地榆鞣质提取物对大鼠心、肝、脑及肾组织体外抗脂质过氧化作用的研究

摘 要 目的：研究地榆鞣质提取物对大鼠心、肝、脑、肾组织体外抗脂质过氧化作用。方法: 采用分光光度法测定地榆鞣质提取物对由Fe²+ 半胱氨酸（Fe²+ Cys）体系、Fe²+ 维生素C（Fe²+ VitC）体系、Fe²+ 过氧化氢（Fe²+ H2O2）体系诱导的大鼠心、肝、脑、肾组织体外脂质过氧化的抑制作用。结果: 地榆鞣质对Fe²+ Cys、Fe²+ VitC、Fe²+ H2O2诱导的大鼠脑、心、肝匀浆、肾及线粒体脂质过氧化产生的MDA的抑制作用显著。结论:地榆鞣质对大鼠心、肝、脑及肾组织体外抗脂质过氧化具有较强保护作用,值得进一步研究与开发。     

川芎嗪对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及机制研究★

目的 探讨川芎嗪（TMP）对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 以DMSO（空白对照组）、不同浓度（50、100、200 μg·mL^-1）的TMP和奥沙利铂（L-OHP，25 μg·mL^-1）干预对数生长期人结直肠癌SW480细胞48 h。采用MTT法和EdU插入实验检测各组SW480细胞增殖率，细胞克隆实验观察SW480细胞克隆形成能力，流式细胞术、Western blotting检测细胞周期、凋亡和蛋白表达。结果 与空白对照组比较，经50、100、200 μg·mL^-1的TMP或25 μg·mL^-1的L-OHP干预可明显降低SW480细胞增殖率，提高细胞凋亡率；经100、200 μg·mL^-1的TMP或25 μg·mL^-1的L-OHP干预可明显抑制细胞克隆形成能力，阻滞细胞周期于G₀/G₁期，提高PTEN、Cleaved Caspase-3、Bax、P27表达量和Bax/Bcl-2比值，降低p-Akt、cyclin D1、Bcl-2表达量和Akt磷酸化率，差异均具有统计学意义（P<0.05）。与L-OHP 25 μg·mL^-1组比较，经TMP 200 μg·mL^-1干预能够明显降低SW480细胞增殖率、提高凋亡率，提高PTEN、Bax、P27表达量和Bax/Bcl-2比值，降低p-Akt、cyclin D1表达量和Akt磷酸化率，差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 TMP可能通过上调PTEN抑制PI3K/Akt通路，进而抑制SW480细胞增殖并促进其凋亡。     

藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞协同抑制作用的研究

目的 探索藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞的协同抑制作用及相关调控机制。方法 取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞,设置空白对照组（DMSO）、藏红花素组（400 μg·mL^-1）、顺铂组（5 μg·mL^-1）、联合组（藏红花素400 μg·mL^-1+顺铂5 μg·mL^-1）。干预48 h后,CCK-8检测HeLa细胞增殖抑制率,采用CompuSyn软件计算藏红花素与顺铂的联合指数（CI）,Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting检测激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞周期素D1（Cyclin D1）、周期蛋白依赖激酶2（CDK2）的表达。结果 与顺铂组比较,联合组细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,CI为0.68,具有中度协同效应;细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,G₀/G₁期细胞比例显著升高（P<0.05）,而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.05）,Cyclin D1、CDK2蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。与空白对照组比较,藏红花素组G₀/G₁期细胞比例显著升高而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.01）,Cyclin D1、CDK2表达水平显著降低（P<0.05）。结论 藏红花素联合顺铂可协同抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖和生长,其作用机制可能与调控凋亡相关蛋白的表达从而促进细胞凋亡、阻滞细胞周期进程有关。     

