LC-MS/MS法测定老年房颤患者血浆中利伐沙班的浓度

目的：建立LC-MS/MS法检测老年房颤患者血浆中利伐沙班血药浓度,用于患者服用利伐沙班后血药浓度监测及药动学研究。方法：血浆样品经含内标利伐沙班-D4乙腈沉淀蛋白,使用色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱（2.1 mm × 100 mm,3.5 μm）,流动相为0.1%甲酸水（A）∶甲醇（B）,采用梯度洗脱分离,流速0.3 mL·min-1,柱温为40 ℃。采用电喷雾离子化电离源（ESI）,正离子方式检测,利伐沙班和内标的离子对分别为m/z 436.4→m/z 145.2和m/z 440.7→m/z 145.3。结果：血浆中利伐沙班在5~500 ng·mL-1范围内线性关系良好（r=0.999 7）。最低检测浓度为5 ng·mL-1,提取回收率与基质效应分别为90.8%~101.3%和95.2%~103.3%。质控样本日内和日间准确度分别为98.6%~112.8%和99.7%~112.9%,相对标准差（RSD）均<10%。样本稳定性符合要求。结论：本研究建立的方法快速、准确,适用于血浆利伐沙班的血药浓度检测和药动学研究。     

利伐沙班在老年非瓣膜性房颤患者中的药动学研究

目的 建立LC-MS/MS测定人血浆中利伐沙班的浓度并进行药动学研究。方法 人血浆样品用乙腈沉淀蛋白后,选用ZORBAX Eclipse XDB C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5 mm),以乙腈-10 mmol醋酸铵溶液(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,流速为0.30 mL·min^-1,采用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 436.2→m/z 145.2(利伐沙班)和m/z 256.1→m/z 165.2(内标苯海拉明)。结果 血浆中利伐沙班的线性范围为5.0~1 000 ng·mL^-1(r=0.995 8),定量下限为5.0 ng·mL^-1;方法回收率为94.1%~106.7%;日内、日间RSD均<15%;提取回收率为84.4%~91.3%,无明显基质效应。结论 该方法快速、灵敏、准确、专属性强、重复性好,适用于人血浆中利伐沙班的血药浓度检测和药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定肝功能不全患者血浆利伐沙班的浓度及其临床应用

摘 要 目的：建立高效液相色谱 串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定肝功能不全患者血浆中利伐沙班浓度的方法。 方法: 采用Agilent SB C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,1.8 μm）;流动相：乙腈 10 mmol·L-1醋酸铵缓冲液 冰醋酸（50∶50∶0.45）;流速：0.2 ml·min-1,柱温：20℃。质谱条件为电喷雾离子源,正离子模式检测,扫描方式为多反应离子监测（MRM）模式;内标法定量,用于定量分析的离子反应为m/z 436.1→145.1（利伐沙班）,m/z 837.0/679.4（内标罗红霉素）。 结果: 血浆利伐沙班浓度在5~1 000 ng·ml-1范围内线性关系良好（r=0.999 2）。日内和日间精密度均<7%,绝对回收率98.19%~103.47%,基质效应85.53%~104.06%。血浆样品室温放置6 h、反复冻融3次及-20℃冷冻30 d稳定性良好,样品浓度均无显著变化。应用本文所建立的方法测定了3例肝功能不全患者服用利伐沙班后的血药浓度,发现餐后服用和空腹服用利伐沙班可能会影响其吸收,而肝功能不全的严重程度可能会使利伐沙班的体内药动学存在较大差异。 结论: 所建方法快速简便、灵敏准确,可用于测定人血浆中利伐沙班的浓度,并可为利伐沙班在人体中的药动学研究提供方法学基础。     

