黄芪多糖对免疫功能影响的体外实验研究

目的探讨黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响,为黄芪多糖的临床应用提供理论依据。方法取小鼠脾细胞,置于96孔细胞培养板中,设黄芪多糖组和空白对照组,WST-1法测细胞的增殖活性;ELISA测细胞因子IL-2、IFN-γ;流式细胞术（FCM）检测细胞表型。结果黄芪多糖组细胞增殖活性显著高于空白对照组（P〈0.01）;黄芪多糖组IL-2、IFN-γ的浓度随黄芪多糖浓度的增加而增多,在一定浓度范围内呈剂量依赖关系;黄芪多糖既能刺激B淋巴细胞增殖,也能刺激T淋巴细增殖。结论黄芪多糖可增强免疫功能,它不仅能提高体液免疫功能,而且能提高细胞免疫功能。     

海洋真菌多糖(YCP)对小鼠淋巴细胞免疫功能的影响

目的研究海洋真菌多糖(YCP)促进小鼠淋巴细胞的免疫调节作用,探讨其抗肿瘤作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测YCP对淋巴细胞增殖的作用,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量,MTT法检测淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)的诱生及其细胞杀伤活性。结果YCP体外能显著提高淋巴细胞增殖反应;显著增加细胞上清液中IL-2和IFN-γ的浓度;与IL-2单独刺激相比,YCP体外能显著提高与IL-2协同诱导产生的LAK细胞对于NK不敏感的Hela细胞和NK敏感的K562细胞的杀伤作用。结论YCP能够增强小鼠脾淋巴细胞的免疫作用。     

麋鹿角醇提取液改善衰老小鼠免疫功能

目的 观察麋鹿角醇提液对D-半乳糖(D-gal)诱导衰老模型小鼠免疫功能的影响.方法 54只小鼠随机分成正常对照(NG)组和三个D-gal诱导衰老模型(MG、LG、HG)组.在造模同时,LG、HG两组分别给予麋鹿角醇提液2 g/kg和4 g/kg.测定部分免疫相关的血清指标.结果 小鼠经D-gal处理6周后出现衰老体征.MG组血清IgG水平下降,脾淋巴细胞转化刺激指数下降,血清IFN-γ浓度IFN-γ mRNA表达水平下降.HG组小鼠IgG水平、脾淋巴细胞转化刺激指数、血清中IL-2和IFN-γ的浓度升高,并增强模型鼠脾淋巴细胞IL-2、IFN-γ mRNA的表达.结论 麋鹿角醇提液能增强D-gal诱导的衰老模型小鼠体液免疫及细胞免疫功能.     

螺旋藻多糖对CHB患者PBMC免疫功能的影响

目的观察螺旋藻多糖对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞免疫功能的影响。方法运用MTT法和流式细胞术分别测定螺旋藻多糖对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞增殖能力和细胞周期的影响,采用ELISA法检测外周血单个核细胞培养上清细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4浓度,同时用RT-PCR法检测外周血单个核细胞IFN-γm RNA的表达。结果螺旋藻多糖能增强慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞的增殖能力,能增强慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞分泌IFN-γ和IL-2,且能降低分泌IL-4。螺旋藻多糖能上调慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞IFN-γm RNA的表达。结论螺旋藻多糖对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞的免疫功能具有调节作用。     

不同剂量重组(酵母)乙肝疫苗对小鼠细胞免疫应答的研究

目的：探索不同剂量重组(酵母)乙肝疫苗对小鼠细胞免疫调节作用。方法：将HBsAg免疫Balb／C小鼠一周后取淋巴结制备淋巴细胞悬液，经HBsAg刺激培养48h后检测其诱导产生的IL-2、IFN-γ的水平，另一份细胞同样经HBsAg刺激培养56h后，用氚-胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)标记16h后检测T细胞增殖的水平。用不同剂量HBsAg免疫小鼠后，检测血清中抗HBsIgG2a的水平。结果：中、高剂量组小鼠产生的IL-2、IFN-γ、抗HBsIgG2a以及T细胞增殖的水平显著高于低剂量组和对照组。结论：一定剂量的重组(酵母)乙肝疫苗可上调小鼠的细胞免疫功能。     

毛蚶多肽提取物的体外免疫活性

目的考察毛蚶多肽提取物(PEAS)的体外免疫活性。方法 MTT法测定PEAS对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及对小鼠NK细胞杀伤活性的影响;中性红吞噬法测定PEAS对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;流式细胞术测定PEAS所致小鼠脾淋巴细胞周期的变化;双抗体夹心ELISA法测定PEAS对主要细胞因子IFN-γ和IL-4分泌水平的影响。结果 PEAS能够显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖(P<0.05或0.01),能够增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红活性和小鼠NK细胞杀伤活性(P<0.05或0.01);PEAS能够促进脾淋巴细胞G0/G1期向DNA合成期(S期)转化;PEAS协同Con A作用,能够增加IFN-γ的分泌(P<0.05或0.01),并且能够抑制IL-4的分泌(P<0.05或0.01)。结论 PEAS体外可促进小鼠脾淋巴细胞、腹腔巨噬细与NK细胞的免疫功能,其机制可能与促进脾淋巴细胞DNA合成,增加IFN-γ的分泌量有关。     

