Fox03a及MAFbx在大鼠失神经腓肠肌细胞中的表达变化

目的探讨失神经大鼠腓肠肌细胞中Fox03a及MAFbx的表达规律。方法72只Wistar大鼠随机分为12组,每组6只,切断大鼠右侧坐骨神经,左侧行假手术,分别于术后0、1、2、3、4、5、6、7、10、14、21、28d处死1组大鼠,取右侧腓肠肌,称重并与左侧腓肠肌对比后,保存于-70℃冰箱。分别使用实时荧光定量PCR法和WesternBlot法对其中的Fox03a和MAFbx的基因和蛋白及253位磷酸化的Fox03a（pFox03a””）进行检测。结果失神经后骨骼肌迅速发生萎缩,失神经14d后肌湿重约下降50％,28d后肌湿重仅存正常时的30％。MAFbx的基因表达在失神经第4d达到峰值（39．1倍）,其后逐渐下降至正常。Fox03a的基因表达在失神经第5d达到峰值（7．06倍）,而后缓慢下降,但仍高表达。Fox03a和MAFbx的蛋白含量随失神经时间的延长逐渐升高,而Fox03a和磷酸化水平逐渐下降,失神经28d时pFox03a””的量只有失神经0d时的60．1％。结论Fox03a的磷酸化调节和MAFbx的表达改变与失神经骨骼肌萎缩关系密切,可以作为药物治疗和基因治疗的靶点之一。     

人参皂苷对大鼠失神经腓肠肌MAFbx表达的影响

目的：观察人参皂苷对失神经大鼠腓肠肌MAFbx表达的影响,并探讨其延缓失神经腓肠肌萎缩的作用机制。方法：选用雌性Wistar大鼠72只,随机分为3组：假失神经组（A）24只,失神经组（B）24只,人参皂苷治疗组？24只。于造模2、7、14、28d后,用RealtimeRT-PCR和Westernblot方法检测各组大鼠右侧腓肠肌MAFbxmRNA和蛋白的表达。结果：失神经组MAFbx表达在各时间点均明显高于假失神经组（P〈0．01）,且在失神经2d达到峰值,而缓慢下降,失神经28d基本降至正常水平;人参皂苷组与失神经组各时间点相比,MAFbx表达均明显降低（P〈0．01）。结论：人参皂苷能通过减少MAFbx的表达而延缓失神经肌萎缩的发生。     

黄芪对大鼠失神经早期骨骼肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白活性的影响

目的:对黄芪对大鼠失神经早期骨骼肌细胞凋亡以及凋亡相关蛋白活性的影响进行分析探讨,为今后的实验研究提供可靠的参考依据。方法:抽取SD大鼠69只,建立右下肢腓肠肌神经支配模型,随机分成3组,分别定义为失神经对照组、失神经黄芪干预组和阴性对照组,对术后2、14、28天时大鼠腓肠肌骨骼肌细胞凋亡细胞核以及凋亡的相关蛋白水平进行检测,并对检测结果进行对比分析。结果:失神经对照组、失神经黄芪干预组大鼠细胞凋亡较阴性对照组发生显著增加(P<0.05);术后14天和28天时黄芪干预组大鼠的腓肠肌湿重较同时期失神经组发生显示升高(P<0.05),然而凋亡细胞核、凋亡相关蛋白Caspase-8,Caspase-9活性则较失神经对照组发生显著降低(P<0.05)。结论:由以上研究可证实黄芪具有对大鼠失神经早期骨骼肌细胞凋亡产生显著的延缓作用,并且对Caspase-8,Caspase-9活性也能够产生一定的抑制效果,值得关注。     

