延胡索酸碱提取物HPLC指纹图谱及主成分分析

目的建立延胡索不同浓度酸碱提取物的HPLC指纹图谱,并结合主成分分析法(PCA)评价不同提取物中的化学组分。方法用氨水、冰醋酸配制不同浓度酸碱水溶液,供试品加热回流提取;采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.6%醋酸溶液(pH 5.0)为流动相,进行梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温25℃,流速1 mL/min,构建HPLC指纹图谱,用相似度软件建立共有峰模式;应用SPSS 19.0分析软件,以主要色谱峰峰面积为变量进行PCA分析。结果标定了延胡索不同酸碱提取物HPLC指纹图谱的16个共有峰,并指认了其中6个共有峰,分别为原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢紫堇碱、延胡索乙素和紫堇碱,各批次延胡索提取物的相似度在0.861~0.984;PCA结果表明,前3个主成分的累计贡献率达到91.097%;选择这3个因子对延胡索不同酸碱提取物进行综合评价。结论HPLC指纹图谱结合PCA可以快速、客观地评价延胡索不同酸碱提取物的化学组分差异,并确定酸性溶液更适合延胡索生物碱类成分的提取。     

UPLC-MS/MS法测定不同产地延胡索中原阿片碱、盐酸巴马汀、脱氢紫堇碱、延胡索乙素和延胡索甲素

目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定不同产地延胡索药材中原阿片碱、盐酸巴马汀、脱氢紫堇碱、延胡索乙素和延胡索甲素。方法 采用Waters UPLC HSS T3 C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,以乙腈–0.1%醋酸铵为流动相,梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,柱温40℃,进样量5 μL。ESI正离子模式采集,采集模式：MRM（多反应检测）,离子源温度150℃,毛细管电压3.0 kV,锥孔电压50 V,脱溶剂气流量800 L/h,脱溶剂气温度400℃。结果 原阿片碱、盐酸巴马汀、脱氢紫堇碱、延胡索乙素和延胡索甲素分别在0.20～10.12、0.25～12.58、1.02～51.20、0.85～42.64、0.39～19.44 ng线性关系良好;平均回收率分别为97.48%、100.16%、101.61%、96.05%、104.17%,RSD值分别为1.70%、2.05%、2.55%、0.74%、3.24%。不同产地的延胡索药材中5种生物碱的含量有明显差异,浙江产地延胡索药材中5种生物碱的含量相对其他产地较高,5种生物碱中脱氢紫堇碱的含量最高。结论 UPLC-MS/MS法灵敏度高、测定速度快、准确度高,可用于延胡索药材中5种成分的快速测定。     

RP-HPLC法同时测定金铃子汤中的5个主要活性成分

目的:采用反相高效液相色谱法建立金铃子汤中原阿片碱、黄连碱、巴马汀、延胡索乙素、川楝素含量同时测定的方法。方法:采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05%醋酸水溶液(氨水调pH 6.0),梯度洗脱,流速0.8mL·min-1,检测波长230 nm,柱温30℃。结果:原阿片碱、黄连碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素、川楝素质量浓度分别在1.76～35.2,1.84～36.8,2.20～44.0,2.24～44.8,8.48～63.6μg·mL-1范围内线性良好(r=0.9998～0.9999);平均回收率(n=6)分别为103.5%,101.2%,102.7%,100.9%,97.1%。结论:本方法简单快捷,测定结果准确,适用于金铃子汤中原阿片碱、黄连碱、巴马汀、延胡索乙素、川楝素的含量测定,可为金铃子汤的质量控制或中药配伍等方面给与全面、客观的评价。     

