5-单硝酸异山梨酯对兔离体隐动脉交感嘌呤能缩血管反应的影响

采用兔离体隐动脉血管环张力实验及电场刺激诱发交感嘌呤能血管收缩实验，观察5-单硝酸异山梨酯(isosorbide-5-mononitrate，ISMN)对交感嘌呤能缩血管反应的作用，并分析其作用机制。结果表明，电场刺激(电压15 V，波宽1 ms，时程1 s)诱发兔离体隐动脉(去内皮)产生血管收缩反应。该收缩反应呈频率(2～16 Hz)依赖性，可被0.1 μmol·L^-1河豚毒素(tetrodotoxin)完全抑制。α₁受体阻断药哌唑嗪(1 μmol·L^-1)对2～8 Hz电刺激诱发的血管收缩反应无影响。P2X₁受体激动药α,β-亚甲基ATP(3 μmol·L^-1)脱敏P2X₁受体，同时联合应用哌唑嗪(1 μmol·L^-1)完全抑制电刺激诱发的血管收缩反应。采用一个标本一个浓度给药时，ISMN(0.1 mmol·L^-1)显著抑制8 Hz电刺激诱发的血管收缩反应，在0.3及1.0 mmol·L^-1时ISMN显著抑制各频率电刺激诱发的血管收缩反应； 1.0 mmol·L^-1 ISMN对电刺激诱发的血管收缩反应的抑制率分别为46%(2 Hz)、 47%(4 Hz)、 34%(8 Hz)和22%(16 Hz)。ISMN(0.3及1.0 mmol·L^-1)对外源性去甲肾上腺素(0.01～100 μmol·L^-1)或腺苷三磷酸(1 mmol·L^-1)诱发的血管收缩反应无影响。以上结果提示，ISMN显著抑制电场刺激诱发的交感嘌呤能血管收缩反应，其作用机制可能是ISMN作用于交感神经末梢突触前膜抑制嘌呤能神经递质产生的血管收缩反应。     

吴茱萸碱对大鼠离体子宫平滑肌的舒张作用及机制研究

摘 要 目的：探讨吴茱萸碱对大鼠离体子宫平滑肌的舒张作用及其可能机制。方法: 以前列腺素F2α（PGF2α）诱导大鼠离体子宫平滑肌收缩,生物机能实验系统观察吴茱萸碱舒张离体子宫平滑肌的作用以及辣椒素受体阻断药capsazepine、磷脂酶Cβ阻断药U73122和钙调蛋白阻断药W 7对吴茱萸碱作用的影响,Prism 5.01非线型可变斜率回归计算半效浓度(EC50)。结果: 吴茱萸碱对PGF2α(EC50=9.60×10-11 mol·L^-1)收缩离体子宫平滑肌舒张作用的EC50为9.56×10 9 mol·L^-1。半抑制浓度(IC50)的capsazepine(6.30×10-11 mol·L^-1),U73122(2.57×10-11 mol·L^-1)和W 7(5.65×10-13 mol·L^-1)预舒张离体子宫平滑肌后,吴茱萸碱的EC50降低,量效曲线左移。EC50的大小顺序依次为：U73122 吴茱萸碱(1.95×10-12 mol·L^-1)＞capsazepine 吴茱萸碱(7.35×10-13 mol·L^-1)＞W 7 吴茱萸碱(8.88×10-15mol·L^-1)。结论: 吴茱萸碱对PGF2α收缩的离体子宫平滑肌有舒张作用,其作用机制可能与辣椒素受体1、磷脂酶Cβ和钙调蛋白有关。     

钙拮抗剂TMB-8对培养牛大脑中动脉内皮细胞[Ca2+]i和一氧化氮释放的影响

目的旨在观察TMB-8对血管内皮细胞[Ca²⁺]i水平和NO释放的影响,探讨扩张脑血管的机制。用AR-CM-MIC阳离子测定系统,测量单个细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]i),用血红蛋白法测量一氧化氮(NO)的释放。结果表明,在细胞外钙浓度为1.3mmol·L^-1时,TMB-8 12.5及25.0μmol·L^-1对静息[Ca²⁺]i和甲基血红蛋白ΔE无明显影响,而50及100μmol·L^-1时可升高静息[Ca²⁺]i和甲基血红蛋白ΔE。表明TMB-850及100μmol·L^-1升高脑血管内皮[Ca²⁺]i,激活NO合酶,促进NO合成和释放,这可能是其扩张脑血管的重要机制之一。     

