TGF-β1、 Smad2在胆道闭锁肝纤维化中的作用

目的 研究转化生长因子（TGF）-β1与Smad2蛋白在胆道闭锁（BA）肝组织中表达情况及在肝纤维化进程中的作用。方法 选取2010年1月—2014年7月尸检（患儿死于非肝胆疾病,正常对照组）5例,胆管扩张症肝活检（胆扩组）10例,BA肝活检（早期肝纤维化组）19例,BA晚期进行肝移植患者自体肝活检（晚期肝硬化组）11例,采用HE染色观察肝标本纤维化评价其纤维化程度,免疫组化染色检测TGF-β1与Smad2蛋白在肝组织中的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）方法检测肝组织中TGF-β1与Smad2基因表达情况。结果 HE：正常对照组肝组织无胶原纤维增生,胆扩组有轻度纤维细胞增生,早期肝纤维化组胶原纤维增生、桥接纤维化现象显著,而晚期肝纤维化组假小叶显著。免疫组化：TGF-β1蛋白平均光密度值在早期肝纤维化组表达最高（P<0.05）;Smad2蛋白在4组间表达差异无统计学意义。qRT-PCR：胆扩组、早期肝纤维化组和晚期肝纤维化组三组肝内TGF-β1、Smad2 mRNA含量均为早期组最高（P<0.017）。结论 BA 肝纤维化早期TGF-β1、 Smad2促进纤维化至P-P、P-C型桥样结构形成;随着纤维化程度加重,TGF-β1、 Smad2表达促纤维化作用逐渐减弱。     

整合素αvβ8、p38及ERK1/2在胆道闭锁患儿肝脏中的表达及意义

目的 研究转化生长因子（TGF） -β1 通路相关调节蛋白整合素αvβ8、p38 及细胞外调节蛋白激酶 1/2（ERK1/2）蛋白在胆道闭锁（BA）患儿肝脏中的表达情况及在肝纤维化进程中的作用。 方法 选取天津市儿童医院普外科收治的 BA 患儿 15 例为 Kasai 组, 胆管扩张症患儿 10 例为胆扩组; 天津市第一中心医院小儿器官移植科行Kasai 手术后因肝功能衰竭行肝移植的 BA 患儿 10 例为肝移植组。 取患儿肝右叶前缘标本, 行 HE 染色观察肝纤维化程度, 行免疫组化染色检测αvβ8、p38 及 ERK1/2 在肝组织中的表达情况。 结果 HE 染色示, 胆扩组偶见纤维细胞增生; Kasai 组汇管区增宽, 纤维组织增生、桥接纤维化现象普遍, 可见假小叶形成; 移植组汇管区明显增宽, 纤维组织增生较重, 广泛桥接纤维组织形成, 假小叶明显。 免疫组化染色示, 胆扩组αvβ8 和ERK1/2 表达为弱阳性, p38为阴性表达; Kasai 组αvβ8、p38 及 ERK1/2 蛋白均在肝细胞胞质、汇管区胆管上皮细胞胞质及血管内皮细胞胞质中强阳性表达; 肝移植组αvβ8、p38 及 ERK1/2 蛋白皆为强阳性表达。 Kasai 组和肝移植组αvβ8、p38 及 ERK1/2 表达水平明显高于胆扩组（均 P＜ 0.05）, Kasai 组与肝移植组比较差异无统计学意义。 结论 αvβ8、p38 及 ERK1/2 表达在BA 肝纤维化过程中明显增高, αvβ8、p38 及 ERK1/2 可能参与并促进 BA 肝纤维进程。     

BMP-7对TGF-β_1诱导人肾小管上皮细胞外基质表达的影响

目的观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对TGF-β1诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2)细胞外基质(ECM)成分表达的影响,以探讨其延缓肾间质纤维化病变的作用机制。方法将体外培养的HK-2细胞分为空白对照组,3μg.L-1TGF-β1组,BMP-7组,TGF-β1加不同浓度BMP-7组。免疫荧光检测FN的表达;RT-PCR和Western blot分别检测FN、ColⅠα1mRNA及蛋白的表达。结果免疫荧光检测结果显示,3μg.L-1TGF-β1刺激HK-2细胞48h后,FN表达明显增强;加入200μg.L-1BMP-7干预后荧光明显减弱。RT-PCR和Western blot结果显示,TGF-β1刺激HK-2细胞48h后,FN、ColⅠα1mRNA及蛋白表达均明显高于对照组(P<0.01);BMP-7(100～400μg.L-1)可在mRNA及蛋白水平呈剂量依赖性下调TGF-β1诱导的FN、ColⅠα1的表达。结论BMP-7能抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞FN、ColⅠα1的合成。表明BMP-7抑制肾小管间质纤维化的进展、改善肾功能的作用,部分是通过抑制肾小管上皮细胞分泌细胞外基质实现的。     

