用液相色谱法分析生物体液中的手性药物

用液相色谱法直接分析生物体液中的手性药物对映体，往往由于谱带增宽和手性固定相被污染等问题而缺乏应有的灵敏度。本文论述了基于非手性聚合衍生化试剂的衍生化方案，对手性药物生物分析的优点，也提出了基于非手性聚合试剂对药物对映体进行直接分析的方法。对外消旋化和态分离等问题，以及在线法的简便，快速，高分辨和高灵敏度等优点进行了评价。     

配体交换法在手性化合物对映体分离中的应用

许多手性药物对映体在体内的药理活性、代谢动力学过程及毒性方面存在显著差异[1],对其进行分离、分析是一系列体内研究的基础,在手性药物研究中起着重要作用.近几十年来手性化合物的分离分析技术得到了迅速发展,主要为间接法和直接法:间接法是在分离前先与高纯度光学试剂反应形成非对映体,再用非手性柱分离,即柱前衍生化法;直接法是直接用手性色谱柱或在流动相中添加手性试剂来分离手性化合物的方法,即手性固定相法和手性流动相添加法.     

手性色谱分离2—芳基丙酸类药物对映体

对２－芳基丙酸类药物对映体的手性色谱分离，包括利用手性固定相（ＣＳＰ）或将对映体以手性试剂衍生化生成非对映体的方法，进行了综述。     

手性色谱分离2－芳基丙酸类药物对映体

对２－芳基丙酸类药物对映体的手性色谱分离，包括利用手性固定相（ＣＳＰ）或将对映体以手性试剂衍生化生成非对映体的方法，进行了综述。     

手性药物HPLC分析的一些进展

手性药物的ＨＰＬＣ分析为药物分析中活跃的研究领域。目前已有几十种手性固定相，分析化学家可从中选择合适的发发展手性药物的分析方法，从而促进手性药物药效学和药动学的研究。高分子衍生化试剂的问世，使分析体液中药物的预处理，衍生化和测定变得简便易行。本文就手性固定相的发展对手性药物研究的影响，固相衍生化试剂与生物体液中手性药物的直接分离与测定等方面的近期进展作一概述。     

人尿中D／L甲基苯丙胺和D／L苯丙胺的光学对映体分析及代谢研究

建立了尿中Ｄ／ＬＡＭＰ和ＭＡＭＰ光学对映体的ＧＣ和ＧＣ／ＭＳ分析方法，药物与手性衍生化试剂Ｌ－ＴＰＣ反应，转化为相应的非对映体并在普通的毛细管上得到分离。方法可用于药物立体代谢机理研究，也可在法庭科学中用于判断药物来源及毒作用。     

阿替洛尔的手性衍生化RP—HPLC法拆分及在鼠肝微粒体中的测定

目的：建立阿替洛尔两对映体在鼠肝微粒体中的ＲＰ－ＨＰＬＣ测定方法。方法：从鼠肝微粒体中提取阿替洛尔消旋体,采用手性衍生化试剂２,３,４,６－四－Ｏ－乙酰基－β－Ｄ－吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（ＧＩＴＣ）对阿替洛尔消旋体进行柱前手性衍生化再以ＲＰ－ＨＰＬＣ拆分,测定鼠肝微粒体中阿替洛尔对映体含量。结果：建立了在碱性条件下从水相中用乙酸乙酯提取阿替洛尔,用ＧＩＴＣ进行柱前手性衍生化,以及用流动相ＮａＨ２ＰＯ     

柱前衍生化高效液相色谱法分离分析奥美拉唑对映体

目的 建立柱前衍生化高效液相色谱法分离奥美拉唑对映体.方法 以(S)-(+)-樟脑磺酰氯为柱前手性衍生化试剂,衍生物在Diamonsil C18色谱柱上,以10 mmol·L-1醋酸铵(pH 7.5)-异丙醇(75:25,v/v)为流动相分离,流速为0.5 mL· min-1.结果 奥美拉唑衍生物可达到基线分离,分离度为1.72.结论 采用柱前衍生化高效液相色谱法,在普通C18色谱柱上分离奥分析美拉唑衍生物,为此类手性药物的分离分析提供一个新方法.     