柳珊瑚酸对离体豚鼠气管的兴奋作用

柳珊瑚酸(suberogorgin,Sub)依浓度提高离体豚鼠气管张力,其ED50为52.5μmol·L^-1,比Gal和ACh弱。Sub对气管张力作用的剂量—效应曲线可因Atr0.13μmol·L^-1,CBT2.4μg·mL^-1或TTX1μmol·L^-1而右移或下移,最大效应降低。Atr0.65μmol·L^-1完全拮抗Sub的作用。在Gal35.5μmol·L^-1致挛的气管ACh使气管张力进一步提高而Sub不改变气管张力。     

大黄素对豚鼠单个心室肌细胞胞浆游离钙浓度及L-型钙电流的影响

目的研究大黄素(emodin)对豚鼠心室肌细胞钙信号的影响。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测量豚鼠心室肌细胞钙信号的变化。结果在静息状态下,1～100 μmol·L^-1大黄素对［Ca²⁺］i均无影响;对60 mmol·L^-1 KCl诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有不同的影响,1 μmol·L^-1表现为促进作用;10 μmol·L^-1无作用;100 μmol·L^-1则表现为抑制作用。膜片钳研究结果表明,1 μmol·L^-1大黄素可明显促进L-型钙电流,10 μmol·L^-1对L-型钙电流无影响;100 μmol·L^-1明显抑制L-型钙电流。结论大黄素对心肌细胞内钙及L-型钙电流具有双向调节作用。     

AMG-1对突触体内游离钙水平及大鼠尾动脉收缩力的影响

观察了AMG-1对高钾所致大鼠脑突触体内游离钙浓度[Ca²⁺]i升高,及去甲肾上腺素引起的离体大鼠尾动脉环收缩力的影响。结果表明,AMG-110和100μmol·L^-1可对抗高钾(30mmol·L^-1)引起的[Ca²⁺]i升高,使分别降低19±11%及57±12%;在无钙Krebs-Hensleleit液中,AMG-1能抑制去甲肾上腺素引起大鼠尾动脉收缩力的作用。     

卡西霉素对血小板在脑微血管内皮细胞粘附的影响及药物的阻断作用

体外实验表明calcimycin0.01μmol·L^-1刺激牛脑微血管内皮细胞25min,使兔血小板与脑微血管内皮细胞的粘附率增高17.1%。PAF受体拮抗剂WEB20860.1,1.0和10.0μumol·L^-1对血小板在脑微血管内皮细胞上粘附的抑制率分别为9.0,22.9和23.1%。DMPP0.1,1.0,10.0μmol·L^-1及Tet0.1,1.0,10。Oμmol·L^-1的抑制率分别为9.7,15.6,22.1%和7.8,15.6及24.6%,提示DMPP和Tet对脑血管有保护作用。     

前胡丙素对培养乳鼠心肌细胞自发性收缩及动作电位的影响

用倒置显微镜闭路电视系统及细胞内标准微电极法,记录培养心肌细胞的自发性收缩及动作电位,结果发现:应用Pra-C5min后,心肌细胞收缩频率及细胞边缘运动的速度同时下降。Pra-C10,30和100μmol·L^-1剂量依赖性的方式抑制心肌细胞的收缩速度,分别抑制24%,43%和50%。pra-C(10和30μmol·L^-1)显示了抑制心肌细胞收缩频率的作用,分别抑制13%和19%。Nif3μmol.L^-1分别缩短APD₅₀和APD₉₀14%及17%,但同样浓度的verapatmil则抑制APA27%,缩短APD₅₀8%,分别延长APD90及SCL10%和43%。Pra-C10,30和100μmol·L^-1缩短APD₅₀7%,14%和18%。Pra-C100μmol·L^-1有抑制APA及延长SCL的作用。结果提示,Pra-C对心肌细胞收缩及动作电位的作用可能与其阻滞Ca²⁺通道有关。     

