阴沟肠杆菌Amp C酶的特性研究

本文对阴沟肠杆菌ＡｍｐＣ酶进行了以下５个方面研究。其内容和结果分别为：（１）联合药敏实验：用平皿二倍稀释法研究第四代头孢菌素头孢吡肟,第三代头孢菌素头孢他啶、头孢噻肟、头孢呋辛与－β－内酰胺酶抑制剂舒巴坦联合对３４株头孢他啶耐药菌,６株头孢他啶中敏菌及１５株头孢他啶敏感菌的体外抗菌活性。结果表明舒巴坦使头孢他啶对３２．７％（１８／５５）的阴沟肠杆菌的抗菌作用有明显抗菌增效作用。９６．４％（５３／５５）的阴沟肠杆菌对第四代头孢菌素头孢吡肟敏感。（２）酶稳定性实验：紫外测定法测定４株标准菌和６株临床分离菌产生的ＡｍｐＣ酶对β－内酰胺类抗生素的水解率。结果表明阴沟肠杆菌产生的β－内酰胺酶对第一代头孢菌素头孢唑林、头孢氨苄,第二代头孢菌素头孢克洛,第三代头孢菌素头孢哌酮及青霉素、氨苄西林、哌拉西林的水解率高,对第二代头     

注射用头孢噻肟钠等6种头孢菌素的体外抗菌活性研究

目的 考察及评价注射用头孢噻肟钠、注射用头孢哌酮钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢他啶、注射用头孢呋辛钠和注射用头孢唑林钠6种头孢菌素的抗菌作用特点。方法 采用琼脂二倍稀释法测定注射用头孢噻肟钠、注射用头孢哌酮钠等6种头孢菌素对临床分离194株致病菌(其中产超广谱β-内酰胺酶41株，产β-内酰胺酶121株、非产酶73株)的MIC值。超声波破碎仪提取粗酶液，用紫外分光光度法测定各抗生素对p内酰胺酶相对水解率。结果 注射用头孢噻肟钠、注射用头孢哌酮钠、注射用头孢曲松钠和注射用头孢他啶4种第三代头孢菌素对临床分离194株致病菌的抗菌活性强于头孢呋辛钠和头孢唑林钠2种第二代头孢菌素。所有头孢菌素对临床分离的ESBLs菌株的耐药性均较非产酶株严重。β内酰胺酶稳定性试验结果表明：头孢哌酮钠、头孢噻肟钠、头孢曲松钠和头孢他啶对SHV-1、SHV-2、SHV-4、SHV-5、TEM-1、TEM-5和D31等β-内酰胺酶的相对水解率分别在40％～90％范围内，均较头孢呋辛和头孢唑林低。结论 头孢噻肟钠、头孢哌酮钠、头孢曲松钠和头孢他啶等4种第三代头孢菌素对临床治疗分离菌株仍具有较好的抗菌作用，但也出现不少耐药菌株。建议临床使用第三代头孢菌素时与酶抑制剂联合应用，提高对耐药菌感染的治愈率。     

比较头孢唑肟与其他14种β内酰胺类抗生素对β内酰胺酶的稳定性

目的研究头孢唑肟对β内酰胺酶，特别是对CTX—M型超广谱酶的稳定性，并与临床常用β内酰胺抗生素比较。方法以超声破碎细菌得粗制β内酰胺酶，紫外分光光度法测定抗菌药物浓度，计算酶对底物水解率，并以头孢噻吩水解率为100％，计算其他被测药物的相对水解率。结果青霉素类以及第1代头孢对各型β内酰胺酶的稳定性均较差；14个酶中，11个对头孢呋辛的相对水解率在50％以下；第3代头孢菌素的酶稳定性较青霉素类及第1，2代头孢菌素增加；头孢唑肟、头孢他啶的酶稳定性最好，与氨曲南、头孢哌酮／舒巴坦、头孢吡肟相当，大多数酶对其相对水解率〈10％，且对CTX—M型酶的稳定性明显优于头孢噻肟和头孢曲松；美洛培南对各型酶均呈高度稳定；MIC值与酶稳定性结果一致。结论头孢唑肟对所测β内酰胺酶稳定性强，与头孢他啶、头孢哌酮／舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南相当，对CTX—M型酶的稳定性优于头孢噻肟、头孢曲松。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶的底物动力学研究

