23-乙酰泽泻醇B对肥胖模型小鼠糖脂代谢紊乱的改善作用

目的:研究23-乙酰泽泻醇B对肥胖模型小鼠糖脂代谢紊乱的改善作用及机制。方法:小鼠给予高脂饲料10周以复制肥胖模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、奥利司他组(阳性对照,15.6 mg/kg)和23-乙酰泽泻醇B低、中、高剂量组(7.5、15、30 mg/kg),每组10只;另设置喂养普通饲料的小鼠10只为正常组。正常组和模型组小鼠灌胃水,给药组小鼠灌胃相应药物,灌胃体积均为20 mL/kg,每天1次,连续4周。末次给药后,测定小鼠的体质量、腰围和全身脂肪、肌肉和体液质量;测定小鼠血清中血脂指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)]和血糖水平;采用酶联免疫吸附法测定肝组织中过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPAR-γ)、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素6(IL-6)水平和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用苏木精-伊红染色法观察小鼠脂肪和肝组织的病理变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量、腰围、全身脂肪和体液质量均显著增加(P<0.01);血清中TC、TG、HDL-C、血糖、TNF-α水平和肝组织中PPAR-γ、NF-κB、IL-6水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);脂肪细胞结构破裂、体积增大,伴有炎性细胞浸润;大量肝细胞水肿,细胞浆疏松淡染,伴有脂肪变性。与模型组比较,23-乙酰泽泻醇B各剂量组小鼠体质量、全身脂肪和体液质量以及血清中TG、TNF-α水平均显著降低(P<0.01);23-乙酰泽泻醇B中、高剂量组小鼠血清中TC、血糖和肝组织中IL-6均显著降低(P<0.05或P<0.01),肝组织中PPAR-γ水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);23-乙酰泽泻醇B高剂量组小鼠腰围和肝组织中NF-κB显著减少或降低(P<0.01);23-乙酰泽泻醇B中剂量组小鼠血清中HDL-C水平显著降低(P<0.01);脂肪细胞排列紧密、体积较小;肝细胞轻中度肿胀,少量细胞浆疏松淡染或呈空泡状,少量肝细胞伴脂肪变性和炎性细胞小灶性浸润。结论:23-乙酰泽泻醇B可改善肥胖模型小鼠的糖脂代谢紊乱,其作用机制可能与调节肝组织中PPAR-γ、NF-κB、IL-6水平和血清中TNF-α水平有关。     

豹皮樟总黄酮对非酒精性脂肪性肝炎治疗作用及部分机制

目的研究豹皮樟总黄酮对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)治疗作用,并初步探讨Toll样受体4(TLR4)在治疗中的作用。方法将SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组及TFLC组(100、200、400 mg.kg-1)。除正常组外,其余各组每天给予脂肪乳剂灌胃连续10周,制备NASH模型。治疗组于造模第6周开始灌胃给予相应剂量的药物。实验10周后,检测血清ALT、AST、TC、TG、TNF-α及肝脏TC、TG含量、TLR4 mRNA和蛋白表达、NF-κB核蛋白表达,并行病理组织学检查。结果模型组大鼠血清ALT、AST、TG、TC、TNF-α水平及肝脏TC、TG含量明显升高,病理组织学检查显示模型组大鼠发生明显的肝细胞脂肪变性、炎症和坏死。TFLC能降低模型大鼠血清ALT、AST、TG、TC、TNF-α水平及肝脏TC、TG含量,病理组织学检查显示TFLC明显改善大鼠肝细胞脂肪变性及炎症程度减轻。进一步研究发现TFLC能明显抑制TLR4 mRNA和蛋白表达、NF-κB核蛋白水平。结论 TFLC对NASH有较好的治疗作用,且与抑制TLR4介导的细胞信号转导通路有关。     