尼索地平对大鼠离体肺动脉和肺动脉高压的影响

目的 观察尼索地平(nifedipine,NIS)对KCl和去氧肾上腺素(phenylephrine,PHE)所致离体大鼠肺动脉收缩的作用,同时研究其对野百合碱诱导的肺动脉高压(pulmonary hypertention,PH)大鼠的影响。方法 ①采用离体血管实验法,以KCl和PHE在含钙离子和不含钙离子的K-H液中预收缩离体大鼠肺动脉环,观察NIS对血管收缩的影响。②取40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、NIS组和硝苯地平(NIF)组,每组10只,采用野百合碱(50 mg·kg^-1)皮下注射建立大鼠PH模型,连续灌胃给药21 d。采用右心导管法测定mPAP、mRVP、maxPAP和maxRVP,并计算各组大鼠的RVHI和LI。结果 ①在含钙离子的K-H液中,NIS抑制KCl(20,40,60 mmol·L^-1)和PHE(1×10^-7,5×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)所致血管收缩的IC₅₀分别为0.87×10^-8,1.41×10^-8,8.32×10^-8 mol·L^-1和0.56×10^-7,4.27×10^-7,1.28×10^-6 mol·L^-1。在无钙离子K-H液中,NIS无抑制离体血管收缩的作用。②模型组大鼠mPAP、mRVP、maxPAP、maxRVP、RVHI和LI均显著高于正常组(P<0.01),NIS组和NIF组大鼠的上述指标均显著低于模型组(P<0.05)。结论 NIS有抑制大鼠肺动脉收缩的作用,对野百合碱诱导的大鼠PH有治疗作用。     

粉防己碱、颅通定对兔窦房结动作电位及豚鼠心室肌单细胞钙电流的协同作用

采用标准微电极技术和膜片钳记录技术,分别研究了粉防己碱(Tet)和颅通定(rotundine)对家兔窦房结动作电位及豚鼠心室肌单细胞钙电流的影响。结果表明:Tet1～200μmol·L^-1,rotundine3～300μmol·L^-1能浓度依赖性地降低兔窦房结动作电位的APA,Vmax和SP₄,延长SCL。Tet0.3μmol·L^-1与rotundine1μmol·L^-1合用亦有作用。在膜片钳实验中Tet0.1μmol·L^-1和rotundine1μmol·L-1合用能有效抑制豚鼠心室肌单细胞钙电流,抑制率为19.2%。提示,两种植物源性抗钙剂有良好的协同效果。     

葛根素和大豆甙元抑制[3H]氟硝西泮和体外大鼠脑膜的结合

从中药葛根中提取到两种苯二氮艹卓受体活性化合物:葛根素和大豆甙元。两种化合物在体外可抑制[3H]氟硝西泮和大鼠脑细胞膜的结合,IC₅₀值分别为18.46μmol·L^-1和15.43μmol·L^-1。大豆甙元还可抑制[³H]哌唑嗪和α1-肾上腺素受体的结合(IC₅₀值为89μmol·L^-1)。两种化合物的GABA比分别为1.11和1.12,提示两种黄酮化合物是苯二氮艹卓受体的拮抗剂或部分激动剂。Scatchardplot分析显示:两种化合物对[³H]氟硝西泮与膜结合的抑制作用是通过竞争性与非竞争性混合机制而实现的。     

钙拮抗剂TMB-8抑制BHQ,NE和KCl引起的培养乳牛基底动脉单个平滑肌细胞内游离钙的升高

用AR CM MIC阳离子测定系统,测量单个细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]i),研究8-(N,N-二乙胺)-n-辛基 3,4,5-三甲氧基苯甲酸酯(TMB-8)对培养乳牛基底动脉平滑肌[Ca²⁺]i的作用。在细胞外钙浓度为1.3mmol·L^-1时,TMB-8(30μmol·L^-1)可明显抑制BHQ,NE及KCl引起[Ca²⁺]i的升高。在细胞外钙为零+EGTA 0.1mmol·L^-1时,TMB-8(10,30及100μmol·L^-1)可浓度依赖性地降低静息[Ca²⁺]i,TMB-8(30μmol·L^-1)可几乎完全阻断BHQ及NE引起[Ca²⁺]i的增加。研究表明TMB-8降低培养乳牛基底动脉平滑肌[Ca²⁺]i的机制,主要是抑制肌浆网Ca²⁺的释放,或增加肌浆网对Ca²⁺的摄入,并由此间接地抑制细胞外钙的内流。     