新型多肽AMPP2在TGF-β1诱导的系膜细胞增殖中的作用及其机制

目的 探究新型多肽AMPP2在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的小鼠系膜细胞增殖中的作用及相关机制。方法 体外用TGF-β1(10μg/L)及AMPP2(10 ng/L)干预系膜细胞,分为Control组、AMPP2组、TGF-β1组及TGF-β1+AMPP2组。CCK-8法检测各组系膜细胞增殖活力;Western blot法检测各组细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)-4、CDK-6、细胞增殖核抗原(PCNA)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)及磷酸化的SMAD同源物3/SMAD同源物3(p-SMAD3/SMAD3)的蛋白表达水平;qPCR法检测各组α-SMA、COL-Ⅰ、FN的m RNA表达水平。结果 与Control组相比,TGF-β1组系膜细胞增殖活力增加(P<0.05),与TGF-β1组相比,TGF-β1+AMPP2组系膜细胞增殖活力下降(P<0.05);与Control组相比,TGF-β1组CDK-4、CDK-6、PCNA蛋白以及α-SMA、COL-Ⅰ、FN蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05),与TGF...     

排钱草生物碱对乙醛刺激的人源肝星状细胞增殖及细胞外基质的影响

目的 研究排钱草生物碱对乙醛刺激的人源肝星状细胞（LX-2）的增殖抑制作用及其对细胞外基质生成的影响。方法 采用MTT法检测排钱草生物碱对乙醛刺激下人源肝星状细胞的增殖的作用;LDH比色法检测排钱草生物碱对LX-2的细胞毒性;运用Real-time PCR技术检测细胞中α-SMA、Co1-Ⅰ、MMP-2及TIMP-1 mRNA的表达情况。结果 排钱草生物碱对乙醛刺激下的肝星状细胞的增殖具有明显抑制作用,呈剂量依赖性。排钱草生物碱各剂量组培养上清液中LDH活力差异无显著性。LX-2细胞中的α-SMA、Co1-Ⅰ、及TIMP-1 mRNA随药物浓度增加,其表达下降,MMP-2 mRNA表达上升。结论 排钱草生物碱可能通过抑制LX-2细胞的增殖和减少细胞外基质的合成,从而发挥抗肝纤维化作用。     

茶条槭总黄酮提取物抗小鼠肝纤维化作用及其机制研究

目的研究茶条槭总黄酮提取物(AF)对四氯化碳(CCl 4)致小鼠肝纤维化的保护作用及其作用机制。方法将60只小鼠随机分为模型组、空白对照组、茶条槭总黄酮提取物(AF)高、中、低剂量组(给药剂量分别为400,200和100 mg·kg^-1)和秋水仙碱组(4 mg·kg^-1)。除空白对照组外,其余5组用0.4 g·mL^-1的CCl 4腹壁皮下注射复制小鼠肝纤维化模型,用HE及Masson染色观察肝组织病理变化,用生化试剂盒检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和层黏连蛋白(LN)的含量以及Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的表达水平;用Elisa法检测血清白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平;用免疫组化染色检测小鼠肝脏α-肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;用Real-time PCR检测肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和信号转导分子-2(SMAD2)mRNA的表达情况;用Western blot技术检测肝组织TGF-β1和SMAD-2的蛋白表达水平。结果与模型组比较,AF高、中剂量组血清ALT、AST、LN含量及Col-Ⅳ、IL-8和IL-6水平均明显降低(P<0.05),肝组织α-SMA表达水平显著下降,CCl 4引起的小鼠肝损伤及纤维化程度明显减轻,肝组织TGF-β1、SMAD2 mRNA及蛋白表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论AF可减轻实验性小鼠肝损伤并改善肝纤维化程度,其作用机制可能与抑制TGF-β1/SMAD通路的激活有密切关系。     

