黄芪当归配伍对气道变应性炎症大鼠Th1/Th2平衡的影响

目的:通过研究黄芪当归配伍对气道变应性炎症模型大鼠鼻黏膜及肺组织IFN-γ、IL-4表达及血清中IFN-γ、IL-含量的影响,探讨黄芪当归配伍治疗气道变应性炎症的作用机制.方法:采用卵清蛋白(OVA)喷雾的方法致敏造成大鼠气道变应性炎症模型,分别用黄芪、当归、黄芪当归配伍灌胃给药治疗.用免疫组化法测定鼻黏膜中及肺组织中IFN-γ、IL-4的表达,ELISA方法测定血清中IFN-γ、IL-4含量.结果:模型血清及肺组织IFN-γ降低,鼻黏膜IFN-γ变化不明显,而血清、鼻黏膜、肺组织中IL-4均升高.黄芪可增加鼻黏膜及血清中IFN-γ,当归组可降低肺组织、鼻黏膜及血清中IL-4.芪归配伍组可增加肺组织及血清中IFN-γ,降低鼻黏膜、肺组织、血清中IL-4.结论:黄芪当归配伍可能通过调节气道变应性炎症中Th1/Th2细胞因子平衡,从而对气道变应性炎症有抑制作用.     

特异性p38蛋白激酶抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Th1/Th2类细胞因子变化的影响

目的:探讨特异性p38蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Th1／Th2类细胞因子(IFN-γ／IL-4)变化的影响。方法:BALB／c小鼠30只随机分成3组:正常对照组、哮喘模型组和SB203580干预组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4和IFN-γ含量,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。结果:与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4水平升高而IFN-γ水平降低(P<0.01);与哮喘模型组比较,SB203580干预组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4水平明显降低,IFN-γ水平明显上升(P<0.01),肺组织病理学改变显著减轻。结论:SB203580能抑制哮喘小鼠的气道炎症反应,纠正IFN-γ／IL-4平衡的失调。     

平喘方干预支气管哮喘模型大鼠Th1/Th2平衡的研究

目的:研究平喘方防治支气管哮喘的作用机理。方法:通过对SD大鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘大鼠模型。于哮喘激发后28d观察空白对照组、哮喘模型组、平喘方组、地塞米松组各组大鼠血清及BALF中IFN-γ/IL-4、肺组织病理。结果:模型组血清及BALF中IFN-γ/IL-4较同期空白对照组明显减少;光镜下,肺内细支气管上皮部分损伤脱落,细支气管壁上平滑肌细胞增生,胶原纤维增多。平喘方组大鼠血清及BALF中IFN-γ/IL-4明显增加;光镜下,支气管壁上胶原纤维减少。结论:平喘方能通过上调IFN-γ、下调IL-4表达,使IFN-γ/IL-4比值有所恢复,明显改善胶原沉积。     

热毒宁对呼吸道合胞病毒感染哮喘模型小鼠的影响

目的：探讨热毒宁（RDN）对呼吸道合胞病毒（RSV）感染哮喘加重小鼠气道炎症的影响。方法：雌性BALB/c小鼠32只,随机分成4组,分别为对照组、鸡卵白蛋白（OVA）组、OVA/RSV组、OVA/RSV/RDN组。无创肺功能检测各组小鼠气道反应性;HE染色观察肺部炎症变化;小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞计数并分类;ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ含量。结果：RSV感染能够加重哮喘小鼠气道炎症与气道高反应性, RDN抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道高反应性（P〈0.05）;RDN显著减少RSV感染哮喘小鼠BALF 中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ含量。结论：RDN可以减轻RSV感染的小鼠气道炎症反应,抑制气道高反应性。     

小儿平喘方对哮喘大鼠血清白细胞介素-4、γ-干扰素水平的影响

目的观察小儿平喘方对哮喘模型大鼠血清中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)含量、IFN-γ/IL-4比值的影响,从而探讨小儿平喘方治疗支气管哮喘的药效机制。方法选取SD大鼠32只,随机分为4组:正常对照组、哮喘模型组、小儿平喘方小剂量组(小剂量组)和小儿平喘方大剂量组(大剂量组),每组8只,采用卵清蛋白(OVA)致敏和雾化吸入激发制备大鼠哮喘模型,用双位点夹心酶联免疫吸附试验测定各组大鼠血清中IL-4和IFN-γ含量。结果与正常对照组比较,哮喘模型组大鼠血清IFN-γ的含量与IFN-γ/IL-4比值均降低(P0.05),而IL-4的含量则显著升高(P0.05);与哮喘模型组比较,大、小剂量组大鼠血清IFN-γ的含量与IFN-γ/IL-4比值均显著升高(P0.01),而IL-4的含量则降低(P0.05)。结论小儿平喘方能显著降低支气管哮喘模型大鼠血清IL-4的含量,提高IFN-γ的含量及失衡的IFN-γ/IL-4比值,从而调节免疫功能,减轻炎症反应,控制哮喘的发作。     

