尼培南、亚胺培南、多西环素、替加环素。结论：与单药相比,9种药物联用舒巴坦对CRAB的体外抑菌作用均有增强效果。9种抗菌药物联合舒巴坦有效地降低MIC值,其中多西环素、替加环素、环丙沙星和左氧氟沙星,可使其MIC值降至敏感范围内。     

2018—2020年多中心耐黏菌素病原菌及耐药状况分析

摘要：目的 了解2018—2020年国内不同地区三级医院耐黏菌素临床分离菌株的分布特征及其对其他抗菌药物的药敏 结果。方法 对临床分离的菌株按照统一方案，采用自动化仪器法进行细菌药敏试验，按照美国临床和实验室标准化协会 (Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)2020年标准判读结果，并采用WHONET 5.6软件进行耐药数据分析。结果 共 收集375株非重复分离的耐黏菌素菌株，主要分离于ICU病区。其中非发酵菌226株，占60.3%；肠杆菌目149株，占39.7%。从菌 株分布来看，排名前3位的依次是铜绿假单胞菌46.1%(173/375)、肺炎克雷伯菌20.3%(76/375)、鲍曼不动杆菌14.1%(53/375)。从 药敏结果来看，耐黏菌素菌的MIC值主要分布在4~32μg/mL。其中非发酵菌对黏菌素耐药的MIC值主要集中在4和32μg/mL，肠 杆菌目对黏菌素耐药的MIC值主要集中在4μg/mL；耐黏菌素的铜绿假单胞菌对氨基糖苷类和哌拉西林/他唑巴坦仍保持一定的抗 菌活性，耐药率均<25%，而耐黏菌素的肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对替加环素外的其他抗菌药物呈现高度耐药性，两者对碳 青霉烯类抗生素耐药率分别为82.8%和79.2%。 结论 黏菌素耐药菌株尤其是高水平耐药株已在不同地区出现，临床应引起重 视，合理使用抗菌药物。     

替加环素联合5种抗菌药物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外活性

目的 评价替加环素分别联合5种临床常用抗不动杆菌属抗菌药物对57株多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌作用.方法 琼脂棋盘稀释法测定替加环素分别联合美罗培南、阿米卡星、环丙沙星、粘菌素、舒巴坦对57株对美罗培南、阿米卡星、环丙沙星、米诺环素均耐药的多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC),并计算部分抑菌浓度指数(FICI).结果 替加环素与5种抗菌药物联合后表现为协同或不相关作用,其中协同率较高的组合为替加环素+阿米卡星组,50.9％;其次为替加环素+美罗培南组,29.8％,未发现拮抗现象.结论 替加环素与5种抗菌药物联合对本组多重耐药鲍曼不动杆菌主要表现为不相关作用,但与阿米卡星联合具有相对较高的协同率.     

盐酸小檗碱和亚胺培南联合作用对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌体外抗菌活性的影响

目的评价亚胺培南、盐酸小檗碱两种药物联合使用对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CPA)体外抗菌活性产生的影响,探讨两种联合用药方案可行性,为抗菌药物联合使用合理性进一步提高可靠参考依据。方法收集2016年2月～2017年5月本院临床分离的80株CPA,采用肉汤稀释法实施亚胺培南、盐酸小檗碱耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌最小抑菌浓度(MIC)检测;采用棋盘稀释法实施亚胺培南联合盐酸小檗碱对CPA的MIC,将联合指数(FIC)计算出来。结果单独使用盐酸小檗碱、亚胺培南时,两种药物对CPA的MIC的均值分别为261.00、8.75μg/mL;两药联合使用后,亚胺培南、盐酸小檗碱对CPA的MIC值均有明显减少,均值分别下降为8.11、4.48μg/mL;两药联用时,对88.42%的50株CPA表现为相加抗菌作用,对6.56%CPA表现为协同抗菌作用,对5.02%CPA表现出无拮抗作用。结论亚胺培南、盐酸小檗碱联合使用时,二者主要表现为协同作用,表明联合能够有效提高两种药物各自对CPA的抗菌敏感性,因此将该方案应用于CPA感染治疗可能获得更理想效果。     

高效液相色谱法同时测定坤泰胶囊中7种成分含量

目的 建立同时测定坤泰胶囊中地黄苷D、盐酸小檗碱、芍药苷、黄芩苷、黄芩素、没食子酸及毛蕊花糖苷7种成分含量的高效液相色谱法。方法 色谱柱为Waters C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为275 nm(地黄苷D、黄芩苷、盐酸小檗碱、没食子酸、黄芩素)、230 nm(芍药苷)、338 nm(毛蕊花糖苷),柱温为30℃,进样量为20μL。结果 地黄苷D、盐酸小檗碱、芍药苷、黄芩苷、黄芩素、没食子酸、毛蕊花糖苷的质量浓度分别在7.512～225.360μg/mL、13.176～395.265μg/mL、6.511～195.315μg/mL、21.007～630.210μg/mL、4.616～138.465μg/mL、2.378～71.340μg/mL、2.008～60.225μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.999 5,n=6);平均加样回收率分别为97.30%,97.97%,97.59%,98.22%,98.87%,101.74%,98.13%,RSD分别为0.9...     