壳聚糖中药复方防治非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的探明壳聚糖中药复方拮抗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用及其机制。方法健康雄性C57BL/6J小鼠18只,随机分为3组,每组6只。采用高脂、胆碱-蛋氨酸缺乏(high fat,methionine and choline deficient diet,MCD)饮食4周建立小鼠NASH模型,应用壳聚糖中药复方进行干预实验,并以胆碱-蛋氨酸充足饮食设立对照组。酶法测定血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和三酰甘油(triglyeride,TG)水平;双抗体夹心ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;光镜下观察肝组织脂肪变程度、炎症活动及纤维化程度;实时定量PCR法检测肝组织TNF-α和IL-6mRNA的表达。结果对照组小鼠肝脏未出现明显的脂肪变及炎症;模型组小鼠肝脂肪变及炎症明显,TNF-α和IL-6的表达显著升高(P<0.01);壳聚糖中药复方干预组肝组织脂肪变及炎性均较模型组明显减轻,TNF-α和IL-6的表达明显降低(P<0.01)。结论壳聚糖中药复方可通过抑制炎症因子TNF-α和IL-6的表达、纠正脂代谢紊乱来阻止或延缓非酒精性脂肪性肝炎的进展,是防治脂肪性肝病的有效措施之一。     

Experimental study on the mechanism of chitosan recipe in preventing and treating non-alcoholic steatohepatitis

目的 探明壳聚糖中药复方拮抗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用及其机制.方法 健康雄性C57BL/6J小鼠18只,随机分为3组,每组6只.采用高脂、胆碱-蛋氨酸缺乏(high fat,methionine and choline deficient diet,MCD)饮食4周建立小鼠NASH模型,应用壳聚糖中药复方进行干预实验,并以胆碱-蛋氨酸充足饮食设立对照组.酶法测定血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和三酰甘油(triglyeride,TG)水平;双抗体夹心ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;光镜下观察肝组织脂肪变程度、炎症活动及纤维化程度;实时定量PCR法检测肝组织TNF-α 和IL-6 mRNA的表达.结果 对照组小鼠肝脏未出现明显的脂肪变及炎症;模型组小鼠肝脂肪变及炎症明显,TNF-α和IL-6的表达显著升高(P<0.01);壳聚糖中药复方干预组肝组织脂肪变及炎性均较模型组明显减轻,TNF-α和IL-6的表达明显降低(P<0.01).结论 壳聚糖中药复方可通过抑制炎症因子TNF-α和IL-6的表达、纠正脂代谢紊乱来阻止或延缓非酒精性脂肪性肝炎的进展,是防治脂肪性肝病的有效措施之一.     

降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏PPARα mRNA表达的影响

目的观察降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)mRNA表达的影响,探讨其治疗NASH的机制。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为3组:健康组普通饲料喂养,模型组和治疗组高脂饮食喂养。治疗组在高脂饮食13周末给予降脂益肝冲剂,同时模型组和健康组给予等量的生活饮用水灌胃,18周末处死各组大鼠。测定肝组织甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)含量及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝组织PPARα mRNA相对含量。结果模型组大鼠肝脏PPARα表达明显减少,肝脏TG、TC、FFA及血清TNF-α水平明显增加;治疗组肝脏PPARα表达明显增强,其余指标均明显下降。结论降脂益肝冲剂能显著促进PPARα的表达,可能是治疗NASH的分子机制之一。     

HMGB1介导的炎症通路在雷公藤致大鼠肝损伤中的作用研究

目的:研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)介导的炎症通路HMGB1-Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)在雷公藤致大鼠肝损伤中的作用,为阐明雷公藤致肝损伤的作用机制提供参考。方法:将24只SD大鼠随机分为空白组(生理盐水,灌胃)、雷公藤组(以生药计16 g/kg,灌胃)和中和剂组(腹腔注射100 mg/kg甘草酸铵溶液3 h后再灌胃以生药计16 g/kg的雷公藤),每组8只,各组大鼠均连续给药3周。每周给药后均检测大鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)水平;给药结束后,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中HMGB1、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blot法检测大鼠肝组织中HMGB1、NF-κB p65、TLR4蛋白表达,苏木精-伊红染色后观察大鼠肝组织病理学改变。结果:给药3周后,雷公藤组大鼠血清中AST、ALT、HMGB1、IL-1β、IL-2、TNF-α水平以及肝组织中HMGB1、NF-κB p65、TLR4蛋白表达水平均显著高于空白组和中和剂组(P<0.05或P<0.01)。雷公藤组大鼠肝组织中央静脉周围肝细胞水肿,部分肝细胞浆内可见圆形空泡;中和剂组大鼠仅少量细胞内可见大小不一的空泡。结论:雷公藤致大鼠肝损伤的机制可能与其激活了HMGB1-TLR4/NF-κB炎症通路有关。     

