基于UPLC指纹图谱结合化学模式识别的复方血栓通胶囊质量控制研究

目的： 采用UPLC法建立复方血栓通胶囊的指纹图谱，并结合化学模式识别技术对其进行系统、全面和科学的质量评价。方法： 采用Waters UPLC超高效液相色谱仪，ACQUITY UPLC^® HSS T3色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱，检测波长为256 nm，建立10批次复方血栓通胶囊的指纹图谱。通过相似度分析并结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）等模式识别技术对复方血栓通胶囊的总体质量进行分析评价。结果： 建立的指纹图谱共标定67个共有峰，经对照品进行化学指认并鉴定了其中的12个色谱峰。10批供试品的相似度均大于0.96，表明该药物总体质量较为稳定；但通过CA及PCA均发现不同批次药物质量之间仍然存在有微小差异，且主要分为两大类，最后进一步采用OPLS-DA筛选出了导致批次药物质量差异的7个共有峰。结论： 本研究建立的分析方法科学、准确、可靠且简便易行，指纹图谱结合化学模式识别技术可更加系统、全面地评价复方血栓通胶囊的药物质量。     

基于UPLC指纹图谱结合化学计量学的肝爽颗粒质量评价研究

摘要：目的:建立肝爽颗粒的UPLC指纹图谱,并结合化学计量学等方法寻找表征不同批次肝爽颗粒质量差异性标志物,为科学全面地评价肝爽颗粒的质量提供参考。方法:采用UPLC法对18批肝爽颗粒进行分析,建立肝爽颗粒指纹图谱,使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价,利用对照品对共有峰进行指认,并结合化学计量学方法对不同批次肝爽颗粒质量及控制方法进行分析和评价。结果:建立的指纹图谱确定23个共有峰,指认出10个成分,分别为阿魏酸（5号峰）、虎杖苷（6号峰）、菊苣酸（7号峰）、柚皮苷（11号峰）、橙皮苷（12号峰）、迷迭香酸（13号峰）、新橙皮苷（14号峰）、丹酚酸B（16号峰）、大黄素（21号峰）、大黄素甲醚（23号峰）;18批肝爽颗粒指纹图谱的相似度均在0.990以上;聚类分析和主成分分析（PCA）将18批肝爽颗粒基本分为3类;正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）筛选得到12个变量重要性投影（VIP）＞1的共有峰（峰7、2、19、22、3、20、14、5、1、11、13、4）,经对照品指认了其中5个差异性标志物（菊苣酸、新橙皮苷、阿魏酸、柚皮苷、迷迭香酸）。结论:该研究建立的UPLC指纹图谱方法合理、有效、准确、简便,结合化学计量学分析方法可用于评价肝爽颗粒的质量,为肝爽颗粒的质量控制提供科学依据。     

护肝宁制剂HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

摘要：目的:采用HPLC法建立护肝宁的指纹图谱,并结合化学模式识别对其质量进行分析评价。方法:采用CAPCELL PAK C18MGⅡ（200 mm×4. 6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0. 1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1. 0 ml·min-1,检测波长为280nm,柱温为30℃,建立11批护肝宁制剂的指纹图谱,通过相似度分析并结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）等模式识别技术对护肝宁制剂的质量进行分析评价。结果:建立的指纹图谱共标定27个共有峰,通过对照品保留时间和紫外吸收光谱确定5个共有峰,11批护肝宁样品指纹图谱的相似度均大于0. 86,表明该药物总体质量较为稳定,但通过CA及PCA均发现不同厂家不同批次药物之间仍存在差异,通过OPLS-DA筛选出对药物质量差异影响最大的4个共有峰。结论:建立的分析方法简便、准确、可靠,指纹图谱结合化学模式识别分析可更好地评价护肝宁制剂的质量,为该制剂的质量控制提供科学依据。     