HPLC双波长法同时测定美辛唑酮红古豆醇酯栓中的2种有效成分

摘 要 目的：建立同时测定美辛唑酮红古豆醇酯栓中呋喃唑酮和吲哚美辛含量的高效液相色谱双波长分析方法。方法: 采用ZORBAX Extend C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈和0.035 mol·L^-1的磷酸二氢钾水溶液（冰醋酸调节pH至3.0）为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,检测波长分别为364 nm和318 nm,柱温30℃,进样量20 μl。结果: 在选定的色谱条件下,呋喃唑酮和吲哚美辛在0.005～0.05 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 9,检测限分别为20 ng·mL^-1和26 ng·mL^-1,定量限分别为70 ng·mL^-1和90 ng·mL^-1,平均回收率分别为99.4%（RSD=0.6%,n=9）和99.4%（RSD=0.3%,n=9）。结论: 所建立的方法简便快速,专属性强,结果准确可靠,可用于美辛唑酮红古豆醇酯栓中呋喃唑酮及吲哚美辛的检测分析。     

垂盆草总黄酮对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β 1和Smad7表达的影响

摘 要 目的： 观察垂盆草总黄酮(SSTF)对CCL₄诱导肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1和Smad7蛋白及mRNA表达的影响。方法: 60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、SSTF低剂量组（100 mg·kg^-1）、SSTF中剂量组(200 mg·kg^-1）、SSTF高剂量组（400 mg·kg^-1）和秋水仙碱阳性药对照组,共6组,每组10只。CCL₄皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,同时SSTF灌胃干预,7周后处死大鼠。采用Masson染色法检测大鼠肝脏组织病理学改变,Western blotting法检测肝脏组织TGF-β1和Smad7蛋白表达,实时定量RT-PCR检测肝脏组织TGF-β1和Smad7mRNA表达。结果: 与模型组比较,SSTF各剂量均能显著降低CCL₄诱导的肝纤维化程度（P<0.05）;中高剂量可以显著减少肝组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达（P<0.05）,并且明显增加Smad7蛋白和mRNA表达（P<0.05）。结论:SSTF可有效地逆转实验性大鼠肝纤维化,其机制可能与下调肝组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达,及增加Smad7蛋白和mRNA表达有关。     

青蒿琥酯对人源肝星状细胞中Akt/GSK-3β/β-catenin信号通路的影响研究

摘 要 目的：探讨青蒿琥酯（Art）对Akt/GSK 3β/β catenin信号通路的影响。方法: 不同浓度（0,12.5,25,50 μg·mL^-1）Art作用于人源肝星状细胞（LX 2）,采用CCK 8法检测细胞增殖情况,并确定给药浓度;给予不同浓度Akt抑制药MK 2206 0～8 μmol·L^-1,Western blot法确定其最佳抑制浓度;给予Art、MK 2206、MK 2206+Art,采用Western blot法检测各组Akt、p Akt、GSK 3β、p GSK 3β、β catenin蛋白表达情况。结果: CCK 8法检测细胞存活率,当选用25 μg·mL^-1Art作用于LX 2细胞24h时细胞存活率约80%,Western blot法确定当MK 2206浓度为6 μmol·L^-1时,可有效抑制p Akt的表达;Art组（25 μg·mL^-1）、MK 2206组（6 μmol·L^-1）、MK 2206（6 μmol·L^-1）+Art（25 μg·mL^-1）组与对照组相比,Akt、p Akt、p GSK 3β、β catenin蛋白表达均有显著差异（P<0.05）,MK 2206（6 μmol·L^-1）+Art（25 μg·mL^-1）组分别与Art（25 μg·mL^-1）组、MK 2206（6 μmol·L^-1）组比较,GSK 3β、Akt蛋白表达无显著差异（P>0.05）,p Akt、p GSK 3β、β catenin蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论: Art可通过Akt因子对Wnt/β catenin信号通路中相关因子产生影响,进而抑制细胞增殖,缓解肝纤维发展进程。     

