育阴灵冲剂对自然流产模型母胎界面Th1/Th2型细胞因子及妊娠结局的影响

目的探讨中药育阴灵冲剂对自然流产模型母胎界面Th1/Th2型细胞因子及妊娠结局的影响。方法建立正常妊娠模型CBA/J×BALB/C与自然流产模型CBA/J×DBA/2,并将自然流产模型CBA/J孕鼠随机分为三组(每组10只):中药组于妊娠第1天灌服育阴灵冲剂(2.35 g/mL);西药组于妊娠第4天(着床期)腹腔注射0.5 mg/kg CsA;模型组于妊娠第1天灌服0.2 mL生理盐水;另设正常妊娠模型CBA/J孕鼠10只(正常组),于妊娠第1天灌服0.2 mL生理盐水。孕13 d时观察4组孕鼠的胚胎吸收率,并采用RT-PCR测定各组母胎界面蜕膜组织中Th1型(IL-12、IFN-γ)/Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子转录水平。结果与模型组比较,育阴灵冲剂能够升高母胎界面局部Th2型而降低Th1型细胞因子转录水平,并显著降低自然流产模型胚胎吸收率(P0.01),与腹腔注射环孢素效果相当。结论育阴灵冲剂能够调控母胎界面局部Th1/Th2型细胞因子转录,形成维持正常妊娠所需的Th2型免疫偏倚,从而诱导母胎免疫耐受,改善其妊娠预后。     

育阴灵冲剂对自然流产小鼠模型影响的实验研究

目的探讨育阴灵冲剂对小鼠自然流产模型外周血T淋巴细胞及其妊娠结局的影响。方法以正常妊娠组CBA/J X BALB/C为对照组,建立自然流产模型组CBA/J X DBA/2,分为中药组、西药组、模型组。通过腹腔注射环孢霉素、灌服育阴灵冲剂后,于小鼠孕12 d计算各组胚胎吸收率;并采用流式细胞术分析小鼠外周血T淋巴细胞。结果胚胎吸收率:中药组、西药组胚胎吸收率明显低于模型组(P<0.05),与正常组比较,中药组、西药组的胚胎吸收率变化不明显(P>0.05)。T淋巴细胞亚群:四组外周血CD8+比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+含量最高,与其余各组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);结论中药育阴灵冲剂可以降低小鼠自然流产模型胚胎吸收率,纠正淋巴细胞亚群比率失调,其疗效与环孢霉素相当。     

转输FasL-树突状细胞诱导妊娠免疫耐受的机制

目的 探讨转输FasL基因修饰的树突状细胞(DC)诱导妊娠免疫耐受的机制.方法 建立自然流产小鼠模型(CBA/J×DBA/2)及正常妊娠小鼠模型(CBA/J×BALB/c),分为5组:正常妊娠模型组(CBA/J×BALB/c)(n=17)、未干预自然流产模型组(CBA/J×DBA/2)(n=37)、转输DC培养基(DCCM)的流产模型组(n=25)、转输空质粒转染DC的流产模型组(n=6)、转输FasL质粒转染DC(FasL-DC)的流产模型组(n=5).观察各组孕鼠胚胎丢失率;采用Annexin V-FITC的方法检测各组孕鼠外周血T淋巴细胞的凋亡;应用免疫组化SABC的方法观察各组孕鼠母胎界面蜕膜FasL的表达.结果 转输FasL-DC的流产模型组孕鼠胚胎丢失率明显低于未干预自然流产模型组、转输DCCM的流产模型组和转输空质粒转染DC的流产模型组(P<0.05或P<0.01).未干预自然流产模型组蜕膜FasL的表达低于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);转输FasL-DC的流产模型组蜕膜FasL的表达明显升高,与未干预自然流产模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05);未干预自然流产模型组外周血T淋巴细胞的凋亡率低于正常妊娠模型组(P<0.05),转输FasL-DC的流产模型组外周血T淋巴细胞的凋亡率与未干预自然流产模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 孕鼠蜕膜表面FasL表达降低和外周血T淋巴细胞的凋亡率下降可能是流产的重要机制;转输FasL-DC可能通过增加母胎界面局部FasL的表达而降低胚胎丢失率,诱导妊娠免疫耐受.     