基于指纹图谱化学模式识别的头顶一颗珠产地差异评价

目的 通过头顶一颗珠HPLC指纹图谱化学模式识别，评价秦巴及不同产地间药材的质量差异。方法 采用Hibar C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，建立头顶一颗珠HPLC指纹图谱，经相似度评价，聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究秦巴及外产地10批样品的质量差异。结果 头顶一颗珠指纹图谱匹配得到23个共有色谱峰，其中21～23号峰依次指认为重楼皂苷Ⅶ、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-O-β-D-葡萄糖苷及重楼皂苷Ⅵ,各批次相似度在0.706～0.958之间。经化学模式识别10批药材样品可聚为3类，其中秦巴产的湖北神农架及陕西药材PCA综合得分较高，质量较好。OPLS-DA筛选出11个影响各批药材质量差异的色谱峰。结论 建立的中药指纹图谱化学模式识别方法能明确秦巴产头顶一颗珠的道地品质，为其开发利用提供了质量评价依据。     

复方滇鸡血藤颗粒的指纹图谱建立及4个木脂素类成分含量测定

目的:建立复方滇鸡血藤颗粒的指纹图谱，并建立颗粒中4个木脂素类成分同时测定的高效液相色谱(HPLC)方法，为其质量控制提供参考。方法:采用HPLC法建立复方滇鸡血藤颗粒的指纹图谱，以对照品进行共有峰指认，通过制剂与各单味药材的相关性分析进行共有峰归属，通过相似度评价结合化学模式识别分析11批样品的质量差异，同时以4个木脂素类成分戈米辛D、内南五味子素、异型南五味子丁素、南五味子素为指标性成分，建立其含量测定方法。结果:建立了复方滇鸡血藤颗粒的11批样品指纹图谱，共标定20个共有峰，其中1号峰为马钱苷、3号峰为羟基红花黄色素A、4号峰为杯苋甾酮、6号峰为大豆苷元、13号峰为戈米辛D、17号峰为内南五味子素、19号峰为异型南五味子丁素、20号峰为南五味子素；各批次样品间相似度均大于0.97,可聚为2类，4个主成分的累积贡献率达89.764%;4个木脂素类成分戈米辛D、内南五味子素、异型南五味子丁素、南五味子素的含量分别为386.35～426.96、280.69～307.66、693.31～740.91、188.66～215.59μg·g^-1。结论:所建立的指纹图谱及含...     

红花龙胆药材的UPLC指纹图谱研究与芒果苷含量测定

目的 为红花龙胆药材的质量控制提供参考依据。方法 以52批红花龙胆药材为研究对象，采用超高效液相色谱（UPLC）法，以《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）》对52批药材样品进行相似度评价，并测定药材中芒果苷含量，再进行化学计量学分析[聚类分析、主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）]。结果 建立了52批红花龙胆药材样品的UPLC指纹图谱，标定了17个共有峰，指认了其中6个，分别为马钱苷酸（1号峰）、新芒果苷（3号峰）、獐牙菜苦苷（5号峰）、当药苷（6号峰）、芒果苷（7号峰）与异荭草苷（9号峰）。52批药材样品的相似度均大于0.9；聚类分析结果显示，S1～S46、S48～S52聚为一类，S47单独为一类；PCA结果显示，前6个主成分的累计方差贡献率为82.928%;OPLS-DA结果显示，獐牙菜苦苷、芒果苷以及4、14、15、16号峰所代表的化学成分是影响红花龙胆药材质量差异的主要标志性成分。52批药材样品中芒果苷的含量在18.2～101.0 mg/g之间，大多符合2020年版《中国药典》规定。结论 所建立的UPLC指纹图谱和化学计量学分析方法结合...     

基于指纹图谱和化学模式识别的养血生发合剂质量评价研究

摘要：目的:建立养血生发合剂HPLC指纹图谱并结合化学模式识别,对养血生发合剂整体质量进行评价。方法:采用Waters XBridge C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）,以甲醇-0.2%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速:1.0 ml·min-1,柱温:30℃,并通过层次聚类分析（HCA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘回归分析（OPLS-DA）对养血生发合剂整体质量进行分析。结果:建立了养血生发合剂指纹图谱,共标定17个共有峰,指认了其中7个共有峰。方法学考察结果表明,所建立的指纹图谱方法精密度、稳定性和重复性均良好,简便可靠。10批养血生发合剂相似度均≥0.977,可聚为3类,2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷、芍药苷和没食子酸是导致不同批次样品间差异的标志性成分。结论:指纹图谱和化学模式识别相结合的考察模式准确可行,可用于养血生发合剂的质量评价。     

