铂类抗癌新药双环铂的体内外抗肿瘤活性

目的观察铂类抗癌新药双环铂的体内外抗肿瘤活性及其对细胞周期的影响。方法MTT法观察双环铂对人肿瘤细胞增殖的抑制作用;小鼠动物肿瘤模型观察双环铂对肿瘤的体内抑制作用;碘化丙锭PI染色流式细胞术分析药物所致人卵巢癌细胞A2780细胞的周期变化。结果双环铂于体外抑制多种人肿瘤细胞增殖,体内抑制小鼠肉瘤S180、肝癌Heps及黑色素瘤B16的生长,并导致A2780细胞S期细胞明显增加及G2/M期细胞少许增加。结论双环铂具有明显的体内外抗肿瘤活性,并影响肿瘤细胞的细胞周期分布。     

赛特铂抗肿瘤作用的临床前观察

目的观察赛特铂临床前抗肿瘤作用.方法体外观察赛特铂对人卵巢癌细胞A2780,肺腺癌细胞A549,结肠癌细胞HCT8,乳腺癌细胞MCF7和前列腺癌细胞DU145等10株人肿瘤细胞的细胞毒作用.体内观察赛特铂对人卵巢癌A2780,小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌HepS的生长抑制作用.结果赛特铂的体外体内作用强度与对照药顺铂相当.对10种肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50为0.51～3.29μmol·L-1,平均IC50为(1.44±0.32)μmo1·L-1;体内口服给药明显抑制裸鼠人卵巢癌A2780,小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌HepS的生长,抑制率分别为61.3%,57.9%和50.6%.结论赛特铂的体外细胞毒和体内口服抗小鼠肿瘤生长抑制作用均与顺铂相仿.     

赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用

目的：观察赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用及对细胞周期的影响。方法：MTT法观察药物对细胞增殖的抑制作用，碘化丙锭染色分析细胞周期变化，电镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化，多参数流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡率，并测定caspase-3的活性变化及caspase抑制剂对细胞存活率的影响。结果：赛特铂可抑制A2780细胞的增殖并诱导凋亡，具有明显的剂量依赖性，作用与顺铂相当。赛特铂主要导致A2780细胞S期细胞明显增加，G2／M期细胞少许增加。经赛特铂作用后漂浮细胞呈现典型凋亡细胞形态学改变。caspase-3活性随着细胞凋亡率增加而增加，caspase抑制剂不完全抑制细胞死亡。结论：赛特铂影响A2780细胞周期分布，可体外诱导A2780细胞凋亡。caspase依赖性和caspase非依赖性途径参与了其凋亡过程，其中caspase依赖性途径又包括caspase-3依赖性和非easpase-3依赖性途径。     

格尔德霉素与抗肿瘤药物的协同作用

目的　研究格尔德霉素(Geldanamycin ,GDM)对人肝癌BEL-7402细胞周期的影响及顺铂和丝裂霉素C等药物联用GDM后的体外体内抗肿瘤作用。方法　用MTT法检测药物对肝癌BEL-7402细胞的生长抑制作用;流式细胞术分析细胞周期;小鼠移植性肝癌22模型研究药物的体内抗肿瘤作用。结果　MTT法测得GDM对BEL7402细胞的生长抑制作用IC₅₀为0.28μmol·L^-1。GDM 0.1,1.0和10μmol·L^-1处理BEL-7402细胞,引起S期细胞比例下降和G2/M期的明显阻断。在较低浓度,GDM 0.1μmol·L^-1和0.2 μmol·L^-1均增强一系列化疗药物包括顺铂、丝裂霉素C、阿霉素和阿糖胞苷对BEL-7402细胞的细胞毒作用。小鼠移植肝癌22模型中,GDM 0.38mg·kg-1增强顺铂和丝裂霉素C的抗肿瘤作用。协同作用十分显著,CDI<0.7。结论　这些结果提示GDM作为以抑制热休克蛋白90 (Hsp90 )功能为靶点的生化调节剂可能应用于肿瘤联合化疗的前景。     