HPLC同时测定不同产地延胡索中的6种生物碱

目的 采用HPLC法同时测定延胡索药材中原阿片碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、脱氢紫堇碱和延胡索乙素等6种生物碱的含量,并比较不同产地、不同商品等级中6种生物碱含量的差异.方法 采用Durashell C18色谱柱(250mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2％冰乙酸溶液(B,三乙胺调pH5.05),梯度洗脱,检测波长280 nm,流速1.0 mL·min-,柱温35℃;用上述方法对48批延胡索药材进行测定,并对结果进行聚类分析.结果 测定了延胡索药材中6种生物碱类成分的含量,在线性范围内的线性关系良好(r2＞ 0.9993),平均回收率为96.19％～97.59％,RSD为1.19％ ～2.81％;48批延胡索样品中6种生物碱均可检测到,不同产地的延胡索中6种生物碱的含量有明显的差异,部分达到显著性差异(P＜0.05).总体来说,不同商品等级延胡索中生物碱的含量无明显差异,二级延胡索质量优于一级;采用聚类分析能将不同产地的48批延胡索药材分为3类.结论 所用方法操作简单、准确、稳定、分离效果好,适用于同时测定延胡索药材中6种生物碱的含量;生物碱的含量受产地、环境因素影响较大,延胡索的品质表现出一定的地域及生境依赖性,商品等级对生物碱的含量无显著影响.     

HPLC波长切换法同时测定沉香舒气丸中9种成分的含量

目的建立并验证同时测定沉香舒气丸中α-香附酮、木香烃内酯、去氢木香内酯、原阿片碱、延胡索乙素、紫堇碱、四氢小檗碱、和厚朴酚、厚朴酚含量的HPLC波长切换方法。方法采用Kromasil Eternity C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为甲醇-乙腈(1∶1),流动相B为0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长分别为250,225,280,294 nm;体积流量0.9 mL·min-1;柱温30℃。结果 9种成分α-香附酮、木香烃内酯、去氢木香内酯、原阿片碱、延胡索乙素、紫堇碱、四氢小檗碱、和厚朴酚、厚朴酚分别在5.79~115.80,7.86~157.20,9.68~193.60,1.07~21.40,3.09~61.80,3.77~75.40,2.09~41.80,15.77~315.40,19.86~397.20μg·mL-1内线性关系良好;平均加样回收率分别为97.95%,98.97%,99.46%,97.37%,98.48%,98.10%,96.90%,99.35%和100.10%,RSD分别为1.35%,1.17%,0.89%,1.57%,1.27%,0.96%,1.09%,0.74%和0.90%。结论所建立的测定方法操作便捷、重复性好,可用于沉香舒气丸的质量控制。     

不同醋制方法对延胡索中延胡索乙素和原阿片碱含量的影响

目的:探讨延胡索不同醋制方法对其延胡索乙素、原阿片碱含量的影响。方法:HPLC法:大连依利特C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.6%冰醋酸(含0.6%三乙胺)(20:80);检测被长为280nm;流速1.0ml·min~(-1);柱温:室温。结果:延胡索乙素、原阿片碱分别在0.25～1.47μg(r=0.999 9),0.20～1.21μg(r=0.999 9)范围呈良好的线性关系,平均回收率分别为104.0%,101.2%,RSD分别为1.8%,1.5%(n=6)。不同醋制方法对延胡索中延胡索乙素和原阿片碱含量影响不一。结论:方法准确,重复性好,延胡索乙素和原阿片碱含量适用于延胡索炮制品的质量控制。临床应用宜规范采用"醋延胡索"。     

