一种特异性检测细胞凋亡和细胞周期的新方法

目的 应用流式细胞技术，建立一种特异性的同时检测细胞凋亡和细胞G0／G1期、S期以及G2／M期各时相百分比的快速测定方法。方法采用Annexin V—FITC/PI双标记染色凋亡细胞，再在该染色样品基础上，进一步地打孔，同时加入高剂量的DNA染色试剂进行活细胞DNA饱和染色，流式细胞仪检测分析。结果 可在同一份细胞样品上获得特异性较强的细胞凋亡、细胞坏死和细胞周期各时相的百分数变化。结论 该方法测量结果准确，检测时间短，人为影响因素少，节约细胞样品用量，为细胞生物学、肿瘤学研究，尤其是细胞动力学研究提供了一种新的、更为实用的分析方法。     

几种凋亡细胞检测方法的比较

在细胞凋亡的基础研究领域 ,如有关凋亡信号转导、基因调控等方面的研究 ,以及在细胞凋亡的应用研究领域 ,诸如将细胞凋亡作为化疗药物的筛选模式、检测肿瘤组织切片中凋亡细胞数以评价肿瘤预后等 ,都涉及到凋亡细胞的识别与检测这一基本问题 ,因此 ,选择合适的检测凋亡细胞的方法便成为各个实验室必须解决的问题。本文结合相关文献及在研究中的体会 ,就凋亡细胞与坏死细胞的区别、几种常用凋亡细胞检测方法适用范围及应用中的影响因素、结果分析等简述如下。1　凋亡细胞与坏死细胞的区别在凋亡检测时必须将其与坏死区别开来 ,而将二者加以…     

生精细胞的凋亡研究进展

<正>凋亡(apoptosis)是由澳大利亚病理学家Johnkerr于1972年提出的,指细胞由基因控制的主动死亡过程。形态上表现为核固缩、染色质浓集、细胞膜皱折、胞体变小,细胞成断片后,最后成为被膜包绕的凋亡小体而被邻近的细胞吞噬与降解。组织学表现为单个细胞缺失,周围没有炎症反应。生物化学表现为活化Ca~(2+)依赖的核酸内切酶,在核小体连接处将染色质DNA降解成单或寡核苷酸小体,其大小均为长度180～200bp的倍数。凋亡可以是一种生理现象,也可以是病理现象。它与因缺血、缺氧而引起的病理性细胞坏死明显不同,后者细胞器和细胞膜出现肿胀、溶解、破裂,细胞内含物释放到细胞间隙可引起炎症反应。     

细胞凋亡相关基因与肺癌

<正>细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡(Pro-grammed Cell,PCD),是一种细胞的生理性死亡.近年来的研究发现,细胞凋亡在许多疾病的发生,尤其是在肿瘤的发生、发展和转归中起重要作用,而且许多基因参与细胞凋亡的调控过程.已有证据表明凋亡抑制基因表达增强或(和)凋亡促进基因受抑是肺癌发生的机制之一,而凋亡相关基因研究也为肺癌治疗提供了新思路和靶点.本文就这方面研究作简要综述:1 细胞凋亡的特征及检测细胞凋亡是在某些生理或病理条件下,细胞接受到某种信号的触发后主动参与并遵循一定程序的较慢的死亡过程,在整个过程中发生一系列特殊基因的表达以及生化和形态学改变.细胞凋亡具有独特的形态学特征,主要表现在细胞萎缩、核固缩、染色质凝集、细胞形成凋亡小体及被吞噬等,不引起周围组织炎症反应和损伤.细胞凋亡还具有典型的生化特征,即在凋亡早期染色体DNA被钙、镁依赖性核酸内切酶裂解成不连续的,不同倍数的180bp～200bP的寡核小体片段,在琼脂糖凝胶电泳上呈现特征性“DNA Ladder”图谱.     

