TESTIN在鼻咽癌中的表达及对鼻咽癌细胞系增殖、上皮-间质转化和侵袭转移的影响

目的 观察TESTIN在鼻咽癌组织和细胞中的表达,分析TESTIN过表达对鼻咽癌细胞增殖、上皮-间质转化(EMT)和侵袭转移的影响.方法 采用免疫组化、Real time-PCR、Western-blot检测TESTIN在鼻咽癌组织和细胞系的表达状况.利用脂质体LipofectamineTM2000转染鼻咽癌5-8F细胞,Real time-PCR、Western-blot验证转染效率.MTT、细胞划痕实验、细胞侵袭实验检测TESTIN过表达对5-8F细胞增殖、EMT和侵袭转移的影响.Western-blot检测TESTIN过表达对侵袭转移相关基因表达的影响.结果 TESTIN在鼻咽癌组织的阳性表达率和表达水平明显低于正常鼻咽部组织,差异有统计学意义(P<0.05).与人正常永生化鼻咽上皮细胞系NP69比较,鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2、C666-1、5-8F、6-10B中TESTIN表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).转染pcDNA3.1/TESTIN的5-8F细胞中TESTIN表达显著上调(P<0.05).TESTIN过表达显著抑制5-8F细胞增殖、EMT和侵袭转移,同时上调E-cadherin表达,下调N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9表达(P<0.05).结论 鼻咽癌组织和细胞系中TESTIN表达显著降低,TESTIN过表达可抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖、EMT和侵袭转移.     

锚蛋白 B在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨锚蛋白B(ANK2)基因在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法 选取2015年10月至2018年10月南阳市中心医院存档的鼻咽癌组织67例,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测人组织中ANK2 mRNA表达,以50例鼻咽部炎症组织作为对照组,分析鼻咽癌组织中ANK2 mRNA表达与临床病理特征关系.以人永生化鼻咽上皮细胞NP69为对照,RT-qPCR法检测鼻咽癌细胞系6-10B和5-8F中ANK2 mRNA表达.转染ANK2小干扰RNA至5-8F细胞,RT-qPCR检测细胞中ANK2 mRNA表达水平验证转染效果,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、Transwell、蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测干扰ANK2表达对5-8F细胞增殖、迁移和侵袭及磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3βser9)、β-连环蛋白(β-catenin)和c-myc蛋白表达的影响.结果 与鼻咽部炎症组织比较,鼻咽癌组织中ANK2 mRNA表达升高[(2.57±0.19)比(1.05±0.08),t=53.119,P<0.001].ANK2高表达与鼻咽癌病人肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05).与NP69细胞比较,鼻咽癌细胞系6-10B和5-8F中ANK2 mRNA表达升高[(2.34±0.16)、(2.95±0.21)比(1.06±0.09),P<0.001].干扰ANK2表达后,5-8F细胞存活率、迁移数和侵袭数及p-GSK3βser9、β-catenin和c-myc蛋白水平均降低(P<0.001).结论 ANK2基因在鼻咽癌组织和细胞系中表达升高,干扰ANK2表达可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路阻碍鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭.     

Stathmin沉默抑制鼻咽癌5-8F细胞的恶性表型

【摘要】 目的 探讨stathmin沉默对鼻咽癌5-8F细胞株的生物学作用。方法 实验设空白对照组(未转染载体的5-8F细胞),阴性对照组(转入pGenesil-1.1-HK质粒表达载体),stathmin沉默组(转入pGenesil-1.1-STM质粒表达载体),siRNA重组表达载体采用脂质体转入鼻咽癌5-8F细胞,然后进行G418筛选,挑取单克隆扩大培养,获得稳定转染的5-8F细胞株。采用MTT实验、流式细胞仪分析细胞的增殖和周期;裸鼠移植瘤实验分析细胞的成瘤性。结果 Stathmin沉默组5-8F细胞增殖受抑制,其抑制率(33.67±2.52)%明显高于阴性对照的(8.13±0.60)%和空白对照组的0,差异有统计学意义(P<0.05);Stathmin沉默组细胞阻滞于G2期,G2期细胞为(15.77±0.55)%,高于阴性对照组的(11.32±0.79)%和空白对照组的(10.90±0.92)%(P<0.05);Stathmin沉默组裸鼠移植瘤质量为(0.32±0.21)g,低于阴性对照组的(1.10±0.40)g和空白对照组的(1.52±0.30)g(P<0.05)。结论 Stathmin沉默能抑制鼻咽癌5-8F细胞的恶性生物学表型。      

