Breg Tfh Tfr细胞在免疫性血小板减少症患者中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）、滤泡辅助性T细胞（Tfh）、滤泡调节性T细胞（Tfr）在免疫性血小板减少症（ITP）中的作用和临床意义。方法 选择2017年10月至2019年10月安徽医科大学第一附属医院收治的初次诊断的30例ITP患者为ITP组，同期选择健康对照组25例，应用流式细胞术（FCM）检测外周血Breg、Tfh、Tfr细胞的表达水平并统计分析。结果 ITP组患者外周血CD19⁺B细胞中Breg[（1.93±1.21）%]、IL-10⁺Breg[（28.64±10.31）%]水平低于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；外周血CD4⁺T细胞中Tfh细胞比例高于健康对照组[（12.18±5.26）% vs（6.21±1.78）%]，Tfr细胞比例[（1.64±1.01）%]、Tfr/Tfh比值（0.21±0.13）低于健康对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 Breg细胞降低，IL-10分泌减少，Tfr/Tfh比值失衡，在ITP发病过程中可能起到重要的作用。     

基于尿液代谢组学研究碘克沙醇损伤肾小管功能的作用机制

目的 研究使用碘克沙醇行冠脉造影后肾小管功能出现损伤患者尿液中内源性代谢物的代谢特征，分析碘克沙醇导致肾小管损伤的潜在机制。方法 选择使用碘克沙醇冠脉造影后24 h内肾小管功能正常和肾小管功能出现损伤的患者各50例，分为正常组(n=50)和损伤组(n=50)，收集其造影24 h内的晨尿尿液样本。采用超高效液相色谱串联质谱以及正交偏最小二乘法(orthogonal partial least squares，OPLS-DA)对尿液样品进行代谢分析；利用Metlin、HMDB、KEGG、MetaboAnalyst数据库考察碘克沙醇损伤肾小管功能的代谢特征。结果 鉴定出与碘克沙醇损伤肾小管功能相关的差异代谢物25种[变量权重值(variable important in projection，VIP)>1]，其中有3种代谢差异代谢物的含量显著下降(VIP>1，P<0.05)，分别为L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸。25种差异代谢物涉及的代谢通路有9条，主要为氨基酸代谢，其中Impact>0.10，P<0.05的目标代谢通路有2条，分别为苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成通路及苯丙氨酸代谢通路。结论 使用碘克沙醇行冠脉造影后肾小管功能出现损伤患者的尿液代谢主要表现为氨基酸代谢紊乱，尿液中L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸含量显著下降可提示肾小管功能出现损伤。碘克沙醇相关早期肾损伤的发病机制主要是通过影响苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成通路，苯丙氨酸代谢通路来损伤肾小管，进而影响其功能。     

槲皮素对宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响

目的 观察槲皮素对人宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响,初步探讨其相关作用机制。方法 用不同浓度槲皮素（空白对照、20、40、80 μmol/L）,顺铂（空白对照、5、10、15、20 μg/mL）以及两者联合（槲皮素40 μmol/L+顺铂 10 μg/mL）分别作用于C33A细胞24 h和48 h后,噻唑蓝（MTT法）检测细胞活力的变化;流式细胞术检测槲皮素对C33A细胞周期的影响;Western blot检测槲皮素对C33A细胞Cyclin D1、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,经过槲皮素处理24 h后,各组细胞活力分别为86.92±3.953）%（20 μmol/L组）、（66.54±3.932）%（40 μmol/L组）和 （52.21±2.970）%（80 μmol/L组）,均低于空白对照组的（98.35±1.230）% ;经过槲皮素处理48 h后,各组细胞活力分别为（65.19±7.071）%（20 μmol/L组）、（47.04±8.881）%（40 μmol/L组）和 （29.71±6.505）%（80 μmol/L组）,均低于空白对照组的（96.97±1.788）%。;此外,槲皮素40 μmol/L+顺铂 10 μg/mL联合作用于C33A细胞24h后,细胞活力下降为（31.12±2.835）%; 48 h后,细胞活力下降为（17.86±3.182）%,同空白对照组相比均出现了明显的下降,（31.12±2.835）%; 48 h后,细胞活力下降为（17.86±3.182）%（P<0.05）。细胞周期检测结果显示,槲皮素可增加C33A细胞G₀/G₁期数量,减少S期数量。Western blot结果显示,槲皮素可下调C33A细胞Cyclin D1蛋白的表达,还可上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结论 槲皮素通过下调Cyclin D1蛋白的表达可以抑制C33A细胞的活力和增殖,槲皮素通过上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,可以诱导C33A细胞的凋亡。     