不同产地细辛中挥发油GC-MS指纹图谱的建立及其化学模式识别研究

目的 建立不同产地细辛药材挥发油的气相色谱-质谱联用(GC-MS)指纹图谱,并结合化学模式识别进行评价。方法 采用GC-MS法建立细辛挥发油的指纹图谱,进行相似度评价,并通过聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法(OPLS-DA)判别分析不同产地细辛挥发油的质量差异。结果 建立了细辛挥发油的GC-MS指纹图谱,确认24个共有峰,并指认了其中10个共有峰。不同批次细辛挥发油样品相似度在0.908以上。CA、PCA和OPLS-DA结果显示细辛挥发油存在一定的质量差异,以变量投影重要度(VIP)值>1.0为标准,筛选出8个差异性标志成分。结论 GC-MS指纹图谱结合化学模式识别可以全面、系统地评价细辛挥发油的质量特征,为细辛药材的质量评价提供参考。     

骨折挫伤胶囊HPLC指纹图谱及化学模式识别

目的 建立骨折挫伤胶囊的高效液相色谱指纹图谱,并运用化学模式识别对其质量进行评价。方法 采用HPLC-DAD法建立骨折挫伤胶囊的指纹图谱,确认主要色谱峰并进行归属,最后通过CA、PCA以及OPLS-DA模型进行分析。结果 75批骨折挫伤胶囊的相似度为0.69~0.99,共标记了26个共有峰,指认了其中6个成分：分别为羟基红花黄色素A（1号峰）、阿魏酸（6号峰）、芦荟大黄素（15号峰）、大黄素（19号峰）、大黄酚（24号峰）和大黄素甲醚（26号峰）;聚类分析可分为五类;PCA和OPLS-DA筛选出13个主要差异贡献成分,通过成分归属说明控制红花的质量对于确保骨折挫伤胶囊质量稳定具有重要作用。结论 建立的HPLC指纹图谱较为稳定、可靠,能基本反映复方中化学成分的特征,可为骨折挫伤胶囊的质量控制及标准提高提供参考。     

当归芍药散HPLC指纹图谱及7个成分含量测定的研究

摘要：目的:建立当归芍药散的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,结合化学模式识别技术对其进行分析,并测定芍药苷、阿魏酸、23-乙酰泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇C、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、茯苓酸7个成分的含量,为当归芍药散质量控制提供科学依据。方法:采用Waters WAT054275 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速：1.0ml·min-1,检测波长：210 nm,柱温：30℃,进样量：10μl。建立15批当归芍药散的HPLC指纹图谱,并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”计算相似度;采用SPSS 22.0及SIMCA 14.1软件对15批当归芍药散的HPLC指纹图谱进行聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),评价不同批次样品间的质量差异;测定7个指标性成分的含量。结果:建立了15批当归芍药散的HPLC指纹图谱,相似度均大于0.90;标定了23个共有峰,指认出7个色谱峰;HCA和OPLS-DA将15批当归芍药散样品分为2类;15批当归芍药散中芍药苷、阿魏酸、23-乙酰泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇C、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、茯苓酸的含量分别为7.635 0～12.360 0 mg·g-1,0.359 6～0.612 3 mg·g-1,0.256 6～0.421 7 mg·g-1,0.057 4～0.102 5 mg·g-1,0.056 3～0.098 5 mg·g-1,0.067 1～0.124 1 mg·g-1,0.145 2～0.214 5 mg·g-1。结论:HPLC指纹图谱结合多成分同时测定的方法,快速、简便、重复性好,可为当归芍药散的质量评价提供参考。     

蒙药三子散HPLC指纹图谱结合化学模式识别研究

目的建立蒙药三子散高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,通过化学模式识别方法综合评价其内在质量。方法采用HPLC法,以京尼平苷色谱峰为参照峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》绘制15批三子散的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,标定并指认共有峰。结合聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析对15批三子散的指纹图谱进行质量评价,筛选影响其质量的差异性标志物。结果 15批三子散中共有29个共有峰,相似度均不低于0.952,表明15批三子散的化学组成一致性较好;共指认了诃子次酸、没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷A、安石榴苷B、jasminoside B、咖啡酸、柯里拉京、京尼平苷、诃子鞣酸、1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖、诃子林鞣酸、鞣花酸13个共有峰。聚类分析与主成分分析均可将15批三子散分为4类,且分类结果一致,表明15批三子散的质量存在一定差异;结合正交偏最小二乘法-判别分析筛选出导致批次间质量差异的14个差异性标志物(诃子次酸、没食子酸、鞣花酸等)。结论建立的HPLC指纹图谱分析方法简便、稳定,结合化学模式识别分析可用于三子散的质量控制。     