苯并吡喃-4-腙类化合物的合成及其血管舒张活性

目的寻找高效低毒并具有组织选择性的苯并吡喃类钾通道开放剂。方法以对氰基苯酚为原料,经酰化、Fries重排、环合、成腙和取代等反应合成了3个系列20个苯并吡喃-4-腙类新化合物,所有目标化合物结构均经IR,1HNMR,MS和元素分析确证,并测定其对低钾(30 mmol·L^-1 KCl)和高钾(80 mmol·L^-1 KCl)诱导的大鼠主动脉条收缩抑制作用。结果合成了20个新化合物(I_1～9,II_1～4和III_1～7)。离体扩血管活性实验表明,大部分化合物具有一定的血管舒张活性。结论化合物I₉,III₂和III₅对低钾诱导的血管收缩抑制活性在1×10^-6 mol·L^-1浓度下略低于对照药emakalim,但对高钾诱导的血管收缩抑制活性在浓度为1×10^-5 mol·L^-1下强于对照药emakalim,值得进一步研究。     

扎普司特和谷胱甘肽翻转豚鼠离体气管对硝普钠的耐受性

上皮完整或去上皮的豚鼠离体气管以300 μmol·L^-1硝普钠(SNP)预处理1 h,使SNP对抗乙醋甲胆碱气管收缩作用的剂量反应曲线右移1.3-1.5 倍, 最大舒张率下降41%-58%,形成SNP气管松弛作用的耐受性. 8-溴环鸟苷酸可模拟SNP在豚鼠离体气管形成的SNP耐受性, 谷胱甘肽(1 mmol·L^-1)及环核苷酸磷酸二酯酶(PDE) Ⅴ抑制剂扎普司特(30 μmol·L^-1)均可部分翻转SNP 的气管松弛作用耐受性,而蛋白合成抑制剂环己酰亚胺(10 μmol·L^-1)对SNP的耐受性无预防作用.结果表明SNP可产生豚鼠离体气管松弛耐受性, 这可能是由于气管平滑肌中环鸟苷酸(cGMP)积聚而下调鸟苷酸环化酶(GC)活性和上调PDEⅤ活性.     

组胺H2受体激动剂和拮抗剂及抗癌药对正常人造血祖细胞和HL-60白血病细胞生长的作用

采用体外微量克隆培养体系研究了组胺H2受体激动剂4-甲基组胺(4-MH)和拮抗剂雷尼替叮(ranitidine)及抗癌药阿糖胞苷分别对正常人外周血粒-巨噬系祖细胞(PBCFU-GM)和HL-60白血病细胞生长的作用。当4-MH的浓度为10^-9～10^-6mol·L^-1时,可促进PBCFU-GM的增殖,4-MH的浓度增加至10^-4mol·L^-1时则表现为抑制PBCFU-GM的增殖。Ranitidine的浓度为10^-9～10^-5mol·L^-1时,表现出对PBCFU-GM增殖的抑制作用,但在10-6mol·L^-1剂量时对PBCFU-GM的抑制率低于50%,而在该剂量时对HL-60白血病细胞的抑制率已达100%,具有一定的选择性。抗癌药阿糖胞苷(Ara-C)对HL-60白血病细胞的抑制作用比对PBCFU-GM的抑制作用较强,但两者的IC₅₀值处于同一个数量级。在强化化疗剂量10^-5mol·L^-1时,Ara-C对HL-60白血病细胞和PBCFU-GM正常造血祖细胞的抑制率均达100%。     

钾通道阻断剂部分抑制三氧化二砷诱导的HeLa细胞死亡

目的研究钾通道阻滞剂对三氧化二砷诱导的HeLa细胞死亡的作用。方法采用MTT法评价HeLa细胞的存活情况，采用膜片钳技术记录HeLa细胞的电压依赖性钾电流。结果As₂O₃(5 μmol·L^-1)孵育24 h引起显著的HeLa细胞死亡，As₂O₃(5 μmol·L^-1)孵育24 h后存活的细胞表现明显的电压依赖性钾电流密度增加。+80 mV电压下，As₂O₃(5 μmol·L^-1)孵育组电流密度(61±18) pA/10 pF(n=8)明显高于对照组(38±10) pA/10 pF(n=8,P<005)。As₂O₃诱导的HeLa细胞死亡可被共同孵育钾通道阻滞剂四氨基吡啶(3 mmol·L^-1)或四乙基铵(5 mmol·L^-1)所部分抑制。3 mmol·L^-1四氨基吡啶或5 mmol·L^-1四乙基铵对HeLa细胞无明显细胞毒作用。结论As₂O₃长期处理增加HeLa细胞的电压依赖性钾电流。As₂O₃诱导的HeLa细胞死亡可被钾通道阻滞剂四氨基吡啶或四乙基铵部分抑制。     