去甲斑蝥素通过下调c-met基因逆转肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药的研究

目的 本研究通过去甲斑蝥素（NCTD）作用于肺癌顺铂（DDP）耐药细胞A549/DDP,探讨其对DDP耐药的逆转作用及其相关机制。方法 应用CCK-8法检测NCTD对A549和A549/DDP细胞活力的影响、DDP对A549细胞和A549/DDP的半数抑制浓度（IC₅₀）、NCTD联合不同浓度DDP对A549/DDP细胞DDP耐药性的影响;细胞克隆形成实验检测NCTD、DDP单给药及NCTD与DDP联合用药对A549/DDP细胞克隆形成率的影响;Western blotting法检测A549/DDP和A549细胞中c-met表达,以及NCTD、DDP单给药及NCTD与DDP联合用药对A549/DDP细胞内c-met蛋白表达的影响。结果 NCTD剂量相关性地抑制A549和A549/DDP细胞的活力,选择抑制率小于10%的最大NCTD浓度即10 μmol/L作为逆转浓度;DDP作用于A549/DDP和A549细胞的IC₅₀分别为15.11和5.04 μmol/L,差异有统计学意义（P<0.01）;A549/DDP细胞中c-met表达明显高于A549细胞;用NCTD（10 μmol/L）处理后,DDP对A549/DDP细胞的IC₅₀从15.11 μmol/L减少到8.06 μmol/L,差异显著（P<0.01）;与DDP单给药组比较,NCTD联合DDP作用明显降低A549/DDP细胞克隆形成率（P<0.01）;Westernblotting结果显示,NCTD联合DDP作用明显抑制顺铂耐药细胞A549/DDP细胞中c-met蛋白的表达,单用DDP或NCTD与对照组比较差异不明显。结论 NCTD与DDP联用可逆转A549/DDP细胞对DDP耐药,其机制可能与抑制c-met蛋白表达有关。     

甘精胰岛素联合西格列汀对首诊2型糖尿病血糖波动炎症因子及低血糖事件的影响

目的 探讨甘精胰岛素联合西格列汀对首诊2型糖尿病（T2DM）患者血糖波动、炎症因子及低血糖事件的影响。方法 选择2017年6月至2018年10月在无锡市第三人民医院接受治疗的124例首诊T2DM患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组与观察组,每组62例。对照组给予甘精胰岛素联合瑞格列奈治疗,观察组给予甘精胰岛素联合西格列汀治疗。比较两组患者空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2 h PBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、日内血糖平均波动幅度（MAGE）、日内血糖波动次数（NGE）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、C反应蛋白（CRP）、体质指数（BMI）,以及低血糖发生率和甘精胰岛素用量的差异。结果 观察组患者治疗后的MAGE为（2.53±1.19）mmol/L、NGE为（1.53±0.93）mmol/L,均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者治疗前与治疗后MAGE、NGE的差值进行比较,差异有统计学意义（P<0.05）。观察组患者治疗后的血清CRP水平为（2.76±1.03）mg/L、TNF-α为（19.83±8.41）ng/L、IL-6为（18.61±4.73）ng/L,均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者治疗前与治疗后血清CRP、TNF-α、IL-6差值进行比较,差异有统计学意义（P<0.05）。观察组患者治疗后的BMI为（23.24±2.83）kg/m²,对照组为（24.29±3.05）kg/m²,差异有统计学意义（P<0.05）。观察组患者低血糖发生率为1.60%、甘精胰岛素用量为（25.54±5.09）U/d,均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 甘精胰岛素联合西格列汀能够减少血糖波动,减轻机体微炎症反应,减少低血糖发生率和甘精胰岛素用量。     