辛伐他汀和利伐沙班联合给药对大鼠体内利伐沙班药动学的影响

目的:研究辛伐他汀和利伐沙班联合给药对大鼠体内利伐沙班药动学的影响。方法:将30只大鼠随机分为利伐沙班组(灌胃生理盐水+利伐沙班2.6 mg/kg)和辛伐他汀+利伐沙班组(灌胃辛伐他汀5.3 mg/kg+利伐沙班2.6 mg/kg),每组15只。各组大鼠先连续灌胃生理盐水/辛伐他汀5 d,每天给药1次,第6天再灌胃利伐沙班+生理盐水/辛伐他汀1次,分别于给药前和末次给药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、8、12、24 h自眼内眦取血0.5 m L,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中利伐沙班的质量浓度,绘制药-时曲线,并用DAS 2.1.1软件拟合药动学参数。结果:利伐沙班组和辛伐他汀+利伐沙班组大鼠血浆中利伐沙班的AUC0-24 h分别为(2 599.86±791.82)、(2 777.74±989.25)ng·h/mL,AUC_(0-∞)分别为(3 053.28±1 116.06)、(3 396.78±1 409.80)ng·h/mL,t1/2分别为(8.06±3.52)、(9.25±4.18)h,t_(max)分别为(0.65±0.28)h、(0.60±0.13)h,CLZ分别为(0.95±0.32)、(0.88±0.34)L/(h·kg),V_d分别为(10.37±4.43)、(11.07±4.48)L/kg,c_(max)分别为(424.93±145.30)、(507.15±132.40)ng/mL;与利伐沙班组比较,辛伐他汀+利伐沙班组AUC_(0-24 h)、AUC_(0-∞)、t_(1/2)、V_d、c_(max)分别增加了6.40%、10.11%、12.86%、6.32%、16.21%,t_(max)、CLZ分别降低了8.33%、7.95%,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:辛伐他汀(5.3 mg/kg)与利伐沙班(2.6 mg/kg)联用后,利伐沙班在大鼠体内的药动学参数无显著性变化。     

利伐沙班导致出血事件的群体药动学模型建立及影响因素分析

目的：建立利伐沙班出血患者群体药动学模型并对出血事件的影响因素进行分析。方法：回顾性选取93例服用利伐沙班抗凝治疗发生出血事件的患者为研究对象,收集192例次利伐沙班稳态峰谷浓度数据,以非线性混合效应模型法建立群体药动学模型并以Bayesian反馈法计算药时曲线下面积（AUC）,同时分析该群体PK模型协变量与预估药物暴露量的相关性。结果：建立的群体药动学模型可对数据进行较好拟合,协变量肾小球滤过率（e-GFR）对清除率（CL）有显著影响,最终模型为CL=77.2×EGFR/71.56^θCLcr。协变量e-GFR和年龄影响利伐沙班的估算AUC和峰浓度（C_max）数值。结论：利伐沙班出血患者群体药动学模型稳定、有效。患者肾功能和年龄影响利伐沙班出血人群体内药物暴露量。     

利伐沙班及其拮抗剂对大鼠出血模型的影响

目的：研究利伐沙班的出血副作用,并对其拮抗剂对大鼠出血模型的影响进行探索。方法大鼠 ig 给予不同剂量利伐沙班（0.3～30 mg/kg）1.5 h后,根据断尾法测定的出血时间、出血量,以及凝固法测定的血浆凝血酶原时间（PT）,观察其出血副作用;大鼠ig给予大剂量利伐沙班（30 mg/kg）制备大鼠出血模型,尾iv人凝血酶原复合物或白眉蛇毒血凝酶,通过测定大鼠断尾出血时间、出血量以及血浆PT,观察两种药物对出血作用的拮抗效果。结果大鼠ig给予不同剂量的利伐沙班后,出血时间、出血量、血浆PT都明显增加,与利伐沙班的剂量呈正相关;人凝血酶原复合物能够显著抑制利伐沙班所致的出血时间、出血量和血浆PT的增加,而白眉蛇毒血凝酶对上述指标无明显影响。结论利伐沙班存在剂量相关性的出血副作用,在出血严重时,可采用人凝血酶原复合物作为拮抗剂进行治疗。     

利伐沙班的合成

 目的：合成高效、直接的FXa抑制剂利伐沙班。方法：以2-(2-氯乙氧基)乙酰氯、对硝基苯胺为原料,合成利伐沙班。结果：合成了利伐沙班,总收率为42.46%,纯度95.19%(HPLC)。结论：通过优化反应条件,缩短了反应时间。     