转输FasL-树突状细胞诱导妊娠免疫耐受的机制

目的探讨转输FasL基因修饰的树突状细胞(DC)诱导妊娠免疫耐受的机制。方法建立自然流产小鼠模型(CBA/J×DBA/2)及正常妊娠小鼠模型(CBA/J×BALB/c),分为5组:正常妊娠模型组(CBA/J×BALB/c)(n=17)、未干预自然流产模型组(CBA/J×DBA/2)(n=37)、转输DC培养基(DCCM)的流产模型组(n=25)、转输空质粒转染DC的流产模型组(n=6)、转输FasL质粒转染DC(FasL-DC)的流产模型组(n=5)。观察各组孕鼠胚胎丢失率;采用Annexin V-FITC的方法检测各组孕鼠外周血T淋巴细胞的凋亡;应用免疫组化SABC的方法观察各组孕鼠母胎界面蜕膜FasL的表达。结果转输FasL-DC的流产模型组孕鼠胚胎丢失率明显低于未干预自然流产模型组、转输DCCM的流产模型组和转输空质粒转染DC的流产模型组(P<0.05或P<0.01)。未干预自然流产模型组蜕膜FasL的表达低于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);转输FasL-DC的流产模型组蜕膜FasL的表达明显升高,与未干预自然流产模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05);未干预自然流产模型组外周血T淋巴细胞的凋亡率低于正常妊娠模型组(P<0.05),转输FasL-DC的流产模型组外周血T淋巴细胞的凋亡率与未干预自然流产模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论孕鼠蜕膜表面FasL表达降低和外周血T淋巴细胞的凋亡率下降可能是流产的重要机制;转输FasL-DC可能通过增加母胎界面局部FasL的表达而降低胚胎丢失率,诱导妊娠免疫耐受。     

育阴灵冲剂对自然流产大鼠IL-4调控作用的实验研究

目的 观察补肾中药方育阴灵冲剂对肾虚自然流产模型大鼠外周血白细胞介素-4(IL-4)的影响.方法将受孕的32只Wistar大鼠随机分为模型组、育阴灵冲剂高、低剂量组、环孢霉素组,每组8只.各组大鼠均采用羟基脲(450 mg·kg-1·d-1)灌胃,复制肾虚流产模型.在造模同时,育阴灵冲剂高、低剂量组分别给予不同剂量的育阴灵冲剂灌胃,环孢霉素组予以环孢霉素灌胃,模型组灌服等体积的生理盐水.观察各组大鼠的胚胎数、流产情况及检测外周血中IL-4的水平.结果模型组大鼠孕胎数显著降低,流产率显著升高;育阴灵冲剂高、低剂量组均可显著升高孕胎数,降低流产率,且呈现一定的量效关系,其作用与免疫抑制剂环孢霉素相似.模型组IL-4的水平显著降低,育阴灵冲剂高、低剂量组可显著性升高血中IL-4的水平.结论育阴灵冲剂的保胎作用可能与其纠正免疫失衡状态及降低流产率有关.     

益气补肾中药对自然流产模型小鼠CD28分子表达的影响

目的：观察益气补肾中药对小鼠母胎免疫的调节作用。方法：以CBA雌鼠×DBA/2雄鼠建立小鼠自然流产模型,将20只CBA孕鼠随机分成四组,每组5只。空白对照组（NS组）予生理盐水灌胃,西药组予环孢菌素A（CsA）灌胃,中药组予益气补肾中药灌胃,中西结合组予中药＋CsA灌胃。妊娠14天处死孕鼠,取脾脏与母胎界面组织,用流式细胞分析术（FCM）分析各组孕鼠CD28分子的表达情况。结果：CD28分子在脾脏表达趋势从高到低依次为：生理盐水组、西药组、中西结合组、中药组,各治疗组CD28分子表达均低于NS组（P〈0.05）;CD28分子在母胎界面上表达趋势从高到低依次为：生理盐水组、中药组、西药组、中西结合组,中西结合组CD28分子表达低于NS组、西药组和中药组（P〈0.05）;中药组、西药组CD28分子表达均低于NS组（P〈0.05）。结论：益气补肾中药对自然流产模型小鼠有下调CD28分子表达的作用趋势。     

补肾安胎冲剂对复发性流产小鼠蜕膜组织VEGF及VEGFR2蛋白表达的影响

目的:探讨补肾安胎冲剂对复发性流产模型小鼠蜕膜组织血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白表达的影响。方法:采用CBA/J×BALB/c小鼠复制正常妊娠模型;采用DBA/2×CBA小鼠复制复发性流产(RSA)模型。造模后小鼠分为正常组、模型组、西药(黄体酮)组及补肾安胎冲剂低、中、高剂量组,每组10只,从妊娠第1天开始灌胃给药,干预15 d。处死小鼠,留取样本。采用免疫组化法、Western blot技术检测各组小鼠蜕膜组织VEGF、VEGFR2蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组蜕膜组织VEGF、VEGFR2表达明显降低(P0.05);与模型组比较,西药组及补肾安胎冲剂低、中、高剂量组小鼠蜕膜组织VEGF、VEGFR2表达显著升高(P0.01)。结论:补肾安胎冲剂具有安胎作用,其机制可能与上调复发性流产小鼠蜕膜组织VEGF、VEGFR2蛋白表达水平有关。     