HPLC法测定仲景胃灵丸中8种成分及其化学计量学综合评价

目的建立HPLC梯度洗脱法同时测定仲景胃灵丸中茴香醛、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、延胡索乙素、去氢紫堇碱、紫堇碱和四氢小檗碱,并采用化学计量学方法对其结果进行分析评价。方法采用HPLC法,Agilent Zorbax SB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃;乙腈–0.1%冰醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.9 mL/min;进样量10μL;检测波长分别为248 nm(检测茴香醛)、280 nm(检测肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、延胡索乙素、去氢紫堇碱、紫堇碱和四氢小檗碱)。采用统计软件对仲景胃灵丸中8种成分的质量分数进行化学计量学评价。结果茴香醛、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、延胡索乙素、去氢紫堇碱、紫堇碱、四氢小檗碱分别在0.96～24.00、1.78～44.50、20.06～501.50、3.92～98.00、2.89～72.25、2.13～53.25、1.36～34.00、0.59～14.75μg/mL线性关系良好;平均加样回收率分别为96.97%、97.81%、100.04%、99.13%、98.91%、96.89%、97.58%、98.34%,RSD值分别为1.04%、1.51%、0.54%、1.01%、0.92%、1.32%、1.36%、1.41%。化学计量学表明10批仲景胃灵丸聚为3类,主成分1～4是影响仲景胃灵丸整体质量的主要因子。结论以茴香醛、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、延胡索乙素、去氢紫堇碱、紫堇碱、四氢小檗碱同步测定的HPLC法和化学计量学方法可用于仲景胃灵丸多指标质量评价。     

不同干燥方法对醋制延胡索物性及成分溶出的影响

目的 考察不同干燥方法(烘干、晒干、真空干燥、真空冷冻干燥)对醋制延胡索物性以及成分溶出的影响，为醋制延胡索干燥方法筛选提供理论依据。方法 延胡索醋制后，分别进行烘干、晒干、真空干燥和真空冷冻干燥。比较复水率、折干率、硬度等物性参数，同时采用超高效液相色谱(UPLC)法测定醋制延胡索在不同时间段四氢非洲防己碱、原阿片碱、四氢黄连碱、非洲防己碱、延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、去氢紫堇碱8种生物碱的溶出量，多指标结合化学计量学评价不同干燥方法对醋制延胡索饮片质量及成分溶出的影响。结果 醋延胡索烘干后表面收缩，形成相对致密的结构，成分溶出较慢。冷冻干燥后疏松多孔，质地较轻且含水量少，成分溶出快。结论 综合考虑成分含量、复水率、折干率、硬度等多指标，真空冷冻干燥醋制延胡索较其他干燥方法醋制延胡索有显著差异。真空冷冻干燥法处理的醋制延胡索饮片在加水回流提取20 min的成分溶出量明显高于另外3种干燥法处理的饮片，临床煎煮宜选用冷冻干燥法处理的醋制延胡索饮片。     

延胡索中5种生物碱的含量测定及稳定性研究

目的:建立延胡索中5种主要生物碱的含量测定方法,并比较产地初加工方法和炮制方法对延胡索中生物碱含量的影响。方法:采用超声提取法提取样品,以高效液相色谱法测定收集自浙江磐安的多个不同延胡索样品及其炮制品中5种主要生物碱的含量。结果:延胡索丙素、巴马汀、小檗碱、去氢延胡索甲素与延胡索乙素检测浓度的线性范围分别为0.05～0.50、0.05～0.50、0.02～0.20、0.20～2.00、0.20～2.00μg.mL-1,平均加样回收率在96.7%～100.2%之间。延胡索生品根据药典规定的原药材处理方式处理后,其生物碱含量降低一半左右,在此基础上的进一步炮制过程对原药材中5种生物碱的含量影响不大。结论:详备的延胡索原药材制备、炮制与生物碱含量检测方法的制定对延胡索药材的质量稳定将起到重要的作用。     

高速逆流色谱法分离小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱

目的高速逆流色谱法分离纯化小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱。方法采用高速逆流色谱法进行分离,以正已烷．乙酸乙酯．甲醇．水（8：8：12：8,V／V）为溶剂系统．上相为固定相,下相为流动相,转速：800r·min一,流速：2mL·min－1,检测波长：280nm。结果从小花黄蔓总生物碱提取物中分离得到延胡索乙素和原阿片碱。纯度分别可达99．2％和99．6％。结论利用高速逆流色谱法可高效分离和纯化小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱。     