槲皮素通过miR-101/EZH2轴介导的EMT途径改善NSCLC吉西他滨耐药的机制研究 #br#

目的 从微小RNA-101（miR-101）/Zeste基因同源蛋白2（EZH2）轴的角度探究槲皮素逆转非小细胞肺癌 （NSCLC）上皮间质转分化（EMT）及吉西他滨（Gb）耐药性的分子机制。方法 用不同浓度槲皮素培养A549及A549/ Gb，CCK-8法筛选适宜的槲皮素浓度进行后续试验；取A549细胞分为空白组、A549+EMT诱导剂组、A549+槲皮素 组、槲皮素+EMT诱导剂组；A549细胞和A549/Gb分为A549组、A549/Gb组、A549/Gb+槲皮素组、A549/Gb+EMT诱导 剂组、miR-101-inhibitor组、槲皮素+miR-101-inhibitor组、miR-NC组；实时荧光定量PCR（qPCR）检测各组miR-101 表达水平；Western blot法检测EZH2、转化生长因子（TGF）-β1、果蝇母亲DPP同源物4（SMAD4）、p-SMAD4和EMT标 志蛋白E钙黏蛋白（E-cadherin）、N钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达；CCK-8法检测各组细胞光密度 （OD）值，并计算半数抑制浓度（IC50）及耐药指数（IR）。结果 槲皮素对A549及A549/Gb的IC50分别为64、128 μmol/L。 EMT诱导剂增强A549细胞EMT特性（N-cadherin及Vimentin表达升高，E-cadherin表达降低）后，A549细胞miR-101 表达降低，EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达水平，IC50及IR升高（P＜0.05）；槲皮素可抑制A549细胞EMT 特性、降低IC50及IR，并上调miR-101，抑制EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达（P＜0.05）；EMT诱导剂可逆 转槲皮素的上述作用（P＜0.05）。与 A549 细胞相比，A549/Gb 细胞的 EMT 特性增强，IC50、IR、EZH2、TGF-β1、pSMAD4/SMAD4表达均升高（P＜0.05）；抑制miR-101或EMT 诱导剂处理，均可进一步增强A549/Gb 细胞的EMT 特 性，升高IC50、IR，上调EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达（P＜0.05）；槲皮素可抑制A549/Gb细胞的EMT进 程、降低其IC50、IR及EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达（P＜0.05）；抑制miR-101表达可逆转槲皮素的上述 作用（P＜0.05）。结论 槲皮素可通过上调miR-101，抑制EZH2表达，进而抑制EMT进程，降低NSCLC细胞耐药性。     

高表达SUMO蛋白对人肝星状细胞LX-2纤维化的影响

目的研究在体外培养的人肝星状细胞LX-2中高表达SUMO蛋白对LX-2纤维化指标的影响。方法采用脂质体瞬时转染法分别将SUMO-1／2／3的高表达质粒转染入LX-2细胞中,分别运用RT-PCR和Western Blot检测a-SMA、Collagen I、MMP-2、TIMP-1的mRNA和蛋白表达量。结果转染质粒48h后a—SMA、Collagen I的mRNA和蛋白表达水平显著降低（P〈0．05）,MMP-2、TIMP-1的mRNA表达量亦显著降低（P〈0．01）,但MMP-2和TIMP-1的蛋白表达水平无明显影响。结论高表达SUMO蛋白能抑制人肝星状细胞LX-2的纤维化过程。     

贝那普利对肝纤维化大鼠TGF-β1和α-SMA影响的研究

目的研究贝那普利对大鼠肝纤维化程度及对肝纤维化大鼠TGF～β1和α-SMA表达的影响。方法建立40％CCL诱导的大鼠肝纤维化模型,42只大鼠分为对照组（n=10）、模型组（n=16）、观察组（n=16）。对3组大鼠肝组织进行HE染色、网状纤维染色、免疫组织化学染色,观察肝组织病理变化、纤维增生及TGF—β1和α-SMA的表达情况。结果模型组的肝纤维化程度、TGF—β1阳性表达、α-SMA阳性表达计分明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;观察组的肝纤维化程度、TGF—β1阳性表达、α-SMA阳性表达计分明显低于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论贝那普利可有效降低肝组织TGF—β1和α—SMA的表达,从而抑制大鼠肝纤维化的进程。     

