PLK1在非霍奇金淋巴瘤中的研究进展

Polo样激酶1（Polo-like kinase1,PLK1）是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,是真核生物细胞分裂的关键的调节因子。PLK1在有丝分裂期增殖的细胞中正常表达,但在人类不同类型的肿瘤中过表达,其中包括非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma,NHL）等。PLK1的基因和蛋白表达水平作为很多肿瘤新的预后标志物,是肿瘤治疗潜在的靶点。非霍奇金淋巴瘤（NHL）是一种造血系统的恶性肿瘤,根据不同的淋巴细胞起源,可以分为B细胞、T细胞和NK细胞淋巴瘤。本文主要探讨了PLK1在非霍奇金淋巴瘤发生、发展中的作用,也总结了关于PLK1抑制剂的在非霍奇金淋巴瘤中的最新发展。     

丝/苏氨酸蛋白激酶PLK1在肿瘤中的研究进展

PLK1是一类高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶.PLK1与不同细胞周期检查点的精密调控有关,其在细胞有丝分裂进程中的重要作用已被阐明.PLK1在增殖活跃的细胞中呈高水平表达,PLK1的高度表达和肿瘤患者的低存活率之间具有相关性;PLK1有可能成为肿瘤分子靶向治疗中的有效靶点.     

PLK1在肿瘤发生中的研究进展

Polo样激酶1(polo-like kinase1, PLK1)属于PLKs家族成员, 是一种广泛存在于真核生物中的丝/苏氨酸蛋白激酶, 因在细胞周期中起重要作用而受到广泛关注。研究发现, PLK1在人类大多数肿瘤中高表达, 并与肿瘤细胞的增殖及患者的预后密切相关。临床前期结果表明干扰PLK1的表达能显著抑制包含非小细胞肺癌、淋巴瘤、结直肠癌在内的多种肿瘤的生长, 且对正常细胞无明显影响。因此, PLK1被认为是一个有良好应用前景的恶性肿瘤治疗新靶点。目前, 针对PLK1的一些低分子抑制剂(如BI2536)已经进入了临床试验阶段。然而, 尚未在临床水平得到证实。由于缺乏临床证据, 人们对PLK1的作用产生了质疑, 即PLK1在肿瘤细胞中的高表达是直接参与细胞的恶性转化还是仅仅作为肿瘤细胞大量增殖的一个指标。本文主要通过PLK1与细胞周期、原癌基因及肿瘤相关信号通路之间的关系来探讨PLK1在肿瘤发生、发展中的作用。     

肿瘤细胞中p53与PLK1相互关系的研究进展

抑癌基因p53是基因组的守护者和准确进行有丝分裂的关键,但在大部分人类肿瘤中由于TP53的突变或p53信号转导通路的失活导致p53功能丢失。PLK1,是有丝分裂和胞质分裂关键性的调控因子,在大部分肿瘤中高表达,并且它的表达常与不良预后相关,提示其可作为治疗靶点的潜能。p53和PLK1之间相互作用,呈负向调节。p53抑制PLK1启动子的转录,而PLK1通过直接结合于p53抑制其功能或通过促进其降解而灭活。PLK1抑制剂以所有迅速分裂的细胞为目标,无论是肿瘤细胞还是增殖的正常细胞。PLK1抑制剂治疗后,在具有野生型p53的肿瘤细胞中p53被激活且诱导强烈的细胞凋亡,然而p53失活的肿瘤细胞中有丝分裂阻滞仅有少量细胞凋亡。此外,具有p53活性的细胞可免受PLK1抑制的细胞毒性。因此,在p53缺失或突变的肿瘤细胞中予以PLK1抑制剂抗肿瘤治疗,并恢复p53功能,将成为有效地抗肿瘤治疗策略。     

PLK1通过自噬调节肿瘤的作用及研究进展

PLK1属于Polo样激酶家族，是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，它在真核细胞中广泛存在。已有研究显示，PLK1参与了肿瘤自噬调控，深入探讨其调控机理，将有望为肿瘤的治疗开辟新途径。本文从PLK1结构和功能、自噬调节和肿瘤的关系、PLK1和自噬调节的关系、PLK1-自噬调控在肿瘤中的作用与机制、PLK1-自噬调控对肿瘤治疗的作用及PLK1抑制剂的临床效果进行综述。     