黄连生物碱成分的 HPLC-DAD-MS 分析

目的：优化测定黄连中生物碱成分的高效液相色谱法条件,并用 LC - MS 鉴定黄连中主要生物碱类成分。方法：使用 Zorbax SB C18色谱柱,流动相 A 为乙腈,流动相 B 为水溶液（含20 mmol／ L 乙酸铵和0.5%乙酸）,梯度洗脱,检测波长345 nm。联用电喷雾-离子阱质谱检测器鉴定主要色谱峰的成分。结果：建立了测定黄连中黄连碱、巴马汀和小檗碱三个成分含量 HPLC 方法,黄连碱、巴马汀和小檗碱的线性范围分别为0.0420~0.840μg、0.0448~0.896μg 和0.0502~1.004μg;LC - MS 鉴定了黄连中7个色谱峰。结论：该方法简便、准确、可靠,能用于控制黄连药材及饮片的质量,同时该方法使用溶解性好、易挥发的乙酸铵代替十二烷基硫酸钠（SDS）做离子对试剂,适用于 LC - MS 分析。     

天芎头风片质量标准研究

目的建立天芎头风片的质量标准。方法采用显微鉴别法对方中全蝎进行鉴别;采用薄层色谱法对方中川芎、延胡索进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对天芎头风片中天麻素进行含量测定。结果全蝎的显微鉴别方法专属性强,简单可行。川芎、延胡索的薄层色谱鉴别方法斑点清晰,重现性好。天麻素进样量在0.44-1.31μg范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 5;平均回收率为99.76%,RSD=1.17%（n=6）。结论所建立的方法稳定、准确、重复性好,可用于天芎头风片的质量控制。     

Box-Behnken响应面法优化延胡索配方颗粒的提取工艺

目的优选延胡索配方颗粒中延胡索总生物碱提取的工艺条件。方法采用单因素实验结合Box-Behnken响应面法,以延胡索总生物碱提取率为评价指标进行实验,考察提取时间、水料比和提取次数3个因素对提取工艺的影响。结果根据回归方程确定的最佳提取工艺条件为:提取时间100min;水料比12.5∶1(mL·g-1);提取次数3次。结论采用该工艺条件,延胡索总生物碱的提取率为1.94%,与理论值预测值接近,具有一定的实用价值。     

HPLC测定荆桔抗感合剂中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量

目的：建立用高效液相色谱法测定荆桔抗感合剂中盐酸麻黄碱和和盐酸伪麻黄碱含量的方法。方法采用 C18柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液（5∶95）,流速为1.0 mL·min -1,紫外检测波长为210 nm。结果盐酸麻黄碱线性浓度范围为0.0795~2.385μg（r ＝0.9999）,平均回收率为99.4%,RSD 为0.47%（n ＝6）。盐酸伪麻黄碱线性浓度范围为0.07875~2.3625μg（r ＝0.9999）,平均回收率为100.7%,RSD 为1.09%（n ＝6）。结论本法重复性好,定量准确,可作为该制剂的定量分析方。     

HPLC法测定夏天无注射液中原阿片碱的含量

目的：建立用高效液相色谱法测定夏天无注射液中原阿片碱含量的方法。方法：采用Diamonsil C18（150mm×4．6mm,5μm）色谱柱,柱温：30℃,进样量：10μl,以乙腈-三乙胺醋酸液（18：82）为流动相,流速：1．0ml·min^-1,检测波长：290nm。结果：原阿片碱在17．62—88．10μg·ml^-1范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999）。平均回收率为99．8％,RSD=0．8％。结论：本法准确可靠,可用于夏天无注射液中原阿片碱的含量测定。     

胃乐舒颗粒的质量控制

目的:建立胃乐舒颗粒的质量控制方法。方法:采用薄层鉴别法(TLC)对制剂中主要药味延胡索、旋覆花、山楂、厚朴进行定性鉴别;以HPLC法测定延胡索中延胡索乙素的含量:色谱柱为Agilent SB-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(45:55,磷酸溶液用三乙胺调pH到6),检测波长为226 nm。结果:在薄层色谱中,各供试品色谱,在与对照品或对照药材相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰;延胡索乙素在0.050~0.657 μg范围内线性关系良好,r=1.000 0。结论:该方法操作简单,重复性好,能够有效地控制胃乐舒颗粒的质量。     