沉香的质量标志物预测与指纹图谱分析验证

目的 寻找沉香药材的质量标志物。方法 通过网络药理学初步筛选出沉香的潜在质量标志物，进一步采用HPLC建立13批不同产地沉香药材的指纹图谱。对13批沉香药材运用主成分分析（principal component analysis，PCA）进行自然聚类，在此基础上，运用正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）筛选不同类别沉香药材的差异性成分，进而验证并推测沉香药材的质量标志物。结果 网络药理学预测沉香中的4个活性成分可作为潜在质量标志物。在HPLC指纹图谱共有模式中标定了10个共有峰，指认了沉香四醇峰、6，7-二甲氧基-2-（2-苯乙基）色酮峰和2-（2-苯乙基）色酮峰。PCA与OPLS-DA分析结果表明不同批次沉香药材差异性成分是沉香四醇。同时，结合网络药理学分析结果，确认沉香四醇也是沉香发挥功效的主要活性成分，可作为沉香潜在质量标志物。结论 沉香四醇可作为沉香潜在的质量标志物。     

桔贝合剂HPLC指纹图谱及5个有效成分含量测定研究

目的: 通过高效液相色谱(HPLC)法建立桔贝合剂指纹图谱及其5个有效成分含量测定方法,并进行聚类分析和主成分分析,为桔贝合剂质量评价提供参考。方法: 采用Phenomenex C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,4 μm),以甲醇-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,不同时段采用326,272,252 nm为检测波长。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)生成桔贝合剂对照指纹图谱,同时测定5个有效成分的含量。并采用SPSS 21.0软件对19批次桔贝合剂进行聚类分析(CA)与主成分分析(PCA)。结果: 建立了桔贝合剂HPLC指纹图谱,确定了15个共有峰,指认了其中8个色谱峰;19批桔贝合剂相似度为0.762~0.999,表明样品间差异较大。19批桔贝合剂可以聚为两大类,S1、S2、S3、S13、S14、S15、S16、S17、S18、S19聚为一类,S4、S5、S6、S7、S8、S9、 S10、S11、S12聚为一类。经主成分分析,主成分1、2是影响桔贝合剂质量评价的主要成分,2个主成分累方差贡献率为92.85%。黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、甘草酸铵5个成分进样量在一定范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=6)为97.3%~101.0%,RSD均≤1.2%。结论: 所建立的桔贝合剂HPLC指纹图谱及5个有效成分含量测定方法稳定可靠,与聚类分析和主成分分析结果,可为桔贝合剂的质量评价和进一步开发利用提供参考。     

基于HPLC指纹图谱及定量测定的益气逐瘀利水方质量评价研究

目的：建立益气逐瘀利水方的HPLC指纹图谱,并测定4种成分含量,为益气逐瘀利水方产业化开发的质量控制提供参考。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长245 nm,建立10批益气逐瘀利水方指纹图谱。采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）进行相似度评价,结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）模式识别技术进行质量评价,同时进行含量测定。结果：10批益气逐瘀利水方标准汤剂指纹图谱相似度均大于0.995,标定出共有峰24个,指认其中的4个共有峰（14号峰毛蕊异黄酮葡萄糖苷、15号峰阿魏酸、17号峰汉防己乙素、19号峰粉防己碱）,CA、PCA及OPLS-DA将10批样品分成2类。定量分析方法学考察结果良好,10批样品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、汉防己乙素、粉防己碱的定量结果分别为43.98~64.18、107.32~167.95、122.63~175.21、391.62~582.02 μg·g^-1。结论：所建立的益气逐瘀利水方指纹图谱及定量测定方法稳定性好、重复性高,可更加全面系统地评价益气逐瘀利水方的质量。     