舌鳞癌组织中肿瘤干细胞的分离培养及PIWIL4对其的影响

目的：从人舌鳞癌组织中分离培养肿瘤干细胞细胞（CSC）,鉴定其生物学特性,并研究PIWIL4在CSC中的表达和意义。方法收集9例不同临床分期舌鳞癌患者组织标本,通过酶消化和原代培养相结合等方法处理,采用无血清悬浮培养法分离培养获得含CSC的悬浮细胞球,流式细胞仪检测细胞表面分子标志CD133和CD44的表达,免疫磁珠分选系统分离CD133＋CD44＋细胞;采用半定量逆转录聚合酶链反应检测PIWIL4 mRNA在CSC中的表达;裸鼠皮下接种CSC,观察其成瘤能力。结果成功的从人舌鳞癌组织分离培养获得可悬浮生长、稳定传代的CSC,CSC高表达CD133和CD44,裸鼠皮下接种1×10^4、1×10^5个CSC均可全部成瘤,PIWIL4 mRNA在CSC的表达也显著高于正常舌组织细胞。结论采用无血清悬浮培养法成功从人舌组织中分离获得CSC,具有肿瘤干细胞特性,能高度表达PIWIL4,为靶向肿瘤干细胞的治疗提供了实验依据。     

鼻咽癌CNE2细胞X射线照射诱导的多药耐药

目的 探讨鼻咽癌CNE2细胞X射线照射前后细胞P糖蛋白（P-gp）表达的差异及鼻咽癌CNE2细胞不同时期X射线照射时抑制率的差异,为临床鼻咽癌综合治疗的放化疗顺序的安排提供理论依据. 方法 用免疫细胞学检测CNE2细胞株X射线照射前后P-gp阳性表达的差异. 用四甲耦氮唑盐（MTT）法检测CNE2细胞株X射线照射前、后化疗药处理及同时X射线照射化疗药处理抑制率的差异. 结果 鼻咽癌CNE2细胞X射线照射前P-gp阳性表达率为6.7%、X射线照射后阳性表达率为72.7%（P＜0.05）. 鼻咽癌CNE2细胞株X射线照射后化疗药处理抑制率较X射线照射前化疗药处理及X射线照射化疗药同时处理,在顺铂、紫杉醇、氟尿嘧啶均下降（P＜0.05）. 鼻咽癌CNE2细胞X射线照射化疗药同时处理抑制率与X射线照射前化疗药处理比较,在顺铂、氟尿嘧啶,紫杉醇均差异无显著性（P＞0.05）. 结论 鼻咽癌CNE2细胞X射线照射后可以诱导P-gp表达升高,降低对化疗药物的敏感性. 鼻咽癌综合治疗时先化疗再放疗或同时放化疗可能效果更好.     

人卵巢癌HO8910细胞株中干细胞的筛选及生物学特性鉴定

目的筛选人卵巢癌HO8910细胞株中的干细胞并观察其生物学特性。方法以常规培养的HO8910细胞为基础(对照组),采用紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法筛选卵巢癌干细胞(干细胞组)。对筛选出的干细胞分别采用MTT法检测细胞的增殖情况;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测CD24、CD44、CD45、CD133、CD117表达及Hoechst33342染色阳性率;Western blot检测ABCG2、Nanog、Oct4及BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达,并对卵巢癌干细胞在裸鼠体内的致瘤性进行检测。结果 (1)在紫杉醇结合无血清培养筛选条件下,部分HO8910细胞能够较好的生长,具有干细胞特性。(2)干细胞组各时间点的细胞增殖能力较对照组明显增强。(3)干细胞组穿膜细胞数较对照组明显增多。(4)干细胞组CD24+、CD44+、CD45+的阳性表达率与对照组比较,差异均无统计学意义;CD133+、CD117+的阳性表达率及Hoechst33342染色阳性率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)干细胞组ABCG2、Nanog、Oct4、BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达水平与对照组比较均明显增强。(6)干细胞组细胞在裸鼠体内致瘤性明显高于对照组。结论紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法能够筛选出具有干细胞特征的卵巢癌干细胞;卵巢癌干细胞在体外及体内的生物学特性较普通卵巢癌细胞有很大差异。     