救必应酸在大鼠体内的口服生物利用度研究

摘 要 目的：研究救必应酸在大鼠体内药动学和口服生物利用度。方法: 建立测定大鼠血浆中救必应酸浓度的RP HPLC法。考察大鼠经灌胃和尾静脉给予40 mg·kg^-1的救必应酸后血药浓度变化。采用3p97软件计算分析药动学参数和口服生物利用度。结果: 灌胃组大鼠的C_max为（0.81±0.22）μg·mL^-1,T_max为（45.24±5.13） min,T_1/2为（101.47±8.25） min,AUC为（76.3±13.68）μg·min^-1·mL^-1;静脉注射组的T_1/2为（73.68±11.02） min,AUC为（1 687.4±29.54）μg·min^-1·mL^-1。救必应酸口服利用度为4.52%。结论:救必应酸的口服生物利用度较差。     

HPLC法同时测定祛喘胶囊中木兰脂素、欧前胡素、异欧前胡素的含量

摘 要 目的： 建立祛喘胶囊中对木兰脂素、欧前胡素和异欧前胡素的HPLC测定方法。方法: 采用日本资生堂CAPCELL PAK C₁₈ 色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,柱温为30℃,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长在0～25 min为278 nm,25～70 min为248 nm,进样量为10 μl。结果: 木兰脂素在6.126～55.134 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.999 7）,平均回收率为101.5%,RSD为1.4%;欧前胡素在9.862～88.758 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.999 8）,平均回收率为99.6%,RSD为1.2%;异欧前胡素在4.830～43.470μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.999 8）,平均回收率为100.2%,RSD为1.7%。结论:本法操作简便、结果准确,可用于祛喘胶囊的质量控制。     

盐酸曲美他嗪缓释片在健康人体内的生物等效性研究

目的：评价盐酸曲美他嗪缓释片在中国健康受试者空腹和餐后条件下单剂量给药时的人体生物等效性。方法：采用随机、开放、单剂量、两序列、两周期交叉的试验设计。空腹组和餐后组分别纳入24 例健康受试者,并随机分为两组,每组12例,口服盐酸曲美他嗪缓释片受试制剂（T）或参比制剂（R） 35 mg,第一组按照TR的给药序列,第二组按照RT的给药序列给药。采用高效液相色谱-串联质谱对血浆中曲美他嗪浓度进行测定。利用Win Nonlin 6.4及以上版本和SAS 9.3版本软件进行药代动力学参数的计算和统计分析,并进行生物等效性评价。结果：空腹口服参比制剂和受试制剂后的主要药代动力学参数如下：C_max分别为（69.73±12.86）和（74.43±13.45）ng·mL^-1;T_max均为4.5 h;t_1/2分别为（6.47±0.51） 和（6.38±0.42）h;AUC_0-t分别为（825.74±140.29）和（867.88±126.28）ng·mL^-1·h;AUC_0-∞分别为（832.57±142.73）和（874.50±127.86）ng·mL^-1·h。餐后口服参比制剂和受试制剂后的主要药代动力学参数如下：C_max分别为（80.05±16.67）和（90.40±17.95）ng·mL^-1;T_max均为4.5 h;t_1/2分别为 （6.32±1.02）和（6.17±1.00）h;AUC_0-t分别为（824.61±147.04）和（825.27±154.35）ng·mL^-1·h; AUC_0-∞分别为（831.34±149.00）和（831.43±156.99）ng·mL^-1·h。在空腹和餐后状态下,受试制剂和参比制剂主要药代动力学参数几何均值对应的90%置信区间符合等效范围要求（80.00%~125.00%）。结论：受试制剂和参比制剂在空腹和餐后组口服时均具有生物等效性。     