丹皮酚对急性哮喘模型小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素表达的影响

目的观察丹皮酚对急性哮喘小鼠模型气道炎症以及对胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达的影响。方法 BALB/c小鼠48只随机分成正常对照组、哮喘模型组、丹皮酚组、布地奈德组,每组12只。卵蛋白致敏,气道激发,丹皮酚组给予丹皮酚100 mg/kg灌胃,1次/d,末次激发24 h后,检测各组小鼠气道反应性。HE染色观察气道炎症变化;采用ELISA观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-13和血清总IgE的表达,real-time PCR观察TSLP的表达,Western-blot观察TSLP蛋白表达。结果哮喘组小鼠气道炎症和气道高反应性明显加重,丹皮酚能够显著抑制慢性哮喘小鼠模型的气道炎症和气道高反应性,哮喘BALF中Th2细胞因子IL-4、IL-13和血清总IgE含量显著降低。丹皮酚治疗后哮喘小鼠肺组织高表达的TSLP的mRNA和蛋白水平显著降低。结论丹皮酚能够抑制哮喘小鼠模型的气道炎症和气道高反应性,其机制可能通过抑制TSLP的的表达而实现。     

雾化吸入BCG对预防哮喘小鼠气道炎性反应的初步研究

目的探讨卡介苗(BCG)雾化吸入对变应性哮喘的预防作用及其与支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)的关系。方法昆明小鼠40只,随机分成3组,正常对照组、哮喘模型组及预防组。预防组又分为致敏前BCG预防组,激发时BCG预防组和地塞米松预防组。预防组经处理后,与哮喘模型组期制作哮喘模型。观察小鼠气道壁炎症变化,并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定BALF中细胞总数,嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数,用酶联免疫法测定BALF中IFN-γ的含量。结果哮喘模型组BALF中细胞总数和嗜酸细胞数显著高于正常对照组(P<0.01),BALF中IFN-γ水平显著低于正常组(P<0.01);致敏前BCG预防组、地塞米松预防组BALF中细胞数、EOS细胞数显著低于哮喘组,而IFN-γ水平显著高于哮喘组(P<0.01-0.05)。激发时BCG预防组各项指标与哮喘组相比无明显变化。结论雾化吸入BCG能明显抑制哮喘小鼠气道的炎性反应,早期吸入BCG对哮喘小鼠有预防作用。     

支气管哮喘患儿Th1/Th2细胞免疫平衡变化研究

目的探讨支气管哮喘患儿Th1/Th2细胞免疫平衡变化及其机制。方法选择急性发作期支气管哮喘患儿30名作为发作组,选择30名缓解期支气管哮喘患儿作为缓解组,选择30名健康小儿作为对照组,采用流式细胞仪检测各组静脉血Th1、Th2表达情况,采用酶联免疫吸附法检测三组患儿血清IL-4、IL-10、IFN-γ水平,比较各组患者Th1/Th2及血清IL-4、IL-10、IFN-γ表达变化水平。结果发作组静脉血Th1/Th2低于对照组及缓解组,血清IL-4、IL-10水平高于对照组及缓解组,IFN-γ水平低于对照组及缓解组。缓解组静脉血Th1/Th2低于对照组,血清IL-4、IL-10水平高于对照组,血清IFN-γ水平低于对照组。结论支气管哮喘患儿存在Th1/Th2免疫失衡,其可能是小儿支气管哮喘的发病机制之一。     

罗红霉素对哮喘大鼠气道炎症及气道高反应性的影响

目的 观察罗红霉素对哮喘大鼠气道炎症、气道高反应性的影响。方法 30只雄性SD大鼠随机分组和建模,罗红霉素干预28天,检测气道反应性和支气管肺泡灌洗液中的IL-4、IL-5、IFN-γ。结果 罗红霉素组气道反应性以及BALF中IL-4、IL-5低于哮喘组。有显著性差异;结论 罗红霉素具有减轻哮喘大鼠气道炎症和气道反应性。     

