MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1联合检测对宫颈癌浸润转移潜能的预测价值

目的 分析基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9及其抑制因子2（TIMP-2）和TIMP-1联合检测对宫颈癌浸润转移潜能的预测价值.方法 选取经病理证实的宫颈浸润癌患者112例（ICC组）、宫颈上皮内瘤样病变患者56例（CIN组）;同时,选取正常宫颈组织标本30例为对照组.采用SABC法行免疫组织化学检测MMP-2、MMP-9 、TIMP-2和TIMP-1的表达情况.比较3组相关因子阳性表达率的差异,并分析ICC组各因子阳性表达率与临床病理参数的关系.结果 ICC组MMP-2和MMP-9的阳性表达率显著高于CIN组和对照组,TIMP-2和TIMP-1的阳性表达率显著低于CIN组和对照组（P＜0.05）.ICC组中,MMP-2、MMP-9、TIMP-2和TIMP-1的阳性表达率与国际妇产科联盟（FIGO）分期、组织学分级、分化程度、脉管浸润和淋巴结转移有关（P＜0.05）.结论 MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1可能与宫颈癌的发生、发展有关,其可作为评估宫颈癌侵袭转移潜能的重要指标.     

MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2在宫颈癌中的表达

目的分析基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9及其抑制因子1（TIMP-1）和TIMP-2在宫颈癌不同位置中的表达情况及其临床意义。方法选取经病理证实的宫颈浸润癌患者118例（ICC组）、宫颈上皮内瘤样病变患者75例（CIN组）,取病变中心组织和边缘组织;选取正常官颈组织标本45例为对照组。采用SABC法行免疫组化检测各组中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2因子表达阳性率、染色强度和表达强度。比较各组相关因子表达情况差异。结果ICC组中MMP-2和MMP-9的阳性率、染色强度和表达强度显著高于CIN组和对照组,TIMP-1和TIMP-2的阳性率、染色强度和表达强度显著低于CIN组和对照组（P〈0．05）。在ICC组,边缘癌组织的MMP-2与MMP-9的阳性率、染色强度和表达强度明显高于中心癌组织,而TIMP-1与TIMP-2的阳性率、染色强度和表达强度明显低于中心癌组织（P〈0．05）。结论MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2与宫颈癌的发生、发展密切相关,可能在宫颈癌的侵袭与转移中发挥着重要作用。     

前列腺癌组织及前列腺细胞株中RECK基因的表达

目的探讨RECK基因(基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂)在前列腺癌组织、正常前列腺组织及不同前列腺细胞株BPH-1、DU-145、LNCap以及PC-3中的表达差异。方法应用Western blot和RT-PCR技术检测前腺癌组织、正常前列腺组织及4种不同前列腺细胞株中RECK基因的蛋白和mRNA表达。结果前列腺癌组织中RECK mRNA和RECK蛋白水平均低于正常前列腺组织(P<0.01)。DU-145、LNCap以及PC-3细胞株中RECK基因的表达低于BPH-1细胞株(P<0.01)。结论 RECK基因可能通过抑制MMPs的表达起到抑癌基因的作用。     

芍药苷对THP-1细胞CD147表达及MMP-9分泌的影响

目的 观察芍药苷干预THP-1细胞CD147表达及MMp-9分泌的影响.方法 用THP-1细胞作为模型,采用West Blot检测THP-1细胞CD147蛋白的表达,酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测MMp-9分泌的变化,以探讨芍药苷治疗狼疮肾炎的可能机制.结果 芍药苷可抑制THP-1细胞CD147蛋白的表达（P＜0.05）,同时减少MMP-9分泌（P＜ 0.05）,差异具有统计学意义.结论 芍药苷可有效抑制THP-1细胞CD147表达及减少MMP-9分泌.     