基于血浆代谢组学的新生化颗粒对急性血瘀大鼠作用机制研究

目的 研究新生化颗粒对急性血瘀大鼠血浆中内源性代谢物的影响,探讨新生化颗粒治疗急性血瘀证的可能机制。方法 将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、复方丹参滴丸（阳性药,0.10 g·kg^-1）组和新生化颗粒低、高剂量（4.86、9.72 g·kg^-1）组,给药体积10 mL·kg^-1,对照组和模型组大鼠ig给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）,每天早晚各ig给药1次,共7次。第5次给药后,除对照组外,采用sc盐酸肾上腺素和冰水浴制备大鼠急性血瘀模型。通过测定全血黏度（WBV）、血浆黏度（PV）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）和凝血酶时间（TT）,观察不同剂量的新生化颗粒对急性血瘀大鼠血液流变学和凝血功能的影响;采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用（UHPLCQTOF-MS）法检测各组大鼠血浆中的内源性代谢物,通过多变量统计分析筛选潜在生物标志物,结合质谱信息、数据库检索和标准品比对鉴定潜在生物标志物,并将鉴定到的生物标志物导入MetaboAnalyst 5.0数据库推测其可能的代谢通路。结果 与模型组比较,新生化颗粒显著降低急性血瘀大鼠WBV、PV和FIB,显著延长APTT、PT和TT（P＜0.05、0.01）。代谢组学结果显示,从急性血瘀大鼠血浆中共鉴定出21个差异代谢物（准确鉴定7个）,与对照组比较,模型组大鼠血浆中乳酸、肉碱和肌酐等10个内源性代谢物显著上调,苹果酸、琥珀酸和色胺等11个内源性代谢物显著下调（P＜0.05、0.01）;除了硫酸吲哚酚和脱氧胞苷外,新生化颗粒对其他19个生物标志物均有显著回调作用（P＜0.05、0.01）。这些标志物主要涉及苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、苯丙氨酸代谢、亚油酸代谢、三羧酸循环和色氨酸代谢。结论 新生化颗粒对急性血瘀大鼠体内紊乱代谢物有较好的回调作用,其作用机制主要与调节苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,亚油酸代谢,三羧酸循环和色氨酸代谢通路有关。     

碳酸镧联合左卡尼汀治疗维持性血液透析慢性肾功能衰竭的临床研究

目的 探讨碳酸镧联合左卡尼汀治疗维持性血液透析慢性肾功能衰竭的临床疗效。方法 选取2019年1月—2021年12月在沧州市中心医院进行治疗的88例维持性血液透析慢性肾功能衰竭患者为研究对象,根据住院号的奇偶分为对照组和治疗组,每组各44例。对照组静脉滴注左卡尼汀注射液,50 mg/kg同0.9%氯化钠注射液100 mL配伍,1次/d;治疗组在对照组治疗基础上口服碳酸镧咀嚼片,0.5 g/次,3次/d。两组均连续治疗3个月。观察两组的临床疗效,比较两组治疗前后相关量表评分、肾功能指标、骨代谢指标、细胞因子指标和血管钙化积分的变化情况。结果 治疗后,治疗组总有效率是93.18%,显著高于对照组的81.82%（P＜0.05）。治疗后,两组生活质量综合评定问卷（GQOLI-74）评分、社会支持评定量表（SSRS）评分、慢性病患者生命质量测定量表体系（QLICD-CRF 2.0）评分均较治疗前显著升高,但急性生理与慢性健康（APACHEⅡ）评分、SAPSⅡ评分均显著降低（P＜0.05）,并以治疗组改善的更明显（P＜0.05）。治疗后,两组患者血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平均较治疗前显著降低,但内生肌酐清除率（Ccr）水平均显著升高（P＜0.05）;治疗后,治疗组肾功能指标改善优于对照组（P＜0.05）。治疗后,两组血钙（Ca）血磷（P）、全段甲状旁腺激素（iPTH）水平均较治疗前显著降低（P＜0.05）,并以治疗组改善更明显（P＜0.05）。治疗后,两组血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、胱抑素C（CysC）、基质细胞衍生因子-1（TSP-1）、β2-微球蛋白（β2-MG）、人成纤维细胞生长因子-23（FGF-23）均较同组治疗前显著降低,而骨形态发生蛋白-7（BMP-7）显著升高（P＜0.05）,并以治疗组改善更明显（P＜0.05）。治疗后,两组患者冠状动脉钙化（CACS）积分、腹主动脉钙化（AACS）积分均显著降低（P＜0.05）,并以治疗组改善更明显（P＜0.05）。结论 碳酸镧联合左卡尼汀治疗维持性血液透析慢性肾功能衰竭疗效明显,可有效改善患者肾功能和骨代谢指标,改善血清细胞因子水平,延缓血管钙化,有着良好的临床应用价值。     