CEA、CYFRA21-1与免疫治疗NSCLC预后的相关性研究★

目的 探讨临床常用的肺部肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1及CA125在肿瘤免疫治疗中的作用。方法 收集我院收治的82例首次接受纳武利尤单抗（3 mg·kg^-1，每2周1次）免疫治疗的非小细胞肺癌（NSCLC）患者的临床资料。分别记录治疗前及治疗6周后CEA、CYFRA21-1、CA125水平以及治疗前后上述指标的差值。所有患者每3个月随访1次，主要生存评估指标为无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）。结果 治疗前CEA<15.675 ng·mL^-1或CYFRA21-1<10.810 ng·mL^-1、治疗6周后CEA差值<2.485 ng·mL^-1或CYFRA21-1差值<3.750 ng·mL^-1与较长的PFS和OS显著相关（P<0.001）。多因素分析结果表明，ECOG评分0~2分的患者可获得较长的PFS；ECOG评分0~2分、CEA差值<2.485 ng·mL^-1的患者可获得较长的OS。结论 治疗前CEA <15.675 ng·mL^-1、CYFRA 21-1<10.810 ng·mL^-1，治疗6周后CEA差值<2.485 ng·mL^-1、CYFRA21-1差值<3.750 ng·mL^-1可能是预测纳武利尤单抗治疗NSCLC患者预后的较为可靠的生物学指标。     

高效液相色谱法测定人血清和尿中盐酸青藤碱浓度及药代动力学研究

用RP-HPLC法,以三唑仑为内标,反相C₁₈为分析柱,乙腈—0.01mol·L^-1磷酸二氢钠—四甲基乙二胺(46∶54∶0.22v/v)为流动相,磷酸调至pH6.9,检测波长263nm,测定血清和尿中盐酸青藤碱浓度,线性范围分别为6～480ng·mL^-1和0.06～3μg·mL^-1,平均回收率75.88%和91.35%,日内日间误差小于5%,最低检测浓度血清4ng·mL^-1,尿40ng·mL^-1。8名健康男性志愿者单次口服盐酸青藤碱片80mg,测定血清及尿浓度,该药符合二室开放模型,体内消除符合一级动力学消除过程,主要药代动力学参数:T_1/2α0.791±0.491h,T_1/2β9.397±2.425h,T_{max 1.040±0.274h,Cmax246.604±71.165ng·mL^-1,AUC 2651.158±1039.050ng·h·mL^-1,CL 0.033±0.01ng·mL^-1。}     

基于RBL-2H3与P815细胞体外模型的聚山梨酯80、维生素K1注射剂、注射用两性霉素B脂质体类过敏反应潜在风险评价

目的 基于 RBL-2H3及 P815细胞系,选择 Compound 48/80（C48/80）为阳性药构建类过敏反应的体外评价模型,初步评价聚山梨酯80、维生素K₁注射剂（VK₁I）、注射用两性霉素B脂质体（ABL）导致类过敏反应的潜在风险。方法 应用 CCK-8 法检测 C48/80（10、30、60、100 μg·mL^-1）、聚山梨酯 80（2.5、5.0、10.0、50.0 mg·mL^-1）、VK₁I（0.625、1.250、2.500、5.000、10.000 mg·mL^-1）、ABL（0.125、0.250、0.500、1.000、2.000 mg·mL^-1）对 RBL-2H3、P815 细胞活性的影响,计算半数抑制浓度（IC₅₀）,阳性药及受试物均选择＜IC₅₀浓度进行后续实验;结合中性红染色形态学观察,研究阳性药及受试物的细胞毒性;流式细胞仪检测Annexin V阳性细胞率及Fluo-4AM标记率;ELISA法检测β-氨基己糖苷酶（β-Hex）及组胺释放量。结果 中性红染色结果显示,在C48/80作用下RBL-2H3、P815细胞部分皱缩或者偶有破损,但大部分细胞仍维持完整细胞形态;在聚山梨酯 80、ABL、VK₁I高浓度的作用下,RBL-2H3、P815细胞大部分仍能保持正常形态。C48/80在＜IC₅₀浓度时能够引起较强的细胞脱颗粒反应,模型建立成功。聚山梨酯80、VK₁I在＜IC₅₀浓度时均出现了浓度相关性细胞脱颗粒现象,与对照组比较,2种细胞聚山梨酯80 2.5、5.0 mg·mL^-1组及VK₁I 0.75、1.50、3.00 mg·mL^-1组Annexin V阳性率、Fluo-4AM标记率均显著升高（P＜0.05、0.01）;聚山梨酯 80 2.5、5.0 mg · mL^-1 组及 VK₁I 1.5、3.0 mg·mL^-1组的组胺、β-Hex释放量显著升高（P＜0.05、0.01）。ABL 组 Annexin V 阳性率浓度相关性升高趋势不明显 ,与对照组比较 ,仅 P815 细胞 ABL 2.00 mg·mL^-1组显著升高（P＜0.05）,且升高幅度不大 ;与对照组比较 ,2种细胞ABL 1、2 mg·mL^-1组的Fluo-4AM标记率和组胺、β-Hex释放量显著升高（P＜0.05、0.01）。结论 聚山梨酯80、VK₁I高浓度具有导致类过敏反应产生风险,ABL 还需进一步研究。     