补肾安胎冲剂对肾虚流产大鼠母胎界面IGF-1及VEGF表达的影响

目的:探讨补肾安胎冲剂对肾虚流产大鼠母胎界面VEGF、IGF-1表达的影响。方法:复制肾虚流产模型,随机分为模型组、中药组、西药组,将正常妊娠大鼠作为正常妊娠组。正常妊娠组和模型组灌服蒸馏水,中药组灌服补肾安胎冲剂(5.0 g·kg-1·d-1),西药组灌服黄体酮(50 mg·kg-1·d-1)。末次给药24 h后,剖视子宫观察流产率;切取子宫组织(含蜕膜组织),免疫组化SABC法检测大鼠蜕膜VEGF、IGF-1蛋白表达。结果:模型组大鼠流产率明显升高(P<0.01),蜕膜VEGF、IGF-1表达明显降低(P<0.01);VEGF与IGF-1变化呈正相关(r=0.778,P<0.05);中药组和西药组大鼠流产率显著降低(P<0.01);中药组VEGF、IGF-1表达显著升高(P<0.01)。结论:补肾安胎冲剂可能通过升高肾虚流产大鼠蜕膜IGF-1、VEGF的表达,参与胎盘血管新生过程,促进胚胎发育,提高妊娠成功率。     

强精煎对小鼠睾丸生精细胞凋亡相关基因表达影响的研究

目的：观察强精煎对实验小鼠睾丸Fas、Fasl、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法：将80只健康雄性昆明种小鼠分为正常组、模型组、强精煎组、黄精赞育胶囊组,以环磷酰胺注射液40mg/kg腹腔注射制造小鼠生精功能障碍模型,以HE染色观察小鼠睾丸病理形态,采用Johnson评分评价精子发生和发生障碍程度,用免疫组织化学SABC法检测Fas、Fasl、Bcl-2和Bax蛋白在小鼠睾丸实质组织中的表达率。结果：模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤,强精煎组则生精功能良好,黄精赞育胶囊组稍差。与正常组比较,模型组Johnson评分偏低,且Fas和Fasl蛋白表达率偏高（P〈0.01）,强精煎组和黄精赞育胶囊组与正常组各方面差异均无统计学意义（P〉0.05）。与模型组比较,正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组睾丸Johnson评分偏高,Fas、Fasl和Bax蛋白表达率显著降低（P〈0.01）,Bcl-2表达率显著升高（P〈0.01）,细胞内Bcl-2/Bax比值显著升高（P〈0.01）。结论：强精煎可以抑制Bax、Fas和Fasl,并促进Bcl-2蛋白在受损伤小鼠睾丸实质组织中的表达。     

不明原因早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中Bcl-2和Fas蛋白的表达

目的探讨Bcl-2和FAS蛋白在人不明原因早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化SABC法和图像分析检测Bcl-2和FAS蛋白在孕5~9周绒毛和蜕膜组织中的分布和变化规律。结果 Bcl-2和Fas蛋白均主要分布于绒毛合体滋养层、细胞滋养层和蜕膜细胞的胞质内。Bcl-2蛋白在正常妊娠组的水平显著高于自然流产组（P（0.05）,Fas蛋白在自然流产组的水平显著高于正常妊娠组（P（0.05）。结论 Bcl-2和FAS蛋白在人不明原因早期自然流产过程中可能发挥重要作用。     

安宫牛黄丸对自发性高血压脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB及NO表达的影响

目的探讨原发性高血压脑出血后,安宫牛黄丸对血肿周围组织细胞凋亡与核转录因子-κB（NF-κB）的表达、NO含量的干预作用。方法采用自体血注入法制作脑出血模型,分为模型组、中药组、西药组、中西药结合组进行干预治疗研究,采用免疫组化方法测定NF-κB的表达,并测定血清中NO含量。结果中西药结合组、中药组、西药组NF-κB的表达明显高于模型组（P〈0.05）,各治疗组之间无统计学差异（P〉0.05）。中西药结合组血NO含量明显低于其他三组（P〈0.05）,中西药结合组、中药组、西药组脑组织血NO含量均低于模型组（P〈0.05）,中药组与西药组间NO含量相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论安宫牛黄丸结合西药应用于原发性高血压脑出血急性期可减轻急性期脑组织损伤,其作用机制可能与减少血NO含量有关。     