支气管哮喘大鼠肺内Th1/Th2失衡及雾化吸入地塞米松的影响

目的观察支气管哮喘大鼠肺组织内T辅助细胞两个亚群(Th1/Th2)的功能状态及地塞米松对其的影响。方法通过卵白蛋白腹腔注射与雾化吸入建立大鼠哮喘模型,并分为哮喘组(A组)、雾化吸入地塞米松组(B组)、正常对照组(C组)。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测地塞米松对哮喘大鼠肺组织IL-4、IL-5以及IFN-γ的mRNA表达的影响,并用光镜观察肺组织支气管壁厚度(WA/Pi)、支气管平滑肌厚度(SMC-A/Pi)及支气管黏膜及黏膜下嗜酸粒细胞(Eos)、淋巴细胞(L)、中性粒细胞(Neu)数量。结果A组肺组织中IL-4、IL-5的mRNA表达及WA/Pi、SMC-A/Pi、支气管黏膜及黏膜下Eos、L、Neu浸润程度显著高于C组(均P<0.001),但在B组中表达降低、浸润程度减轻(与A组相比,P<0.001);B组与C组比较差异也有显著性。A组肺组织中IFN-γ的mRNA表达低于C组(P<0.001),B组与A组比较,IFN-γ的mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。肺组织内IL-4、IL-5mRNA的表达与WA/Pi、SMC-A/Pi的改变以及Eos、L、Neu的浸润呈正相关(P均<0.05),IFN-γ的mRNA表达与上述改变以及Eos、L、Neu的浸润呈负相关(P均<0.05)。结论支气管哮喘大鼠存在Th1/Th2失衡;地塞米松主要通过降低哮喘大鼠肺组织中Th2类细胞因子IL-4和IL-5的基因转录,发挥其抗气道重塑和气道炎症的作用。     

山东地区药用牛蒡子的质量评价

目的对山东地区商品牛蒡子的质量状况进行分析。方法按照《中国药典》2005年版牛蒡子项下方法对性状、显微、总灰分、酸不溶性灰分进行检测。结果发现二批牛蒡子伪品大鳍蓟,比较牛蒡子生品与炮制品炒牛蒡子中牛蒡苷的含量。结论建议增加炒牛蒡子的含量测定等质控项目,严格控制牛蒡子药材质量,保证用药安全。     

高效液相色谱法测定不同地区蔓荆子中蔓荆子黄素的含量

目的:建立蔓荆子的含量测定方法及比较不同样品的含量。方法:高效液相色谱法,色谱柱用Shim-pack ODS(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇 -0.4％磷酸溶液(60:40,pH=2.7),检测波长为258 nm,流速为1.0 mL·min~(-1),柱温32℃。结果:标准曲线线性范围为0.16～0.80 μg(r=0.999 9),回收率为98.15％,对收集到的 14个省(市),16个城市的市售蔓荆子药材,进行了含量测定,不同地区的市售样品蔓荆子黄素的含量差异很大,含量最高的可达0.112 0％,最低的0.027 2％。结论:本方法简便、准确、重复性好,为制定蔓荆子的含量限度提供了依据。     

连翘中连翘苷含量测定方法的试验研究

目的改进高效液相色谱法测定连翘中连翘苷的含量测定方法。方法采用甲醇索氏提取,中性氧化铝柱层析分离纯化、高效液相色谱法测定连翘中连翘苷含量。结果改进了高效液相色谱法测定连翘中连翘苷的含量测定方法。结论该连翘苷含量测定方法准确、重现性好、回收率为97.09%、含量限度制定合理、可行,可较好地控制连翘质量。     

枳实、枳壳挥发油成分比较研究

目的:分析不同产地、不同生长周期及其炮制品中枳实、枳壳挥发油成分差异.方法:采用2010年版《中国药典》附录XD甲法提取挥发油并通过GC-MS法进行成分分析,然后用归一化法计算各成分相对含量.结果:柠檬烯和芳樟醇是枳实、枳壳挥发油中的主要成分,不同产地、不同生长周期及其炮制品中枳实、枳壳挥发油成分存在较大差异.结论:随着生长周期的延长,芳樟醇、alpha-松油醇、香芹酚和香叶醇的含量呈现一定的规律性变化,其中芳樟醇和香芹酚的含量随着生产期的延长而降低,而alpha-松油醇和香叶醇的含量随着生产期的延长而升高.     