PLK1小分子抑制剂的抗肿瘤活性及其在肿瘤治疗中的应用现状

在肿瘤治疗中蛋白激酶被认为是重要的干预靶点之一。作为高度保守的苏氨酸、丝氨酸蛋白激酶，Polo样激酶（polo-likekinase，PLK）在真核生物中广泛存在。PLK1在多数肿瘤组织中表达均显著上调，且参与细胞恶性生物学行为及肿瘤的发生、发展，所有的证据均显示PLK1在肿瘤的治疗过程中可能是重要的干预靶点。随着临床上对PLK1小分子抑制剂研究的不断深入，不断有新的PLK1高效选择性抑制剂被发现，以PLK1为靶点的肿瘤干预方案已成为肿瘤治疗中的热点。本文将对PLK1小分子抑制剂在肿瘤治疗中的应用现状及抗肿瘤活性进行综述。     

Construction of PLK1 siRNA-express plasmid and detection of its effects

目的:用脂质体法构建polo样激酶-1 (polo-like kinase-1,PLK1)基因RNA(siRNA).方法:设计合成PLK1siRNA干扰序列,构建干扰载体,然后以该siRNA转染SMMC-7721细胞后,以实时定量Western Blot检测各组细胞PLK1蛋白表达情况.结果:应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞48 h后,PLK1蛋白的表达siRNA分别较无关对照组和空白对照组有明显下降.结论:通过脂质体转染法成功构建靶向PLK1的siRNA,实现了细胞的稳定转染,为进一步研究奠定了基础.     

Survivin与PLK1在T细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的 通过对T细胞淋巴瘤中Survivin、PLK1表达的研究,并结合临床病理参数,探讨Survivin、PLK1与T细胞淋巴瘤及其生物学行为的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测50例T细胞淋巴瘤及30例反应性增生淋巴组织中Survivin、PLK1的表达.结果 T细胞淋巴瘤中Survivin、PLK1蛋白表达均显著高于反应性增生淋巴组织中的表达(P＜0.05).Survivin、PLK1蛋白在不同恶性程度及临床分期组间的表达差异具有统计学意义(P＜0.05).此外,T细胞淋巴瘤中Survivin、PLK1蛋白在不同性别、年龄、发生部位中的表达差异均无统计学意义(P＞0.05).经Spearman等级相关分析发现Survivin、PLK1蛋白在T细胞淋巴瘤中的表达呈正相关(P＜0.01).结论 Survivin、PLK1在T细胞淋巴瘤中呈高表达,且与肿瘤恶性程度与临床分期相关,与性别、年龄、发生部位无关.两者在T细胞淋巴瘤中的表达呈正相关.Survivin和PLK1的高表达可能是T细胞淋巴瘤发生发展的重要生物学标志.     

Polo-like激酶1在人类3种前列腺癌细胞株中的表达

目的检测Polo-like激酶1(Polo-like kinase 1,PLK1)在人类3种前列腺癌细胞株中的表达。方法采用RT-PCR和Western Blot方法检测人类前列腺癌细胞株LNCaP,DU145和PC3中PLK1 mRNA和蛋白的表达。结果在LNCaP,DU145和PC3中PLK1 mRNA均呈高表达,其PLK1/-actin比值分别为1.34,1.31,1.37;PLK1蛋白的表达水平有差异,Western Blot结果显示PLK1/-actin比值分别为1.17,0.83,0.76。结论mRNA水平上,PLK1在3种前列腺癌细胞中均呈高表达;蛋白水平上,PLK1的表达在不同前列腺癌细胞中存在差异。     

