热原检测的新时代

热原是能引起机体发热的生物源性物质。研究最深入的热原是革兰阴性菌细胞壁上的脂多糖 (L PS,亦称内毒素 ) ,内毒素是普遍存在的致病分子 ,对制药业和医学界是一种热原。基于鲎变形细胞裂解物 (L AL)的内毒素检测方法已在注射制剂和医疗器械质控中应用达 2 5年之久 ,但鉴于该方法本身的缺点及鲎来源有限 ,亟需一种替代热原检测方法。重组 C因子 (r FC)开创了热原检测的新时代 ,其机理是内毒素激活 r FC酶原 ,活化的 r FC水解合成的底物 ,生成可检测的产物(产物的量与内毒素成正相关 ) ,从而定量内毒素     

细菌内毒素检查法的应用及存在的问题

细菌内毒素检查法(Bacterial Endotoxin Test，BET)是一种利用鲎血细胞溶解物作试剂，检测药品内毒素污染的方法。热原是微生物代谢产物，是微生物产生的一种内毒素，内毒素是由磷脂、脂多糖和蛋白质组成的复合物。脂多糖是内毒素的主要成分和致热中心，并且已知的细菌内毒素都具有热原活性。20世纪60年代，德国学者用酚水法制备和纯化出无蛋白质的高纯度脂多糖，     

鲎法检查大输液中细菌内毒素假阳性结果判定

自1988年10月卫生部部颁标准规定[1]，应用党法在5种大输液中检查细菌内毒素取代热原检查法。由于鲎法具有灵敏度高，特异性强及简便快速等优点。本文采用国产鲎试剂对100批大输液进行热原测定，并与家兔法对照，结果证明鲎法（灵敏度为O．5EU／ml）检查阳性率较家兔法高，我们通过降低鲎试剂的灵敏度，使假阳性结果出现率降低。一、实验方法和结果部颁标准细菌内毒素检查仅规定5种注射剂的内毒素限值（＜EU／ml），根据5种注射剂的细菌内毒素限量计算，热原检查家兔洁剂量为10ml几g（M）和我国内毒素标准品的致热阈10EU／kg（K），计算…     

鲎试剂法检查热原的应用范围

由于鲎试剂在药剂工作中的应用,各医院药剂科有不少有关鲎试剂操作的经验及论文报道.热原,是指进入机体后能引起机体发生异常热反应的一类物质。包括了微生物及其代谢产物、细菌及其尸体、立克次体、霉菌、病毒、不溶性微粒、内外毒素等等。其中以G~-杆菌产生的内毒素致热力最强,因此也有热原就是内毒素之说法也仅能说内毒素是引起热原的主要因素.鲎试剂法是利用鲎的变形细胞与微量内毒素产生凝集反应的现象,作为判断供试品中细菌内毒素限量是否符合规定的一种方法.鲎试剂对内毒素特别敏感,很微量的内毒素即可检出.但对非内毒素引起的热原,则不敏感.     

沙赛普肽注射液的细菌内毒素检测

目的：用鲎试剂检测沙赛普肽注射液中的细菌内毒素。方法：采用鲎试法（LT）与家兔法（RT）对沙赛普肽注射液进行细菌内毒素检测。结果：两种方法检查结果一致,用直接稀释法排除细菌内毒素的干扰。结论：以鲎试法用于控制沙赛普注射液的热原方法可行。     

维生素C注射液中细菌内毒素的定量测定

中国药典２０００年版犤１犦规定维生素C注射液细菌内毒素测定法为凝胶法，该法是一种半定量测定方法。我们用BET－３２型细菌内素毒素测定仪，应用动态浊度法对其进行定量测定。通过试验确定维生素C对鲎试剂的干扰浓度，并对其内毒素进行定量测定。现报告如下。１实验材料BET－３２型细菌内毒素测定仪（天津大学无线电厂）；自动旋涡器（天津大学无线电厂）；玻璃试管及取样器头（２５０℃６０min干烤除热原）。鲎试剂（湛江鲎试剂厂，灵敏度：０．０３EU／ml，批号：２００１０１２０）；细菌内毒素工作标准品（湛江鲎试剂厂，２０EU…     