Isolation of cancer stem cells from ovarian cancer cell line HO9810 and identification of their biological characteristics

目的 筛选人卵巢癌HO8910细胞株中的干细胞并观察其生物学特性.方法 以常规培养的HO8910细胞为基础(对照组),采用紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法筛选卵巢癌干细胞(干细胞组).对筛选出的干细胞分别采用MTT法检测细胞的增殖情况;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测CD24、CD44、CD45、CD133、CD117表达及Hoechst33342染色阳性率;Western blot检测ABCG2、Nanog、Oct4及BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达,并对卵巢癌干细胞在裸鼠体内的致瘤性进行检测.结果 (1)在紫杉醇结合无血清培养筛选条件下,部分HO8910细胞能够较好的生长,具有干细胞特性.(2)干细胞组各时间点的细胞增殖能力较对照组明显增强.(3)干细胞组穿膜细胞数较对照组明显增多.(4)干细胞组CD24+、CD44+、CD45+的阳性表达率与对照组比较,差异均无统计学意义;CD133+、CD117+的阳性表达率及Hoechst33342染色阳性率与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(5)干细胞组ABCG2、Nanog、Oct4、BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达水平与对照组比较均明显增强.(6)干细胞组细胞在裸鼠体内致瘤性明显高于对照组.结论 紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法能够筛选出具有干细胞特征的卵巢癌干细胞;卵巢癌干细胞在体外及体内的生物学特性较普通卵巢癌细胞有很大差异.     

神经酰胺诱导鼻咽癌细胞凋亡

目的　了解第二信使神经酰胺信号转导对鼻咽癌细胞生长的影响。方法　采用MTT法检测神经酰胺对鼻咽癌细胞株 (CNE 2 )增殖的抑制作用。光镜观察、荧光染色、流式细胞术检测细胞凋亡改变。Westernblot法检测p2 1WAF1的表达。结果　神经酰胺在 6 2 5、12 5、2 5、5 0 μm浓度下 ,对CNE 2细胞生长有明显的抑制作用 ,流式细胞仪检测发现亚G1峰出现 ,荧光染色可见核荧光强度增加、核片段化和凋亡小体。p2 1WAF1蛋白表达明显上调。结论　神经酰胺能诱导鼻咽癌细胞株CNE 2凋亡 ,且上调 p2 1WAF1蛋白表达。p2 1WAF1可能是神经酰胺诱导鼻咽癌细胞凋亡中起作用的因素之一。     

DMBT1过表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

目的 观察DMBT1过表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响.方法 利用脂质体LipofectamineTM 2000转染鼻咽癌5-8F细胞,Real time-PCR、Western-blot验证转染效率.MTT、流式细胞术检测DMBT1过表达对5-8F细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响.Western-blot检测DMBT1过表达对多药耐药基因(P-gp)、肿瘤抑制基因p53蛋白表达的影响.MTT法检测DMBT1过表达对化疗药物敏感性的影响.结果 转染pcDNA3.1/DMBT1的5-8F细胞中DMBT1表达显著上调(P<0.05),提示成功构建稳定表达DMBT1基因的鼻咽癌5-8F细胞.DMBT1过表达的鼻咽癌5-8F细胞增殖能力减慢、凋亡率、G0/G1期细胞比例及p53蛋白表达增高,S期、G2/M期细胞比例及P-gp蛋白表达降低,同时细胞对顺铂敏感性增加(P<0.05).结论 DMBT1过表达能够显著抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,诱导其凋亡,并提高癌细胞对化疗药物敏感性.     