PLK1调控Pin1促进乳腺癌对他莫昔芬耐药的机制

目的探究Polo样激酶1(PLK1)对他莫昔芬耐药(TAM-R)乳腺癌中脯氨酰异构酶Pin1的调控机制。方法长期低浓度加药法诱导TAM-R乳腺癌细胞系MCF-7R,采用荧光定量PCR、Western blot检测PLK1、p-PLK1、Pin1表达水平,应用免疫共沉淀技术证明PLK1和Pin1在细胞内相互作用,通过siRNA和PLK1抑制剂确认PLK1对于Pin1的调控作用。结果他莫昔芬耐药乳腺癌细胞MCF-7R中,Pin1、PLK1、p-PLK1蛋白水平分别是亲本细胞MCF-7的3.1、1.3和2.4倍,差异有统计学意义(P0.05)。通过免疫共沉淀实验证明,PLK1和Pin1可以在细胞内相互作用,并且PLK1抑制剂或者siRNA显著减少Pin1蛋白表达水平。结论 TAM-R乳腺癌中PLK1与Pin1相互作用并能调控Pin1的蛋白水平。     

miR-593通过调控PLK1基因的表达抑制结肠癌细胞的增殖

目的探讨miR-593在结肠癌细胞增殖中的作用及分子机制。方法利用生物信息学分析筛选miR-593可能结合的靶基 因为PLK1;利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-593 和PLK1 基因的结合;通过qRT-PCR、Western blotting 验证PLK1 为 miR-593直接作用的靶基因;通过CCK-8实验证明miR-593通过调控PLK1基因的表达抑制结肠癌细胞的增殖。结果运用三 种生物信息学软件对PLK1可能结合的miRNA进行了预测与分析,发现miR-593可能结合PLK1基因;双荧光素酶报告基因实 验证明miR-593 与PLK1 基因发生了结合;Western blotting 结果表明,PLK1 在miR-593 mimic 转染组表达量显著下降,而在 miR-593 inhibitor 组明显升高,相对于对照组均具有统计学差异（P<0.05）;qRT-PCR结果表明,PLK1 RNA水平在各组中表 达水平差异无统计学意义（P>0.05）;细胞增殖实验表明,miR-593与PLK1对结肠癌细胞增殖的影响为相反关系,且共转染miR-593 mimic与PLK1过表达质粒组对细胞增殖的影响介于单独转染miR-593 mimic组与PLK1过表达质粒组之间。结论miR-593通 过调控PLK1基因的表达抑制了结肠癌细胞的增殖,并发挥抑癌miRNA的作用。     

Polo-like Kinase1 Gene Expression and its Clinicopathological Significance in gastric Carcinoma

Polo-like Kinase1 Gene Expression and its Clinicopathological Significance in gastric Carcinoma     

STIL基因的分子生物学特征及效应

STIL基因是从急性T淋巴细胞白血病基因中克隆而来,作为一种癌基因,STIL与生物体内中心体的生成、复制及细胞有丝分裂密切相关。中心粒是细胞分裂的控制中心。STIL与PLK4(一种中心粒复制相关蛋白)在细胞分裂的G₁期中期组成包含有卷曲螺旋结构域(coiled-coil domain,CCD)和STAN模体(STAN motif)的复合体参与中心粒的形成、复制,调控细胞有丝分裂,并且生成中心体的数量与STIL蛋白含量成正比。进一步的研究发现,在神经系统中STIL截断突变基因(STILT)通过影响中心粒的增殖从而导致小头畸形症(MCPH)的发生,并与全前脑畸形(HPE)的发病有关。增强STIL介导的Shh信号转导通路可以降低视网膜多巴胺能细胞对神经毒素的敏感性,从而保护视网膜。经研究发现,STIL在多种肿瘤组织均有表达,并通过调节中心体的结构和数目,影响染色体不稳定性形成参与恶性肿瘤发生、发展及转移。在肺癌特别是非小细胞肺癌中STIL呈过表达状态。在胰腺癌中,STIL在Hedgehog信号通路中通过与SUFU(融合抑制蛋白)和Gli(一种锌指蛋白)相互作用导致胰腺癌的发生。本篇综述旨在探讨STIL在中心粒复制和细胞增殖方面的作用,揭示其与神经系统疾病及恶性肿瘤发生的关系及潜在机制,为疾病的预后和治疗提供新的方向。      