柱前衍生化RP-HPLC荧光色谱法分离肌肽的光学异构体

目的 采用柱前衍生化反相高效液相荧光色谱法拆分肌肽的对映体.方法 采用邻苯二甲醛和N-乙酰-L-半胱氨酸为柱前手性衍生化试剂,反相液相色谱法分离肌肽的光学异构体.考察衍生化反应条件对肌肽衍生化反应、不同色谱条件下对肌肽光学异构体分离的影响.通过光学异构体分离过程中的热力学参数的计算,探讨光学异构体分离过程的驱动力.结果 邻苯二甲醛和N-乙酰-L-半胱氨酸的摩尔比为1∶2时,以无水乙醇与硼酸缓冲液(pH9.8)为溶剂溶解,作为衍生化试剂,于室温下避光反应5 min,肌肽转化成异吲哚产物;在柱温35℃时,肌肽光学异构体的衍生化产物分离因子(α)和分离度(R)分别为1.533、3.947.其光学异构体-衍生产物的拆分过程主要是一个焓驱动的过程.结论 所用方法简单快速、灵敏度高、重复性好,适用于肌肽的手性拆分.     

高效液相色谱法分离和测定药物对映体的研究进展

以近年来国内外有代表性的论文为依据 ,对高效液相色谱法 (HPLC)在药物对映体分离和测定中的常用方法 ,包括手性衍生化试剂法、手性流动相及手性固定相等方法进行分析 ,整理 ,归纳综述。HPLC可进行药物对映体的纯度测定 ,制备 ,分离 ,提高药物疗效 ,减少药物的不良反应。HPLC为药物对映体的快速灵敏地分离和测定提供了更多的手段和可能。其在药物对映体中的应用 ,特别是与其他仪器的联用具有广阔的前景。     

柱前衍生化RP-HPLC法分离苯乙醇胺类化合物对映体

目的以2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)为手性衍生化试剂,建立苯乙醇胺类化合物对映体RP-HPLC分离分析方法。方法采用RP-HPLC法。考察了衍生化反应中碱化试剂和衍生化试剂的浓度等反应条件对衍生化产率的影响,并考察流动相的组成和pH值等因素对生成的非对映异构体分离的影响。讨论了化合物的分子结构对手性衍生化及衍生后的非对映异构体色谱分离的影响。结果在三乙胺和GITC的浓度分别为10和5 mmol.L-1的乙腈溶液中,室温下反应20 min后,有5个苯乙醇胺化合物转化成相应的非对映异构体的硫脲衍生物。在色谱条件为:Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),30 mmol.L-1醋酸铵(pH6.0)-乙腈(体积比为50∶50)为流动相,检测波长254 nm,流速1.0 mL.min-1,室温下,5个苯乙醇胺化合物对映体衍生化后非对映异构体的分离度达到4以上。结论该方法可作为苯乙醇胺类化合物对映体分离的方法之一。     

β-环糊精流动相和手性配位交换HPLC法分离药物对映体

目的:为生物样品手性药物对照体的分离测定建立手性流动相添加剂HPLC,方法:以β-环糊精和手性配位交换剂为流动相添加剂,分离测定了生物样品中羟基苯妥英、美芬妥英、叔丁喘安、氯噻酮、氧氟沙星等5种手性药物对映体.结果:测得结果各对映体之间均能得到较好的分离.以β-环糊精为流动相添加剂法测得4种手性药物对映体的分离度(R)在1.10～1.86之间,各对映体的理论板数(n)在1642～2022之间.以手性配位交换法测得氧氟沙星两对映体的R为2.10,n为2560和 2600.并于制备柱上分离获得两对映体的纯品.结论:本法无需特殊设备,可在常规高效液相仪上进行手性药物的分离测定,操作简便、手性添加剂的种类多,适用范围广、便于推广     

电泳中介微分析法手性分离抗生素制剂中氨基酸的可行性探讨

目的 应用电泳中介微分析(EMMA)技术手性分离抗生素制剂中的氨基酸.方法 以邻苯二甲醛和非手性巯基试剂或手性巯基试剂为衍生化试剂,采用柱上衍生化EMMA技术,以手性毛细管区带电泳或非手性胶束电动色谱为分离手段,分别对抗生素制剂中的4种常用氨基酸进行全自动的在线手性分离.结果 采用新建立的柱上衍生化EMMA技术可手性分离精氨酸、门冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸,抗生素或其衍生物均不干扰氨基酸衍生物的检测,分析快速,专属性强,成本低廉,自动化程度高.结论 该方法可应用于抗生素制剂中氨基酸的手性分离.     