他克莫司对白癜风小鼠Th17/Treg细胞平衡及黑素细胞丢失的影响

目的 探究他克莫司对白癜风小鼠辅助性T17（Th17）/调节性T （Treg）细胞平衡和黑素细胞丢失的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组和他克莫司低、中、高剂量组（涂抹10、50、100 mg 0.03%他克莫司软膏）,使用松香/蜡混合物对小鼠背部相同位置进行去毛,大小为2 cm×2 cm,将其分为两部分：用药区域与非用药区域,面积1：1。除对照组外,于小鼠背部用药区均匀涂抹50 mg 40%莫诺苯宗软膏,每天1次,连续90 d,制备白癜风模型。莫诺苯宗涂抹30 d后开始于相同位置涂抹他克莫司软膏,2种药膏涂抹时间间隔7 h,他克莫司软膏每天早晚各涂抹1次,连续用药60 d。肉眼观察小鼠皮毛脱色情况并进行脱色评分,通过反射式共聚焦显微镜（RCM）观察小鼠皮肤黑素细胞和黑色素的分布,取小鼠皮损进行苏木精-伊红染色（HE）和马松染色（MF）对基底层黑素细胞和含黑色素的毛囊进行计数,通过流式细胞术测定小鼠外周血中Th17和Treg淋巴细胞的比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血白细胞介素-17（IL-17）、IL-22和叉头型基因p3（Foxp3）的含量。结果 与对照组比较,白癜风模型组小鼠用药区皮毛明显脱色,脱色评分显著升高（P<0.05）,皮损处色素明显缺失;含黑色素的毛囊和黑素细胞显著减少（P<0.05）;Th17/Treg淋巴细胞比例显著升高（P<0.05）;血清IL-17、IL-22水平显著上升,Foxp3水平显著降低（P<0.05）。与模型组比较,他克莫司各组小鼠皮毛脱色情况明显改善,脱色评分显著降低（P<0.05）,皮损处可见色素分布及黑素细胞;含黑色素的毛囊和黑素细胞显著增多（P<0.05）;Th17/Treg淋巴细胞比例显著降低（P<0.05）;IL-17、IL-22水平显著降低,Foxp3水平显著升高（均P<0.05）。结论 他克莫司可调控白癜风小鼠Th17/Treg淋巴细胞平衡,抑制其黑素细胞丢失。     