以保罗样激酶1为靶点的抗肿瘤药物的筛选及活性评价

目的：利用酵母模型进行保罗样激酶1（Polo-like kinase 1,PLK1）抑制剂的高通量筛选,并初步评估活性化合物的体外抗肿瘤效果。方法采用噻唑蓝比色法（MTT 法）检测初筛阳性化合物对不同细胞系增生的影响,酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）分析化合物对体外纯化的 PLK1激酶的作用效果,流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测细胞周期分布和凋亡率,免疫印迹（Western blotting）检测化合物对周期蛋白 B1（cyclin B1）和 PLK1的作用。结果利用酵母模型初筛得到3个阳性化合物,MTT 法检测显示1号和3号化合物能抑制多种肿瘤细胞的增生而对正常细胞的毒性很小,ELISA 结果显示2号和3号化合物对体外纯化的 PLK1几乎无抑制作用,FCM 检测显示1号化合物处理组 G2/ M 期细胞比例高于对照组, Western blotting 表明1号化合物不影响 PLK1的蛋白表达,能导致 cyclin B1的表达增加。结论1号化合物通过抑制 PLK1激酶的活性发挥抗肿瘤作用而不影响 PLK1的蛋白表达,有望成为靶向 PLK1的抗肿瘤先导化合物。     

Polo-1ike激酶1在人类3种前列腺癌细胞株中的表达

目的检测Polo-1ike激酶1（Polo-1ike kinase 1，PLK1）在人类3种前列腺癌细胞株中的表达。方法采用RT-PCR和Western Blot方法检测人类前列腺癌细胞株LNCaP，DU145和PC3中PLK1 mRNA和蛋白的表达。结果在LNCaP，DU145和PC3中PLK1mRNA均呈高表达，其PLKI／β-actin比值分别为1．34，1.31，1．37；PLK1蛋白的表达水平有差异，Western Blot结果显示PLK1／β-actin比值分别为1.17，0．83，0．76。结论mRNA水平上，PLK1存3种前列腺癌细胞中均呈高表达；蛋白水平上，PLK1的表达在不同前列腺癌细胞中存在差异。     

沉默PLK1基因表达对肺腺癌H1792细胞肿瘤生物学行为影响的研究

［摘要］ 〖HTH〗目的〖HTSS〗〖KG*2〗探讨PLK1表达下调对肺腺癌H1792细胞肿瘤生物学行为的影响,并分析相关机制。 〖HTH〗方法〖HTSS〗〖KG*2〗将PLK1 siRNA和control siRNA转染肺腺癌H1792细胞48 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）法检测肺腺癌H1792细胞PLK1 mRNA表达水平;采用Western blot法检测H1792细胞中PLK1、E-cadherin、Vimentin蛋白表达;再通过流式细胞术检测肺腺癌H1792细胞检测周期分布的变化情况;Transwell实验检测H1792细胞侵袭能力的改变。 〖HTH〗结果〖HTSS〗〖KG*2〗PLK1 siRNA组PLK1 mRNA表达水平显著低于control siRNA组（P＜0.05）。PLK1 siRNA组PLK1蛋白和 Vimentin蛋白表达显著低于control siRNA组,E-cadherin蛋白表达显著高于control siRNA组（P＜0.05）。PLK1 siRNA组G2/M期细胞比例显著高于control siRNA组,S期细胞比例显著低于control siRNA组（P＜0.05）。siRNA组穿膜细胞数显著少于control siRNA组（P＜0.05）。 〖HTH〗结论〖HTSS〗〖KG*2〗PLK1在肺腺癌的生长和侵袭转移中发挥重要作用。     

ALDH1和PLK4蛋白表达水平变化与卵巢肿瘤良恶性的关系

探讨乙醛脱氢酶(ALDH1)、Polo样蛋白激酶4(PLK4)的表达与卵巢良恶性肿瘤的关系。收集本院经病理学检查确诊的卵巢癌组织和卵巢良性肿瘤组织标本,采用免疫组化检测技术分析两种标本中的ALDH1和PLK4蛋白表达水平,并分析卵巢癌不同FIGO分期、不同病理类型、不同分化程度、淋巴结转移与ALDH1和PLK4蛋白表达有关。结果显示,与良性组卵巢肿瘤组织相比,卵巢癌组织中的ALDH1和PLK4蛋白阳性表达率显著增高;卵巢癌组织中的ALDH1和PLK4蛋白在不同FIGO分期、不同的组织分化程度和淋巴结转移组织中的表达有显著差异(P<0.05)。结果提示,ALDH1和PLK4蛋白在卵巢癌组织中高表达,并与肿瘤的恶性度有关。