磷脂酰肌醇蛋白多糖3对胆道闭锁患儿的诊断价值及与肝纤维化的关系

摘要：目的　探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖3（GPC3）在胆道闭锁（BA）患儿中表达水平及其与肝纤维化的关系。方法　收集BA患儿41例（BA组）、胆总管囊肿（CC）患儿9例（CC组）、肝功能正常无其他肝胆疾病的体检健康婴儿12例（NC组）。用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测3组血清GPC3水平,使用受试者工作特征（ROC）曲线评估GPC3对BA的辅助诊断价值。留取BA组和CC组肝组织样本,通过免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测GPC3在患儿肝组织中表达水平,分析BA患儿GPC3与肝纤维化分级的关系。结果　（1）BA组GPC3水平高于CC组和NC组（χ2=24.170,P＜0.01）。BA组内日龄≤30 d（21例）及＞30 d的患儿（20例）血清GPC3水平差异无统计学意义,但均高于CC组和NC组（χ2=24.210,P＜0.01）。BA组内Ⅰ~Ⅱ级与Ⅲ~Ⅳ级患儿GPC3水平差异无统计学意义,但均高于CC组和NC组（χ2=24.390,P＜0.01）。GPC3诊断BA的ROC曲线下面积为0.878（95%CI：0.792~0.965,P＜0.01）,敏感度为82.93%,特异度为80.95%,最佳临界值为0.639 μg/L。（2）肝组织免疫组织化学检测结果显示,BA组肝组织中GPC3表达较CC组明显升高（Z=3.565,P＜0.01）;肝组织中GPC3的含量与肝纤维化分级呈正相关（rs=0.619,P＜0.01）。BA组GPC3 mRNA表达较CC组上调（Z=7.361,P＜0.05）。结论　血清GPC3对BA的诊断及鉴别诊断有一定临床价值;BA肝组织中GPC3表达上调,其表达量与胆道闭锁的肝纤维化分级呈正相关。     

Aucubin and its hydrolytic derivative attenuate activation of hepatic stellate cells via modulation of TGF-β stimulation

Eucommia ulmoides is an important traditional Chinese medicine and has been used as a tonic with a long history. Aucubin is an active component extracted from Eucommia ulmoides, which has liver-protection effects. However the mechanisms are still unclear. To investigate the inhibitory effects and the underlying mechanisms of aucubin on TGF-β1-induced activation of hepatic stellate cells and ECM deposition, Human hepatic stellate cells (LX-2 cells) were incubated with TGF-β1 to evaluate the anti-fibrotic effect of aucubin. Western blot was used to investigate the expression of α-SMA, Col I, Col III, MMP-2 and TIMP-1. ROS production was monitored using DCFH-DA probe, and NOX4 expression was detected by Real-time PCR. Results indicated that TGF-β1 stimulated the activation and ECM deposition of LX-2 cells. Compared with the control group, aucubin and aucubigenin both reduced the protein expression of α-SMA, Col I, Col III and MMP-2 in LX-2 cells. Aucubin and aucubigenin also suppressed the generation of ROS and down-regulated the NOX4 mRNA expression. Taken together, aucubin and aucubigenin both inhibit the activation and ECM deposition of LX-2 cells activated by TGF-β1. Aucubin and aucubigenin are potential therapeutic candidate drugs for liver fibrosis.     

FAK抑制剂对人肝星状细胞Akt/GSK-3β/β-catenin信号通路的影响

目的：探讨FAK抑制剂（PF562，271）对人肝星状细胞（LX-2）Akt/GSK-3β/β-catenin信号通路的影响，为抗肝纤维化寻找新的作用靶点。方法：CCK-8法检测不同浓度范围（0~7 μmol·L^-1）FAK抑制剂（PF562，271）在12、24、48 h和72 h时对LX-2细胞增殖的影响，Real-time PCR分析PF562，271对LX-2细胞中α-SMA、Collagen Ⅰ mRNA表达水平的影响，Western-blot检测不同浓度PF562，271对LX-2细胞中Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin蛋白表达的影响，评价PF562，271对LX-2细胞中Akt/GSK-3β/β-catenin信号通路的影响。结果：PF562，271能够抑制LX-2细胞增殖，且该作用呈剂量和时间相关性；qRT-PCR检测到PF562，271能够抑制LX-2细胞中α-SMA、collagen ⅠmRNA表达，与对照组相比，表达量显著降低（P<0.05）；Western-blot结果显示PF562，271对Akt/GSK-3β的磷酸化表达水平显著降低（P<0.05）。结论：FAK抑制剂能够抑制LX-2细胞增殖，促进其凋亡，其作用机制可能是通过抑制Akt/GSK-3β/β-catenin信号通路从而缓解肝纤维化进程。     