铭铂诱导人卵巢癌细胞A2780凋亡

目的：观察铭铂诱导的人卵巢癌细胞A2780凋亡,探讨其抗肿瘤作用机理。方法：用MTT法测定了铭铂对A2780的细胞毒作用;荧光显微镜从形态学上观察凋亡发生,琼脂糖DNA电泳检测程序性细胞死亡特征的DNA降解。结果：铭铂对A2780细胞有细胞毒作用,半数抑制浓度具有药物接触细胞时间依赖性;铭铂处理的A2780细胞形态学上显示出凋亡细胞特性,琼脂糖凝胶电泳显示出特征性程序性细胞死亡DNA梯形图谱。结论：铭铂能够诱导A2780细胞凋亡,诱导肿瘤细胞凋亡是其一个抗肿瘤作用机理。     

紫杉烷类衍生物Lx2-32c对人卵巢癌A2780细胞的抑制作用

目的:研究新型紫杉烷类衍生物Lx2-32c体内外对人卵巢癌A2780细胞的生长抑制作用并探讨其机制.方法:体外实验采用培养的人卵巢癌A2780细胞株,利用集落形成法测定Lx2-32c对A2780细胞克隆原细胞的影响,流式细胞术(FCM)测定细胞周期的变化,间接免疫荧光方法观察细胞内微管动力学的改变.体内实验采用人癌细胞裸鼠移植瘤模型观察Lx2-32c对卵巢癌的生长抑制作用.结果:Lx2-32c能够显著抑制A2780细胞的克隆原形成,IC50值为0.13 nmol·L-1;Lx2-32c诱导A2780细胞出现G2/M期阻滞;影响细胞内微管的动力学功能,抑制微管解聚,形成稳定的微管束.体内抗肿瘤实验中,Lx2-32c显示出较强的抗肿瘤活性.结论:新型紫杉烷类衍生物Lx2-32c具有较强的细胞毒性和抗肿瘤作用.     

顺铂载入碳纳米管内增加其抗肿瘤性的研究

目的 观察大孔径碳纳米管(SWNTs)做为载体以增加顺铂抗肿瘤活性的模式及机制.方法 用毛细现象,将碘化丙啶(PI)和顺铂装载进入纳米管管腔,内载顺铂进入宫颈癌细胞,并在细胞内释放顺铂;用荧光分光光度计及紫外分光光度计,观察PI及顺铂在细胞外和细胞内释放模式,并通过流式细胞技术及MTT法,检测顺铂对宫颈癌细胞增殖活性的抑制.结果 顺铂在碳纳米管的运载下,可较易进入细胞内,从而使细胞内药物浓度增加,其模式与PI的转载模式相同,且在顺铂浓度较低时,就可对Hela细胞产生明显的抑制作用.结论 SWNTs内载抗癌药物可逆转肿瘤耐药,增加药物抗肿瘤作用.     

野马追总黄酮的体内外抗乳腺癌活性及机制研究

目的 探究野马追总黄酮(TFE)的体内外抗乳腺癌活性及相关的作用机制。方法 MTT法检测TFE对乳腺癌细胞(MCF-7、T47D、MDA-MB-231、MDA-MB-468)和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A增殖的影响;流式细胞术检测TFE对乳腺癌细胞周期和凋亡的影响;吖啶橙(AO)染色法检测TFE对细胞自噬的影响;Western blot检测细胞周期、凋亡、自噬相关蛋白的变化,以及PI3K/Akt信号通路相关蛋白的变化;建立MDA-MB-231细胞的裸鼠移植瘤模型,观察TFE的体内抗肿瘤活性。结果 TFE能明显抑制乳腺癌细胞增殖,并呈剂量依赖性,而对人正常乳腺上皮细胞无显著的抑制作用;TFE能增加G₂/M期细胞比例,上调p-cdc-2蛋白表达,下调cdc-2和Cyclin B1蛋白表达;TFE能显著增加乳腺癌细胞凋亡比例,上调促凋亡蛋白Bad和Bax表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达;TFV能够诱导乳腺癌细胞产生自噬,自噬相关蛋白LC3-II表达上升,p62表达降低;TFE能够抑制显著抑制PI3K和Akt的磷酸化水平;TFE能够在体内抑制裸鼠肿瘤的体积。结论 TFE通过抑制PI3K/Akt信号通路,阻滞细胞周期、诱导凋亡和自噬,进而在体内外抑制乳腺癌细胞的生长。     