论鲎试验的假阳性

论鲎试验的假阳性郭建芳（空军后勤部药品检验所１０００７６）夏振民（中国药品生物制品检定所）笔者在查阅有关以细菌内毒素检查法（鲎法）检测药品热原的文献时，发现一些作者将鲎法阳性，热原检查法（兔法）阴性的结果，或将鲎法比兔法灵敏，称为“鲎试验假阳性”［１...     

东方鲎血细胞溶解物的制备及其灵敏度测定

根据热原检查新方法研究协作组1977年9月广州第一次会议分工,我们开展了鲎血凝集法研究。鲎血凝集法国外已开展广泛的研究。普遍认为应用鲎法检测热原(内毒素)是一种快速、简易且又经济的方法,尤其在临床内毒素血症、菌尿症及放射性药品、生物制品等热原的检测方面,比家兔法灵敏和具有独特的优点。美国已将鲎     

鲎试剂检测热原的方法及注意问题

鲎试剂可检测出微量内毒素(热原),其灵敏度可达0.1毫微克/毫升,样品检测在试管内或玻片上进行,两小时内即可得出结果,为内毒素检测提供了一种快速、灵敏、简便的实验方法,简称鲎试验。自1972年鲎试剂首先用于放射性药品的热原检测以来,近十年发展很快,用途日广。如在药品检验方面已用于注射药品、生     

泛影葡胺注射液细菌内毒素检测方法探新

目的：确立用鲎试剂（ＴＡＬ）法检测泛影葡胺注射液中的内毒素。方法：参照《美国药典》２３版及《中国药典》１９９５年版二部收载的细菌内毒素检查方法的要求进行试验。结果：用标示值灵敏度为０．５ＥＵ．ｍｌ＾－１的鲎试剂检查泛影葡胺注射中的细菌内毒素是有效的。结论：０．５ＥＵ．ｍｌ＾－１鲎试剂可以用于泛影葡胺注射液中的内毒素检测。鲎试剂（ＴＡＬ）法可替代泛影葡胺注射液热原检查项目中的家兔（ＲＴ）法。     

关于扩展鲎法检测热原适用范围的探讨

关于扩展鲎法检测热原适用范围的探讨常玉英，焦平，司秀贞（周口地区药检所４６６０００）卫生部部颁标准规定鲎试剂法只对四种大输液检测细菌内毒素，其它药品检测热原用家兔法。兔法检测热原既费事又麻烦，而且动物要求条件较高，品种、温度、生物个体差异都能给实验带...     

细菌内毒素检测法与家兔法同步检测磷酸川芎嗪注射液热原的比较

目的:考察细菌内毒素检查法对磷酸川芎嗪注射液进行检查的可行性。方法:用细菌内毒素检查法对磷酸川芎嗪注射液进行干扰实验;用细菌内毒素检测法对家兔热原试验不同结果的磷酸川芎嗪注射液进行比较试验。结果:供试品对鲎试剂与内毒素的反应无干扰作用。家兔热原检查法阴性结果与细菌内毒素检查法结果相吻合,并且热原检查阳性结果也吻合。结论:用细菌内毒素检查法检测磷酸川芎嗪注射液热原是可行的。     

鲎试剂用于检测人血白蛋白内毒素

药品中经常遇到的热原是细菌内毒素.在GMP条件下生产的药品的质量控制中,人们可以接受的观点是,不存在内毒素意味着不存在热原.与传统的热原质检查法——家免热原检查法相比,鲎试验法检测细菌内毒素具有特异性高、灵敏度高、快速、简便等优点.但由于血液制品中存在着干扰因素,产生抑制或增强作用,影响内毒素检测,因此,需对此干扰作用加以排除.本工作采用稀释法,并对用鲎法检测70多批人白热原的结果与家兔法进行对比.1 材料与方法1.1 材料 特异性鲎试剂(厦门鲎试剂厂,批号970520,灵敏度标示值:0.125EU/ml);细菌内毒素工作品(厦门鲎试剂厂,批号970401,10EU/安瓿),10%人血白蛋白(深圳卫武光明生物制品厂);旋涡混合器(上海医科大学仪器厂, 型号XW-80A).1ml吸管、试管等均经去热原处理.1.2 方法     