盐酸小檗碱、黄芩苷与抗菌药物联用对多重耐药鲍曼不动杆菌作用研究

目的探讨盐酸小檗碱、黄芩苷与6种抗菌药物(头孢他啶、哌拉西林-他唑巴坦、亚胺培南西司他丁钠、氨曲南、左氧氟沙星、加替沙星)对多重耐药鲍曼不动杆菌的联合抑菌作用。方法根据临床药敏结果选取7株鲍曼不动杆菌多重耐药菌株作为实验对象。用微量稀释法测定盐酸小檗碱、黄芩苷分别与6种抗菌药物的联合抑菌效应。结果盐酸小檗碱与亚胺培南西司他丁钠、氨曲南联用表现为协同作用。黄芩苷与氨曲南表现为协同作用。结论盐酸小檗碱、黄芩苷与某些抗菌药物联用后对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌活性有协同作用,可能对多重耐药鲍曼不动杆菌的治疗有所帮助。     

2010年住院患者鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的了解我院住院患者的鲍曼不动杆菌的分布特点及耐药情况,为临床治疗提供可靠依据。方法采用法国生物梅里埃公司VITEK 2 Compact系统进行细菌鉴定,K-B法进行药敏试验,使用WHONET 5.4软件进行细菌的耐药性分析。结果我院鲍曼不动杆菌检出率为6.62%,出现最多是痰标本,占81.16%;鲍曼不动杆菌感染主要以康复科、神经科及ICU最多,其次为呼吸内科。该菌对头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素的敏感性最高,均在80%以上,对美洛培南和亚胺培南的敏感率均在60%以上,对其它抗菌药物的耐药率在50%以上。结论鲍曼不动杆菌是医院感染重要的条件致病菌,其对抗生素耐药率高,且多重耐药,美洛培南和亚胺培南是首选的经验性治疗鲍曼不动杆菌的药物,头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素是治疗鲍曼不动杆菌最敏感的抗菌药物,对于多重耐药鲍曼不动杆（MDR-AB）感染,可采用头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素联合治疗方案。     

Activity of tigecycline alone and in combination with colistin and meropenem against Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing Enterobacteriaceae strains by time-kill assay

Antibiotic combinations including tigecycline have not been studied against Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing pathogens. Tigecycline alone and combined with colistin and meropenem was tested against eight genetically unrelated KPC-producing clinical strains of Enterobacteriaceae (four K. pneumoniae, two Escherichia coli, one Enterobacter cloacae and one Serratia marcescens) by time-kill assay. Tigecycline displayed a concentration-independent bacteriostatic activity in seven strains and bactericidal activity in one strain. Colistin showed bactericidal activity at 4× the minimum inhibitory concentration (MIC) in three strains and was bacteriostatic for the remaining strains and concentrations. Meropenem was bactericidal in three strains and bacteriostatic in five strains. The tigecycline+meropenem combination was not bactericidal against the four K. pneumoniae strains and was non-synergistic against all eight strains. Tigecycline+colistin was bactericidal against all strains at most time intervals and concentrations and was also synergistic at 1× and 2× MIC against most strains up to 4-8h and at 4× MIC up to 24 h against all strains. These findings suggest that, at most drug concentrations, tigecycline, colistin and meropenem as single agents do not exhibit efficient bactericidal activity against most of the KPC-producing strains. Tigecycline alone might be a therapeutic option for infections caused by KPC-producers when bacteriostatic activity is adequate or combined with colistin when bactericidal activity is necessary. Additional in vivo tests are warranted to assess better the killing kinetics of tigecycline combinations against KPC-producers.     

9种中药单体对艰难梭菌的体外抑菌活性研究

目的:研究黄芩素等9种中药单体对艰难梭菌的体外抑菌活性.方法:采用滤纸片法测定9种中药单体对艰难梭菌的抑菌活性,筛选出其中活性较好的中药单体;采用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC);微量肉汤稀释法测定最低杀菌浓度(MBC);滤纸片法测定pH稳定性以及棋盘法测定与万古霉素联合的抑菌作用.结果:黄芩素、 槲皮素对艰难梭...     