慢性温和不可预知应激抑郁模型大鼠脑组织1H-NMR代谢组学研究

目的 采用高分辨核磁共振¹H谱（¹H-NMR）代谢组学技术研究慢性温和不可预知应激（CUMS）抑郁大鼠脑组织中代谢物及代谢通路的变化，探讨抑郁症的发病机制。方法 12只雄性SD大鼠随机分为模型组和对照组，采用CUMS对模型组大鼠进行为期4周的造模，进行称体质量、旷场实验和糖水偏爱实验验证模型是否成功，造模结束后收集大鼠脑组织。采用两相提取法（甲醇/氯仿/水）对脑组织进行提取，得到水溶性和脂溶性代谢物。应用¹H-NMR技术结合多元统计和代谢通路分析筛选出与抑郁相关的脑内差异代谢物，并构建其代谢通路。结果 行为学数据显示，与对照组比较，模型组大鼠的体质量、糖水偏爱率、旷场的穿格数和直立次数均显著降低（P<0.05），显示了抑郁状态。在大鼠脑组织的¹H-NMR图谱中共指认出35种内源性代谢产物。脑组织中水溶性和脂溶性代谢物主成分分析（PCA）均显示模型组与对照组分开，与行为学结果一致，表明造模成功；OPLS-DA分析找到9个水溶性差异代谢物和6个脂溶性差异代谢物。就水溶性代谢物而言，与对照组比较，模型组中肌酐、谷氨酰胺、牛磺酸和γ-氨基丁酸含量显著增加（P<0.05、0.01、0.001），丙二醇、谷氨酸、亮氨酸、缬氨酸和赖氨酸含量显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。就脂溶性代谢物而言，与对照组比较，模型组-（CH₂） n和-N （Me₃）₃含量显著升高（P<0.05、0.001），胆固醇的C18/19甲基、R-CH₃、CH₂OPO₂-、-CH=CH-含量显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。与对照组比较，CUMS造模后5条代谢通路发生显著变化：缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成，牛磺酸和亚硫磺酸代谢，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，糖降解和糖异生通路和丙酮酸代谢。结论 运用¹H-NMR代谢组学技术结合多元统计分析和代谢通路分析，阐明抑郁症的发病机制与能量代谢、氨基酸代谢和神经递质合成等相关。     

复方皂矾丸联合琥珀酸亚铁治疗缺铁性贫血的临床研究

目的 探讨复方皂矾丸联合琥珀酸亚铁治疗缺铁性贫血的临床效果。方法 选取2019年1月—2021年10月海南医学院第一附属医院收治的116例缺铁性贫血患者,随机分成对照组（58例）和治疗组（58例）。对照组口服琥珀酸亚铁片,2片/次,2次/d。在对照组基础上,治疗组饭后口服复方皂矾丸,8丸/次,3次/d。两组均连续治疗8周。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者主要症状评分,血常规参数血红蛋白（HBG）、平均红细胞血红蛋白量（MCH）、平均红细胞体积（MCV）、红细胞比容（HCT）水平,铁代谢参数血清铁蛋白（SF）和转铁蛋白饱和度（TSAT）水平,及血清可溶性转铁蛋白受体（sTFR）、促红细胞生成素（EPO）、一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果 治疗后,治疗组临床有效率为96.55%,显著高于对照组[86.21%,P＜0.05]。治疗后,两组主要症状评分较治疗前均显著减少（P＜0.05）,且均以治疗组的下降更显著（P＜0.05）。与治疗前对比,治疗后两组血常规参数HGB、MCH、MCV、HCT均显著增高（P＜0.05）,且治疗组的改善更显著（P＜0.05）。治疗后,两组SF水平和TSAT均较治疗前显著升高,而血清sTFR、EPO水平则均显著降低（P＜0.05）,且治疗后,治疗组SF、TSAT、sTFR和EPO水平均显著优于对照组（P＜0.05）。治疗后,两组血清NO、TNF-α及IL-6水平均较治疗前显著下降（P＜0.05）,且治疗后治疗组降低作用较对照组更显著（P＜0.05）。结论 复方皂矾丸联合琥珀酸亚铁治疗缺铁性贫血可获得确切疗效,能明显缓解患者贫血症状,改善血常规及铁代谢,并能进一步抑制血清NO、TNF-α和IL-6的表达水平,安全性较高。     

川芎嗪对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞增殖的影响

目的 观察川芎嗪对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞（HRCECs）增殖的影响。方法 将HRCECs细胞分为对照（生理盐水）组、模型（25 mmol/L葡萄糖）组和川芎嗪低、中、高浓度（50、100、200 μmol/L）组,培养48 h后,MTT细胞毒实验检测细胞增殖变化,流式细胞技术检测细胞周期,ELISA法检测血管内皮生长因子（VEGF）表达。结果 与对照组比较,高糖对HRCECs细胞增殖、分裂（M）期比例、上清VEGF浓度均具有显著促进作用（P<0.05、0.01）;与模型组比较,低、中、高浓度川芎嗪对高糖诱导的HRCECs细胞增殖、分裂（M）期比例、上清VEGF浓度均发挥显著抑制作用（P<0.05、0.01）,且呈浓度相关性。结论 川芎嗪可能通过抑制高糖诱导的HRCECs细胞VEGF高表达,阻滞细胞周期,发挥抑制HRCECs细胞增殖的作用。     