利伐沙班的合成

目的：研究利伐沙班的化学合成新方法。方法以对硝基苯胺为起始原料,通过开环后环合、还原制得4-（4-氨基苯基）-3-吗啉酮,再经加成、环合、脱保护、缩合4步反应生成最终产物利伐沙班。结果合成的利伐沙班的总收率为32.1％（以对硝基苯胺计）,其结构经红外光谱（ IR）、氢核磁共振（1 H-NMR）和质谱（ MS）确证。结论本研究原料价廉易得,合成操作简单,成本低,适合工业化生产。     

富含铁元素食物对非洛地平片在Beagle犬体内药动学的影响

目的 研究高铁饮食对非洛地平在Beagle犬体内药动学影响。方法 采用随机、开放、单剂量给药、双交叉试验设计。12条健康Beagle犬采用随机数字表法分为两组,每组6条,分别空腹和餐后服用5 mg非洛地平片,给药前后按不同采血时间点采集血样,采用液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法测定血浆中非洛地平浓度,用DAS3.2.8软件计算药动学参数。结果 空腹与餐后主要药动学参数如下:Cmax(12.59±2.17)、(7.13±2.96)ng/mL,tmax(1.25±0.24)、(1.32±0.35)h,t1/2(1.1±0.69)、(1.2±0.72)h,AUC0-12(19.46±5.23)、(11.87±3.85)ng·h-1·mL-1,AUC0-∞(20.69±5.75)、(12.76±4.18)ng·h-1·mL-1。以AUC0-12计算,实验组的相对生物利用度F为(61.0±12.7)%。与对照组相比,实验组Beagle犬的生物利用度偏低,而且达峰浓度也降低,说明食物中Fe3+抑制了非洛地平药物的吸收。结论 高铁饮食可显著降低非洛地平片在Beagle犬体内的吸收程度,但不影响其吸收速度。     

利伐沙班的合成

目的研究利伐沙班的化学合成新方法。方法以对硝基苯胺为起始原料,通过开环后环合、还原制得4-(4-氨基苯基)-3-吗啉酮,再经加成、环合、脱保护、缩合4步反应生成最终产物利伐沙班。结果合成的利伐沙班的总收率为32.1%(以对硝基苯胺计),其结构经红外光谱(IR)、氢核磁共振(1H-NMR)和质谱(MS)确证。结论本研究原料价廉易得,合成操作简单,成本低,适合工业化生产。     

Rivaroxaban

There is a real and viable need in the anticoagulant arena for a safe, robust, effective oral anticoagulant drug that measures up to warfarin in providing protection against thrombosis and compares favorably (if not better) with regard to safety profile, without the need for routine and often cumbersome monitoring. Many potential antithrombotic agents are in development, and the oral factor Xa inhibitors are one such class of drug. By inhibiting both free and clot-bound factor Xa complexes, the oral factor Xa inhibitors prolong activated partial thromboplastin time and prothrombin times in a dose-dependent manner without the need for antithrombin, thus differing from drugs such as fondaparinux, heparin, etc. Early human experiments demonstrated a favorable pharmacokinetic and pharmacodynamic profile with good absorbtion, effective inhibition of factor Xa activity and no significant accumulation of the drug in the body. Other studies on healthy human volunteers showed an efficacious antithrombotic profile, minimal interactions with food, fasting and concomitant antiplatelet-drug (aspirin and naproxen) administration, and effectiveness in extremes of body weight (>120 kg). Rivaroxaban has been tested in trials to prevent and treat venous thromboembolism, and the results were indicative of a safe, effective and therapeutic pharmacological profile. Results so far from phase III studies currently underway that assess the role of rivaroxaban in preventing arterial thromboembolism in both high-risk atrial fibrillation and acute coronary syndrome patients will be the focus of interest and indeed intense speculation as to whether we should modify our current practice in favor of using a more convenient and effective pharmacological agent.     