左旋棉酚对人鼻咽癌细胞凋亡的影响

目的探讨左旋棉酚对人鼻咽癌细胞株CNE2凋亡的影响及其机制。方法采用MTT实验检测左旋棉酚对CNE2细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析左旋棉酚诱导细胞凋亡及其对Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,caspase-3分光光度法检测试剂盒测定caspase-3活性。结果≥10μmol／L左旋棉酚可显著抑制CNE2细胞增殖,并表现出剂量、时间依赖效应。左旋棉酚可调节CNE2细胞的细胞周期,使其主要被阻滞于G0／G1期,在诱导细胞凋亡过程中,凋亡相关基因Bcl-2表达下降,而Bax表达则相对上调,caspase-3活性在24h达到高峰。结论左旋棉酚在体外可诱导鼻咽癌细胞CNE2凋亡,其机制可能与Bcl-2基因下调、Bax基因上调、caspase-3的激活有关。     

肿瘤干细胞来源的DC-CIK 对同源肿瘤细胞的杀伤作用

【摘要】目的 观察干细胞负载树突细胞诱导的杀伤细胞（CSC-DC-CIK）作为效应细胞对同源肿瘤细胞的杀伤作用,探讨CSC 抗原参与肿瘤杀伤作用的可行性。方法 培养肾癌细胞株A498 和肺癌细胞株A549,用流式分选术分离纯化CD133+细胞,分别作为肾癌干细胞（KSC）和肺癌干细胞（LSC）,冻融法制备抗原。提取健康产妇脐带血的单个核细胞,体外扩增诱导生成DC 和CIK 细胞。分别用上述CSC 抗原负载DC,与CIK 共培养（CSC-DC-CIK）,流式细胞术分析DC 和CIK 细胞免疫表型,ELISA 法检测细胞因子分泌水平,用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测CSCDC- CIK 对同源肿瘤细胞的杀伤效率。结果CSC-DC 的DC 免疫表型CD40+、CD80+、CD86+及HLA-DR+的表达均高于单纯DC 的相应免疫表型的表达（P < 0.01）;DC、CSC-DC 与CIK 共培养后的DC 免疫表型CD40+、CD80+、CD86+ 及HLA-DR+的表达均高于共培养前（P < 0.01）;CSC-DC 与CIK 共培养后的DC 免疫表型CD40+、CD80+、CD86+及 HLA-DR+的表达高于DC 与CIK 共培养后的相应免疫表型（P < 0.01）;DC、CSC-DC 与CIK 共培养后的CIK 免疫表型CD3+、CD8+、CD56+的表达高于共培养前（P < 0.01）;CSC-DC 与CIK 共培养后的CIK 免疫表型CD3+、CD8+、CD56+ 的表达高于DC 与CIK 共培养后的CIK 相应免疫表型（P < 0.01）;DC、CSC-DC 与CIK 共培养后的IFN-γ、TNF-α和 IL-2 分泌水平高于共培养前（P < 0.01）;CSC-DC 与CIK 共培养后的IFN-γ、TNF-α和IL-2 分泌水平高于DC 与CIK 共培养后的相应细胞因子表达（P < 0.01）;KSC-DC-CIK 组和LSC-DC-CIK 组对靶细胞的杀伤率为（50.21±4.24）% 和（49.32±3.89）%,明显高于DC-CIK 组的（30.25±3.11）%（F=89.157,P < 0.01）。结论 CSC 抗原负载DC 活化CIK （CSC-DC-CIK）对同源肿瘤细胞有更好的杀伤作用,对其作用机制和临床应用的可能性尚需深入研究。     