异丙肾上腺素防治失神经骨骼肌萎缩机制的分析

目的探讨异丙肾上腺素对失神经骨骼肌萎缩机制的防治情况。方法选取60只wista大鼠,制作成标准的腓肠肌失神经支配、右侧坐骨神经离断模型,随机分成观察组30只和对照组30只,应用Western Bloting和RT-PCR检测不同时间段蛋白质、mRNA、MuRF、1NF-JB的表达水平。结果两组在肌湿重维持率、NF-JBP65、MuRF1等方面相比差异均具有显著性(P<0.05)。结论异丙肾上腺素在抑制NF-JB/MuRF1通路中成效显著,能够达到防治失神经骨骼肌萎缩的目的。     

黄芪对大鼠失神经早期骨骼肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白活性的影响

目的:对黄芪对大鼠失神经早期骨骼肌细胞凋亡以及凋亡相关蛋白活性的影响进行分析探讨,为今后的实验研究提供可靠的参考依据。方法:抽取SD大鼠69只,建立右下肢腓肠肌神经支配模型,随机分成3组,分别定义为失神经对照组、失神经黄芪干预组和阴性对照组,对术后2、14、28天时大鼠腓肠肌骨骼肌细胞凋亡细胞核以及凋亡的相关蛋白水平进行检测,并对检测结果进行对比分析。结果:失神经对照组、失神经黄芪干预组大鼠细胞凋亡较阴性对照组发生显著增加(P0.05);术后14天和28天时黄芪干预组大鼠的腓肠肌湿重较同时期失神经组发生显示升高(P0.05),然而凋亡细胞核、凋亡相关蛋白Caspase-8,Caspase-9活性则较失神经对照组发生显著降低(P0.05)。结论:由以上研究可证实黄芪具有对大鼠失神经早期骨骼肌细胞凋亡产生显著的延缓作用,并且对Caspase-8,Caspase-9活性也能够产生一定的抑制效果,值得关注。     

川芎嗪对大鼠失神经骨骼肌细胞凋亡及bcl-2、bax表达的影响

目的探讨川芎嗪对失神经骨骼肌细胞凋亡及bcl-2、bax表达的影响,寻找延缓失神经骨骼肌萎缩的新途径。方法将54只Wistar大鼠,随机分为9组,分别为正常对照组（A）、失神经对照组（B、C、D、E）、川芎嗪干预组（F、G、H、I）。失神经对照组、川芎嗪干预组建立右下肢失神经腓肠肌动物模型。正常对照组（0d）不做任何处理;川芎嗪干预组于腹腔注射川芎嗪注射液80mg.kg-1.d-1;失神经对照组腹腔注射等剂量生理盐水。在术后第0、2、7、14、28d分别处死1组大鼠取其两侧腓肠肌并称肌湿重。采用RT-PCR、Western Blot检测各时段bcl-2以及bax的蛋白表达水平。使用TUNEL法检测肌细胞凋亡。结果川芎嗪干预组肌湿质量比显著高于失神经对照组（P〈0.05）。川芎嗪干预组bcl-2的蛋白表达水平均高于失神经对照组（P〈0.05）,而bax的蛋白表达水平均低于失神经对照组（P〈0.05）。失神经组凋亡率逐渐升高,且与正常对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）,采用川芎嗪治疗2d时,细胞凋亡率显著低于同期失神经对照组（P〈0.05）。结论川芎嗪可以通过促进bcl-2抑制bax的表达来延缓失神经骨骼肌萎缩。     

黄芪与丹参联合对大鼠失神经骨骼肌萎缩的作用

目的探讨黄芪与丹参联合应用对失神经骨骼肌萎缩的作用。方法健康成年雄性SD大鼠72只,随机分为3组:阴性对照组(A组,n=24)、失神经对照组(B组,n=24)、黄芪丹参治疗组(C组,n=24)。A组仅暴露右侧坐骨神经,但不切断;B、C两组切断右侧坐骨神经1 cm,建立右下肢失神经腓肠肌萎缩模型;B组腹腔注射3 mL生理盐水;C组采用黄芪、丹参各1.5mL混合腹腔注射给药,分别于术后第2、3、4、6周每组各处死6只大鼠进行腓肠肌肌湿重比值和肌纤维横切面积检测。结果在第2、3、4周,治疗组的肌湿重比值、肌纤维横截面积均显著高于模型组(P<0.05);在第6周时,治疗组肌湿重比值、肌纤维横截面积与模型组相比无显著性差异(P>0.05)。结论在失神经早期,黄芪丹参联合应用能有效延缓大鼠因失神经所致的骨骼肌萎缩,其发生的机制有待进一步研究。     