Ameliorative effect of grape seed proanthocyanidin extract on thioacetamide-induced mouse hepatic fibrosis

The present study was designed to examine the effect of the grape seed proanthocyanidin extract (GSPE) on developing hepatic fibrosis that was induced by thioacetamide (TAA) in mice. Administration of TAA for 9 weeks led to a serious necrosis and apoptosis of the parenchymal cells, which resulted in an accumulation of excessive collagen in the liver and an increase of transformed hepatic stellate cells (HSCs). In addition, the mRNA expression of transforming growth factor β1 (TGF-β1), α-smooth muscle actin (α-SMA), as the marker of the activated HSCs, and α1-(I)-collagen were all up-regulated significantly when compared with the control. However, combined oral administration of GSPE at 100mg/kg suppressed the mRNA expression of TGF-β1 and α-SMA, with decreased collagen accumulation as demonstrated by histomorphological evaluation and quantitative RT-PCR. The mRNA expression of the pro-inflammatory factors, including inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2), was remarkably enhanced by TAA treatment. However, their levels displayed a down-regulated trend beyond simultaneous GSPE treatment. Moreover, GSPE administration markedly suppressed lipid peroxidation. In conclusion, as a plant antioxidant, GSPE manifested effective hepatocellular protective action to ameliorate the developing liver fibrosis induced by chronic TAA administration in mice.     

JAK/STAT途径调节瘦素诱导的肝星状细胞Ⅰ型胶原基因的表达

目的研究瘦素对肝星状细胞(HSC)α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成的影响,探讨Janus激酶/信号传导及活化转录因子(JAK/STAT)信号传导通路在瘦素诱导的HSC胶原基因表达过程中的作用。方法采用RT-PCR法、ELISA法和Western blot法分别检测不同浓度的瘦素对人肝星状细胞株LX-2α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达、蛋白合成以及JAK1、STAT3磷酸化状态的影响;采用Western blot法和RT-PCR法分别观察JAK1抑制剂AG490对瘦素诱导的JAK1磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达的影响;采用Western blot法分别观察AG490、LX-2转染STAT3反义寡核苷酸(STAT3-ASON)对瘦素诱导的STAT3磷酸化状态的影响;应用RT-PCR法检测LX-2转染STAT3-ASON对瘦素诱导的α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达的影响。结果瘦素增加LX-2α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成,呈剂量效应关系,当瘦素浓度为80μg·L-1时达到最大值;瘦素促进JAK1、STAT3磷酸化,呈时间效应关系;AG490完全阻断瘦素诱导的JAK1、STAT3磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA的表达;LX-2转染STAT3-ASON阻断瘦素诱导的STAT3磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA的表达。结论瘦素通过增加HSCα1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成而在肝纤维化发生发展过程中发挥重要的作用,JAK/STAT信号传导通路参与并调节该过程,AG490和LX-2转染STAT3-ASON可有效阻滞此传导途径。在人HSC中,活化的JAK1和STAT3信号可作为肝纤维化治疗新的分子靶点。     

Di(2-ethylhexyl) phthalate promotes hepatic fibrosis by regulation of oxidative stress and inflammation responses in rats

Di(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) is an environmental pollutant that is widely used in medical and consumer products. An epidemiological study has suggested that a large daily intake of DEHP from phthalate-contaminated food may be a risk factor for liver dysfunction. Long-term exposure to DEHP is associated with liver disease and exacerbates the progression of chronic liver injury. However, the effect of DEHP on hepatic fibrosis is rarely studied. In the present study, we sought to determine the effect of DEHP on carbon tetrachloride (CCl4)-induced liver fibrosis, and to further examine the molecular mechanisms. We found that DEHP exposure remarkably promoted liver inflammation, necrosis and fibrosis, and increased expression of the protein associated with liver inflammation and fibrogenesis, including α-SMA, COL-Ⅰ, COL-Ⅲ, TGF-β1, P-Smad2, P-Smad3, P-p38 and P-p65. The similar trend was observed in the LX-2 cells. Furthermore, DEHP exposure induced oxidative stress and inflammatory cytokine production. Taken together, DEHP might play a fibrotic role in hepatic fibrosis rats and TGF-β1-stimulated LX-2 cells in vitro which was related to TGF-β1/Smad and p38MAPK/NF-κB signal pathway.     