脐血细胞生物学特性的研究

目的 :研究单份脐血造血干 /祖细胞 (HSC/ HPC)的质和量 ,脐血中的干细胞、免疫细胞的表型特征。方法 :收集 2 0份脐血 ,采用 6 %的羟乙基淀粉沉淀去除红细胞 (RBC) ,利用甲基纤维素半固体培养法培养和观察 HSC/ HPC的集落生成情况 ,以了解增殖能力 ,用流式细胞仪检测脐血 CD34 + CD38- 、CD34 + 、CD34 + CD38+ 细胞量及免疫细胞的表型特性。结果 :2 0份脐血采集量在 4 0 m L～ 16 5 m L 之间 ,均数为 (78± 2 3) m L。每次收集的有核细胞 (NC)数在 4 .8×10 8～ 4 .6× 10 9之间 ,均数为 (1.4 3± 0 .96 )× 10 9,NC的回收率为 86 .6 %。脐血中 CD34 + CD35-细胞数占 NC总数的 (0 .10 2± 0 .0 70 ) % ,平均为 (0 .12 0± 0 .0 90 )× 10 7/份 ,CD34 + 细胞占 NC总数的 (1.2 9± 0 .31) % ,平均为 (1.4 2± 0 .92 )×10 7个 /份 ,CFU- GM为 (2 .5 4± 2 .0 2 )× 10 6个 ,BFU- E为 (1.4 1± 1.39)× 10 6个 ,CFU- GEMM(1.6 0± 2 .30 )× 10 5个 ,CD4 + T细胞表达 CD4 5RA为 (89.95± 7.86 ) % ,CD8+ T细胞表达 CD4 5RA为 (99.5 8± 3.4 6 ) % ,均显著高于成人外周血 T淋巴细胞 (P<0 .0 1) ,结论 :单份脐血的 HSC/ HPC含量可以满足体重较轻的 (<5 0 kg成人和儿童患者移植的需要 ,体重 ) ,5 0 kg以上的     

ROCK1基因在鼻咽癌组织中的表达及其与细胞侵袭的关系

目的观察干扰ROCK1基因对鼻咽癌的细胞侵袭影响。方法 收集2016年1—12月临沂市河东区人民医院30例鼻咽癌病人临床鼻咽癌标本及同期鼻咽癌的癌旁组织,通过免疫组织化学法(免疫组化)检测ROCK1的表达;培养鼻咽癌细胞株6-10B和永生化的鼻咽上皮细胞NP69,蛋白质印迹法(Western Blot)方法检测ROCK1的表达;使用ROCK1的抑制剂Y-27632处理6-10B细胞株,通过Transwell小室实验,检测鼻咽癌的细胞侵袭。结果 免疫组化结果显示,30例鼻咽癌组织中,ROCK1有18例阳性,12例阴性;而对照组中只有2例阳性,鼻咽癌组的ROCK1明显高表达,与对照组相比差异有统计学意义(χ² =19.20,P<0.000 1);Western Blot检测结果显示,6-10B组的ROCK1表达明显高于NP69细胞组;侵袭实验结果显示,未处理组为(171.67±17.89),明显高于10 μM组(120±19.07)和30 μM组(67.33±13.58),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ROCK1基因与鼻咽癌的细胞侵袭有关。     

PI3K/Akt信号通路在小檗碱联合人参皂苷Rg3诱导鼻咽癌细胞凋亡中的调控作用

目的研究PI3K/Akt信号通路在小檗碱联合人参皂苷Rg3诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用。方法RTCA法检测小檗碱联合人参皂苷Rg3对鼻咽癌CNE2、6-10B细胞增殖的影响;Hoechst 33342染色法、荧光双染流式细胞仪检测药物对CNE2细胞凋亡的影响;Western blot法检测PI3K/Akt信号通路关键蛋白及凋亡相关蛋白表达的变化。结果小檗碱联合人参皂苷Rg3可抑制鼻咽癌CNE2、6-10B细胞的增殖,诱导CNE2细胞的凋亡。与单独用药组相比,联合用药组细胞的PI3K/Akt信号通路关键蛋白PI3K p110α和p-Akt的表达明显下调(P<0.05)。加入PI3K/Akt信号通路的激活剂SC79后,小檗碱联合人参皂苷Rg3抑制CNE2细胞增殖和诱导细胞凋亡的效应降低,p-Akt、Survivin、PCNA及Bcl-2表达量增加,Bax的表达下降。结论小檗碱联合人参皂苷Rg3可通过PI3K/Akt信号通路发挥抑制鼻咽癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。     