Endoglin与血管内皮生长因子和血管内皮生长因子受体2及基质金属蛋白酶9联合表达与宫颈癌血管生成的关系

目的探讨Endoglin、血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体2（KDR）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）联合表达在宫颈癌局部血管生成中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测15例正常宫颈上皮（NCE）、18例宫颈上皮内瘤变（CIN）和75例宫颈癌（ICC）组织Endoglin、VEGF、KDR及MMP-9表达,并检测CD34标记的微血管密度（MVD）。结果Endoglin、VEGF、KDR和MMP-9在NCE、CIN及ICC组的阳性率分别为6．7％、38．9％及64．O％;26．7％、61．1％及77．3％;13．3％、61．1％及69．3％和20．0％、55．6％及81．3％,从NCE到CIN再到ICC组,Endoglin、VEGF、KDR及MMP-9的阳性率均显著升高（P〈0．05）。宫颈癌组织MVD均分别与Endoglin（r=0．499,P〈0．01）、VEGF（r=0．602,P〈0．01）、KDR（r=0．331,P〈0．01）及MMP-9（r=0．287,P〈0．05）表达显著正相关,并且Endoglin、VEGF、KDR及MMP-9同时均阳性表达者,其MVD升高更为显著（P〈0．01）。结论Endoglin、VEGF、KDR及MMP-9联合表达在上调宫颈癌局部肿瘤血管生成中起重要作用,4个指标均过度表达,血管生成能力显著增强。     

MMP-2、MMP-9及TIMP-1在颅内动脉瘤中的表达及意义

目的观察基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）在颅内动脉瘤中的表达情况,并且与正常颅内动脉的表达相比较,以探讨动脉瘤的发病原因及机制。方法用免疫组织化学方法对31例经手术切除的颅内动脉瘤标本和16例脑外伤病人切除的正常血管中的MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达进行检测和比较,将所得染色标本在光镜下观察,并用医学图像分析系统进行定量分析。结果动脉瘤标本中的MMP-2、MMP-9及TIMP-1明显高于正常血管。结论MMP-2、MMP-9及TIMP-1与颅内动脉瘤密切相关,可能在颅内动脉瘤形成、发展及其破裂过程中发挥重要作用。     

喉鳞状细胞癌中MMP-1和TIMP-1表达的临床病理学意义

目的探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和基质金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）蛋白和mRNA的表达及其临床病理学意义。方法分别应用免疫组织化学和RT-PCR方法 ,检测喉鳞状细胞癌组织中MMP-1和TIMP-1的蛋白及mRNA表达情况。结果 MMP-1在喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织中的蛋白表达阳性率比较,差异有统计学意义（P﹤0.05）,且MMP-1 mRNA在喉鳞状细胞癌组织中的表达高于癌旁组织（P﹤0.05）;TIMP-1在喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织中的蛋白表达阳性率,差异有统计学意义（P﹤0.05）且TIMP-1 mRNA在喉鳞状细胞癌组织中的表达低于癌旁组织（P﹤0.05）。结论 MMP-1和TIMP-1表达与喉鳞状细胞癌的发生发展﹑浸润及转移有关,检测癌组织中的MMP-1和TIMP-1的基因及蛋白表达情况,有助于判断喉鳞状细胞癌的转移、TNM分期及预后。     

大肠癌患者血清基质金属蛋白酶-9的表达特点

目的：探讨大肠癌患者血清中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达特点。方法选取经病理切片证实的大肠癌患者60例作为大肠癌组,良性大肠肿瘤组40例,健康对照组30例,空腹抽取静脉血检测 MMP-9含量,并探讨其变化特点。结果大肠癌组 MMP-9含量高于对照组及大肠良性肿瘤组,差异有统计学意义（P ﹤0.01）,而大肠良性肿瘤组与对照组比较,差异无统计学意义（P ﹥0.05）。MMP-9水平在 Ducks 分期中 A 期明显低于 B、C、D 期（P ﹤0.05）;淋巴有转移者明显大于淋巴无转移者,差异均有统计学意义（P ﹤0.05）;病理分级 G1、G2、G3比较,差异无统计学意义（P ﹥0.05）。结论 MMP-9在大肠癌患者血清中有较高的表达,且与大肠癌的分期,转移有较密切的联系。     