玉红膏指纹图谱研究及质量标志物预测分析

目的：建立玉红膏指纹图谱并进行聚类分析及主成分分析,并对其质量标志物进行预测。方法：在古方记载方法基础上加以改善,制备玉红膏样品;采用HPLC色谱法测定21批样品,色谱柱Sepax Bio-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液;流速：1.0 mL·min^-1;柱温：25℃;检测波长：278 nm,进样量：20 μL。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）"软件对21批样品图谱进行相似度评价及主成分分析,结合主成分分析（principal component analysis,PCA）、正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）对玉红膏进行整体质量评估,并对其质量标志物进行预测分析。结果：玉红膏的HPLC指纹图谱中21批样品（S1~S21）的相似度>0.940,通过PCA、CA和OPLS-DA,将21批样品聚成3类,S1~S7、S15~S21为第一类、第三类（2019年6月实验室自制、2020年1月实验室自制）;S8~S14为第二类（源自长春中医药大学附属医院）;并从10个共有峰中确定差异较大的3个共有峰,分别为3号峰（芝麻酚）、5号峰（甘草苷）、9号峰（左旋紫草素）。结论：建立的玉红膏HPLC分析方法简便、准确、稳定、灵敏,体现了玉红膏的整体化学成分特征,可用于该制剂的质量控制,也为经典名方发展为现代制剂提供了一定的参考依据。     

基于UPLC指纹图谱结合化学模式识别的芪参益气滴丸质量控制研究

目的 采用超高效液相色谱法建立芪参益气滴丸的指纹图谱,并结合化学模式识别技术对其进行系统、全面和科学的质量评价。方法 采用Waters超高效液相色谱仪,ACQUITY UPLC^®HSS T3色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为256 nm,建立10批次芪参益气滴丸的指纹图谱。通过相似度分析并结合聚类分析（cluster analysis,CA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）模式识别技术对芪参益气滴丸的总体质量进行分析评价。结果 建立的指纹图谱共标定53个共有峰,经对照品进行化学指认并鉴定了其中的14个色谱峰。10批供试品的相似度均>0.94,表明该药物总体质量较为稳定;但通过CA及PCA均发现不同批次药物质量之间仍然存在有微小差异,且主要分为2大类,最后进一步采用OPLS-DA筛选出了导致批次药物质量差异的3个共有峰。结论 本研究建立的分析方法科学、准确、可靠且简便易行,指纹图谱结合化学模式识别技术可更加系统、全面地评价芪参益气滴丸的药物质量,同时为今后中药及其制剂更进一步的质量控制研究奠定了坚实的理论基础。     

茵栀黄颗粒的HPLC指纹图谱研究及共有峰归属分析

目的：建立茵栀黄颗粒的HPLC指纹图谱,并对其共有峰进行归属分析和指认,以科学评价及有效控制该制剂质量。方法：采用Kromasil C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长238 nm,柱温30℃。测定20批茵栀黄颗粒样品指纹图谱,建立共有模式,并采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2004A版）进行相似度评价;通过与各对照品保留时间比对,对共有峰进行归属分析和确认。结果：以栀子苷峰为参照峰,建立了茵栀黄颗粒的HPLC指纹图谱,确定了29个共有峰,并对其中的16个色谱峰进行了指认及归属。20批茵栀黄颗粒样品指纹图谱经相似度评价,其相似度均大于0.95。结论：该法所建立的指纹图谱能较全面地体现茵栀黄颗粒中组分的整体特征,为茵栀黄颗粒的质量控制提升提供了依据。     

指纹图谱结合模式识别、一测多评的连翘质量评价

目的建立连翘药材的指纹图谱并结合模式识别、一测多评技术对其进行系统、全面的质量评价。方法采用HPLC测定10批次连翘样品的指纹图谱,建立指纹图谱共有模式,通过相似度分析,结合聚类分析、主成分分析等模式识别技术对其进行定性评价。以连翘苷为内参物,建立连翘酯苷A、(+)松脂醇-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘酯素与内参物的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评的定量评价;同时采用外标法测定10批连翘中4个成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证一测多评法的准确性。结果建立的指纹图谱共标定13个共有峰,并对其中4个进行了归属,分别是连翘酯苷A、(+)松脂醇-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘酯素,10批次连翘样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.98,通过聚类分析及主成分分析将其分为3类。建立的相对校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与实测值之间相关系数均>0.99,相对误差均<3%。结论本研究建立的分析方法直观、准确、简便、可行。指纹图谱结合模式识别、一测多评技术进行定性定量分析可以为连翘的质量控制提供科学依据。