滨蒿内酯对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用研究

目的:研究滨蒿内酯对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用及潜在分子机制。方法:将50只雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组、水飞蓟素组(阳性对照,120 mg/kg)和滨蒿内酯高、低剂量组(60、30 mg/kg),每组10只。各给药组小鼠均灌胃相应药物,正常对照组和模型组小鼠灌胃等体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液,每日1次,连续给药7 d。末次给药结束2 h后,除正常对照组小鼠腹腔注射等体积橄榄油外,其余组小鼠均一次性腹腔注射0.1%CCl4橄榄油溶液(1 mL/100 g)以建立急性肝损伤模型。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肝组织病理性改变;采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性和白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)的含量;采用蛋白免疫印迹法检测小鼠肝组织中核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白[NF-κB p65、核因子κBα激酶抑制蛋白(IκBα)]的磷酸化水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠血清中AST、ALT活性和MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量均显著升高,SOD、CAT活性均显著降低(P<0.05);肝组织出现明显的病理性改变,且肝组织中NF-κB p65和IκBα蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,水飞蓟素组和滨蒿内酯高、低剂量组小鼠血清中相关因子活性或含量水平均显著逆转(P<0.05);肝组织病理性改变程度明显减轻,且肝组织中NF-κB p65和IκBα蛋白的磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。结论:滨蒿内酯对CCl4所致小鼠急性肝损伤具有保护作用,该作用与降低氧化应激水平以及阻断NF-κB通路的活化、进而抑制炎症反应有关。     

绞股蓝皂苷通过Nrf2/NF-κB信号通路发挥抗小鼠急性酒精性肝损伤作用

目的研究绞股蓝皂苷抗小鼠急性酒精性肝损伤作用及机制。方法 BALB/c小鼠分为对照组、酒精肝损伤模型组和绞股蓝皂苷3个剂量保护组。皂苷保护组每日给予低、中、高剂量绞股蓝皂苷灌胃连续1周。HE染色观察肝组织病理学改变;全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平;荧光定量PCR检测TNF-α、IL-6 mRNA水平;试剂盒检测氧化损伤相关指标; Western blot检测Nrf2和NF-κB信号通路蛋白水平。结果与对照组相比较,酒精模型组动物ALT、AST、TC和TG水平明显升高; TNF-α和IL-6表达水平明显升高;氧化损伤产物明显升高,抗氧化蛋白活性明显降低; Nrf2信号通路蛋白明显降低;细胞核内p65蛋白水平明显升高。不同剂量绞股蓝皂苷能够明显抑制模型组上述各项指标的变化。结论绞股蓝皂苷通过激活Nrf2/NF-κB信号通路有效地保护小鼠急性酒精性肝损伤。     