In vitro activity of cefepime, imipenem, tigecycline, and gentamicin, alone and in combination, against extended-spectrum beta-lactamase-producing Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli

STUDY OBJECTIVE: To evaluate the activity of cefepime, imipenem, tigecycline, and gentamicin, alone and in combination, against extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli. DESIGN: In vitro susceptibility and time-kill analysis. SETTING: University-affiliated research laboratory. ISOLATES: Ten K. pneumoniae and 10 E. coli clinical strains known to produce ESBL. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: Minimum inhibitory concentration (MIC) testing was performed at 5.5 and 7.0 log(10) colony-forming units (cfu)/ml. Time-kill studies were performed over 24 hours with a high inoculum of 7.0 log(10) cfu/ml for cefepime, imipenem, tigecycline, and gentamicin at 1 times MIC. Combination studies were tested for cefepime plus tigecycline, cefepime plus imipenem, imipenem plus tigecycline, and for adjunctive gentamicin with cefepime, imipenem, or tigecycline. At the high inoculum, the MIC ranges for cefepime, imipenem, tigecycline, and gentamicin were 0.25-256 (MIC for 90% of tested strains [MIC(90)] = 32), 0.125-2 (MIC(90) = 1), 0.25-16 (MIC(90) = 4), and 0.25-4 mg/L (MIC(90) = 1), respectively, for all isolates. At the higher inoculum, MICs shifted for cefepime, imipenem, and tigecycline. Change in log(10) cfu/ml from baseline to 24 hours for cefepime, imipenem, and tigecycline alone ranged from 4.85-0.71, 5-4.22, and 3.5-1.01, respectively, for all isolates. Bactericidal activity was observed for cefepime alone (10 [50%] of 20 isolates), imipenem alone (20 [100%] of 20), and tigecycline alone (3 [15%] of 20). Combination studies with cefepime plus tigecycline resulted in synergy against 4 (20%) of 20 isolates. Combination studies with gentamicin resulted in synergy against 6 isolates (30%) with cefepime and 4 isolates (20%) with tigecycline. No synergy was observed with imipenem combinations. No antagonism was observed. With the exception of cefepime, correlations were observed between MIC and terminal densities for studied agents. CONCLUSIONS: Cefepime exhibited bactericidal activity but was unrelated to susceptibility. Tigecycline exhibited predictable bacteriostatic activity and synergy in combination against a subset of study isolates. Imipenem exhibited predictable bactericidal activity against all isolates. The utility of combination regimens with novel agents requires further exploration.     

替加环素与临床常用抗菌药物对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的协同作用研究

目的评价替加环素与临床常用抗菌药物对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的协同作用。方法收集2014—2016年临床分离的非重复CRE共235株。琼脂稀释法进行药物敏感性试验并分析替加环素和9种常用抗菌药物的耐药率。选取替加环素非敏感的35株作为研究对象,并采用棋盘稀释法检测替加环素联合其他9种抗菌药物(亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南、左氧氟沙星、阿米卡星、哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦)对CRE的协同作用。结果肺炎克雷伯菌、沙雷菌属、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌对替加环素的耐药率较高,分别是5.1%(7/137)、5.6%(1/18)、7.7%(1/13)和8.3%(1/12)。替加环素与头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦联合效果最明显,协同百分比都是28.6%(10/35)。替加环素与头孢噻肟(9/35,25.7%)、左氧氟沙星(8/35,22.9%)和头孢哌酮/舒巴坦(7/35,20.0%)也显示出较好的协同作用。研究中未出现药物拮抗的作用。结论替加环素与头孢他啶、哌拉西林/三唑巴坦联合对CRE的协同作用比较明显。替加环素的联合治疗可能比单用更为有效。     

Q-marker思路下的黄连花薹抗菌作用及机制研究

摘要：目的 基于Q-marker思路探究黄连花薹的抗菌活性和机制,在此基础上探讨中药质量标志物与药物整体的作用机制的 异同的确定原则。方法 采用二倍稀释法测定黄连花薹提取物和盐酸小檗碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草芽胞杆菌的最 小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并通过菌体的胞外可溶性蛋白质含量、胞外核酸相对含量和电导率的测定研究其抗菌 机制。结果 黄连花薹和盐酸小檗碱对3种细菌抗菌作用有差异,其中黄连花薹提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌效果最好,MIC为 12.5 mg/mL,MBC为25 mg/mL;盐酸小檗碱对枯草芽胞杆菌的抗菌效果最好,MIC为0.25 mg/mL,MBC为2.0 mg/mL。在盐酸小 檗碱和黄连花薹提取物的作用下胞外可溶性蛋白质含量、胞外核酸相对含量及电导率增加。结论 黄连花薹及盐酸小檗碱对3 种致病菌具有较好的抗菌活性,其作用机制相同,均通过对细菌细胞膜造成损伤增加其通透性,使菌体物质大量外渗,从而达 到其抗菌活性。     

下呼吸道感染鲍曼不动杆菌的耐药性监测

目的探讨下呼吸道感染中鲍曼不动杆菌的耐药情况,为临床抗感染治疗提供科学依据。方法对2010年临床下呼吸道感染分离的104株鲍曼不动杆菌耐药情况进行回顾分析,用K-B法进行体外药敏试验。结果 104株鲍曼不动杆菌药敏试验结果显示该菌对多黏菌素耐药率最低,为7.7%,其次是美罗培南(21.2%)、亚胺培南(24.0%)、头孢哌酮/舒巴坦(28.8%),对其他抗生素均有较高的耐药性。结论鲍曼不动杆菌是下呼吸道感染常见病原菌,多重耐药性严重,临床应根据药敏结果合理用药,以便有效控制感染和减缓耐药菌株的产生。