关于《中华人民共和国药典》2010年版二部氯霉素含量测定项下色谱条件的商榷

氯霉素是<中华人民共和国药典>2010年版二部收载的一种抗微生物药物,氯霉素二醇是氯霉素原料中的一种特定杂质.氯霉素质量标准中"含量测定"项下色谱条件规定[1]:"用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.01 mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液(取磷酸二氢钾6.8 g,用0.01 mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000 ml,再加三乙胺5 ml,混匀,使用磷酸调节pH至2.5)为流动相;检测波长为277 nm;取氯霉素对照品、氯霉素二醇对照品与对硝基苯甲醛对照品各适量,加甲醇适量(每10 mg氯霉素加甲醇1 ml)使溶解,用流动相稀释制成每1 ml中各含50 μg的溶液,取10 μl注入液相色谱仪,记录色谱图.各相邻峰的分离度均应符合要求".笔者发现,选择4种不同品牌填料的C18色谱柱,按药典方法进行系统适用性试验时,均未见色谱峰出现,推测该色谱条件有误,值得商榷,现将实验结果报告如下.     

高效液相法测定痤疮搽剂中氯霉素、水杨酸的含量

目的 建立痤疮搽剂中氯霉素、水杨酸的含量测定方法.方法 以UltimateTM XB-C18为分析柱,乙腈-0.01 mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液（取磷酸二氢钾6.8 g,用0.01 mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000ml,再加三乙胺5ml,混匀,用磷酸调节pH值至2.5）（25：75）为流动相 流速：1.0ml·min-1 检测波长：278 nm 进样量10 μl.结果 氯霉素对照品在29.49～196.60μg/ml范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为99.1% 水杨酸对照品在31.41～209.40μg/ml,范围内具有良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为99.5%.结论 本测定方法简便、准确,可用于痤疮搽剂的质量控制.     

HPLC法测定氯霉素注射液的有关物质和含量

目的:建立HPLC法测定氯霉素注射液的有关物质（氯霉素二醇物和对硝基苯甲醛）和含量。方法:色谱柱采用ShiseidoC₁₈ MGⅡ（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为甲醇-0.01 mol·L^-1庚烷磺酸钠溶液(取磷酸二氢钾6.8 g,用0.01 mol·L^-1庚烷磺酸钠溶液并稀释至1 000 ml,再加三乙胺5 ml,混匀,用磷酸调节pH至2.5)（32:68）;流速为1.0 ml·min^-1;检测波长为277 nm。结果:氯霉素、氯霉素二醇物、对硝基苯甲醛的线性范围分别为25.45～178.12μg·ml^-1（r=0.999 8）,7.95～63.60μg·ml^-1（r=0.999 7）和1.86～7.44μg·ml^-1（r=0.999 9）。氯霉素平均回收率为100.2%（RSD=0.6%）。结论:本文建立的高效液相色谱法结果准确可靠,专属性好,可作为氯霉素注射液有关物质和含量的测定方法。     

对于2015年版《中国药典》注射用氨苄西林钠舒巴坦钠有关物质氨苄西林二聚体定位方法的建议

目的：对《中国药典》注射用氨苄西林钠舒巴坦钠有关物质氨苄西林二聚体定位方法进行完善。方法：选择3根不同色谱柱,分别采用药典方法和氨苄西林系统适用性对照品标准图谱方法定位氨苄西林二聚体峰,考察两者结果是否一致。结果：采用药典方法与氨苄西林系统适用性对照品法定位结果不一致。结论：现行标准欠妥,建议对二聚体的定位方法修改为：取氨苄西林系统适用性对照品适量,加初始流动相溶解并稀释制成每1 ml中约含2 mg的溶液,取10 μl注入液相色谱仪,记录的色谱图应与标准图谱一致。     

关于雷米普利片有关物质测定方法修订的建议

国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH03452003雷米普利片的有关物质检测方法如下：取本品细粉（约相当于雷米普利12.5mg）,置25mL量瓶中,加流动相溶解并稀释制成每1mL含0.5mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取1mL,置100mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,作为对照溶液;精密称取杂质D对照品适量,加流动相溶解并稀释制成每1mL中含25μg的溶液,作为对照品溶液。量取对照溶液20μL注入液相色谱仪,调节仪器灵敏度,使主成分峰高为满量程的20％,量取上述三种溶液各20μL分别进样,记录供试品溶液色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍,供试品溶液色谱图如现杂质峰,各杂质峰面积和不得大于对照溶液主峰面积的7倍（7.0%）,其中与对照品溶液相应的杂质D色谱峰,按外标法以峰面积计算,含量不得过5.0%。     