目的:对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌所产β-内酰胺酶进行底物动力学研究。方法:从我院2008年分离并经Nitrocefin鉴定的产β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中各随机挑选4株,以Kirby-Bauer法进行药敏试验检测,采用L-B作图法得出Km和Vmax。结果:8株细菌对β-内酰胺类抗生素均耐药,而对碳青霉烯类抗生素高度敏感;所产β-内酰胺酶对青霉素均有较强的水解作用,对第1代头孢菌素头孢唑林及头孢噻吩也有一定的水解作用,对第2代头孢菌素头孢呋辛和第3代头孢菌素头孢他啶及头孢噻肟的水解活性差异较大。结论:产β-内酰胺酶菌株所致感染首选碳青霉烯类抗生素治疗,不同产酶菌株所产β-内酰胺酶水解底物轮廓有较大差异。     

头孢布烯(Ceftibuten)体外抗菌作用

目的:评价头孢布烯对临床分离的836株致病菌的体外抗菌作用.方法:头孢布烯与头孢克肟、头孢他啶、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢克罗、头孢拉啶、环丙沙星进行比较.结果:头孢布烯对大多数革兰阴性菌具有很强的抗菌活性,如对大肠杆菌、肺炎克雷白杆菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌、沙门菌属、志贺菌属、粘质沙雷菌、阴沟肠杆菌的MIC90值均≤1mg·L-1,优于所测定的其他口服头孢菌素,与头孢他啶、头孢噻肟相似.头孢布烯对淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌也有很强的抗菌活性,但对某些肠杆菌科杆菌如弗劳地枸橼酸杆菌对本品与头孢他定相似不太敏感,MIC90值为8mg·L-1,乙酸钙不动杆菌对本品耐药,MIC90值为32 mg·L-1.头孢布烯对革兰阳性菌除化脓性链球菌外作用均较弱.对肺炎链球菌的MIC50与MIC90值分别为2与4mg·L-1,不及其他所测定的三代头孢菌素.金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、脆弱拟杆菌对头孢布烯耐药.从产酶大肠杆菌及肺炎克雷白菌的体外抗菌作用的结果表明,头孢布烯对产酶菌株具有较强的抗菌活性,MIC90值低于其他所测定的三代头孢菌素.结论:说明本品具有较强的β-内酰胺酶稳定性.细菌接种量、pH值的变化、人血清的含量对头孢布烯的体外抗菌作用无明显影响.     

Sulperazone等抗生素对β－内酰胺酶的稳定性比较

ｓｕｌｐｅｒａｚｏｎｅ与其它抗生素对β－内酰胺酶的稳定性比较结果表明：ｓｕｌｐｅａｚｏｎｅ对１２个标准酶中的１１个酶均高度稳定，对ＴＦＭ－１、ＴＥＭ－２和ＳＨＶ－１的稳定性较头孢酮显著增强，与头孢噻肟相同。对１４个临床分离高度耐药菌所产生的β－内酰胺酶，ｓｕｌｐｅｒａｚｏｎｅ的酶稳定性也较头孢酮显著加强，其中１２个酶对ｓｕｌｐｅｒａｚｏｎｅ的相对水解率较头孢酮降低２．２～８０．２倍。对６个超广谱酶，ｓｕｌｐｅｒａｚｏｎｅ具有较好的酶稳定性，对肺炎克雷伯氏菌Ｎｏ，１０９１、４４７、８７７和异型枸橼酸杆菌Ｎｏ．８８７的酶稳定性好于头孢酮和头孢噻肟，与头孢他啶和氨曲南接近。     

哌拉西林/三唑巴坦对肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的体外敏感性

目的 评价哌拉西林/三唑巴坦对肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的体外敏感性。方法 收集肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌426株,用Kirby-Bauer琼脂扩散法作药敏试验;用表型确认试验检测用广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。结果 426株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中,哌拉西林/三唑巴坦的敏感性为99.53％,与亚胺培南(100％)和头孢哌酮/舒巴坦(100％)相当,明显高于青霉素类抗生素哌拉西林(48.83％)和第二代头孢菌素头孢呋新(60.09％),也高于第三代头孢菌素头孢三嗪(62.91％)、头孢噻肟(64.79％)、头孢哌酮(65.73％)和头孢他啶(88.26％),略优于第四代头孢菌素头孢吡肟(94.37％)。142株(33.33％)菌株经表型确认试验证实为产ESBLs菌;哌拉西林/三唑巴坦对产ESBLs菌的体外敏感性为98.59％。结论 哌拉西林/三唑巴坦对肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的体外抗菌活性与亚胺培南和头孢吸酮/舒巴坦相当,高于第三、四代头孢菌素;哌拉西林/三唑巴坦可作为产ESBLs菌感染的治疗选择。     