对乙酰氨基酚对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞的毒性作用比较

目的 建立大鼠原代肝细胞提取鉴定体系,比较对乙酰氨基酚(APAP)对大鼠原代肝细胞和永生化细胞BRL-3A的毒性作用。方法 采用胶原酶原位两步灌流法提取大鼠原代肝细胞,通过过碘酸雪夫染色(PAS)和肝细胞双核结构进行鉴定;CCK 8法测定APAP对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞毒性作用的IC₅₀;光学显微镜透射电镜观察APAP对2种细胞的损伤情况;全自动生化分析仪测定细胞上清AST、ALT、LDH、ALP、ALB、BUN、TP、GLU 8项生化指标的变化。结果 PAS糖原染色鉴定获取的大鼠原代肝细胞,双核结构,细胞存活率浮动在80%~95%;最佳接种密度为60000/cm²,在第3~5天为对数生长期;APAP作用于大鼠原代肝细胞24 h的IC₅₀为18.03 mmol/L,95%置信区间为(17.28~18.81)mmol/L,作用于BRL-3A的IC₅₀为20.05 mmol/L,95%置信区间为(18.99~21.17)mmol/L;透射电镜结果显示,在30 mmol/L APAP作用下,2种细胞细胞器肿胀,核膜破裂,细胞膜边界模糊不清;与对照组比较,大鼠原代肝细胞分泌的天冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)随着APAP浓度增加产生显著变化,而BRL-3A细胞几乎所有的酶学指标变化均差异不显著。结论 与永生化细胞BRL-3A比较,大鼠原代肝细胞更能体现药物的肝脏毒性作用,但其体外培养存活时间较短;BRL-3A细胞缺少肝脏重要酶类,增加细胞内肝脏酶类是提升其作为肝脏毒性筛选模型的更好手段之一。     

褪黑素通过诱导铁死亡抑制食管鳞癌生长的机制研究

目的 探讨褪黑素通过抑制溶质运载蛋白7家族成员11（SLC7A11）表达对食管鳞癌细胞铁死亡的影响。方法 使用不同浓度（0.25、0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L）的褪黑素处理人食管鳞癌KYSE150细胞，筛选建立KYSE150细胞铁死亡模型的褪黑素浓度；将KYSE150细胞分为对照组、褪黑素（1.0 mmol/L）组、褪黑素（1.0 mmol/L）＋pcDNA（转染空载质粒）组、褪黑素（1.0 mmol/L）＋SLC7A11（转染SLC7A11过表达质粒）组。透射电子显微镜观察KYSE150细胞线粒体形态；碘化丙啶（PI）染色检测细胞死亡；试剂盒检测细胞Fe²⁺、谷胱甘肽（GSH）及活性氧（ROS）水平；Western blotting法检测细胞SLC7A11蛋白表达。建立食管鳞癌裸鼠荷瘤模型，将BALB/c裸鼠分为模型组、褪黑素（ip 25 mg/kg褪黑素）组、褪黑素＋pcDNA（ip 25 mg/kg褪黑素＋裸鼠右侧腋下注射转染空载质粒的KYSE150细胞）组、褪黑素＋SLC7A11（ip 25 mg/kg褪黑素＋裸鼠右侧腋下注射转染SLC7A11过表达质粒的KYSE150细胞）组；分别检测各组小鼠肿瘤体积、质量及肿瘤组织中SLC7A11蛋白表达。结果 1.0 mmol/L褪黑素可诱导KYSE150细胞铁死亡；与对照组比较，褪黑素组KYSE150细胞死亡数目增多，细胞内的线粒体变小，线粒体膜密度增加，细胞内Fe²⁺及ROS水平显著增加（P＜0.05），SLC7A11蛋白表达水平及细胞内GSH水平显著降低（P＜0.05）；与褪黑素＋pcDNA组比较，褪黑素＋SLC7A11组细胞死亡数目减少，细胞内的线粒体增大，线粒体膜密度减少，细胞内Fe²⁺及ROS水平显著降低（P＜0.05），SLC7A11蛋白表达水平及细胞内GSH水平显著升高（P＜0.05）；褪黑素可通过抑制SLC7A11蛋白表达抑制食管鳞癌裸鼠肿瘤生长。结论 褪黑素可能通过抑制SLC7A11表达诱导细胞铁死亡，抑制食管鳞癌细胞生长。     