HPLC法测定化妆品原料2-羟乙基脲及杂质尿素的含量

目的 建立化妆品原料2-羟乙基脲的高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）含量测定方法,并检测其杂质尿素的含量,以实现对2-羟乙基脲的质量控制。方法采用Capcell PAK ADME C_{18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;以水为流动相;柱温30℃;流速为1.0 mL·min^-1;进样量10 μL;检测波长194 nm。结果 2-羟乙基脲和尿素分别在1.168～116.8 μg·mL^-1（r=0.999 7）和1.032～206.5 μg·mL^-1（r=0.9992）范围内浓度与峰面积有良好的线性关系,平均回收率分别为98.0%和97.1%,检出限分别为0.12 μg·mL^-1和0.21 μg·mL^-1,定量限分别为0.36 μg·mL^-1和0.52 μg·mL^-1。结论 本方法准确度高,重复性好,检测灵敏度符合检测要求,可用于化妆品原料2-羟乙基脲及其杂质尿素的含量测定方法。}     

小儿宝泰康颗粒对呼吸道病毒感染的抗病毒作用研究

目的 观察小儿宝泰康颗粒对呼吸道合胞病毒和腺病毒感染细胞的抑制作用,以便为呼吸道病毒感染的治疗提供新的药物。方法 通过细胞培养技术观察不同浓度的小儿宝泰康颗粒对HEp-2细胞的细胞毒作用,采用MTT法并结合CPE法检测病毒感染细胞存活率和病毒抑制率,以利巴韦林作为阳性药物对照,评价该药物对呼吸道合胞病毒和腺病毒感染细胞的抗病毒活性。结果 小儿宝泰康颗粒对HEp-2细胞的半数细胞毒性浓度（TC₅₀）为4.4 mg·mL^-1,对呼吸道合胞病毒的半数有效浓度（EC₅₀）为2.03 mg·mL^-1,而腺病毒的EC₅₀为0.65 mg·mL^-1,抗病毒指数分别为2.17和6.75。在对两种病毒的直接灭活作用中,EC₅₀分别为4.13和8.99 mg·mL^-1。阳性对照药物病毒唑在128 g·mL^-1时,对呼吸道合胞病毒和腺病毒的抑制率分别为92.7%和80.16%。结论 小儿宝泰康颗粒是一种对呼吸道合胞病毒和腺病毒感染有抗病毒作用的药物,有临床应用前景和进一步研究的价值。     