顺铂诱导人宫颈鳞癌细胞Caski细胞凋亡的分子机制

目的研究顺铂对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及凋亡的影响,探究顺铂诱导宫颈鳞癌细胞凋亡的分子机制。方法运用体外细胞培养,顺铂以不同浓度（20、10、5、2、1μg/ml）作用于人宫颈癌Caski细胞。采用噻唑蓝（MTT）法测定顺铂对细胞杀伤率;用流式细胞检测法测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNALadder现象;Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2等表达;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变。结果顺铂对人宫颈癌Caski细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和剂量依赖性;可使Caski细胞G2/M期比例明显下降（P〈0.01）,S期比例升高（P〈0.01）;诱导细胞凋亡发生;顺铂作用Caski细胞后,Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase3活化,线粒体膜电位改变。结论顺铂在体外可有效抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,可能通过影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布、诱导凋亡发挥抑制细胞增殖作用,其凋亡分子机制与Bcl-2家族表达调控,线粒体膜跨膜电位下降的线粒体参与凋亡途径相关。     

PARP抑制剂WZ-8体内外抗肿瘤作用研究

目的 研究PARP抑制剂WZ-8对人源性肿瘤细胞增殖及裸鼠移植人结肠癌（HCT116）生长的抑制作用。方法 SRB染色法和裸小鼠移植瘤模型研究WZ-8在体内外抗肿瘤作用。结果 体外WZ-8对多种人肿瘤细胞增殖有明显抑制作用,其中对结肠癌细胞HCT116的半数抑制浓度IC50为（0.21±0.01）mg·mL^-1。体内研究表明WZ-8（20 mg·kg-1）对小鼠移植HCT116肿瘤生长有一定抑制效果,其体内外抗肿瘤活性均高于同类化合物Iniparib。结论 WZ-8在体外对人源性肿瘤细胞增殖有明显抑制作用,在体内可抑制裸鼠移植人结肠癌细胞HCT116的生长。     

新型AKT抑制剂Hu7691对胃癌细胞的抗肿瘤活性及机制研究

目的 考察新型AKT抑制剂Hu7691对胃癌细胞的体内外抗肿瘤活性及作用机制。方法 以人胃癌细胞HGC27和BGC823为体外细胞模型，采用SRB法评价不同浓度的Hu7691对胃癌细胞的体外增殖抑制作用；以流式细胞术考察Hu7691对HGC27细胞周期的影响，采用Western blotting考察Hu7691作用后，细胞内相关蛋白的表达变化；采用HGC27裸小鼠移植瘤模型评价Hu7691的体内抗肿瘤活性。结果 Hu7691在HGC27和BGC823细胞模型上能显著抑制肿瘤细胞增殖；引起肿瘤细胞发生细胞周期阻滞，浓度依赖性地下调AKT通路相关蛋白p-PRAS40（T246）、p-GSK3β、p-S6（S235/236）、p-4EBP1（T37/46）及p-4EBP1（S65）的蛋白表达，上调p-AKT （S473）、p-AKT （S308）的表达；下调细胞周期相关蛋白Cyclin D1的表达；在HGC27裸小鼠移植瘤模型中，Hu7691能显著抑制肿瘤生长，并且对小鼠体质量无显著影响。结论 新型AKT抑制剂Hu7691通过诱导细胞周期阻滞，发挥对胃癌细胞体内外显著的抗肿瘤活性。     