白细胞介素1β对失神经肌肉保护作用的实验研究

目的研究白细胞介素1β(IL-1β)对失神经支配骨骼肌的作用。方法将36只健康SD大鼠制备失神经支配腓肠肌模型,随机分成实验组和对照组,每组18只。A组于腓肠肌不同的5个点注射IL-1β0.1mL(浓度1ng/mL),B组注射同等剂量的生理盐水,术后每天注射1次。于术后2、4、8周各取6只大鼠处死,取右侧腓肠肌观察,测定肌湿质量维持率、肌细胞横截面积、肌肉蛋白总含量,检测运动终板,细胞凋亡等指标。结果术后2、4、8周实验组的肌湿质量维持率、肌细胞截面积、肌肉蛋白含量均明显高于对照组(P<0.05)。术后8周两组的运动终板平均灰度值和平均光密度值差异有统计学意义(P<0.05)。实验组肌细胞凋亡率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶肌肉局部注射IL-1β能减轻失神经骨骼肌形态的改变,对失神经骨骼肌和运动终板具有保护作用,能在短时间内有效延缓失神经支配骨骼肌萎缩。     

手法对家兔骨骼肌失神经支配后雪旺氏细胞S-100蛋白表达的影响

目的：通过观察推拿手法家兔骨骼肌失神经支配后肌湿重、雪旺氏细胞S-100蛋白表达水平,探讨推拿手法对受损神经及失神经支配骨骼肌的影响。方法：新西兰家兔120只,分为四大组：正常对照组30只、模型观察组30只、神经生长因子(NGF)治疗组30只、手法治疗组30只,分别于手法干预2周、3周、1月、2月、4月后,每组各取6只家兔,称量肌湿重,计算术侧与健侧的肌湿重比值;测定雪旺氏细胞S-100蛋白表达水平。结果：①腓肠肌肌湿重比：NGF治疗组在2周、3周、1月、2月及手法治疗组在2周、3周、1月、2月、4月均高于模型观察组(P＜0.05)。手法治疗组在2周、3周低于NGF治疗组(P＜0.05),4月时则高于NGF治疗组(P＜0.05)。②雪旺氏细胞S-100蛋白表达：NGF治疗组、手法治疗组在各个时期均高于模型观察组(P＜0.05)。手法治疗组在1月、2月均高于NGF治疗组(P＜0.05)。结论：推拿手法可以延缓周围神经损伤后骨骼肌萎缩、变性,促进损伤神经的修复。     

异丙肾上腺素防治失神经骨骼肌萎缩机制的分析

目的探讨异丙肾上腺素对失神经骨骼肌萎缩机制的防治情况。方法选取60只wista大鼠,制作成标准的腓肠肌失神经支配、右侧坐骨神经离断模型,随机分成观察组30只和对照组30只,应用Western Bloting和RT-PCR检测不同时间段蛋白质、mRNA、MuRF、1NF-JB的表达水平。结果两组在肌湿重维持率、NF-JBP65、MuRF1等方面相比差异均具有显著性(P0.05)。结论异丙肾上腺素在抑制NF-JB/MuRF1通路中成效显著,能够达到防治失神经骨骼肌萎缩的目的。     

The protective effect of EGB761 on vessels of denervated gastrocnemius in rats and its mechanism

This study investigated the protective effect of EGB761 on blood vessels of denervated gastrocnemius of rat and its possible mechanism.Fifteen male adult SD rats were randomly divided into three groups...     