氩氦刀冷冻消融兔vx2肝肿瘤对免疫功能的影响

目的观察氩氦刀治疗兔肝肿瘤后对免疫功能的影响。方法将荷瘤日本大白兔18只随机分成三组,即对照组（A组,n=6）,外科切除组（B组,n=6）,氩氦刀治疗组（C组,n=6）。分别于术前、术后1、2、3周观察血清中Bax、Bcl-2蛋白含量的变化,观察模型兔生存时间。结果术后1周时c组Bax蛋白含量升高,Bcl-2蛋白含量未见明显变化,Bax／Bcl-2值升高,与术前比较差异有统计学意义（P〈0．05）;术后2周时Bax／Bcl-2略有升高,与术前比较差异无统计学意义（P〉0．05）;到术后3周时已基本恢复到术前水平。A组、B组Bax蛋白含量、Bcl-2蛋白含量、Bax／Bcl-2值变化差异均无统计学意义（P〉0．05）。生存时间：C组〉B组〉A组,A组与C组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论氩氦刀治疗能够在短时间内上调外周血中Bax蛋白含量,Bax／Bcl-2比值升高,提高机体对肿瘤的凋亡能力,延长生存期。     

寿胎丸对反复自然流产小鼠母胎界面SOCS1和SOCS3蛋白表达的影响

目的探讨寿胎丸对反复自然流产小鼠母胎界面SOCS1和SOCS3蛋白表达的影响。方法采用CBA/J×BALB／C建立正常妊娠小鼠模型,CBA/J×DBA/2建立反复自然流产小鼠模型,并将流产模型小鼠随机分为4组,分别为反复自然流产模型对照组及寿胎丸低、中、高剂量组,寿胎丸低、中、高剂量组从妊娠第0天开始灌胃给药,14d后处死小鼠,取其蜕膜和胎盘组织。Western blot分别检测SOCS1和SOCS3蛋白的表达。结果寿胎丸低、中、高剂量组均可降低反复自然流产小鼠母胎界面SOCS1蛋白的表达,差异具有统计学意义（P〈0．01）,与正常妊娠组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;寿胎丸中、高剂量组可升高反复自然流产小鼠母胎界面SOCS3蛋白的表达,差异具有统计学意义（P〈0．01-0．05）,高剂量组与正常妊娠组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论寿胎丸可能通过降低小鼠母胎界面SOCS1蛋白表达及提高SOCS3蛋白表达,进而调控Th细胞向Th2方向分化,敌对反复自然流产有治疗作用。     

参夏合剂对动脉粥样硬化大鼠Bax、Bcl-2和Hs-CRP表达的影响

目的观察中药参夏合剂对动脉粥样硬化大鼠Bax、Bcl-2和超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)表达的影响,探讨防治动脉粥样硬化的作用机制。方法运用高脂饲料法复制动脉粥样硬化大鼠模型,随机分组,参夏组以参夏合剂干预,干预结束后取血清检测Hs-CRP水平,取胸主动脉观察斑块变化,采用免疫组化法检测动脉管壁中Bax、Bcl-2蛋白表达。结果模型组Hs-CRP水平明显高于空白对照组(P<0.05),与模型组比较,参夏组可明显降低Hs-CRP水平;模型组Bax蛋白表达与Bcl-2蛋白表达明显低于空白对照组(P<0.05),参夏组与模型组比较,Bax蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Bax和Hs-CRP通过促进细胞凋亡作用而诱发动脉粥样硬化过程,参夏合剂可通过调节细胞凋亡发挥抗动脉粥样硬化作用。     

补肾联合免疫治疗对不同频次URSA先兆流产患者免疫功能的影响

目的观察参芪寿胎丸方联合主动免疫治疗对不同频次原因不明复发性流产(URSA)早期先兆流产患者免疫功能的影响。方法将60例URSA早期先兆流产患者按流产次数分为治疗1组(自然流产2次)与治疗2组(自然流产≥3次),每组30例。观察此方案对不同频次URSA早期先兆流产患者的继续妊娠成功率,比较两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+及CD4/CD8)的变化。结果两组患者治疗后总继续妊娠成功率为91.67%,治疗1组为93.33%,治疗2组为90.00%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗前后,CD3+、CD4+比较差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后CD8+显著增高(P<0.05),CD4/CD8降低(P<0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾中药联合主动免疫治疗,可调节不同频次URSA患者早期先兆流产的免疫功能,纠正患者免疫失衡,继而提高继续妊娠成功率。     