单唾液酸四己糖神经节苷脂联合奥沙利铂对HCT116细胞增殖和周期的影响

目的研究外源性单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)联合奥沙利铂对HCT116细胞增殖和细胞周期的影响。方法进行人结肠癌肿瘤细胞株HCT116细胞培养,HCT116细胞在20μmol/L奥沙利铂与不同浓度GM1(5~300μmol/L)联合干预,孵育12、24、48 h后通过CCK-8法检测药物对于HCT116细胞增殖活性的影响。倒置显微镜观察药物作用后细胞形态学变化。流式细胞术检测GM1联合奥沙利铂对于HCT116细胞细胞周期分布及凋亡的影响。结果奥沙利铂导致HCT116细胞增殖活性显著降低,该作用呈现显著时间依赖性,并且不受GM1药物作用的影响(P>0.05)。细胞形态学观察,奥沙利铂作用24 h后,HCT116细胞生长出现显著抑制,联合使用GM1对奥沙利铂引起的HCT116细胞的生长抑制亦无明显影响。流式细胞术检测,奥沙利铂作用24 h后,HCT116细胞周期G0/G1期和S期细胞减少,G2/M期细胞增多,细胞凋亡增多(P<0.05),联合使用GM1对于奥沙利铂引起的HCT116细胞细胞周期和凋亡的改变无明显影响(P>0.05)。结论GM1在体外不降低奥沙利铂对HCT116细胞增殖的抑制作用,不影响奥沙利铂引起的细胞周期和凋亡的变化。     

松树皮中原花青素对荷S180肉瘤小鼠抗肿瘤作用的研究

目的 研究松树皮原花青素小鼠体内抗肿瘤作用。方法 采用小鼠移植性肿瘤模型考察松树皮原花青素对荷瘤小鼠S180肉瘤抑制作用;流式细胞仪检测原花青素对肿瘤细胞周期的影响;ATPase试剂盒检测原花青素对肿瘤细胞中钙泵活性的影响;激光共聚焦显微镜观察原花青素对肿瘤细胞中钙离子含量的影响。结果 松树皮原花青素抑制荷瘤小鼠S180肉瘤的生长;抑制肿瘤细胞中钙泵活性,升高钙离子的含量并使肿瘤细胞G0/G1期比例降低,S期细胞的比例增加。结论 松树皮原花青素体内对S180肿瘤细胞具有一定的抗肿瘤作用。     

纳米活性炭对顺铂抗肿瘤作用的影响

目的观察纳米活性炭(ACN)与顺铂合用对顺铂抗肿瘤作用及荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法采用平板克隆形成法初步观察ACN对顺铂抑制人胃癌BGC823细胞克隆形成的影响;制备荷S180肉瘤和H22肝癌小鼠模型,观察ACN对顺铂抑制移植瘤生长的影响;采用ELISA法检测脾细胞培养上清IgG水平;采用流式细胞术检测脾T淋巴细胞亚群。结果ACN单独应用对BGC823细胞克隆形成无明显影响,与顺铂合用则明显增强顺铂对BGC823细胞克隆形成的抑制作用,也明显增强顺铂对S180肉瘤及H22肝癌移植瘤生长的抑制作用;与顺铂组相比,ACN与顺铂合用明显提高脾细胞培养上清IgG水平,使CD4+细胞百分比明显升高,CD8+细胞百分比明显下降,从而使CD4+/CD8+比值明显升高。结论ACN对顺铂抗肿瘤作用具有明显的增效作用,同时对荷瘤小鼠的细胞免疫和体液免疫反应均有一定的改善作用。     