Hyperbaric Oxygen and Ginkgo Biloba Extract Ameliorate Cognitive and Memory Impairment via Nuclear Factor Kappa-B Pathway in Rat Model of Alzheimer's Disease

Background:

Hyperbaric oxygen (HBO) and Ginkgo biloba extract (e.g., EGB 761) were shown to ameliorate cognitive and memory impairment in Alzheimer''s disease (AD). However, the exact mechanism remains elusive. The aim of the present study was to investigate the possible mechanisms of HBO and EGB 761 via the function of nuclear factor kappa-B (NF-κB) pathway.

Methods:

AD rats were induced by injecting β-amyloid 25–35 into the hippocampus. All animals were divided into six groups: Normal, sham, AD model, HBO (2 atmosphere absolute; 60 min/d), EGB 761 (20 mg·kg⁻¹·d⁻¹), and HBO/EGB 761 groups. Morris water maze tests were used to assess cognitive, and memory capacities of rats; TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling staining and Western blotting were used to analyze apoptosis and NF-κB pathway-related proteins in hippocampus tissues.

Results:

Morris water maze tests revealed that EGB 761 and HBO significantly improved the cognitive and memory ability of AD rats. In addition, the protective effect of combinational therapy (HBO/EGB 761) was superior to either HBO or EGB 761 alone. In line, reduced apoptosis with NF-κB pathway activation was observed in hippocampus neurons treated by HBO and EGB 761.

Conclusions:

Our results suggested that HBO and EGB 761 improve cognitive and memory capacity in a rat model of AD. The protective effects are associated with the reduced apoptosis with NF-κB pathway activation in hippocampus neurons.     

EXPERIMENTAL STUDY ON INFLUENCE OF MUSCLE TENSION TOWARDS THE FUNCTION OF THE SKELETAL MUSCLE FOLLOWING ITS REINNERVATION

Objective To investigate the influence of tension on the function of the denervated skeletal muscle after its reinnervation. Methods Fifty-four Sprague-Dawley ( SD ) rats were randomly divided into 3 groups. The left gastrocnemius muscles of the rats were dissected with only the neurovascular pedicles intact; the tibial nerves were cut and immediately repaired by epineurial suture. Then the Achilles tendons were isolated and treated accordingly; the Achilles tendon was lengthened by 0.5cm in lengthened group, shortened by 0.5cm in shortened group and left alone in normal (control) group. In the 2nd, 4th and 8th week after operation, the isometric twitch contractile force of both the right and the left gastrocnemius muscles were measured; specimens were taken from gastrocnemius muscle for histological study by light microscope. Results In comparison between the groups, the gastrocnemius muscles in the shortened group showed less severe muscle atrophy and connective tissue proliferation, bigger diameter and cross section dimension of the muscle fiber and greater isometric twitch contractile strength of the bilateral gastrocnemius muscles than those in the normal and lengthened groups in all the postoperative periods. Coneluaion A proper high tension of the muscle may improve the function of the denervated skeletal muscle after its reinnervation.     