人结核分枝杆菌hsp70DNA疫苗的免疫保护作用研究

目的研究人结核分枝杆菌hsp70 DNA疫苗对小鼠的免疫保护作用.方法用人结核分枝杆菌hsp70 DNA疫苗免疫雄性BALB/c小鼠,8周后,用结核杆菌H37Ra进行攻击8周,检测小鼠淋巴细胞刺激指数(SI)、腹腔巨噬细胞培养上清释放NO量、小鼠血清IFN-γ、IL-2的含量,并计数小鼠肝、肺活细菌数.结果hsp70 DNA疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞刺激指数(SI)为3.24±0.57,与对照组(2.63±0.47)比较,差异不具有显著意义;腹腔巨噬细胞培养释放NO量与对照组比较无显著差异,但较对照组高26%.免疫小鼠其血清IFN-γ量为981.40pg/ml,与对照组(565.90pg/ml)相比,差异具有显著意义(P＜0.05);小鼠血清中IL-2的浓度较对照组明显提高(P＜0.05).经hsp70 DNA疫苗免疫的小鼠受结核杆菌攻击后其肺、肝脏结核杆菌数较对照组少.结论人结核分枝杆菌hsp70 DNA疫苗免疫小鼠后能提高小鼠腹腔巨噬细胞培养上清释放NO量,刺激IFN-γ、IL-2的分泌,说明此疫苗能诱导CD4+Th1和CD8+ CIL的细胞免疫反应,增强小鼠细胞免疫功能,并使小鼠能抵抗结核杆菌的攻击.     

体外阻断CD137-CD137L途径抑制移植物抗宿主病的免疫效应

目的探讨体外阻断活化的供鼠T淋巴细胞CD137-CD137L共刺激途径抑制供鼠淋巴细胞的免疫反应。方法应用雄性供鼠BALB/c脾淋巴细胞为反应细胞,雌性受鼠C57BL/6脾淋巴细胞为刺激细胞,进行混合淋巴细胞培养(MLC)。设单抗实验组(加抗CD137L单抗)和对照组(不加抗CD137L单抗),初次和再次MLC第1、3、5、7天采用流式细胞术检测CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞;RT-PCR法检测培养的细胞IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平。结果实验组CD3+CD8+T细胞明显低于对照组(P<0.01);实验组IL-2、IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.01);实验组IL-10表达明显高于对照组(P<0.01)。结论体外MLC中,应用抗CD137L单抗孵育供鼠脾T淋巴细胞主要抑制供鼠CD3+CD8+T细胞的增殖,抑制Ⅰ类细胞因子IFN-γ及IL-2的表达,促进Ⅱ类细胞因子IL-10的表达。     

方格星虫多糖对小鼠免疫功能的影响

目的研究方格星虫多糖(Sipunculus nudus polysaccharides,SNP)对小鼠免疫功能的调节作用。方法采用ConA诱导淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定试验测试方格星虫多糖对小鼠细胞免疫功能的影响;采用血清溶血素水平检测和抗体形成细胞数检测方法测试SNP对小鼠体液免疫的影响;采用碳廓清试验测试SNP对小鼠非特异性免疫的影响。结果 SNP能明显提高小鼠的细胞免疫和体液免疫功能,促进小鼠碳廓清速率和小鼠肝脏与脾脏对异物的吞噬功能。结论 SNP可提高小鼠的免疫功能。     

基于多重细胞因子释放的中药活性多糖筛选和抗肿瘤作用研究

目的 肿瘤微环境的细胞因子对肿瘤进展具有重要作用。本研究拟以细胞因子释放为切入点筛选具有抗肿瘤作用的中药活性多糖。方法 选取20种中药多糖,采用Cytometric Bead Array (CBA)结合流式细胞技术筛选活性多糖;采用小鼠B16F10黑色素瘤荷瘤模型观察活性多糖的体内抗肿瘤作用。结果 17种中药多糖能显著刺激脾细胞分泌TNF-α,5种多糖能刺激脾细胞分泌IL-6;红花多糖和山慈姑多糖还能显著刺激脾细胞分泌IFN-γ。红花多糖能抑制黑色素瘤B16F10细胞在小鼠体内生长。结论 基于多重细胞因子的测定可以作为免疫抗肿瘤中药的筛选手段。红花多糖具有较好的免疫刺激作用和抗肿瘤作用。