泌尿系感染大肠埃希氏菌耐药性分析

目的：了解泌尿系感染大肠埃希氏菌耐药情况。方法：采用纸片琼脂扩散法（K－B法）测定该菌耐药性，并依据NCCLS双纸片法检测产超广谱β－内酰胺酶菌株。结果：亚胺培南＋西拉司丁钠（泰能）最敏感，耐药率为0，其他依次为丁胺卡那霉素、头孢哌酮＋舒巴坦（舒普深）、头孢他啶、呋喃妥因、头孢唑啉、头孢呋新、庆大霉素、喹诺酮类和磺胺类，耐药率均高于80％，260株。大肠埃希氏菌中有28株为产超广谱β－内酰胺酶株，其最有效药物为泰能；丁胺卡那霉素、舒普深、呋喃妥因耐药性较非产酶组明显增强。结论：丁胺卡那霉素及呋喃妥因可作为普通首选药物，泰能为产超广谱β－内酰胺酶株首选药物。     

Sulperazone等抗生素对β—内酰胺酶的稳定性比较

ｓｕｌｐｅｒａｚｏｎｅ与其它抗生素对β－内酰胺酶的稳定性比较结果表明：ｓｕｌｐｅｒａｚｏｎｅ对１２个标准酶中的１１个酶均高度稳定，对ＴＥＭ－１、ＴＥＭ－２和ＳＨＶ－１的稳定性较头孢哌酮显著增强，与头孢噻肟相同。对１４个临床分离高度耐药菌所产生的β－内酰胺酶，ｓｕｌｐｅｒａｚｏｎｅ的酶稳定性也较头孢哌酮显著加强，其中１２个酶对ｓｕｌｐｅｒａｚｏｎｅ的相对水解率较头孢哌酮降低２．２￣８０．２倍。对６个     

头孢他美的体内外抗菌活性

测定头孢他美对临床分离菌株 (包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌 )的体内、体外抗菌活性 ,同时测定了头孢他美对产 β-内酰胺酶菌株的最低抑菌浓度及它对 β-内酰胺酶的稳定性。并与头孢噻肟、头孢哌酮、头孢呋辛、头孢曲松等 4个头孢菌素做了比较。结果表明头孢他美具有和它们相似的抗菌活性 ,而且具有很强的β-内酰胺酶稳定性。     

氨曲南和亚胺培南对β－内酰胺酶稳定性和抑酶效应的研究

用紫外分光光度法．以其它青霉素类、头孢菌素类抗生素为对照．研究氨曲南（Ａｚｔｒｅｏｎａｍ．ＡＺ）和亚胺培南（Ｉｍｉｐｅｎｅｍ．ＩＭＰ）对１１种标准β－内酰胺酶的稳定性及抑酶作用。结果表明．ＡＺ．ＩＭＰ与第三代头孢菌素头孢噻甲羧肟．头孢氨噻类似，对１１种标准β－内酰胺酶均高度稳定。除酶Ｋ１对头孢氨噻相对水解率达２５％外．其余均不超过１５％．其余的青霉素类及第一、二代头孢菌素类，除头孢西丁酶稳定性较好外．均对β－内酰胺酶不稳定．大多数相对水解率１００％以上。抑酶结果表明．ＡＺ或ＩＭＰ对β－内酰胺酶抑制，除与β－内酰胺酶类型有关外．还与ＡＺ或ＩＭＰ本身浓度密切关联。     

头孢呋辛/他唑巴坦对β内酰胺酶稳定性及抑酶增效作用

目的观察在头孢呋辛(第2代头孢类抗生素)中加入不同配比他唑巴坦后,对β内酰胺酶的稳定性及抑酶保护作用。方法以超声破碎细菌,得粗制β内酰胺酶,紫外分光光度法测定抗菌药物浓度,计算酶对底物水解率,并以头孢呋辛水解率为100%,计算不同配比头孢呋辛/他唑巴坦的相对水解率和抑酶保护率。结果头孢呋辛中加入他唑巴坦后,β内酰胺酶对其水解率较单用头孢呋辛下降;对大多数菌株,相对水解率<30%,抑酶保护率>70%,3种配比与单用头孢呋辛比较有非常显著性差异(P<0.01)。结论他唑巴坦有很好的抑酶作用,提高了头孢呋辛对革兰阴性杆菌所产β内酰胺酶的稳定性。     