乳腺癌干细胞亚群比例的改变与芳香化酶抑制剂耐药的相关性

目的分析乳腺癌干细胞(BCSCs)亚群比例的改变与芳香化酶抑制剂(AIs)耐药之间的相关性。方法采用流式细胞术检测对AIs耐药的人源性乳腺癌细胞株MCF-7(MCF-7/AI)及野生型人源性乳腺癌细胞株MCF-7中CD44+CD24-细胞的数量,比较MCF-7/AI和MCF-7中CD44+CD24-细胞的比例。结果 MCF-7/AI和MCF-7中CD44+CD24-细胞的平均比例分别为(13.15±5.50)%和(0.39±0.22)%(P<0.05)。结论 MCF-7/AI中BCSCs亚群的比例显著高于MCF-7,提示AIs耐药和BCSCs之间可能存在着一定的相关性,BCSCs亚群比例的改变可能是AIs耐药的重要标志之一。     

从PC-3细胞中富集前列腺癌干细胞的实验研究

目的从PC-3人前列腺癌细胞中分离并富集前列腺癌干细胞。方法体外无血清悬浮培养PC-3细胞,通过传代更新、诱导分化验证PC-3悬浮成球细胞具有强增殖性、自我更新及分化潜能,实时荧光定量核酸扩增检测系统检测CD44和CD133mRNA的表达,流式细胞术检测CD44+CD133+细胞和侧群(SP)细胞比例。结果 PC-3成球细胞可以在无血清培养液(SFM)中生存并形成可以稳定传代的悬浮细胞球。PC-3成球细胞具有自我更新和分化能力,其前列腺癌干细胞标志物CD44和CD133mRNA的相对表达量分别是PC-3贴壁细胞的41.83倍和10.48倍(P<0.05)。PC-3悬浮成球细胞中CD44+CD133+细胞比率为13.94%,SP细胞含量为3.10%,均显著高于PC-3贴壁细胞的0.77%和0(P<0.05)。结论通过无血清悬浮聚球培养可以从PC-3细胞中简便、高效地富集前列腺癌干细胞。     

CD133阳性肝癌细胞周期分析

目的:免疫磁珠分选法分选肝癌细胞系SMMC7721中CD133+细胞,并检测CD133+和CD133-细胞周期.方法:采用免疫磁珠分选法分选肝癌细胞系SMMC7721中CD133+和CD133-细胞,乙醇固定,PI染色,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期.结果:CD133+细胞在SMMC7721中所占比例为0.9%,FCM检测显示SMMC7721细胞株中CD133.细胞周期处于G0/G1期的比例为85.3%,而CDl33.细胞G0/G1期的比例相对较低,为61.6%,未分选细胞居中,为68.9%.结论:人肝癌细胞系SMMC7721中CD133+亚群,比例约为0.9%,且CD133.细胞多处于静止期,具有一般干细胞的特性.     

辛伐他汀抑制鼻咽癌细胞迁移

目的：研究辛伐他汀对鼻咽癌细胞株CNE2细胞迁移的作用。方法：用损伤修复实验和transwell实验观察辛伐他汀对鼻咽癌细胞株CNE2细胞迁移的抑制作用。结果：损伤修复实验结果显示,辛伐他汀浓度和时间依赖性地抑制鼻咽癌细胞株CNE2细胞迁移,2．5μmol／L的辛伐他汀作用24h,其迁移距离为对照组24h的50．1％。transwell实验结果表明2．5μmol／L的辛伐他汀处理24h,迁移细胞数量为对照组的69．2％。结论：辛伐他汀能浓度、时间依赖性地抑制CNE2细胞迁移。为辛伐他汀的临床研究提供有利的线索。     

