补肾益气活血方对宫内发育迟缓胎鼠肝脏 IGF-Ⅰ表达的影响

目的观察补肾益气活血方对宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)胎鼠肝脏胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)基因在转录和翻译水平上的影响,探讨其防治IUGR的作用机制.方法采用被动吸烟法复制胎鼠IUGR模型,分为正常对照组、IUGR组、IUGR精氨酸治疗组(精氨酸组)、IUGR补肾益气活血方治疗组(中药组).采用Northern blot和免疫组织化学的方法分别检测胎鼠肝脏IGF-Ⅰ mRNA和蛋白的表达.结果IUGR组IGF-Ⅰ mRNA及蛋白表达水平与对照组比较明显下调(P＜0.01),而精氨酸组和中药组两者表达水平较IUGR组有所增加,其中,中药组IGF-Ⅰ的表达强度高于精氨酸组(P＜0.05),接近正常组(P＞0.05).结论补肾益气活血方可能通过直接(或间接)促进IGF-Ⅰ的合成和分泌,或者防止某些致病因素对IGF-Ⅰ基因表达细胞信息传导途径的阻断而起到防治IUGR的作用.     

补肾益气活血方对宫内发育迟缓胎鼠脑细胞内游离钙离子浓度的影响

探讨补肾益气活血方对宫内发育迟缓(mteruterine growth retardation,IUGR)胎鼠脑细胞内游离钙离子浓度的影响.采用被动吸烟法建立缺血缺氧IUGR大鼠模型,将动物分成IUGR模型组(IUGR组),IUGR中药治疗组(中药组),IUGR L-argme治疗组(精氨酸组)和正常对照组(正常组).运用细胞内Ca2+荧光指示剂Fura-2/AM检测各组中妊娠第18～21d胎鼠神经元突触体胞液游离钙离子浓度,并以胎鼠出生体重和脑重作疗效评价.结果IUGR组胎鼠体重和脑重较之正常组明显降低(P＜0.01),中药组和精氨酸组胎鼠体重和脑重较之IUGR组明显升高(P＜0.01),且中药组胎鼠体重和脑重已接近正常组(P＞0.05).自妊娠第18 d可见IUGR组胎鼠脑细胞内游离[Ca2+]i已开始升高,至分娩前(第21 d)为正常组值的3倍多,中药组与正常组[Ca2+]i相对稳定,而精氨酸组有轻微上升.说明补肾益气活血方能通过抑制钙离子超载而保护胎鼠脑细胞,其作用优于精氨酸.     

补肾益气活血方对胎儿生长受限胎鼠IGF-1、IGFBP-1及IGFBP-3表达的影响

目的 观察补肾益气活血方对胎儿生长受限胎鼠肝脏IGF-1、IGFBP-1、IGFBP-3表达的影响,探讨补肾益气活血方治疗FGR的作用机制.方法 采用被动吸烟法建立SD大鼠FGR模型,分为正常组、FGR组、补肾益气活血方治疗组(中药组)、精氨酸治疗组(精氨酸组).采用免疫组织化学方法检测胎鼠肝脏IGF-1、IGFBP-...     

L-精氨酸对生长受限孕鼠胎盘胰岛素样生长因子-1及其受体表达的影响

目的 观察L-精氨酸对生长受限孕鼠胎盘胰岛素样生长因子-I（IGF—I）及其受体（IGF—IR）表达的影响，探讨L-精氨酸对生长受限孕鼠的作用机制。方法 取健康SD系大鼠雌雄3：1合笼饲养，按妊娠顺序随机抽取孕鼠分为空白组、模型组、观察组（L-精氨酸组）各12只，模型组、观察组孕8d至孕20d采用被动吸烟造模，模型组孕鼠腹腔注射生理盐水，观察组孕鼠腹腔注射L-精氨酸液，孕21d剖宫取胎，计数活胎数，测量活胎仔身长、体质量、头臀长及胎盘质量并制备胎盘标本，采用免疫组织化学法检测IGF—I及IGF—IR。结果 模型组胎鼠体质量、头臀长、胎盘质量均低于空白组与观察组（P〈0．05），而观察组胎鼠体质量、头臀长、胎盘质量与空白组比较无明显差别（P〉0．05）。光镜下各组胎盘均见IGF—I免疫反应阳性，模型组IGF—I、IGF—IR均低于空白组与观察组（P〈0．05），而观察组IGF—I、IGF—IR与空白组比较无明显差别（P〉0．05）。结论 L-精氨酸可能通过直接或间接促进IGF—I的合成和分泌，促进吸烟所致生长受限胎仔的生长发育。     