多重耐药大肠杆菌β—内酰胺酶的初步研究

用Ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ法检测到多重耐药大肠杆菌ＨＸ８８１０８及其４株质粒转化菌内均含有β－内酰胺酶，酶稳定性实验显示大肠杆菌ＨＸ８８１０８的４个质粒所编码的β－内酰胺酶对８种β－内酰胺类抗生素的水解率及对头孢哌酮的水解扫描光谱各不相同，ＰＡＧＥ实验表明大肠杆菌ＨＸ８８１０８内含有几条β－内酰胺酶条带，４个质粒编码的β－内酰胺酶条带在凝胶上的位置互不相同，但都与大肠杆菌ＨＸ８８１０８的１条β－内酰胺     

临床分离肺炎克雷伯菌234株药敏结果分析

目的分析临床痰标本分离的234株肺炎克雷伯菌的耐药情况,指导临床合理用药。方法采用手工法和桓星半自动细菌分析仪、桓星细菌鉴定与生化反应板,对234株肺炎克雷伯菌进行细菌鉴定和药物敏感试验（药敏试验）。采用琼脂纸片扩散法,用头孢噻肟和头孢噻肟／克拉维酸以及头孢他啶和头孢他啶／克拉维酸纸片进行超β-内酰胺酶检测。结果2013年1—10月因上呼吸道感染而送检的3418份合格痰标本,共检出234株肺炎克雷伯菌,其中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌78株,占分离肺炎克雷伯菌总数的33.3％。产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性最低的是亚胺培南,耐药率为5．1％,耐药率在50％以上、90％以下的有氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、复方新诺明、氯霉素、呋喃妥因（对其他抗菌药物）均有不同程度的耐药。而非产ESBLs肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢唑林保持高度耐药,耐药率分别为85．2％和80．2％。对第三代、第四代头孢菌素和碳青酶烯类和单环β-内酰胺类抗菌药物呈高度敏感,敏感性为90％-100％;而对其他类抗菌药物均有不同程度的耐药。结论临床抗感染用药应根据实验室分离菌株和菌株的药敏试验结果,合理选择有针对性的敏感抗菌药物。以避免耐药现象的发生。     

用头孢呋辛后出现高热伴三叉神经痛1例

用头孢呋辛后出现高热伴三叉神经痛１例莫美娟，杨澜帆（浙江省绍兴市人民医院，绍兴３１２０００）关键词头孢呋辛；支气管扩张；三叉神经痛；发热头孢呋辛（ｃｅｆｕｒｏｘｉｍｅ）属第２代头孢菌素类抗生素，可抵抗大多数的β－内酰胺酶，对大部分革兰阳性菌、革兰阴性...     

多重耐药大肠杆菌β－内酰胺酶的初步研究

用Ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ法检测到多重耐药大肠杆菌ＨＸ８８１０８及其４株质粒转化菌内均含有β－内酰胺酶；酶稳定性实验显示大肠杆茵ＨＸ８８１０８的４个质粒所编码的β－内酰胺酶对８种β－内酰胺类抗生素的水解享及对头孢哌酮的水解扫描光谱各不相同；ＰＡＧＥ实验表明大肠杆菌ＨＸ８８１０８内含有几条β－内酰胺酶条带，４个质粒编码的β－内酰胺酶条带在凝胶上的位置互不相同，但都与大肠杆菌ＨＸ８８１０８的１条β－内酰胺酶条带的位置相同。以上结果提示：大肠杆菌ＨＸ８８１０８内的４个质粒编码４种不同的β－内酰胺酶，从而介导大肠杆菌ＨＸ８８１０８对多种β－内酰胺类抗生素耐药。     

铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶检测及其对20种抗生素的耐药分析

目的 了解本地区铜绿假单胞菌临床分离株产诱导型β-内酰胺酶的情况及其耐药性。方法 采用美国DADE产MicroScan AutoScan—4型微生物分析仪及其NC21鉴定板检测128株铜绿假单胞菌对20种抗生素的敏感性，用符合NCCLS标准的Version 22分析软件对128株铜绿假单胞菌产诱导β-内酰胺酶情况进行分析。结果 (1)铜绿假单胞菌对头孢他啶、哌拉西林／三唑巴坦、环丙沙星、阿米卡星、头孢吡肟、亚胺培南的敏感性高达62．6％—80．0％之间，妥布霉素、哌拉西林、庆大霉素次之，而其他头孢菌素敏感性低下；(2)128株铜绿假单胞菌产β-内酰胺两者115株(89.8％)，在产诱导型β-内酰胺酶菌株中，哌拉西林／三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、氨曲南诱导铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶的出现率为64．3％—86．1％；(3)产诱导型β-内酰胺两株对哌拉西林／三唑巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、妥布霉素等抗生素的敏感性显著高于不产诱导型β-内酰胺酶株，而氨苄西林／舒巴坦、SMZ／TMP的敏感性则完全相反(P＜0．05或0．005)。结论 本地区抗生素诱导铜绿假单胞菌产诱导型β-内酰胺酶率较高，哌拉西林／三唑巴坦、头孢他啶、哌拉西林、氨曲南是强诱导剂，对于产酶菌株可选择环丙沙星、阿米卡星或联合使用耐酶的抗生素。     

头孢西丁,头孢呋辛体外抗菌活性的比较性研究

本文对比研究了头孢西丁和头孢呋辛对４２０株临床分离菌株，包括革兰氏阳性、阴性菌的体外抗菌活性，并测定了它们对１５株产β－内酰胺酶标准菌株的最低抑菌浓度。结果发现，革兰氏阳性球菌中，头孢西丁除对甲型溶血性链球菌的作用稍弱外，对其它阳性球菌的作用均稍强于或等于头孢呋辛；对革兰氏阴性杆菌中的痢疾志贺氏菌、伤寒沙门氏菌、变形菌、大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌，头孢西丁的抗菌作用均强于头孢呋辛，而对其它受试阴性杆菌的作用与头孢呋辛相近似。头孢西丁对产染色体介导的β－内酰胺酶Ｋ－１、Ｄ３１及除ＰＳＥ－１、ＰＳＥ－２、ＳＨＶ－１之外的其它质粒介导的β－内酰胺酶的标准菌株的体外抗菌活性极明显地强于头孢呋辛     

肺炎克雷伯氏菌中超广谱β—内酰胺酶特性研究及体外选择高产酶突变株

报道英国近年来肺炎克雷伯氏菌所致的６次院内感染爆发流行中所分离到的６株肺炎克雷伯氏菌中超广谱ＳＨＶ型β－内酰胺酶研究及体外选择高产酶突变株。ＰＣＲ结果显示这６株肺炎克雷伯氏菌均产生ＳＨＶ型β－内酰胺酶，对头孢噻肟、头孢他啶耐药，其ＭＩＣ分别为４～６４及８～＞６４ｍｇ／Ｌ。其耐药性可通过接合试验传递给大肠埃希氏菌Ｋ１２Ｊ６２．１。６株大肠埃希氏菌感受株（ｔｒａｎｓｃｏｎｊｕｇａｎｔｓ）质粒琼脂糖电泳结果显示获得一平均大小为１００ｋｂ的大质粒。６株肺炎克雷伯氏菌的大肠埃希氏菌感受株的β－内酰胺酶等电点除一株菌为８．２外，其余为７．６。体外选择高产酶突变株结果显示除其中３株大肠埃希氏菌感受株已经是高产酶株外，其余３株均能为２～６４ｍｇ／Ｌ头孢噻肟诱导成高产酶突变株。高产酶株对头孢噻肟、头孢他啶耐药性增至２～６４倍。说明体外易于选择高产超广谱ＳＨＶ型β－内酰胺酶突变株     

氨曲南和亚胺培南对β—内酰胺酶稳定性和抑酶效应的研究

用紫外分光光度法，以其它青霉素类，头孢菌素类抗生素为对照，研究氨曲南和亚胺培南对１１种标准β－内酰胺酶的稳定性及抑酶作用。结果表明，ＡＺ，ＩＭＰ与第三代头孢菌素头孢噻甲羟肟，头胞氨噻类似，对１１种标准β－内酰胺酶均高度稳定。除酶Ｋ１对头孢氨相对水解率达２５％外，其余的青霉素类及第一，二代头孢菌素类，除头孢西丁酶稳定性较好外，均对β－内酰胺酶不稳定，大多数相对水解率１００％以上，抑酶结果表明，ＡＺ或