祛风止动方对抽动障碍大鼠纹状体中DRD1/DRD2 mRNA表达的影响

目的：探讨祛风止动方对抽动障碍（TD）大鼠纹状体神经递质基因表达的影响。方法：按照SPSS程序将SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药大剂量组、中药常规剂量组及西药对照组,采用阿扑吗啡（APO）腹腔注射给药建立TD大鼠模型。中药组灌胃祛风止动方、西药组灌胃氟哌啶醇,正常组、模型组均予同等剂量生理盐水。药物干预4周后,断头处死实验大鼠,解剖脑组织并分离纹状体,采用RT-PCR检测各组大鼠纹状体中多巴胺受体D1/D2（DRD1/DRD2）mRNA表达水平。结果：腹腔注射APO后,经刻板行为验证显示模型大鼠能再现TD的特征性行为变化,且3周后模型组大鼠纹状体DRD2 mRNA明显上调、DRD1 mRNA明显下调,与正常组比较差异均有显著意义（P〈0.05）;经4周药物干预,西药组、中药大剂量组可显著上调DRD1 mRNA表达,明显优于中药常规剂量组（P〈0.05）;中药大剂量组可显著下调DRD2mRNA表达,明显优于西药组与中药常规剂量组（P〈0.05）。结论：祛风止动方可调节纹状体的DRD1/DRD2 mRNA表达水平。     

中西药物协同药物流产204例临床疗效观察

[目的]观察单独药流、西药协助药流、中药协助药流的临床疗效。[方法]将204例符合药流指征得早孕患者随机分成甲组168例（口服米非司酮加米索前列醇）；乙组68例（甲基睾丸素协同药流）；丙组68例（自拟中药复宫1号方、复宫2号方协同药流）。[结果]经SPSS13．0软件包统计分析，三组流产效果相同（P〉0.05），阴道出血持续天数，月经恢复情况，月经量，孕产物排出时间均是（P〈0.01）丙组丙值最大。[结论]中药协同药流最安全，最有效，西药组次之。     

消痰和胃方对胃癌前病变大鼠IL-1β蛋白及mRNA表达的影响

目的观察消痰和胃方对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织中IL-1β蛋白及基因表达的影响。方法 Wistar大鼠50只随机分为正常组、模型组、验证组、维酶素组、中药组5组,每组10只。除正常组外其他4组采用高剂量N-甲基-N'硝基-N-亚硝基胍(MNNG)综合造模法干预32周建立大鼠胃癌前病变(PLGC)模型。验证组处死后取胃,验证造模成功,其余4组按照各自给药方法干预12周。Western Blot法检测4组大鼠胃黏膜组织中白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达含量;RTPCR法检测4组大鼠胃黏膜组织中IL-1βmRNA表达含量。结果模型组、维酶素组IL-1β蛋白及IL-1βmRNA表达较正常组显著升高(P0.05,P0.01)。中药组IL-1β蛋白表达较模型组、维酶素组下降(P0.05),与正常组相比差异无统计学意义(P0.05);中药组IL-1βmRNA平均相对表达量较模型组显著降低(P0.01)。结论消痰和胃方可下调胃癌前病变大鼠IL-1β蛋白及基因表达。     

益气补肾活血方对失用性骨质疏松模型大鼠BMD、BGP、BAP的影响

目的观察益气补肾活血方对失用性骨质疏松大鼠骨密度(BMD)、大鼠骨钙素(BGP)、大鼠骨特异性碱性磷酸酶(BAP)等指标的影响。方法将假手术大鼠作为空白对照组,大鼠右侧股骨骨折后石膏固定的方法建立废用性骨质疏松模型,分为益气补肾活血方组、钙尔奇组、模型对照组。灌胃给药60 d后,骨密度仪检测BMD、骨矿盐(BMC),ELISA法检测血清中BGP、BAP的含量。结果益气补肾活血方组与钙尔奇组全身及股骨BMD及BMC均显著高于模型对照组(P0.05),两组之间比较,差异无统计学意义(P0.05);模型对照组血清BGP最低,与其他组比较差异有统计学意义(P0.05);益气补肾活血方组与钙尔奇组均能降低血清中BAP含量,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气补肾活血方能够有效防止失用性骨质疏松模型大鼠的骨量丢失,并能有效抑制骨吸收的发生,促进骨形成。