葛根芩连汤对高脂饲料饲喂的大鼠非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的研究葛根芩连汤对大鼠NASH模型的药效学作用。方法随机将SD大鼠分为空白组、模型组、葛根芩连汤低剂量组、葛根芩连汤高剂量组,每组10只,然后建立大鼠NASH模型,造模同时进行药物干预;实验第8周结束后进行血清ALT、AST、TG、TC、HDL-C、LDL-C、TNF-α、IL-6、IL-10及肝组织TNF-α、IL-6、IL-10的测定。结果 (1)肝脏酶学:血清ALT、AST水平,模型组高于空白组(P0.01),葛根芩连汤高、低剂量组低于模型组(P0.05)。(2)血脂及肝脂:与空白组相比,模型组血清HDL-C显著降低,血清LDL-C、TG、TC明显增加(P0.01)。葛根芩连汤高、低剂量组血清HDL-C水平与模型组相比增加,血清LDL-C、TG、TC均降低(P0.05)。(3)血清及肝组织IL-6、IL-10、TNF-α水平:与空白组相比,模型组血清及肝组织IL-10显著降低,血清IL-6、TNF-α明显增加(P0.01)。与模型组相比,葛根芩连汤高、低剂量组可明显增加血清及肝组织IL-10含量,降低血清及肝组织IL-6、TNF-α水平(P0.05)。结论葛根芩连汤高、低剂量均能够降低高脂饮食饲喂诱导的NASH大鼠血清转氨酶水平、改善血脂代谢紊乱;能够通过提高抑炎因子和抑制促炎因子两方面调控炎症的发展。     

阿托伐他汀对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝炎的影响

目的观察阿托伐他汀对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的影响。方法将23只SD大鼠随机分为三组:正常对照组(NC组,8只)、高脂饲养模型组(HF组,7只)和高脂饲养+阿托伐他汀组(HF+AT组,8只)。观察大鼠血清及肝脏各指标的变化,RT-PCR分别检测肝组织核转录因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)mRNA表达。结果与HF组相比,HF+AT组大鼠血清相关指标明显改善,肝组织脂肪变性及炎症活动得以减轻,肝脏NF-κB及TNF-αmRNA表达降低,PPARγmRNA表达增加(P<0.05或P<0.01)。结论阿托伐他汀能减轻高脂诱导的模型大鼠NASH。     

二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用

目的:研究二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用。方法:取SD大鼠40只随机分为4组(n=10),即对照组、模型组、烟酸组及二甲双胍组。除对照组外,其余各组分别每天给予脂肪乳剂、烟酸、二甲双胍。实验开始1周后断尾取血,测定血清脂质;3周后处死大鼠,测定血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、游离脂肪酸(FFA)、空腹血糖(FBG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和肝匀浆TG、TC、FFA水平,并行肝脏病理学检查。结果:与模型组比较,二甲双胍组能降低大鼠血清TG、ALT、FFA、FBG、TNF-α水平及肝匀浆中TG、FFA水平和肝脂肪变性程度及炎症水平(P<0.05或P<0.01)。结论:二甲双胍对脂肪乳剂诱导的NASH模型大鼠具有防治作用。     

穿心莲内酯对大鼠非酒精性脂肪肝炎的防治作用

目的研究穿心莲内酯对非酒精性脂肪性肝炎大鼠（Nonalcoholic steatohepatitis,NASH）的防治作用。方法SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为对照组、模型组、异甘草酸镁组（Magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG）（10mg·kg^-1）及穿心莲内酯组（andrographolide,AGH）（100mg·kg^-1）。除对照组给予生理盐水外,其余各组每天上午给予脂肪乳剂灌胃;每天下午除给生理盐水外,其它组分别腹腔注射相应药物。3周后处死动物,测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和肝匀浆TG、TC、MDA、SOD,并行肝脏病理学检查。结果模型组大鼠出现NASH,MgIG组及AGH组血清和肝脏TG、MDA、TNF—α均显著降低,肝组织SOD活性明显降低;肝脂肪变性和炎症程度明显减轻。结论穿心莲内酯对脂肪乳剂诱导的NASH大鼠具有防治作用。     

Anti-inflammatory effect of genistein on non-alcoholic steatohepatitis rats induced by high fat diet and its potential mechanisms