伊伐布雷定及其代谢物的血药浓度测定及人体药动学研究

目的：建立伊伐布雷定（IVA）及其活性代谢产物N-去甲基伊伐布雷定（M1）人体血药浓度的HPLC-MS/MS同时测定方法,研究盐酸伊伐布雷定片经健康受试者口服后IVA及M1的人体药代动力学特征。方法：12名健康受试者单次口服盐酸伊伐布雷定片2.5 mg、5 mg和7.5 mg,多次口服5 mg后,采用HPLC-MS/MS测定不同时间点血浆中IVA和M1浓度,并计算其主要药动学参数。结果：IVA和M1血药浓度标准曲线线性范围分别为0.03~80 ng·mL^-1和0.03~10 ng·mL^-1。单次给药2.5、5、7.5 mg后IVA的C_max分别为（9.661±3.832）、（20.63±9.31）、（34.95±19.46） ng·mL^-1,AUC0-48分别为（42.16±19.53）、（85.86±44.85）、（133.6±65.7） μg·h·L^-1;M1的C_max分别为（1.007±0.189）、（2.683±0.675）、（4.064±1.172） ng·mL^-1,AUC_0-48分别为（10.78±1.35）、（26.02±4.91）、（36.24±7.90） μg·h·L^-1。多次给药5 mg后IVA的稳态平均血药浓度Cav为（6.494±2.385） ng·mL^-1,稳态血药浓度波动度DF为（3.3±0.7）,累积常数R_AUC为（1.1±0.2）;M1的C_av为（1.959±0.186） ng·mL^-1,DF为（1.4±0.3）,R_AUC为（1.5±0.2）。结论：建立的人血浆中IVA和M1的LC-MS/MS同时测定方法适用于人体药代动力学研究。单次给药后,在2.5~7.5 mg范围内IVA和M1均呈线性药动学特征;多次给药5 mg后,IVA人体内的暴露量约增加10%,M1人体内的暴露量约增加50%。     

HPLC法测定布洛伪麻缓释片的释放量

摘 要 目的:建立高效液相色谱法测定布洛伪麻缓释片释放量的方法。方法: 色谱柱为迪马 C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-三乙胺-0.04 mol·L^-1 磷酸二氢钠溶液 (60∶0.02∶40),流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为215 nm,柱温为35℃,进样量为20 μl。结果:布洛芬的线性范围为40～2 000 μg·mL^-1（r＝1.000 0）,平均加样回收率为99.2％,RSD＝0.8％(n=9),最低定量浓度为0.04μg· mL^-1;盐酸伪麻黄碱的线性范围为6～300 μg·mL^-1（r＝1.000 0）,平均加样回收率为98.5％,RSD＝0.6％(n=9),最低定量浓度为0.06μg· mL^-1。结论: 该方法简便快速、准确灵敏,可用于布洛伪麻缓释片释放量的测定。     

金蝉花水提物对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 研究金蝉花水提物对高糖诱导下肾小管上皮细胞（HK-2）发生上皮-间充质细胞转分化的影响。方法 采用高糖诱导HK-2细胞建立糖尿病肾病模型,将细胞分为正常组,高糖组,贝那普利组,金蝉花水提物低、高剂量组（0.1,0.5 mg·L^-1）,培养24 h后,ELISA测定转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）,Western blot测定α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）的表达情况。结果 与正常组比,高糖组TGF-β1、α-SMA和FN蛋白表达显著增高（P<0.01）;与高糖组比,贝那普利组和金蝉花水提物高剂量组TGF-β1、α-SMA和FN蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论 金蝉花水提物可能通过降低TGF-β1、α-SMA和FN蛋白的表达,从而缓解甚至逆转肾小球的硬化与肾间质细胞纤维化,发挥治疗糖尿病肾病的作用。     