胰岛素样生长因子I受体在宫同内发育心缓胎鼠中的表达研究

目的 探讨宫内发育迟缓（IUGR）时胰岛素样生长因子I受体（IGFD－1R）表达的变化及其在组织和细胞中的定位。方法 将21只SD孕鼠随机分为实验组12只和对照组9只。钳夹实验组孕鼠双侧子宫动、静脉20分钟,建立宫内发育迟缓动物模型。对照组仅作开腹和关腹术。两组均于孕22天剖宫取出胎鼠,采用免疫组化法观察孕晚期胎鼠肝脏和肺组织中IGF－1R的表达。结果 实验组胎鼠的体重、身长及胎盘、肝、肺组织重量按对照组明显降低（P＜0．05）;实验组胎鼠肝脏IGF－1R表达面积比较对照组明显增加,平均灰度明显降低（P＜0．01）;实验组胎鼠肺组织IGF－1R表达面积也比较对照组明显增加（P＜0．05）,但平均灰度则无显著性差异（P＞0．05）。结论 宫内发育迟缓时IGF－1R在肝脏和肺组织的表达增加,可能是机体对IGF－1降低的代偿机制。     

胰岛素样生长因子对IUGR胎盘功能影响的实验研究

目的通过L-精氨酸孕期干预后IUGR大鼠胎盘IGF—Ⅰ、IGF—Ⅱ及IGFBP-3水平的变化，探讨L-精氨酸的作用及其机制。方法被动吸烟法造IUGR大鼠模型，孕鼠随机分为4组：对照组、模型组、L-精氨酸小剂量和大剂量防治组。应用酶联免疫吸附法检测各组胎盘组织IGF—Ⅰ、IGF—Ⅱ及IGFBP-3含量。结果模型组大鼠胎盘重比对照组明显下降，L-精氨酸防治组与模型组相比，胎盘重量明显增加（P〈0．01）。与对照组相比，模型组胎盘组织中IGF—Ⅰ、IGF—Ⅱ含量明显降低。IGFBP-3含量明显增高（P〈0．01）。小剂量和大剂量L一精氨酸防治组与模型组相比，IGF—Ⅰ、IGF-Ⅱ含量明显增高，IGFBP-3含量明显降低（P〈0．01）。结论L-精氨酸可增高宫内发育迟缓大鼠胎盘组织中IGF—Ⅰ、IGF-Ⅱ的含量，降低IGFBP-3含量，对胎鼠发育起保护作用。     

宫内生长受限子鼠肝脏脂肪代谢关键酶表达的研究

目的 通过检测胎儿宫内生长受限(intrauterine growth restriction,IUGR)子鼠肝脏中脂肪代谢关键酶及可促进脂肪合成的核转录因子固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)的表达,探讨IUGR个体发生脂肪性肝病的分子机制.方法 通过孕期低蛋白饮食法复制大鼠IUGR模型,采用定量逆转录-聚合酶链反应和Western blotting技术检测孕20 d(E20)胎鼠和12周成年子鼠(A12)肝脏中SREBP1c的mRNA和蛋白含量,同时检测肝脏脂肪酸合酶(FAS)和肝脂肪酶(HL)的表达变化.结果 IUGR成年子鼠肝脏三酰甘油浓度增加(P＜0.01).IUGR胎鼠和成年子鼠肝脏SREBP1和FAS的mRNA和蛋白表达均明显高于同龄对照,且FAS与SREBP1c的mRNA水平成正相关(均P＜0.05).IUGR胎鼠肝脏HL表达正常但成年后表达增高(均P＜0.05).结论 “胎儿程序化”影响使IUGR子代自围产期至成年肝脏中脂肪合成的调控因子SREBP1表达增加,诱导生脂酶FAS的表达,可能是成年肝脏脂质堆积及脂肪性肝病高发的机制之一.     