Genistein is a naturally occurring plant-derived phytoestrogen present in the human diet, and is known to possess anti-cancer, anti-oxidant and anti-osteoporosis effects. Anti-inflammatory activity of genistein has been revealed in animal studies. In this paper, we investigated the anti-inflammatory effect of genistein on non-alcoholic steatohepatitis (NASH) rats induced by high fat diet (HFD), and explored its potential mechanisms. Rats were fed with normal chow diet or HFD for 12 weeks with or without low (4 mg/kg/day body weight) or high (8 mg/kg/day body weight) dose of genistein. Serum levels of aminotransferases, thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS), tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukin-6 (IL-6) and transforming growth factor beta (TGF-β(1)) were measured, hepatic inflammation, liver TBARS, IL-6, TNF-α and TGF-β(1) levels were determined, and proteins involved in mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and nuclear factor-kappa B (NF-κB) pathways were assayed. The results showed that the NASH model rats reproduced typical pathogenetic and histopathological features of NASH in human, and genistein administration improved liver function, slowed down NASH progression, decreased the levels of TBARS, TNF-α and IL-6 in serum and liver, as well as inhibited IκB-α phosphorylation, nuclear translocation of NF-κB p65 subunit, and activation of c-Jun N-terminal kinase (JNK). In conclusion, genistein may be a promising drug to inhibit the inflammatory process and prevent liver damage in patients with NASH.     

Paeoniflorin alleviates non-alcoholic steatohepatitis in rats: Involvement with the ROCK/NF-κB pathway

Paeoniflorin (PF) is one of the major active ingredients of Paeonia lactiflora and has been suggested as a dietary therapy for non-alcoholic steatohepatitis (NASH); however, the involved mechanism remains obscure. The present work investigates the anti-inflammatory effects of PF and explores the possible mechanisms in a rat model of NASH. Male Sprague-Dawley rats were fed a high-cholesterol and high-fat (HCF) diet for 12 weeks to induce the NASH model, and PF (20 mg/kg/d) was orally administered to the NASH rats during the last four weeks of the study. Our results showed that PF significantly decreased serum alanine transferase (ALT) and aspartate transferase (AST) activities and also significantly decreased total levels of cholesterol (TC), low-density lipoprotein (LDL), and tumor necrosis factor alpha (TNF-α) (all P < 0.05). Moreover, PF ameliorated the hepatic steatosis and inflammation and inhibited CD68 and transforming growth factor beta (TGF-β)-1 expression (both P < 0.05). PF also down-regulated the activity of Rho kinase (ROCK) and suppressed the activation of the nuclear factor (NF)-κB signaling pathway in liver tissue. PF has liver protective and anti-inflammatory effects in HCF diet-induced NASH rats. The possible mechanisms may be associated with inhibition of the ROCK/NF-κB signaling pathway in the NASH liver.     

安肠汤对TNBS致溃疡性结肠炎模型大鼠TLR4/NF-κB信号通路及粪钙卫蛋白表达的影响

目的:研究安肠汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)致溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路及粪钙卫蛋白(FC)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组[双歧杆菌活菌胶囊,5 m L(含双歧杆菌活菌0.35 g)]和安肠汤低、中、高剂量组(1、5、10 mL,每mL约相当于生药总量0.11 g),每组15只。除空白组大鼠注入生理盐水外,其余各组大鼠均采用TNBS结合乙醇复合灌肠法建立UC模型。造模成功2 d后,空白组、模型组大鼠灌胃生理盐水5mL,各药物组大鼠灌胃相应药物,每日1次,连续给药14 d。末次给药后,采用苏木精-尹红染色法观察大鼠结肠组织的病理改变;采用Western blotting法检测大鼠结肠组织中TLR4、TNF受体关联因子6(TRAF6)、NF-κB蛋白的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测TLR4、TRAF6、TNF-α、NF-κB m RNA的表达水平;采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清TNF-α、IL-6以及粪便样品中FC的水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠的结肠黏膜严重受损,其结肠组织中TLR4、TRAF6、NF-κB蛋白和TLR4、TRAF6、TNF-α、NF-κb m RNA的表达水平以及血清TNF-α、IL-6及粪便样品中FC水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,各药物组大鼠结肠组织病变均有不同程度的改善,且上述指标水平均显著降低(P<0.05)。结论:安肠汤可能通过调节TLR4/NF-κB信号通路及FC水平来减轻UC模型大鼠的炎症反应。