化疗联合G-CSF动员恶性血液病患者外周血造血干细胞

目的　探讨恶性血液病患者使用化疗联合造血生长因子进行自体外周血造血干细胞动员的效果及影响因素。方法　 19例恶性血液病患者采用化疗联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG CSF)进行外周血造血干细胞动员和采集 ,检测采集物中有核细胞及CD34+ 细胞数量。结果　 19例共采集 5 6次 ,化疗结束至采集开始平均 11 5 (6～ 19)天。获有核细胞数平均 4 0 0 (1 6 4～ 6 4 6 )×10 8/kg ;CD34+ 细胞数平均 6 78(0 0 5～ 2 3 33)× 10 6/kg。CD34+ 细胞≥ 2 5× 10 6/kg的比率为 78 9%(15 /19,95 %可信区间为 5 4 %～ 96 % ) ;CD34+ 细胞≥ 5 0× 10 6/kg的比率为 5 2 6 % (10 /19,95 %可信区间为 2 9%～ 76 % )。仅 3例 (15 79% ,95 %可信区间为 3%～ 4 0 % )CD34+ 细胞 <2 0× 10 6/kg。CD34+细胞产率与病程、动员前化疗次数、Drake化疗积分、动员前外周血白细胞计数相关 ,而与年龄、疾病状态等因素无明显相关性。动员效果也与化疗后外周血白细胞计数恢复时间相关。结论　化疗联合rhG CSF方案应用在大多数血液系恶性肿瘤患者中可获得足够的干祖细胞。对于动员病程长、化疗次数多、Drake化疗积分高、白细胞减少的患者动员效果不良。     

中药注射剂对免疫细胞表面分子的影响

目的探讨中药注射剂（TCMI）对免疫细胞致敏相关表面分子表达的影响,为TCMI致敏性评价提供参考。方法将雌性BALB／c小鼠用随机区组法分为对照组和12个TCMI组（分别为鸦胆子组、艾迪组、香丹组、葛根素组、红花组、醒脑静组、喜炎平组、舒血宁组、鱼腥草组、生脉组、黄芪组、灯盏细辛组）,每组7只小鼠。按照临床等效剂量于12个TCMI组小鼠左后肢足趾部各注射相应TCMI50μL,对照组注射等体积磷酸盐缓冲液。5d后处死动物,取左侧胴窝淋巴结制备淋巴细胞悬液,应用流式细胞术检测CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞、B细胞、CD11c^＋细胞及F4／80细胞比例,早期活化分子CD69、MHC11和协同刺激因子CD86、CD80、CD40及CD44分子的表达。结果与对照组相比,鸦胆子组CD4^＋T细胞比例及CD69表达均减低,艾迪组CD8^＋T细胞比例及CD69表达均减少,但2组B细胞比例均明显增高而其CD69表达均减低;葛根素组、香丹组和喜炎平组B细胞比例均增高而其CD69表达均减低,葛根素组T细胞CD69表达也减低,香丹组和喜炎平组CD8^＋T细胞比例降低;醒脑静组CD8^＋T细胞比例及T、B细胞CD69表达均减少;鱼腥草组、灯盏细辛组CD8^＋T细胞与B细胞CD69表达减低;红花组仅CD8^＋T细胞比例降低。与对照组比较,鸦胆子组、艾迪组、香丹组CD11c^＋细胞和F4／80细胞比例均增高,红花组和葛根素组仅F4／80细胞比例升高;除舒血宁组和鱼腥草组外,其他各组CD4^＋T细胞表面MHC11分子表达均明显增高;鸦胆子组、艾迪组和葛根素组CD11c^＋细胞CD40表达增高,醒脑静组CD11c^＋细胞CD80表达升高,香丹组和红花组CD11c^＋细胞CD86表达增高,F4／80细胞CD40表达减低。与对照组比较,香丹组和喜炎平组CD4^＋T细胞表面CD44分子表达增高而黄芪组表达减低;鸦胆子组、艾迪组、香丹组、红花组、喜炎平组和醒脑静组CD8^＋T细胞表面CD44分子表达均增高。结论不同种类TCMI引起的胴窝淋巴结免疫细胞表面分子变化不同,对其综合考察可以为TCMI致敏性评价提供参考和依据。