全反式维甲酸提高人结肠癌LoVo细胞对奥沙利铂敏感性

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,AT-RA)提高人结肠癌LoVo细胞对奥沙利铂的药物敏感性和机制。方法MTT法筛选ATRA和奥沙利铂实验浓度。流式细胞仪检测ATRA对细胞周期的影响。分别用ATRA、奥沙利铂、ATRA联合奥沙利铂作用LoVo细胞;MTT法检测药物抑制率,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,原子光谱吸收仪检测细胞DNA含铂(Pt)量。结果奥沙利铂抑制LoVo细胞作用呈量效依赖;其GI50(GI,inhibit net cell growth by%)为6.5mg.L-1,主要阻滞肿瘤细胞在S期。ATRA抑制LoVo细胞作用呈时效和量效依赖。1.0μmol.L-1ATRA作用12h后G1期细胞增多;48h后伴S期、G2/M期细胞减少并明显抑制肿瘤细胞增殖;作用12h至48h后联合奥沙利铂,两药联合由相加作用转变为协同作用;联合用药后S期细胞明显增多,细胞DNA含Pt量明显增加,但不提高奥沙利铂凋亡率。结论小剂量ATRA通过改变LoVo细胞周期和提高细胞DNA含Pt量,明显增加肿瘤细胞对奥沙利铂的药物敏感性。     

黑木耳多糖顺铂配合物抗HeLa和LoVo细胞增殖活性

目的 研究不同分子量黑木耳多糖（Auricularia auricula polysaccharide，AAP）能否与顺铂形成配合物，同时研究其配合物对HeLa和LoVo细胞的抗肿瘤细胞增殖活性。方法 采用"One pot"法合成不同分子量的黑木耳多糖顺铂配合物（Auricularia auricula polysaccharide-cis-diaminedichloroplatinum，AAP-CDDP），并应用MTT法对其体外抗肿瘤细胞增殖活性进行研究。结果 AAP-CDDP的抑制HeLa和LoVo肿瘤细胞增殖活性与其螯合顺铂量密切相关，相关系数r²分别为0.877 5和0.913 2；其中AAP（Ⅴ）-CDDP具有最强的抗肿瘤细胞增殖活性。结论 AAP与顺铂形成配合物具有很好的抗肿瘤细胞增殖活性。     

大蒜素联合顺铂对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨大蒜素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用并探讨其机制。方法取对数生长期HeLa细胞，设对照组、大蒜素（50 μg/mL）组、顺铂（5 μg/mL）组、联合给药组（大蒜素50 μg/mL+顺铂5 μg/mL）。药物干预48 h后，通过MTT法检测细胞增殖抑制率，运用CompuSyn软件计算大蒜素与顺铂联合指数（CI），流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡水平，Western blotting法检测Cyclin D1、CDK2、P27、Cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与大蒜素组和顺铂组比较，联合给药组HeLa细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05、0.01），CI为0.69（提示大蒜素与顺铂具有中度协同效应）。与对照组比较，大蒜素组和顺铂组G₀/G₁期细胞比例和细胞凋亡率显著升高（P<0.05、0.01），Cyclin D1、CDK2、Bcl-2表达显著下调且P27、Cleaved Caspase-3、Bax表达显著上调（P<0.05、0.01），Bax/Bcl-2比值显著升高（P<0.01）。与大蒜素组和顺铂组比较，联合给药组G₀/G₁期细胞比例和细胞凋亡率显著升高（P<0.05、0.01），Cyclin D1表达显著下调且P27、Cleaved Caspase-3、Bax表达显著上调（P<0.05、0.01），Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.01）。结论大蒜素联合顺铂具有协同抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用，可能与调节细胞周期和凋亡相关蛋白表达，进而阻滞细胞周期进程并促进细胞凋亡有关。     