MMP-9、TIMP-1及MMP-2、TIMP-2表达与胃肠道间质瘤生物学行为的关系

目的 探讨MMP-9、TIMP-1、MMP-2、TIMP-2表达与胃肠道间质瘤（GIST）生物学行为的关系，为预测该肿瘤的侵袭潜能提供理论依据和可能的预测指标，以指导临床的治疗和预后。方法 对70例GIST利用组织微阵列技术制片进行免疫组织化学染色，并结合病理形态学及生物学行为评价进行统计学分析。结果 （1）MMP-9的表达率为65／69（94．2％），MMP-9的阳性表达程度与GIST的生物学行为有显著相关性；MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达率分别为47．8％、98.6％和95．7％。结论 MMP-9表达与GIST生物学行为关系密切，可作为GIST生物学行为的潜在评价指标。     

TNFα、MMP-1及其抑制剂在肝纤维化组织中的表达及其相关性研究

目的研究肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis faetor-α，TNF—α）、基质金属蛋白酶1（Matrix metalloproteinase-1，MMP—1）及基匝金属蛋酶抑制剂1（Tissue inhibitor of metalloproteinase—1，TIMP—1）在肝纤维化发展的不同时期的表达情况及意义。方法采用免疫组化法，检测TNF—α、MMP-1和TIMP-1在52例肝纤维化发展不同时期的组织巾的表达情况，应用统计软件分析结果。结果①TNF—α、TIMP—1的阳性表达随肝组织炎症及纤维化程度增加而增强（P〈0．05）：MMP-1在各组间的表达无显著性差异（P〉0．05）。②MMP-1／TIMP-1比值与肝纤维化程度呈负相关；TNF—α的表达与MMP—1、TIMP—1的表达呈显著性正相天。结论①TNF-α对肝纤维化的形成有一定的促进作用；②MMP-1／TIMP-1系统在肝纤维化形成过程中起着重要的调控作用；③TNF-α能诱导MMP—1、TIMP—1的表达。     

Knockdown of FoxM1 by siRNA interference decreases cell proliferation, induces cell cycle arrest and inhibits cell invasion in MHCC-97H cells in vitro

Aim:

To investigate the effects of small interfering RNA (siRNA) knockdown of forkhead box M1 (FoxM1) on the proliferation and invasion capacities of human hepatocellular carcinoma MHCC-97H cells in vitro.

Methods:

The expression levels of FoxM1 in human hepatocellular carcinoma samples, adjacent non-hepatocellular carcinoma liver samples and MHCC-97 cell lines were detected by RT-PCR and Western blotting. FoxM1 siRNA was transfected into MHCC-97H cells with Lipofectamine 2000. Cell growth was evaluated by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, and cell cycle analysis was performed by flow cytometry. Protein expression levels were evaluated by Western blotting. Anchorage-independent growth and the invasive potency of MHCC-97H cells were measured by soft agar colony formation and a transwell cell invasion assay, respectively.

Results:

FoxM1 was over-expressed in hepatocellular carcinoma samples compared to adjacent non-hepatocellular carcinoma liver samples. FoxM1 siRNA was successfully transfected into MHCC-97H cells, resulting in the significant inhibition of FoxM1 mRNA and protein expression. Down-regulation of FoxM1 inhibited cell proliferation, caused cell cycle arrest, and decreased invasion of MHCC-97H cells. Compared with control and mock groups, the FoxM1 siRNA transfected cells showed decreased protein expressions of cyclin B1 and cyclin D1, whereas p27 protein expression was increased. Down-regulation of FoxM1 reduced the expression of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and urokinase plasminogen activator (uPA).

Conclusion:

FoxM1 is functionally involved in hepatocellular carcinoma cell proliferation and invasion and is a potential target for hepatocellular carcinoma therapy.     