麻杏止咳糖浆质量标准研究

目的优化麻杏止咳糖浆的质量标准。方法在原标准基础上,增加了法半夏的TLC鉴别,建立了HPLC法测定盐酸麻黄碱及马兜铃酸A的含量。结果法半夏TLC鉴别斑点清晰、分离度好,阴性样品无干扰;含量测定盐酸麻黄碱对照品质量浓度在10.024~75.180μg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8);平均加样回收率为98.6%,RSD值为1.0%。马兜铃酸A的质量浓度在0.040~1.000μg·mL~(-1)范围内具有良好的线性关系(r=0.999 9);平均加样回收率为97.8%,RSD值为1.3%。结论所用定性、定量方法准确可靠,能有效控制麻杏止咳糖浆的质量标准。     

HPLC法同时测定中药复方乳膏中盐酸小檗碱和阿魏酸的含量

目的建立中药复方乳膏中盐酸小檗碱和阿魏酸的含量测定方法,控制中药复方乳膏的质量。方法采用反相高效液相色谱法,Inertsil ODS-3(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.046mol·L-1磷酸二氢钾(25∶75)为流动相;流速1.0mL·min-1;检测波长338nm;柱温为室温。结果盐酸小檗碱的质量浓度在1.01¹01μg·mL-1范围内线性关系良好,阿魏酸的质量浓度在1.145101μg·mL-1范围内线性关系良好,阿魏酸的质量浓度在1.145¹14.5μg·mL-1范围内线性关系良好。盐酸小檗碱和阿魏酸的平均回收率(n=6)分别为99.6%(RSD=1.7%)和99.7%(RSD=1.1%)。结论该方法操作简便,专属性强,结果准确可靠,可作为中药复方乳膏中盐酸小檗碱和阿魏酸的含量测定方法。     

延胡索HPLC指纹图谱研究

目的建立延胡索药材HPLC指纹图谱,为全面评价延胡索质量提供参考依据。方法色谱柱为Agilent ZORBAX Eclise XDB-C18(150mm×4.6mm,5μm);柱温为25℃;流动相为甲醇-0.1mL·L~(-1)磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0mL·min~(-1);检测波长为280nm。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》对10批延胡索药材指纹图谱进行分析。结果确定了11个共有峰,精密度、稳定性和重复性实验中各共有峰相对保留时间的RSD值均小于2.0%,相对峰面积的RSD值均小于5.0%,建立了延胡索药材HPLC指纹图谱,通过分析得到10批延胡索药材指纹图谱的相似度均大于0.85。结论该方法简单易行,重复性较好,可作为延胡索药材的质量评价方法。     

HPLC波长切换法同时测定理气散结颗粒中4个成分的含量

目的建立同时测定理气散结颗粒中氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和α-香附酮的HPLC波长切换联合梯度洗脱法。方法采用Venusil MP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~15 min,12.0%A;15~31 min,12.0%A→26.0%A;31~39 min,26.0%A→40.0%A;39~45 min,40.0%A→12.0%A),流速0.9 mL/min,波长切换(0~31 min,在230 nm波长下检测氧化芍药苷、芍药内酯苷和芍药苷;31~45 min,在242 nm波长下检测α-香附酮),柱温30℃,进样量为20μL。结果氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和α-香附酮4个成分的质量浓度分别在5.15~103.00μg/mL(r=0.999 6)、8.99~179.80μg/mL(r=0.999 5)、19.83~396.60μg/mL(r=0.999 9)、6.35~127.00μg/mL(r=0.999 3)呈良好线性关系;平均加样回收率及相应的RSD(n=6)分别为96.83%(0.93%)、97.85%(1.31%)、99.71%(0.80%)、98.77%(1.59%)。结论所建立的方法灵敏度高、快速、专属性好、准确度高,为理气散结颗粒的质量控制提供了依据。