普瑞巴林中(R)-对映体的微波辅助柱前衍生化-HPLC法测定

建立了微波辅助柱前衍生化-HPLC法检测普瑞巴林中的(R)-对映体.含(R)-对映体的普瑞巴林与手性衍生化试剂N<'α>-(5-氟-2,4二硝基苯基)-D-缬氨酰胺在DMSO中,于微波辅助条件下进行快速衍生化反应,生成具有紫外吸收的一对非对映体衍生化产物.采用Hypersil BDS C<,18>色谱柱,以0.1 mol/L甲酸铵溶液(用甲酸调至pH 3.0)-乙腈(49:51)为流动相,检测波长340 nm.(R)-对映体在2～20 μg/ml浓度范围内与其衍生物峰面积线性关系良好.定量限为0.24μg/ml.     

手性衍生化-反相高效液相色谱法测定L-肌肽的光学纯度

目的建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法(HPLC)测定L-肌肽对映体的纯度。方法以邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)为手性衍生化试剂,反应生成具有荧光吸收的一对非对映异构体衍生物,采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流速1.0mL·min-1,50mmol·L-1乙酸铵缓冲溶液(pH6.0)-甲醇(70:30,V/V)流动相,柱温35℃,λex=350nm,λem=450nm。结果L-肌肽与其光学异构体分离度大于3,在0.104～2.68mg·L-1范围内,D-肌肽衍生物色谱峰面积与其浓度呈良好线性关系,检测限浓度为0.02mg·L-1。结论建立的L-肌肽光学异构体(杂质)手性衍生化-HPLC拆分检查法方便准确,可用于L-肌肽的光学纯度控制。     

供气相色谱分析的未处理生物样品中药物的直接衍生化

药物在气相色谱分析前进行衍生化主要是为减少极性以避免痕量化合物在柱上吸附.并可引入适合选择性和灵敏性检测的标记.一般在衍生化之前需先提取分离生物样品中的待分析物.目前人们一直努力把提取分离和衍生化合为一步.不经分离而直接衍生化能改善极性化合物的提取性能.如果在取样后立即进行衍生化,可以避免一些待分析物的不稳定和在分离过程中在玻璃器皿上的吸附.提取烷基化反应:可以用于以阴离子形式     

柱前衍生化RP-HPLC分离巴氯芬的对映异构体

目的建立巴氯芬对映异构体的拆分方法。方法采用柱前衍生化RP-HPLC法,以2,3,4,6-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯为柱前手性衍生化试剂,考察衍生化时间、试剂用量、流动相组成及其pH等因素对手性分离的影响。结果采用ZORBAX-C8(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,在流动相为甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(40:60,pH6.0)、紫外检测波长为254 nm、流速为1.5 m.lmin-1、柱温35℃的色谱条件下,巴氯芬对映体衍生物获得了基线分离,分离度为1.93,并确认了R( )-衍生物的色谱峰。结论所建方法简便、快速,为巴氯芬的光学异构体的测定提供了参考。     

利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂拆分胺类、醇类药物

本文首次介绍了利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上对五种含胺基、醇基的药物对映体进行了拆分。其中拆分美西律(mexiletine)、氯胺酮(ketamine)、本芴醇(benflumelol)和苯丙醇(phenylpropanol)药物尚未见报道。结果表明,用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂的方法,具体简便易行、分离度好、几乎没有衍生化带来的杂质、不需分离出未反应的异氰酸-α萘酯便可直接进行拆分实验等优点。可以预计,NI将可能成为一种很有发展前途的新衍生化试剂,而且为Pirkle型DNBPG柱开发了新的领域。     

利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂拆分胺类、醇类药物

本文首次介绍了利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上对五种含胺基、醇基的药物对映体进行了拆分。其中拆分美西律(mexiletine)、氯胺酮(ketamine)、本芴醇(benflumelol)和苯丙醇(phenylpropanol)药物尚未见报道。结果表明,用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂的方法,具体简便易行、分离度好、几乎没有衍生化带来的杂质、不需分离出未反应的异氰酸-α萘酯便可直接进行拆分实验等优点。可以预计,NI将可能成为一种很有发展前途的新衍生化试剂,而且为Pirkle型DNBPG柱开发了新的领域。     

柱前衍生结合手性固定相高效液相色谱法拆分2种氨基酸对映体

目的建立柱前衍生结合手性固定相HPLC法拆分2种氨基酸对映体。方法衍生化试剂：4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并噁二唑（NBD-Cl）;色谱柱：OA-2500S;流动相：甲醇（含5 mmol.L-1枸橼酸）∶-乙腈（50∶50,v/v）;检测波长：470 nm;流速：0.5 mL.min-1。结果在优化的色谱条件下,丝氨酸和缬氨酸对映体的分离度分别为2.4和2.5,分离因子分别为1.12和1.17。结论该方法简单、灵敏,可用于2种氨基酸对映体的拆分。