Hemoglobin levels that trigger erythropoiesis-stimulating agent treatment decisions for cancer-associated anemia – examination of practice in Germany

ABSTRACT

Objective: Given the safety concerns regarding off-label use of erythropoiesis-stimulating agents (ESAs) in the treatment of cancer-associated anemia, data from the German Cancer Anemia Registry (CAR) were analyzed to examine whether current practice in Germany adheres to treatment guidelines.

Research design and methods: CAR was a web-based registry gathering patient data for 12 weeks following anemia diagnosis or until the primary treatment objective was achieved.

Results: Of over 2000 patients surveyed, 783 were treated with ESAs. Treatment was primarily aimed at improvement of quality of life (37.3%), hemoglobin correction (32.7%), and prevention of transfusions (24.4%). The average hemoglobin level triggering ESA treatment was 9.7?g/dL (6.0?mmol/L), however, starting levels varied with cancer type. For 67.8% of patients, transfusions could be avoided. ESA treatment was stopped at 11.2?g/dL (7.0?mmol/L) and maximum hemoglobin levels during the study averaged 11.8?g/dL (7.3?mmol/L). In 4.8% of the women and 6.0% of the men, maximum hemoglobin levels were >14?g/dL (8.7?mmol/L); in 15.6% and 9.1%, respectively, levels were between 13 and 14?g/dL. The median hemoglobin level triggering transfusion was 8.3?g/dL (5.2?mmol/L), irrespective of the malignant disease.

Conclusion: Current use of ESAs for the treatment of cancer-associated anemia in Germany appears to be in good compliance with treatment guidelines. Similar results obtained from other studies in Europe and the US indicate this to be true beyond Germany.     

双胎合并低蛋白血症不良妊娠结局分析

目的 探讨双胎妊娠合并低蛋白血症不良妊娠结局。方法 选取2011年1月至2015年12月安徽省妇幼保健院分娩无明显严重孕期并发症的双胎妊娠140例,将其中90例低蛋白血症患者设为观察组,按低蛋白血症诊断标准将90例患者分为重度低蛋白血症组（血清白蛋白<20 g/L,Ⅰ组,n=34）和轻度低蛋白血症组（20 g/L<血清白蛋白<30 g/L,Ⅱ组,n=56）;血清白蛋白正常的双胎妊娠50例纳入对照组。统计比较观察组及对照组产妇的一般临床资料、生化检查指标、妊娠不良结局等。结果 观察组患者生化指标、妊娠不良结局与对照组比较,肝肾功能及血脂损伤较对照组严重,差异有统计学意义（P<0.05）。两组孕产次,体质指数（BMI）,自然受孕与否,不良妊娠史,绒毛膜性质等比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。观察组组间（Ⅰ组和Ⅱ组）比较,Ⅰ组肝肾功能及血脂损伤较Ⅱ组严重,Ⅰ组产妇在胎盘早剥、产后出血、新生儿低体重、窒息发生率等不良妊娠结局发生率等方面显著高于Ⅱ组（P<0.05）。结论 随着低蛋白血症的出现及进展,产妇肝肾功能及血脂代谢损伤加重,双胎妊娠胎盘早剥、产后出血、产褥感染等并发症发病率增加,并可造成围生儿不良结局。     