Rivaroxaban

Rivaroxaban (Xarelto?), an oral oxazolidinone-based anticoagulant, is a potent, selective, direct inhibitor of factor Xa that is used in the prevention of venous thromboembolism (VTE) in adult patients after total hip replacement (THR) or total knee replacement (TKR) surgery. In large, clinical trials, oral rivaroxaban 10?mg once daily was more effective than subcutaneous enoxaparin 40?mg once daily in preventing postoperative VTE in patients undergoing THR or TKR surgery. Rivaroxaban was associated with significantly lower incidences of the primary endpoint, total VTE (composite of deep vein thrombosis, non-fatal pulmonary embolism, or death from any cause) compared with enoxaparin regimens across all studies. For example, in the largest trial in patients undergoing THR, total VTE occurred in 1.1% of rivaroxaban recipients and 3.7% of enoxaparin recipients (absolute risk reduction 2.6% [95% CI 1.5, 3.7]) in the modified intent-to-treat population. Notably, the greater efficacy of rivaroxaban was achieved without a significant increase in the incidence of major bleeding episodes compared with enoxaparin; bleeding events were the most frequently reported adverse events across clinical trials. Pyrexia, vomiting, nausea, and constipation were the most frequently reported of the non-bleeding treatment-emergent adverse events in rivaroxaban recipients and occurred at a similar rate to that with enoxaparin treatment. In addition, preliminary pharmacoeconomic analyses in Canada and the US indicate that rivaroxaban is a cost-saving treatment strategy versus enoxaparin. Although the position of rivaroxaban relative to other therapies remains to be fully determined, it is an effective option for the prophylaxis of VTE following THR and TKR.     

抗凝药Rivaroxaban

Rivaroxaban（Bay-59-7939）是由拜耳公司开发的小分子口服抗凝药,可直接抑制凝血因子Xa（factor Xa,F Xa）,不需血浆辅助因子的参与就可发挥凝血调节作用,且对凝血过程中的相关丝氨酸蛋白酶不产生干扰。     

利伐沙班片处方与工艺的优化

目的对利伐沙班片处方与工艺进行优化,考察处方工艺。方法以硬度、溶出度、流动性为考察指标,选择适宜的崩解剂,稀释剂,黏合剂,增溶剂。结果根据处方制备的利伐沙班片符合中国药典要求。结论利伐沙班片处方工艺成熟稳定,可控性好,溶出好,适合大规模生产。     

利伐沙班中间体的合成

4-(3-氧代-4-吗啉基)苯胺与氯甲酸苄酯发生取代反应制得N-[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基甲酸苄酯,后者与(S)-N-[(2-乙酰氧基-3-氯)丙基]乙酰胺经缩合制得(S)-3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]-5-乙酰胺甲基-1,3-噁唑烷-2-酮,再经酸性水解即可制得合成利伐沙班的重要中间体(S)-3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]-5-氨甲基-1,3-噁唑烷-2-酮,总收率约35％.     

利伐沙班合成路线图解

利伐沙班(rivaroxaban,1),化学名为5-氯-N-[[(5S)-2-氧代-3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]-1,3-噁唑烷-5-基]甲基]噻吩-2-甲酰胺,是拜耳和强生公司联合研发的新型口服抗凝药,2008年在欧盟和加拿大获得批准,用于预防关节置换术后的静脉血栓.本品通过直接抑制Xa因子达到抗凝作用,有望成为肝素和维生素K拮抗药的替代物[1-3].     

HPLC法测定利伐沙班中对映异构体的含量

目的：建立高效液相色谱法测定利伐沙班中对映异构体含量。方法：色谱柱为 Chiralpak IA（250 mm ×4.6 mm,5μm）,流动相为100%甲醇,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为250 nm,柱温为40℃。结果：利伐沙班与其对映异构体之间的分离度大于2.0,两者在0.5~1000.00μg·ml^-1范围内呈良好的线性关系,r均为0.9999,对映异构体检测限为0.17 ng,平均加样回收率为102.9%,RSD为1.54%（n=6）。结论：该方法准确、快速,可用于利伐沙班中对映异构体的含量测定。     

利伐沙班在急性冠状动脉综合征中的应用研究

目的探讨利伐沙班片在急性冠状动脉综合征中的应用研究。方法选取2016年1月至2018年1月在沈北新区中心医院内二科就诊的80例急性冠状动脉综合征患者,随机分为试验组40例,对照组40例,均采用常规治疗。试验组加利伐沙班片治疗。比较两组患者心血管事件发生率和出血发生率。结果两组患者观察指标比较,试验组各指标优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利伐沙班片治疗急性冠状动脉综合征疗效显著,安全性高,值得推广。