银杏达莫注射液治疗突发性聋的临床研究

目的　对银杏达莫注射液治疗突发性聋的疗效进行临床观察。方法　将 77例 (1 0 1耳 )突发性聋患者按就诊顺序分成银杏达莫组即实验组 39例 (5 2耳 )和对照组 38例 (4 9耳 )。实验组用含银杏叶提取物和双嘧达莫 (Dipyridamole)的银杏达莫注射液治疗 ;对照组用低分子右旋糖酐治疗 ;另外两组同时加用地塞米松、丹参、ATP、肌苷、吸氧和B族维生素等 ,如有明确感冒受凉史则加用抗病毒药及干扰素。两组在治疗前和治疗后 4d开始每 3d用纯音电测听测试患者听力。结果　经治疗后 ,实验组 39例 (5 2耳 )中痊愈 1 7例 (2 5耳 ) ,显效 1 5例 (1 7耳 ) ,有效 5例 (7耳 ) ,无效 2例 (3耳 ) ,治愈率为 4 8.1 0 % ,有效率为 92 .30 % ;对照组 38例 (4 9耳 )中痊愈 7例 (9耳 ) ,显效 9例 (1 1耳 ) ,有效 1 5例 (1 9耳 ) ,无效 7例 (1 0耳 ) ,治愈率为 1 8.4 3% ,有效率为 6 1 .30 %。两组统计学处理差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　银杏达莫治疗突发性聋的临床疗效肯定 ,按该组剂量未发现有明显副作用 ;对于银杏达莫注射液治疗突发性聋的详细机理有待进一步探讨     

银杏叶提取物对损伤后中脑多巴胺能神经细胞活性的影响

目的 探讨银杏叶提取物(EGB761)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)及脂多糖(LPS)损伤后的中脑多巴胺能神经细胞是否具有保护作用.方法 采用胚胎大鼠中脑原代细胞培养法,分离培养中脑神经细胞,培养细胞随机分为空白对照组、MPP+组、MPP++EGB761组、MPP++LPS组、MPP++EGB761+LPS组;给予MPP+、EGB761和LPS进行配组干预,然后观察细胞生长状况;通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)微量比色法检测细胞活性;酪氨酸羟化酶(TH)免疫荧光法(FITC),比较各组阳性神经元的变化,了解多巴胺能神经元的表达情况;同时硝酸还原法检测培养细胞中一氧化氮(NO)的表达情况.结果 空白对照组、MPP++EGB761组:细胞生长旺盛,轴突延长明显;MPP++EGB761+LPS组:细胞生长受抑制,轴突较短MPP+组、MPP++LPS组细胞数量少,仅少数细胞稍有突起,大多数细胞无轴突.MTT法测得细胞吸光度值(A值)、免疫荧光TH阳性细胞表达及培养细胞NO的表达:空白对照组、MPP++EGB761组NO含量与MPP++EGB761+LPS组、MPP+组、MPP++LPS组比较差异有统计学意义(P<0.05).MPP++EGB761+LPS组NO含量与MPP+组、MPP++LPS组比较差异有统计学意义(P<0.05),MPP+组与MPP++LPS组比较差异亦有统计学意义(P<0.05,见表1).结论 LPS可加重MPP+对多巴胺能神经元的损伤作用,小胶质的活化及其释放的NO有可能参与该细胞凋亡过程.EGB761对损伤后的胚胎大鼠中脑原代培养细胞具有保护作用,此作用可能通过抑制小胶质的活化完成.     

银杏达莫治疗突发性耳聋的临床疗效观察

目的对银杏达莫注射液治疗突发性耳聋的疗效进行临床观察。方法将87例(114耳)突发性耳聋患者按就诊顺序分成银杏达莫组即实验组44例(59耳)和对照组43例(55耳)。实验组用含银杏叶提取物和双嘧达莫的银杏达莫注射液治疗,对照组用复方丹参治疗;另外两组同时加用地塞米松、ATP、肌苷和B族维生素等药物及高压氧治疗。两组在治疗前和治疗后4 d开始每3 d用纯音电测听测试患者听力。结果经治疗后,实验组44例(59耳)中痊愈20例(27耳),显效14例(18耳),有效5例(7耳),无效5例(7耳),治愈率为45.3%,有效率为88.4%;对照组43例(55耳)中痊愈8例(12耳),显效8例(13耳),有效14例(15耳),无效9例(15耳),治愈率为20.7%,有效率为72.1%,两组统计学处理差异有显著性(P<0.05)。结论银杏达莫治疗突发性耳聋的临床疗效肯定,按该组剂量未发现有明显副作用。