HPLC法测定复方氯霉素乳膏中氯霉素含量

目的：建立HPLC法测定复方氯霉素乳膏中氯霉素的含量。方法：色谱柱为Shim—pack VP—ODS（150mm×4．6mm）,流动相为含01％庚烷磺酸钠的溶液-（取0．1％庚烷磺酸钠溶液500ml与二甲基甲酰胺5ml、冰醋酸0．5ml,混匀）-乙腈（75：25）,流速1．0ml／min,检测波长272nm,进样量10μl。结果：氯霉素浓度在29．88—249μg/ml范围内与峰面积具有良好线性关系,r=0．9999,平均回收率为99．60％,RSD为0．618％（n=9）。结论：本法简便、结果准确、重复性好,可用于复方氯霉素乳膏的质量控制。     

RP-HPLC法测定曲安奈德氯霉素溶液的含量及有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定曲安奈德氯霉素溶液中3种成分氯霉素、盐酸萘甲唑林和醋酸曲安奈德及有关物质(曲安奈德、氯霉素二醇物和对硝基苯甲醛)的含量。方法:用Dionex C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠溶液(取磷酸二氢钾6.8g,用0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠溶液并稀释至1000 mL,再加三乙胺5 mL,混匀,用磷酸调节pH至2.5)(A)-甲醇(B),梯度洗脱[0 min(66%A)→20 min(66%A)→30 min(35%A)→49 min(35%A)→50min(66%A)→60 min(66%A)];流速为1.0 mL·min-1;检测波长:0～20 min为277 nm,20～60 min为230 nm。结果:氯霉素、盐酸萘甲唑林、醋酸曲安奈德的线性范围分别为0.375～3.000 mg·mL-1(r=0.9990)、0.0127～0.1016 mg·mL-1(r=0.9989)和0.0262～0.2096 mg·mL-1(r=0.9992)。结论:本文建立的高效液相法结果准确可靠,专属性好,可作为曲安奈德氯霉素溶液含量和有关物质的控制方法。     

反相高效液相色谱法测定氯霉素及其相关物质

目的　 HPL C法同时测定氯霉素、二醇物及氯霉素光降解产物 ,更好地监控氯霉素尤其是氯霉素溶液制剂的质量。方法　ODS色谱柱 (15 0 mm× 4 .6 mm,5 μm) ;流动相为 0 .15 %己烷磺酸钠溶液 (用 0 .1%冰HAc溶液调节 p H3.7) -乙腈 (75∶ 2 5 ) ;紫外检测。比较了文献报道的不同流动相系统对氯霉素及水解、光解产物分离的影响 ,同时考查研究了 p H、离子对种类、离子对浓度等因素对分离的影响。结果　含离子对流动相可以提高二醇物的保留时间 ;p H对氯霉素及二醇物色谱峰影响较小 ,但对氯霉素光降解物色谱峰影响较大。结论　确定了同时检测氯霉素、二醇物及氯霉素光降解产物含量变化的 HPL C系统 ,方法简便 ,分离效果好。     

氯霉素氢化可的松滴耳液含量测定方法的改进

摘 要 目的：建立氯霉素氢化可的松滴耳液中氯霉素和氢化可的松的含量测定方法。方法: 采用HPLC法,色谱柱：资生堂SPOLAR C18柱（250 mm ×4.6 mm,5 μm）;流动相：0.01 mol·L^-1庚烷磺酸钠缓冲溶液（称取磷酸二氢钾6.8 g,用0.01 mol·L^-1庚烷磺酸钠缓冲溶液溶解并稀释至1 000 ml,再加三乙胺5 ml,混匀,用磷酸调pH至2.5）-甲醇（40∶60）;柱温：30℃;流速：1.0 ml·min^-1;检测波长：245 nm;进样量：10 μl。结果: 氯霉素在50.26～753.84 μg·ml^-1（r=0.999 6）、氢化可的松在10.93～163.92 μg·ml^-1(r=1.000 0)范围内与峰面积有良好的线性关系。氯霉素的平均回收率为100.21%,RSD为0.48%（n=9）;氢化可的松的平均回收率为100.82%,RSD为0.37%（n=9）。结论:该方法专属性强、重复性好、精密度高,可作为氯霉素氢化可的松滴耳液的含量测定方法。     