长柱重楼总皂苷的抗肿瘤活性及急性毒性作用研究

目的 研究长柱重楼总皂苷（PCT3）的体内外抗肿瘤活性及ig一次性给药的急性毒性。方法 采用改良MTT法检测PCT3对人结直肠癌（HCT-116）细胞和人胃癌（SGC-7901）细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度（IC₅₀）。ig一次性给予小鼠1.646、2.352、3.360、4.800 g/kg PCT3进行急性毒性测试。建立小鼠皮下肝癌（H22）模型,分别ip顺铂2 mg/kg（阳性对照）、生理盐水（阴性对照）;ig给予0.5% CMC-Na（溶剂对照）、30、90、270 mg/kg PCT3,连续给药9 d,检测小鼠肿瘤、体质量抑制率,肝、脾、肾、胸腺系数。结果 与阴性对照组比较,PCT3对HCT-116和SGC-7901细胞增殖有明显的抑制作用（P<0.05、0.01）,IC₅₀分别为7.6、5.9 μg/mL。大剂量PCT3可致动物腹泻及活动抑制,半数致死量（LD₅₀）为1.985 5 mg/kg。与溶剂对照组比较,PCT3对小鼠体质量无显著影响;270 mg/kg PCT3对H22肿瘤发挥显著抑制作用（P<0.05）,抑制率为26.8%;对各脏器系数均无显著影响;与阴性对照组比较,顺铂显著抑制肿瘤和体质量的增长（P<0.01）,抑制率分别达81.4%和37.4%;对肝脏、脾脏、胸腺系数均发挥显著抑制作用（P<0.05、0.01）。结论 顺铂抑瘤率明显高于PCT3,但其显著抑制小鼠的体质量和肝脏、脾脏、胸腺系数,PCT3在体内外具有一定的抗肿瘤活性,且毒性较低,其活性及作用机制有待进一步研究。     

大蒜素协同草酸铂对直肠癌细胞凋亡作用的影响

目的探讨大蒜素对人直肠癌SW480细胞周期的影响及其与特异性抗癌药物草酸铂联合使用的抗肿瘤作用。方法MTT法检测大蒜素对直肠癌细胞的增殖抑制作用；流式细胞仪检测细胞周期改变；Annexin V-FITC标记法定量检测细胞凋亡；观察大蒜素与草酸铂联合使用后药物对细胞毒活性的改变。结果大蒜素可明显抑制SW480细胞生长，大蒜素作用SW480细胞24h后，与对照组比较，G0／G1期细胞的百分率明显减少，而G2／M期明显增加（P〈0．05），大蒜素与草酸铂联合使用后，草酸铂72h IC50值由单独应用的9．21μg／ml下降至1．07μg／ml；细胞凋亡率由65．3％增至97％。结论大蒜素可将直肠癌SW480细胞阻滞于G2／M期，大蒜素与草酸铂联合使用可能具有协同抗肿瘤作用。     

相思子蛋白P2抗肝癌作用及对端粒酶活性影响

目的研究相思子蛋白P2对肝癌细胞生长的抑制作用及机制。方法体外实验:MTT法检测相思子蛋白P2对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用。流式细胞仪检测对HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响。TRAP-SYBR-Green染色法检测相思子蛋白P2作用前后细胞端粒酶活性的改变。体内实验:相思子蛋白P2 50、75、100μg.kg-1连续灌胃给药10 d,观察对小鼠肝癌H22移植性肿瘤的生长抑制作用。小鼠口服给药急性毒性观察。结果相思子蛋白P2可明显抑制HepG2细胞增殖,IC50值为5.172×10-3 mg.L-1。在5×10-5～1×10-3 mg.L-1剂量作用下,可引起HepG2细胞凋亡。相思子蛋白P2主要将细胞周期滞留在S期,从而抑制了肿瘤细胞增殖。同时可使细胞端粒酶活性明显降低,其下调端粒酶活性的作用随药物浓度的增加而明显增强。相思子蛋白P2对小鼠H22肝癌细胞生长有明显抑制作用,100μg.kg-1抑瘤率达62.47%,且对胸腺和脾脏指数的影响较环磷酰胺小。小鼠口服给药LD50值为6.77 mg.kg-1。结论相思子蛋白P2体内外均可明显抑制肝癌细胞的生长,其抗肿瘤作用可能与下调细胞端粒酶活性、改变细胞周期分布,诱导细胞凋亡有关。