去甲斑蝥素体外肝细胞代谢产物的HPLC-MS分析

目的 建立去甲斑蝥素体外肝细胞代谢产物的HPLC-MS分析方法。方法 去甲斑蝥素进行体外肝细胞代谢,透析得到代谢产物,并用HPLC-MS对产物进行鉴定,再通过半制备HPLC色谱仪分离纯化,最后根据理化性质和波谱数据鉴定代谢物的结构。结果 共分离得到7个化合物,对其中量较高的2个化合物进行结构鉴定,分别为去甲斑蝥素与谷氨酸结合物（1）、去甲斑蝥酸钠（2）。结论 体外细胞代谢法由于反应条件相对单纯,易于控制,适合于制备去甲斑蝥素体外肝细胞代谢产物。     

The influence of gut microbiota on drug metabolism and toxicity

Introduction: Gut microbiota plays critical roles in drug metabolism. The variation of gut microbiota contributes to the interindividual differences toward drug therapy including drug-induced toxicity and efficacy. Accordingly, the investigation and elucidation of gut microbial impacts on drug metabolism and toxicity will not only facilitate the way of personalized medicine, but also improve rational drug design.

Areas covered: This review provides an overview of the microbiota–host co-metabolism on drug metabolism and summarizes 30 clinical drugs that are co-metabolized by host and gut microbiota. Moreover, this review is specifically focused on elucidating the gut microbial modulation of some clinical drugs, in which the gut microbial influences on drug metabolism, drug-induced toxicity and efficacy are discussed.

Expert opinion: The gut microbial contribution to drug metabolism and toxicity is increasingly recognized, but remains largely unexplored due to the extremely complex relationship between gut microbiota and host. The mechanistic elucidation of gut microbiota in drug metabolism is critical before any practical progress in drug design or personalized medicine could be made by modulating human gut microbiota. Analytical technique innovation is urgently required to strengthen our capability in recognizing microbial functions, including metagenomics, metabolomics and the integration of multidisciplinary knowledge.     

3种牙髓生物活性材料对小鼠间充质干细胞骨向分化的影响

目的 评估3种牙髓生物活性材料——三氧化聚合物（MTA）、Bioaggregate（BA）和Biodentine（BD）的生物相容性并观察其各自对小鼠间充质干细胞（MSCs）向成骨分化的影响。方法 采用XTT实验和ALP染色检测小鼠MSCs生存能力、分化矿化能力,观察MTA、BA及BD对小鼠MSCs向成骨分化的影响。结果 BD的细胞生存能力在浓度1、1/2、1/4时明显低于MTA和BA（P<0.001）,3种材料的细胞生存能力在材料浓度降至1/10和1/50时,差异无统计学意义（P>0.05）。MTA、BA和低浓度BD在显示分化矿化能力的ALP染色检测方面,与对照组相比染色值均升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 MTA、BA以及低浓度BD与小鼠MSCs有良好的生物相容性;MTA、BA和低浓度BD在小鼠MSCs向成骨方向分化过程中有促进分化矿化作用,可以作为根管的根尖封闭材料。     

Refined fructose and cancer

Introduction: Caloric excess, including increased refined carbohydrate intake, is associated with higher cancer risk emphasizing the importance of improved understanding of cancer cell metabolism in tumor survival and metastasis.

Areas covered: This article reviews the relationship between increased dietary refined sugar and cancer risk, with specific emphasis on the monosaccharide fructose. Cancer cell metabolism is reviewed, and the potential mechanisms by which dietary sugars contribute to the tumor microenvironment are discussed. Recent observations indicate that cancer cells readily utilize fructose to support proliferation and preferentially use fructose for nucleic acid synthesis. This review discusses the potential role of how dietary fructose can promote cancer growth by a variety of mechanisms, including altered cellular metabolism, increased reactive oxygen species, DNA damage and inflammation. Preliminary insights into potential therapeutic strategies by which fructose-mediated cancer effects may be abrogated are presented.

Expert opinion: Other sugars (particularly fructose, given its abundance in the modern diet) must be considered with reference to cancer cell metabolism. Cancer cells utilize similar sugars in distinct ways, which may present important new therapeutic avenues of targeting cancer.