HPLC法测定复方氯霉素醇溶液中氯霉素的含量

目的研究复方氯霉素醇溶液中氯霉素含量的HPLC测定法。方法色谱柱：ZORBAX 80A Extend-C18,紫外检测器波长：278nm,流速：1mL·min^-1。流动相组成：0.1%庚烷磺酸钠溶液（取0.1%的庚烷磺酸钠500mL与二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL,混匀）-乙腈（75∶25）。结果氯霉素浓度在9.96～99.64μg·mL^-1范围内与峰面积具有良好的线性关系（r=0.99989）,平均回收率为100.85%（RSD=0.50%）。结论本方法测定氯霉素具有简便、准确的特点。     

HPLC法测定制霉菌素氯霉素栓中氯霉素的含量

目的：建立HPLC法测定制霉菌素氯霉素栓中氯霉素的含量。方法：色谱柱为Agilent XDB-C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相为0.01mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液（pH2.5）∶甲醇（68∶32）;流速1.0ml·min-1;检测波长为277nm。结果：氯霉素在2.467～49.340μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为99.82%,RSD为0.4%（n=9）。结论：此法简单可行,准确可靠,可用于制霉菌素氯霉素栓中氯霉素的含量测定。     

HPLC面积归一化法测定有关物质的弊端

本文旨在用具体实例揭示HPLC面积归一化法测定有关物质可能出现的明显谬误。 近期笔者按试行标准对黑龙江某制药公司生产的盐酸洛美沙星葡萄糖注射液的有关物质进行检查。该制剂规格为 250ml,洛美沙星0.3g,葡萄糖12.5g。其有关物质检查项具体方法为;取本品,加流动相分别制成每 1ml中含洛美沙星 1.0mg的供试品溶液和每 1ml中含10μg的对照溶液。照高效液相色谱法试验,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以庚烷磺酸钠-磷酸二氢钾混合溶液(取庚烷磺酸钠 26.3mg,磷酸二氢钾 2.45g,加水溶解并稀释     

反相高效液相色谱法测定法莫替丁片含量--中国药典(2000版)和美国药典(26版)方法的比较

目的 用RP-HPLC测定法莫替丁片含量,并将中国药典(2000版)与美国药典(26版)两种方法进行比较.方法 用反相高效液相色谱测定法莫替丁片含量.中国药典(2000版)色谱条件:C18柱,以庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠2.0 g,加水900ml溶解后,用冰醋酸调节pH至3.9,加水至1000 ml)-乙腈-甲醇(25:6:1)为流动相,检测波长254 nm.美国药典(26版)色谱条件:C18柱,以水-甲醇-磷酸二氢钾缓冲液(31:6:3,用磷酸调节pH至5.0)为流动相,检测波长254 nm.结果 中国药典(2000版)方法法莫替丁在0.012 5～0.20 g·L-1浓度范围内,浓度与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.999 9.美国药典(26版)方法法莫替丁在0.002 024～0.202 4 g·L-1浓度范围内,浓度与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.999 9.结论 二者法莫替丁浓度与峰面积都具有良好的线性关系,但美国药典(26版)与中国药典方法(2000年版)相比,峰面积较小,但流动相成本较低,易得,更安全.     

HPLC法测定氯达软膏中氯霉素含量

目的建立高效液相色谱法测定氯达软膏中氯霉素的含量.方法色谱柱为Hypersil ODS C18柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为含0.1%庚烷磺酸钠的溶液[1](取0.1%庚烷磺酸钠溶液500 ml与二甲基甲酰胺5 ml、冰醋酸0.5ml,混匀)-乙腈(7525),流速为1.0 ml·min-1,检测波长为272 nm,进样量为20 μl.结果氯霉素浓度在25.6～128.4 μg·ml-1范围内与峰面积具有良好线性关系,r=O.999 9,平均回收率为99.7%(RSD=0.9%,n=9).结论本法简便、结果准确、重复性好,可用于氯达软膏的的质量控制.     