原位细胞凋亡的检测—POD法

细胞凋亡是许多正常的生理过程所必须的 ,在许多病理条件下 ,凋亡抑制的调节失衡在癌症、艾滋病、心脏病、中枢神经系统的退行性变等疾病中起着重要的作用 [1 ] 。由于细胞凋亡可由抗癌药物、放射及高热等启动 ,因此细胞凋亡的研究已趋向于热门。在检测细胞凋亡的众多方法中 ,POD法因其简便、快速及高敏感性而获得了较为广泛的应用。我教研室采用细胞凋亡原位杂交检测试剂盒 (北京中山公司提供 )对 5 0例子宫颈癌的病例分 5次进行了检测。每次均设阳性及阴性对照 ,使实验成功率达到了 10 0 %。介绍如下。1　方法1.1　石蜡切片脱蜡置蒸馏水…     

细胞凋亡检测方法的研究

现已证实细胞凋亡（Apoptosis）是基因调控的程序死亡，又称程序化细胞死亡。细胞凋亡的概念提出后引起了学者们的关注，     

细胞凋亡的检测方法

自 1972年Ｋｅｒｒ首次提出细胞凋亡的概念以来 ,凋亡的研究迅速在生命科学领域扩展和深入。凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是指细胞在一定的生理或病理条件下 ,遵循自身的程序 ,由基因调控的主动的死亡过程[1 ] 。凋亡是不同于细胞坏死 (ｎｅｃｒｏｓｉｓ)的另一种细胞死亡的形式 ,二者在形态学、生化基础及发生学等方面有明显差异 ,详见表 1。本文对细胞凋亡的检测方法予以综述。表 1　细胞凋亡和坏死的区别项　别凋　亡坏　死诱导原因生理和病理病理基因调控　 +　 -细胞形态皱缩肿胀核染色质浓缩聚集核膜下成新月形染色质呈不规则移位胞浆浓…     

细胞凋亡主要检测方法及其应用

细胞凋亡是在一定的生理或病理条件下,受基因调控的细胞生理性主动死亡的过程,其在维持生物体内环境稳态、组织器官的正常形态、胚胎的正常发育以及生物体的正常生理活动和功能等方面起着不可或缺的作用。凋亡机制的异常会使细胞失去控制,与包括肿瘤在内的许多疾病的发生发展密切相关,准确地对细胞凋亡进行检测是开展凋亡研究的必需步骤。近年来,随着对凋亡研究的深入,在细胞凋亡的识别、确认及机制等方面的研究进展显著,用于检测细胞凋亡的新方法不断涌现,原先使用的技术方法也日趋成熟,在形态学观察的基础上,生物化学、分子生物学和免疫学等方面的技术均已广泛应用于细胞凋亡的检测。     

细胞凋亡及其检测技术的进展

细胞凋亡是多细胞生物体内一个重要的生命现象，它已成为当前生命科学和医学领域的研究热点。根据细胞凋亡时的形态学改变和生化改变，通过显微镜和流式细胞仪等仪器设备，采用凝胶电泳及原位标记法等方法对凋亡细胞进行检测。随着研究的深入，许多新的指标逐渐被采纳，同时先进仪器的使用，原有指标的灵敏度和准确性也得到提高，这些都将细胞凋亡的检测水平提升到了一个新的高度。检测方法虽然众多，但多数学者认为宜选两种或两种以上的方法加以证实。     

溶媒二甲基亚砜对细胞生长与活力的影响研究

目的 观察不同浓度二甲基亚砜( dimethyl sulfoxide,DMSO)对PC12细胞生长、形态与活力的影响,为DMSO作为脂溶性溶媒提供依据.方法 用培养液将DMSO稀释到不同浓度,孵育细胞24 h后,采用显微镜观察细胞形态,四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法和流式细胞仪技术分别检测细胞活力和细胞凋亡.结果 DMSO终浓度低于2%时,PC12细胞能够正常生长并保持形态完整,细胞活力与对照组相比无差异,细胞未发生凋亡,但浓度超过4%时,细胞生长异常,细胞活力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率梯度性增高.结论 DMSO对PC12细胞生长的影响存在剂量效应线性相关性, 可作为细胞药物干预实验的脂溶性溶媒.