苍耳子炮制前后的抗炎、镇痛作用比较

目的：比较苍耳子炮制前后抗炎、镇痛作用的差别。方法：采用二甲苯耳肿胀实验、角叉菜胶足肿胀实验评价苍耳子炒制前后抗炎作用;以小鼠扭体法、热板法观察苍耳子炒制前后的镇痛作用。结果：苍耳子生品、炒品灌胃小鼠0.5,1.0 g·kg^-1剂量,能抑制二甲苯引起的耳肿胀（P<0.05）以及角叉菜胶引起的足肿胀（P<0.05）;对化学刺激性、热刺激性疼痛均有明显的镇痛作用（P<0.05）,并呈现剂量依赖性。苍耳子炒品与生品比较,抗炎、镇痛作用无明显差异（P>0.05）。结论：苍耳子炒制前后具有较好的抗炎、镇痛作用,为其临床应用提供了实验依据。     

枳实、枳壳挥发油化学成分及抑菌活性的比较研究

目的:对比分析不同生长期枳实、枳壳挥发油成分差异,比较不同生长期枳实、枳壳挥发油的抑菌活性。方法:采用药典甲法提取挥发油,通过GC-MS分析枳实、枳壳挥发油的组成;结合枳实、枳壳挥发油的成分差异,对二者挥发油的抑菌活性进行了初步比较研究。结果:枳壳挥发油的抑菌活性总体上较枳实挥发油强。结论:同一来源的枳实、枳壳因生长期不同,挥发油成分和抑菌活性均存在差异。     

五味子和南五味子的HPLC指纹图谱研究

目的对五味子和南五味子药材的HPLC指纹图谱进行研究,完善五味子质量评价和控制的方法。方法采用HPLC测定了10批五味子和10批南五味子样品并建立标准对照指纹图谱,对其余10批样品进行测定。色谱条件:Agilent ZORBAXSB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水梯度洗脱,流速1 mL.min-1,检测波长为240 nm,柱温为30℃。结果建立的指纹图谱能区别五味子和南五味子。结论所建立的五味子和南五味子的HPLC指纹图谱为科学评价和控制五味子样品的质量提供了依据。     

液相色谱法鉴别七味都气丸中五味子与南五味子

目的 鉴别七味都气丸中五味子与南五味子。方法 采用RP-HPLC法，以五味子甲素为参考峰，色谱柱：Supelcosil C18柱;流动相：甲醇-水(65：35)；流速：1．0mL／min；检测波长：254nm。结果 在选定的色谱条件下，提供了稳定可控的药材及制剂液相色谱图；药材及制剂的图谱有较好的相关性。结论 本法能鉴定七味都气丸制剂中鉴别五味子与南五味子；采用色谱技术鉴别中药制剂中的中药材是切实可行的。     

康胃灵片薄层色谱鉴别

目的 为建立康胃灵片的质量标准提供依据.方法 采用薄层色谱法对康胃灵片中的黄芩、连翘、山楂进行了定性分析鉴别.结果 分别鉴别出康胃灵片中的黄芩、连翘和山楂.结论 实验方法简便,重现性好,结果准确,可为建立康胃灵片的质量标准提供依据.     

基于活性成分探讨山茱萸酒制前后干预绝经后骨质疏松症大鼠的动态药效变化及其机制

目的 比较研究山茱萸和酒茱萸中5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)、环烯醚萜苷(莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷)、没食子酸5种活性成分含量差异,并探讨酒制前后山茱萸干预绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)模型大鼠术后30,60,90 d的动态药效变化及其机制。方法 采用Hypersil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 µm),以乙腈(A)-0.3%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.6 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长：240 nm(环烯醚萜苷),274 nm(5-HMF、没食子酸);将雌性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,山茱萸/酒茱萸高、低剂量组,阳性药物组,除假手术组外均采用去卵巢法造模,分别在术后30,60,90 d,检测大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)值、血清中的雌二醇(E₂)、钙(Ca)、磷(P)含量及骨组织显微结构的动态变化。结果 酒茱萸中5种活性成分总含量、5-HMF、没食子酸的含量均高于山茱萸;与模型组比较,酒茱萸高剂量组可升高模型大鼠术后30 ,60 d的E₂、Ca及P的含量(P<0.05),且术后60 d还可升高其BMD值(P<0.05);酒制前后山茱萸高剂量组均可升高模型大鼠术后90 d的BMD值和E₂、Ca及P含量(P<0.05),且酒茱萸高剂量组还可减少骨小梁的断裂及骨髓腔中脂肪细胞的含量。结论 酒制前后山茱萸均可改善PMOP,并以高剂量为优;且酒茱萸可早期干预该症的发生发展。其机制可能与升高E₂水平,减缓骨中Ca、P的丢失,调节骨代谢,延缓BMD值下降有关。酒茱萸中活性成分5-HMF、没食子酸的含量高于山茱萸可能是其药效较优的主要因素之一。