HPLC法测定复方氯霉素酊中氯霉素的含量

目的:建立复方氯霉素酊中氯霉素含量的测定方法。方法:采用Hypersil C18 ODS柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相为:0.1%庚烷磺酸钠的溶液(取0.1%庚烷磺酸钠溶液500 ml与二甲基甲酰胺5 ml,冰醋酸0.5 ml,混匀)-乙腈(75:25);流速为1.0 ml·min-1;检测波长272 nm。结果:氯霉素在22.44～224.4μg·ml-1范围内线性关系良好,平均回收率为99.7%(n =6),RSD=0.5%。结论:该方法简便,准确快速,可测定复方氯霉素酊中氯霉素的含量。     

HPLC法测定氯霉素地塞米松乳膏中氯霉素的含量

目的:建立氯霉素地塞米松乳膏的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法:色谱条件为:Kromasil C18柱(250×4.6mm,5μm);流动相:0.01mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液-甲醇(65:35);检测波长:277nm;流速:1.00rL/min.结果:氯霉素进样量在0.4016～8.032μg范围内,呈良好的线性关系,r=0.9999.平均加样回收率为98.3％,RSD为0.53％.结论:该方法简便快速,准确,重现性好.可有效控制氯霉素地塞米松乳膏中氯霉素的含量.     

反向高效液相色谱法紫外测定缬沙坦含量的方法学研究

目的建立高效液相色谱法测定缬沙坦原料的含量。方法采用Waters Symmetry C18柱(150 mm×4.6mm,5μm),用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水-冰醋酸(500∶500∶1)为流动相;设定检测波长为225nm,流动相流速为1.0ml/min。取样品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml约含缬沙坦0.05mg的样品溶液;另取缬沙坦对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml约含缬沙坦0.05mg的对照品溶液。上述供试品溶液与对照品溶液稀释相同倍数后经过精密度试验、重复性试验、稳定性试验、回收率试验、测定定量项、样品测定等步骤。结果在进样浓度为5.0~75.0μg∕ml范围内与峰面积线性良好(r=0.9999,n=18),平均回收率为100.9%(RSD%=0.49%,n=9)。结论反向高效液相色谱法专属性好,准确,灵敏,用于缬沙坦含量的测定结果可靠。     

HPLC法测定复方氯霉素洗剂和氯柳酊中氯霉素的含量

目的:建立测定复方氯霉素洗剂和氯柳酊中氯霉素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex C18,流动相为0.01 mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液-甲醇(70∶30,V/V),检测波长为277 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃,进样量为10μl。结果:氯霉素检测质量浓度在51.27²05.08μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.1%;平均回收率为100.36%,RSD=0.78%(n=9)。结论:该方法操作简便、结果准确、专属性强、重复性好,可用于复方氯霉素洗剂和氯柳酊中氯霉素的含量测定。     

高效液相色谱法测定氯锌油中氯霉素含量简

目的 建立测定氯锌油中氯霉素含量的高效液相色谱法.方法 采用Waters C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为0.01 mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液-甲醇（60∶40）,流速为1.0 mL/min,检测波长为277 nm,柱温为30℃.结果 氯霉素的质量浓度在0.01～1.00 g/L范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为100.18％,RSD=1.38％.结论 方法灵敏度高、操作简便、准确可靠,可用于氯锌油中氯霉素的含量测定.     

HPLC法测定劲力固体饮料中烟酸的含量

目的：建立HPLC法测定劲力固体饮料中烟酸的含量.方法：采用迪马Spursil C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱;流动相为甲醇-异丙醇-庚烷磺酸钠溶液（取庚烷磺酸钠1 g,用910 ml水溶解）（70：20：910,用高氯酸调pH至2.1±0.1）;流速1.0 ml·min-1;柱温25℃;检测波长261 nm.结果：在0.847 2～12.707 3 μg·ml-1浓度范围内烟酸的峰面积和浓度具有良好的线性关系,r=0.999 9;平均回收率为100.04%,RSD=0.57%（n=9）.结论：本方法准确,可靠,重复性好,可用于测定劲力固体饮料中烟酸的含量.