羌活醇及异欧前胡素对脂多糖诱导大鼠成纤维样滑膜细胞增殖抑制的影响

目的 探讨羌活醇及异欧前胡素对大鼠成纤维样滑膜细胞增殖抑制的影响。方法 复制经脂多糖(LPS)诱导的大鼠成纤维样滑膜细胞(CIA-FLS)模型,分别给予不同浓度的羌活醇(25、50、100、200、400 μg·mL^-1)、异欧前胡素(25、50、100、200、400 μg·mL^-1)及阳性药泼尼松龙（400 μg·mL^-1）,另设空白对照组,观察给药前后成纤维样滑膜细胞形态差异;采用噻唑蓝(MTT)法测定不同给药时间、不同给药浓度下成纤维样滑膜细胞的抑制率,计算半数抑制浓度（IC₅₀）;硝酸还原酶法测定羌活醇和异欧前胡素对大鼠成纤维化滑膜细胞中一氧化氮（NO）水平的影响;ELISA测定肿瘤坏死因子a (TNF-a)表达的影响。结果 造模细胞较正常细胞增殖力强,细胞粗大,纤维样,呈层叠状生长;羌活醇组给药后细胞增殖力减弱,生长良好;异欧前胡素给药后细胞增殖力锐减,生长状况不佳。给药12 h,羌活醇未测出半数抑制浓度值,异欧前胡素半数抑制浓度值为160 μg·mL^-1;给药36 h,羌活醇、异欧前胡素半数抑制浓度值分别为190、120 μg·mL^-1;给药60 h,分别为80、45 μg·mL^-1,异欧前胡素的增殖抑制能力强于羌活醇（P＜0.01）。给药羌活醇与异欧前胡素对一氧化氮总体含量和细胞因子肿瘤坏死因子a含量均有显著性降低（P＜0.01）,且异欧前胡素的降低更显著。结论 羌活醇及异欧前胡素对大鼠成纤维样滑膜细胞均有增殖抑制作用(P＜0.05),均使一氧化氮含量和细胞因子TNF-a的含量显著减少（P＜0.01）,二者都有很好的增殖抑制能力,且异欧前胡素的抑制效果优于羌活醇。     

坎地沙坦酯脂质体冻干粉的制备及在大鼠体内药动学研究

目的 制备并评价泊洛沙姆407修饰的坎地沙坦酯脂质体（CC/PLip）,考察其口服给药后在大鼠体内药动学过程。方法 用薄膜分散法制备CC/PLip,经冷冻干燥制成冻干粉。动态光散射（DLS）测定其zeta电位和粒径,透射电镜（TEM）观察其形态,超滤离心法测定包封率;采用口服给药,观察肠道粘膜渗透行为,分析药物在大鼠体内的药代动力学参数。结果 泊洛沙姆407修饰的坎地沙坦酯脂质体呈现球形,粒径为（182.67±4.10）nm,Zeta电位为（-8.98±0.19）mV,包封率为98.94%±0.60%;体外释放试验结果表明其具有明显的缓释效果;肠道粘膜渗透试验表明CC/PLip在小肠易被吸收;药动学实验中,参比坎地沙坦酯片和CC/PLip的AUC_0→48h分别为（13 112.6±5 343.7）ng·h·mL^-1、（19 522.8±3 973.7）ng·h·mL^-1;C_max分别为（656.8±345.0）ng·mL^-1、（1 199.1±330.7）ng·mL^-1;T_max分别为（7.3±3.0）h、（2.7±1.4）h。结论 CC/PLip包封率较高,粒径较小,具有缓释效果,能提高在小肠的吸收,可显著提高在大鼠体内的生物利用度。     

HPLC法测定马来酸依那普利分散片的有关物质

摘 要 目的： 建立高效液相色谱法测定马来酸依那普利分散片的有关物质。方法: 采用Kromasil 100 SC₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以0.01 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH为2.2）为流动相A,乙腈为流动相B梯度洗脱,流量1.0 ml· min^-1,检测波长215 nm,柱温40℃,进样量20 μl。结果: 依那普利拉、马来酸依那普利及依那普利双酮的浓度分别在14.64～43.92μg·mL^-1（r=0.999 8）;9.29～27.87 μg·mL^-1（r=0.999 1）;10.80～32.40 μg·mL^-1（r=0.999 5）范围内与峰面积呈良好的线性关系。采用《中国药典》方法测得依那普利拉未检出,依那普利双酮含量为0.2%,采用梯度洗脱方法测得依那普利拉、依那普利双酮含量分别为0.1%、0.2%, 主药与有关物质能达到较好的基线分离。结论:该方法灵敏度高,专属性强,准确可靠, 可用于该药品质量控制。