甲基黄酮醇胺对豚鼠气管平滑肌收缩及cAMP水平的影响

观察了MFA对离体豚鼠气管张力,cAMP的影响及二者的关系。发现:MPA(0.03～0.6mmol·L^-1)剂量依赖性抑制KCI,ACh及Hist所致的气管条收缩,同时伴有cAMP升高,两者间有良好的相关性(r值分别为0.753,0.9112和0.9567,P<0.001);MFA(0.03mmol·L^-1)能够增强Ami和Iso的气管平滑肌舒张作用,后者同时伴有cAMP升高。提示:MFA对支气管平滑肌张力的抑制作用确与cAMP升高有关,MFA升高cAMP作用可能与其钙拮抗作用有关。     

羟苯氨酮的舒张血管作用及其机理研究

目的研究羟苯氨酮(oxyphenamone,Oxy)的舒血管作用及其作用机理。方法离体兔血管制备生物测定法。结果Oxy对离体兔肾动脉、股动脉和肠系膜动脉均有明显舒张作用且呈剂量依赖性;显著抑制去氧肾上腺素的缩血管作用;Oxy对30 mmol·L^-1和80 mmol·L^-1 KCl缩血管作用均有显著抑制;对80 mmol·L^-1 KCl抑制作用的量效曲线与30 mmol·L^-1 KCl抑制作用的量效曲线比较,明显右移;对血管紧张素II的缩血管作用因浓度而异,低浓度加强而高浓度抑制。结论Oxy对多种血管均有舒张作用,其机理可能与血管平滑肌细胞上的钙通道和钙激活的钾通道有关。     

红车轴草总异黄酮通过内皮依赖途径对离体大鼠肠系膜动脉舒张作用研究

摘 要 目的：研究红车轴草总异黄酮对离体大鼠肠系膜动脉环的舒张作用。方法: 将大鼠肠系膜动脉环挂在两个L型金属针间,在浴槽中加入血管收缩剂获得稳定收缩后,加入不同浓度的红车轴草总异黄酮和（或）阻断剂,采用离体血管张力描记技术记录大鼠肠系膜动脉的张力的变化。结果: 红车轴草总异黄酮（0.001~1 mg·ml^-1）可浓度依赖性舒张K⁺krebs液（60 mmol·L^-1K⁺）预收缩的正常大鼠肠系膜动脉,与溶剂对照（DMSO）相比差异有统计学意义（P＜0.01）;去除大鼠肠系膜动脉内皮可以显著抑制红车轴草总异黄酮诱导的血管舒张反应,与完整内皮组相比差异有统计学意义（P＜0.01）;使用Nω 硝基 L 精氨酸甲酯（L NAME,10-4 mol·L^-1）孵育可以减弱红车轴草总异黄酮诱导的血管舒张反应,与溶剂对照（DMSO）相比差异有统计学意义（P＜0.01）;而吲哚美辛(10-5 mol·L^-1)对红车轴草总异黄酮诱导的血管舒张反应的影响无显著差异（P＞0.05）。结论: 红车轴草总异黄酮可以舒张离体肠系膜动脉,其机制可能与促进血管内皮释放一氧化氮有关。     

特里杨甙对过敏性慢反应物质和组胺的拮抗作用

采用离体豚鼠回肠标本法及荧光分光光度法研究了从毛白杨叶中分离得到的特里杨甙(tremulacin,TRC)与组胺(histamine,His)及过敏性慢反应物质(SRS-A)的关系。结果表明:TRC能明显抑制His和SRS-A所致离体豚鼠回肠收缩,且成剂量相关性,IC₅₀分别为1.78X10-4mol·L^-1 2.51X10-4mol·L^-1。亦明显抑制致敏豚鼠肺释放SRS-A及致敏大鼠腹腔肥大细胞释放His。提示:TRC的抗炎作用与其对His及SRS-A的受体拮抗作用及对His和SRS-A释放的阻滞作用有关。