蒲公英萜醇通过上调微小 RNA-610表达抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移侵袭

目的探讨蒲公英萜醇对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法 2019年 4月至 2020年 1月,将鼻咽癌细胞 SUNE1分为对照组、蒲公英萜醇低、中、高浓度组、微小 RNA(miR)-NC组、 miR-610组、蒲公英萜醇 +anti-miR-NC组、蒲公英萜醇 +anti-miR-610组。 MTT法检测 SUNE1细胞增殖;蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1A(p21)、细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶( MMP)-2、MMP-9蛋白表达; Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测 miR-610表达水平。结果不同浓度蒲公英萜醇处理鼻咽癌细胞 SUNE1后,细胞增殖抑制率［( 16.72±1.42)%、(31.95±2.95)%、(54.59±5.0)%比( 0.00±0.00)%］和 p21、miR-610(1.68±0.14、2.37±0.21、3.09±0.29比 1.00±0.06)表达水平升高,迁移( 70.02±5.72、56.49±5.35、43.37±4.19比 86.71±7.05)、侵袭( 50.70±4.41、39.12±3.89、26.28±2.78比 69.12±4.80)细胞数和 Cy. clinD1、MMP-2、MMP-9水平降低,呈浓度依赖性( P<0.05)。过表达 miR-610可提高细胞增殖抑制率［( 46.66±4.48)%比( 7.11±0.74)%］和 p21表达水平,降低迁移( 52.18±5.35比 87.40±6.86)、侵袭( 33.11±3.29比 70.27±5.39)细胞数和 CyclinD1、MMP-2、 MMP-9表达水平(P<0.05)。抑制 miR-610表达逆转了蒲公英萜醇抗鼻咽癌 SUNE1细胞增殖、迁移和侵袭作用。结论蒲公英萜醇可抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调 miR-610表达相关。     

CLEC5A抑制肝胆管细胞癌增殖和转移的作用研究

目的　探究C型凝集素结构域家族5成员A（CLEC5A）在肝胆管细胞癌（ICC）组织中的表达特点,并分析其对ICC细胞株RBE增殖、凋亡、迁移以及侵袭特性的影响。方法　免疫组化染色法检测25例ICC患者癌组织及配对癌旁组织中CLEC5A的表达水平;构建慢病毒介导CLEC5A过表达RBE细胞株,采用实时荧光定量PCR检测细胞内CLEC5A表达水平,CCK-8法检测CLEC5A对RBE细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测RBE细胞凋亡和细胞周期,Transwell法检测细胞迁移及侵袭能力。结果　CLEC5A在ICC癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.05）。过表达CLEC5A可以抑制RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力,诱导细胞凋亡并引起G2/M期阻滞（P＜0.05）。结论　CLEC5A是一个潜在的ICC抑癌基因,它可能通过调控细胞增殖、迁移及侵袭特性影响ICC发生发展。     

EM患者子宫内膜组织的ESCs中miR-539表达水平及其靶向MMP-9对ESCs侵袭和迁移的影响

目的 探究子宫内膜异位症（EM）患者子宫内膜组织的子宫内膜基质细胞（ESCs）中miR-539表达水平, 以及miR-539靶向基质金属蛋白酶9（MMP-9）对ESCs侵袭和迁移的影响。方法 收集60例EM患者子宫内膜异位 组织及47例正常子宫内膜组织,分离ESCs原代培养,实时荧光定量PCR检测miR-539和MMP-9 mRNA表达水平, 并采用双荧光素酶报告基因检测其靶向关系。利用Lipofectamine 3000试剂转染ESCs,并将其分为miR-539 mimics 组、mimics NC组、miR-539 inhibitors组和inhibitors NC组。CCK-8检测各组细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移; Transwell检测细胞侵袭;Western blot法检测各组细胞中MMP-9蛋白表达水平。结果 EM组miR-539 mRNA水平 显著低于对照组,MMP-9 mRNA水平显著高于对照组（P＜0.05）。双荧光素酶报告实验结果显示miR-539与MMP-9 具有明显的靶向关系（P＜0.05）。与mimics NC组相比,miR-539 mimics组ESCs细胞增殖、划痕愈合率、侵袭细胞数 量及MMP-9蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）;与inhibitors NC组相比,miR-539 inhibitors组ESCs细胞增殖、划痕 愈合率、侵袭细胞数量及MMP-9蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。结论 miR-539可靶向调节MMP-9表达水 平,影响ESCs的增殖、迁移和侵袭。     

表没食子儿茶素没食子酸醋对人胃癌细胞迁移、袭和FoxM1基因表达的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸醋（表没食子儿茶素没食子酸醋,EGCG）对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法采用不同浓度的EGCG处理人胃癌BGC823细胞后,以划痕试验方法检测癌细胞迁移能力,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹方法检测FoxM1基因蛋白水平变化。结果人胃癌BGC823细胞经EGCG处理后,迁移和侵袭能力均明显下降,且呈剂量依赖性（P〈0.01）。EGCG处理组FoxM1基因蛋白水平明显下调,且呈浓度依赖性。结论 EGCG可降低人胃癌细胞侵袭能力,下调FoxM1基因表达,是其重要机制之一。     

羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞生物学行为的影响

目的 探讨羽扇豆醇调控miR-100-5p对非小细胞肺癌（NSCLC）NCI-H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 将体外培养的NCI-H1299细胞分为正常对照（NC）组（未处理）、低剂量组（12.5μmol/L羽扇豆醇）、中剂量组（25μmol/L羽扇豆醇）、高剂量组（50μmol/L羽扇豆醇）、miR-NC组（转染miR-NC）、miR-100-5p组（转染miR-100-5p）、anti-miR-NC+高剂量组（转染anti-miR-NC后用50μmol/L羽扇豆醇处理）、anti-miR-100-5p+高剂量组（转染anti-miR-100-5p后用50μmol/L羽扇豆醇处理）。CCK-8和克隆形成实验检测NCI-H1299细胞增殖;Transwell法检测NCI-H1299细胞迁移和侵袭。荧光定量PCR(q PCR)检测miR-100-5p表达;Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP9蛋白的表达。结果 与NC组比较,低、中、高剂量组NCI-H1299细胞活力、细胞克隆数、迁移数、侵袭数、CyclinD1、...     

小白菊内酯通过下调NOX4抑制结肠癌SW480细胞增殖和侵袭

目的:探讨小白菊内酯对人结肠癌细胞SW480增殖及侵袭的影响,并探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方法:以不同浓度(5,10,15μmol·L^-1)小白菊内酯作用于体外培养的人结肠癌SW480细胞,以环磷酰胺(30μmol·L^-1)作为阳性对照。采用CCK8法以及平板克隆法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移及侵袭;免疫印迹法(Western blotting)检测NOX4蛋白以及增殖相关蛋白[β-连环蛋白(β-catenin)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、侵袭相关蛋白金属基质蛋白酶2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)蛋白]表达情况。结果:随着小白菊内酯浓度的增加,对SW480细胞增殖抑制率明显升高,与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同一浓度作用下,随作用时间的延长,增殖抑制率显著升高(P<0.05),小白菊内酯10,15μmol·L^-1浓度组与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,小白菊内酯组克隆细胞形成数、侵袭、迁移细胞数、增殖相关蛋白β-catenin、Cyclin D1、侵袭迁移关蛋白MMP-2、MMP-9以及NOX4蛋白水平显著下降(P<0.05),且小白菊内酯各组间呈浓度依赖(P<0.05);与阳性对照组相比,小白菊内酯10,15μmol·L^-1浓度组以上各指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小白菊内酯可能通过下调NOX4表达,抑制结肠癌细胞SW480细胞增殖、侵袭能力。     

含酰胺结构的大黄酸衍生物4a对卵巢癌细胞的 迁移、侵袭的影响

目的探讨含酰胺结构的大黄酸衍生物4a(简称衍生物4a,derivative 4a)对卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭能力的影响及可能作用机制。方法采用分子对接和Western blot检测衍生物4a对Rac1蛋白的调控作用,CCK-8、HE染色、Scratch和Transwell实验分别检测衍生物4a对SKOV3细胞增殖、形态学、迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测衍生物4a处理细胞后EMT的标志性蛋白Vimentin、β-cantenin、E-caderin、MMP-2、MMP-9的表达情况。结果衍生物4a能有效与Rac1蛋白结合,结合能明显低于大黄酸;且能下调SKOV3细胞Rac1蛋白的表达。衍生物4a能够明显抑制SKOV3细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并诱导细胞产生大量空泡化;衍生物4a可下调MMP-2、MMP-9表达,上调EMT上皮性标志蛋白E-caderin表达及下调Vimentin、β-cantenin的表达。结论衍生物4a能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭,其机制可能是靶向调控Rac1,抑制基质金属蛋白酶分泌,上调EMT过程关键分子E-caderin和下调Vimentin、β-cantenin的表达综合作用的结果。