全方香丹注射液细菌内毒素检查的干扰实验

目的：探讨一种能替代家兔法检查全方丹注射液（即复方丹参注射液）热原的方法,方法：利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的机理,检查全方香丹注射液的细菌内毒素,结果,当鲎试剂灵敏度为0.5EU/ml,样品稀释倍数为20倍时就能消除样品对鲎试剂的干扰,结论：可以用细菌内毒素检查法替代家兔法作全方香丹注射液的热原检查。     

甘油氯化钠注射液细菌内毒素检查法的研究

目的介绍细菌内毒素法对甘油氯化钠注射液热原的研究。方法应用鲎试剂检查甘油氯化钠注射液的热原,观察甘油氯化钠注射液对细菌内毒素检查法的干扰现象。结果甘油氯化钠注射液稀释2倍对细菌内毒素检查法无干扰行为。结论对甘油氯化钠注射液进行2倍稀释以0.5EU/ml的鲎试剂检查其热原是可行的。     

甲硝唑葡萄糖注射液中细菌内毒素的检查

用鲎试剂对甲硝唑葡萄糖注射液进行细菌内毒素检测研究。甲硝唑葡萄糖注射液对细菌内毒素检查无干扰，并与兔法热原检查进行对照，细菌内毒素检查法的灵敏度高于热原检查法，实验结果表明，鲎试剂法可用以检测供试品的细菌内毒素，以替代热原检查法。     

细菌内毒素检测法与家兔法检测门冬氨酸钾镁注射液热原的比较

目的：考察细菌内毒素检查法对门冬氨酸钾镁进行检查的可行性。方法：用细菌内毒素检查法对门冬氨酸钾镁注射液进行干扰试验：用细菌内毒素检测法对家兔热原试验可疑结果的门冬氨酸钾镁注射液进行比较试验。结果：供试品对鲎试剂与内毒素的反应无干扰作用。家兔热原检查法的结果与细菌内毒素检查法的结果不相吻合。结论：用细菌内毒素检查法检测门冬氨酸钾镁注射液热原是可行的。     

影响鲎试剂灵敏度测定结果因素的分析

鲎试剂法是热原检查的重要经典方法,与传统的家兔法相比,具有灵敏度高、重现性好、成本低、操作简便、易于掌握等特点,更便于基层检验推广使用。如何用鲎法替代家兔法检查热原也因此成为人们比较关心的问题。细菌内毒素检查法系利用鲎试剂与细菌内毒素在一定条件下的反应结果来判断供试品是否符合规定的一种体外检测方法。鲎     

三联血袋的细菌内毒素检查方法的建立

目的建立三联血袋细菌内毒素检查法。方法按《中国药典》2005年版二部附录进行实验和结果判断。结果干扰试验表明40倍稀释三联血袋液对细菌内毒素检测（鲎试法）无干扰。结论可以用细菌内毒素检查法代替热原检查法检测。     

复方维生素注射液（4）细菌内毒素检查法的建立

目的：建立复方维生素注射液（4）细菌内毒素检查的方法。方法：用两个生产厂家的鲎试剂对两个厂家6个批号的复方维生素注射液（4）分别进行干扰实验,考察确立该品种细菌内毒素的检测方法。结果：复方维生素注射液（4）对细菌内毒素检查有干扰作用,但稀释100倍以上可消除。结论：可以用细菌内毒素检查法（凝胶法）代替家兔热原检查法控制其热原。其细菌内毒素限值为50EU/ml。