部分背根切断对备用背根节和脊髓IGF—I表达的影响

目的探讨IGF—I在正常猫和部分去背根猫的L6双侧背根节和脊髓Ⅱ板层(L3、L6、L5)与背核(L3)表达及变化，以了解IGF—I与脊髓可塑性的关系。方法成年健康雄猫15只分为正常组、备用根术后7d组与14d组，每组5只。用兔抗IGF—I(1：200)抗体行免疫组化ABC法染色。观察、计数并比较各组背根节、脊髓实验侧I板层(L3、L5、L6)和背核(L3)中IGF—I的分布、含量。结果①IGF—I在去部分背根后7d，术侧背根节阳性细胞数比正常组显著减少(P＜0．05)，与非术侧比无差异(P＞0．05)；术后14d，术侧背根节IGF—I阳性神经元数比正常组亦显著减少(P＜0．05)，与术后7d组比无差异(P＞0．05)，较非术侧者明显减少(P＜0．01)。②各组L3、L5、L6术侧脊髓Ⅱ板层内IGF—I阳性神经元数均无明显差异(P＞0．05)。L。背核IGF—I阳性神经元数在术后两时相则先减少后增加(P＜0．05)，且在术后14d时恢复至正常水平(P＞0．05)。结论部分背根切断导致双侧背根节IGF—I表达改变和脊髓背核IGF—I表达改变，提示IGF—I与脊髓可塑性有关。     

宫内发育迟缓胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK基因的表达变化

目的宫内发育迟缓(IUGR)是胰岛素抵抗的独立危险因素,通过检测IUGR胎鼠肝脏糖代谢相关酶的表达,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制。方法通过孕期蛋白质营养不良法建立大鼠IUGR模型,孕21天时剖宫产,测量胎鼠的体重和肝重,采用RT-PCR和蛋白印迹技术检测胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK的mRNA及蛋白表达的变化。结果与正常对照相比,IUGR胎鼠肝脏PGC-1的mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.01),肝中PEPCKmRNA的表达也明显增高(P<0.01)。结论IUGR胎鼠肝脏PGC-1表达增加诱导了糖异生关键酶PEPCK的表达,促进肝脏糖异生,这是IUGR鼠成年后发生胰岛素抵抗的原因之一。     

L-精氨酸对宫内发育迟缓胎鼠胰岛素样生长因子-Ⅰ受体表达的影响

目的 研究不同剂量的L-精氨酸孕期干预对被动吸烟致宫内发育迟缓胎鼠脑内胰岛素样生长因子-Ⅰ受体（IGF-Ⅰ R）表达的影响,探讨L-精氨酸的作用及其机制.方法 孕鼠随机分为4组：对照组、模型组、L-精氨酸小剂量和大剂量防治组.孕21 d剖宫取胎,应用荧光定量RT-PCR法检测各组胎鼠脑组织IGF-Ⅰ R mRNA表达.结果 模型组胎鼠脑组织中IGF-Ⅰ R mRNA表达量较对照组明显降低（P＜0.01）,小剂量和大剂量L-精氨酸防治组胎鼠脑组织中IGF-ⅠRmRNA表达量均比模型组明显增高（P＜0.01）.结论 L-精氨酸可增加宫内发育迟缓胎鼠脑内IGF-ⅠRmRNA的表达,从而促进胎儿发育,防治IUGR的发生.