姜黄素衍生物抗大鼠肝纤维化的作用及其机制

目的观察姜黄素衍生物(Curc-OEG)抗肝纤维化作用及其机制。方法将雄性SD大鼠共分成4组:正常组、模型组、姜黄素衍生物组和姜黄素组。用四氯化碳诱导大鼠形成肝纤维化模型,2个治疗组分别尾静脉注射100 mg·kg-1Curc-OEG和灌胃400 mg·kg-1姜黄素。10周后,测肝功及肝纤维化指标、肝组织羟脯氨酸(Hpy)水平;HE、天狼星红染色,免疫组化法观察TGF-β1及α-SMA表达;RT-PCR法测TGF-β1 mRNA水平;Western blot测TGF-β1及α-SMA蛋白表达。结果与模型组比较,Curc-OEG能改善肝功及降低肝纤维化指标,降低Hpy含量及肝纤维化程度,抑制TGF-β1及α-SMA的表达。结论 Curc-OEG具有明显的抗肝纤维化作用。     

Inhibition of P2X7R modulates ECM deposition in HSCs and crosstalk with macrophages in liver fibrosis

OBJECTIVE Modulation of immune response and reduction of extracellular matrix(ECM)deposition are both essential in the therapy of liver fibrosis.Regulating P2 X7 R might be a potential therapeutic strategy to treat liver fibrosis, we investigated whether the blockade of P2 X7 R could reverse liver fibrosis and how P2 X7 R is involved in fibrogenesis during hepatic stellate cells(HSCs) and macrophages crosstalk. METHODS In vivo,liver fibrosis model was established by thioacetamide(TAA) intraperitoneal administration in male C57 BL/6 mice. In vitro, LX-2 cells were treated with TGF-β and LPS/ATP respectively. Supernatant from LPS/ATP stimulated THP-1 macrophages were supplemented to LX-2 cells to mimic cellular crosstalk between HSCs and macrophages. RESULTS Blockade of P2 X7 R with its selective antagonist A438079, not only decreased liver injury and ECM deposition but also ameliorated inflammation by inhibiting NLRP3 inflammasome, NF-κB activation and IL-1β production in TAA-induced liver fibrosis. And the recruitment of macrophages, monocytes and granulocytes were also inhibited. In TGF-β-stimulated LX-2 cells,ECM deposition was reduced by the inhibiting of P2 X7 RTLR4-NLRP3 axis. Protein synthesis and cleavage of IL-1β and its m RNA level was dramatically increased by LPS 4 h combined with ATP 30 min than those in HSC treated with LPS or ATP alone. Additionally, LX-2 cells primed with LPS/ATP greatly increased m RNA and protein expression of caspase-1, NLRP3 and P2 x7 R, as well as liver fibrosis markers, α-SMA and typeⅠcollagen.These events were remarkably suppressed by A438079 pretreatment. si RNA against P2 x7 R reduced protein expression of NLRP3 and α-SMA, and suppressed deposition and secretion of type Ⅰ collagen induced by LPS/ATP. Ectopic overexpression of P2 X7 R reduced the threshold of ECM deposition in HSCs induced by TGF-β.Inhibiting upstream receptors of NLRP3 inflammasome,P2 X7 receptor-selective antagonist(A438079), TLR4 inhibitor(CLI-095) reduced the fibrotic markers in both models of TGF-β and LPS/ATP-activated HSCs. The cultured medium of the THP-1 macrophages by LPS/ATP aggravated ECM deposition in LX-2 cells. The decreased IL-1β by the pharmacological inhibitors of P2 X7 R,caspase-1 and TLR4 treated to THP-1 macrophages attenuates ECM deposition in LX-2 cells. CONCLUSION Both ECM producing in HSCs and inflammatory cytokines secreting from macrophages were regulated by P2 X7 R, suggesting a therapeutic utility of P2 x7 R blockade in liver fibrosis treatment.