Micro-CT观察重组人甲状旁腺素在骨折愈合过程中的作用

目的 使用Micro-CT,探讨重组人甲状旁腺激素（rhPTH）在2月龄雄性大鼠骨折愈合过程中的作用。方法 应用2月龄雄性SD大鼠建立单侧闭合性股骨骨折内固定模型,随机分为甲状旁腺素治疗组和对照组,术后分别皮下注射重组人甲状旁腺素（1-34）10 μg/（kg.d）或等剂量生理盐水安慰剂（对照组）,分别于术后第2、7、14、21和42天取双侧股骨标本,分别行X线检查和Micro-CT观察,并进行骨结构的定量分析。结果 术后第21天,甲状旁腺素组骨折断端两侧的骨痂之间连续性良好,骨折线已模糊不清。甲状旁腺组较对照组,在术后第42天骨体积（bone Volume,BV）、骨体积分数（BV/TV）、骨密度（bone mineral density,BMD）和骨小梁模式因子（trabecular bone pattern factor,Tb.Pf）明显高于对照组;而骨小梁分离度（trabecular separation,Tb.Sp）和各向异性的程度（degree of anisotropy,DA）低于对照组。结论 低剂量重组人甲状旁腺激素可提高大鼠骨折BV、BV/TV、Tb.Pf和BMD而降低Tb.Sp和DA,从而促进骨折的愈合。     

重组人甲状旁腺激素(1-34)对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用

目的 观察重组人甲状旁腺激素(1-34)[recombinant human．parathyroid hormone (1-34) rhPTH(1-34)]对卵巢摘除(ovariectomy,OVX)大鼠骨质疏松的治疗作用。方法 选用雌性6月龄SD大鼠100只,80只行双侧卵巢摘除,3个月后诱发骨质疏松模型。rhPTH (1-34)治疗分为5、10、20、40μg／kg剂量组,每组10只,每日皮下注射1次,每周6次。并设OVX 鲑鱼降钙素治疗(15IU／kg,隔日皮下注射1次)和阿伦膦酸钠治疗(10mg／kg,每日灌胃1次)对照组,每组10只。以OVX和手术不摘卵(Sham)组各10只为对照,治疗观察3个月。以骨干重、灰重,骨密度,股骨三点弯曲载荷,腰椎压缩载荷,骨小梁面积、矿化沉积率和血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、钙、磷,尿吡啶啉／肌酐(urinarypy pyridinoline／creatin,Pyd／Cr)等指标观察rhPTH(1-34)的治疗作用。结果 卵巢摘除3个月后血清E2、子宫湿重和骨量、骨生物力学性能较Sham组明显下降,表明OVX大鼠骨质疏松模型建立。rhPTH(1-34)5-40μg／kg剂量治疗组骨量、骨生物力学性能和骨小梁面积、矿化沉积率明显增高,骨病理形态改善,小剂量治疗组血ALP和尿Pyd／Cr值增加。结论,hPTH(1-34)5—40μg／kg每日1次皮下注射对OVX大鼠骨质疏松有明显治疗作用。     

神经轴突导向分子Semaphorin 3A对骨质疏松模型大鼠骨折愈合的影响

目的：探讨神经轴突导向分子Semaphorin 3A（ Sema3A）对骨质疏松模型大鼠骨折愈合的影响。方法对64只双侧卵巢摘除术后12周的大鼠行单侧胫骨水平切开术,然后将大鼠随机分为对照组和Sema3A组,每组32只。骨切开术后于切开区域每周分别局部注射赋形剂或Sema3A（500μg／kg）。骨折后4、8周收集骨折标本,进行X线、iDXA、组织学、micro－CT检测和三点弯曲实验。结果与对照组相比,Sema3A组骨折后4、8周骨密度、百分比骨体积和骨痂生物学强度均明显增加（ P＜0.05）。骨折后8周,两组间骨痂相对体积差异无统计学意义（P＞0.05）,而Sema3A组骨痂平均断面面积较对照组减少（P＜0.05）。组织学图像显示Sema3A组骨折后8周骨痂形成和骨化更好。结论 Sema3A治疗骨质疏松模型大鼠骨折4周后能增加骨痂体积和密度,8周后能诱导骨痂骨化和重塑。     

信号选择性甲状旁腺素模拟肽促进去势雄性小鼠的骨折愈合

目的观察间断皮下注射信号选择性甲状旁腺素（PTH）模拟肽对去势雄性小鼠骨折愈合的影响。方法36只7周龄C57/
BL雄性小鼠去势,1 周后制作股骨中段骨折模型,术后用人重组甲状旁腺素（hPTH（1-34））,信号选择性PTH模拟肽［Gly1,
Arg19］hPTH（1-34）（G1,R19（1-28））和等量溶解剂注射,于术后14 d和28 d处死,双能X线骨密度仪测量骨痂区骨密度以及骨矿
物含量;术侧骨折愈合情况通过X线、显微CT、生物力学和组织学显示。结果术后14 d,G1,R19（1-28）组骨密度显著高于对照组
（P<0.05）。最大力和刚度G1,R19（1-28）低于hPTH（1-34）组。X线和显微CT显示,G1,R19（1-28）组骨痂的改建和重塑优于对照
组,略差于hPTH（1-34）组。结论信号选择性甲状旁腺素模拟肽G1,R19（1-28）促进骨折的愈合,cAMP/PKA通路对促进骨折愈
合具有重要作用。
     

不同剂量转化生长因子β对兔尺骨骨折愈合作用的研究

目的 探讨不同剂量的外源性转化生长因子β(Transporming growth facter-β,TGF-β)对骨折愈合的作用。方法 采用兔尺骨骨折模型，根据每天注射TGF-β剂量，36只成年兔随机分为对照组、1μg、10μg、20μg组；通过力学试验、骨形态测定和骨密度测量法对骨折愈合进行评估。结果 给予TGF—β各组的骨痂面积和最大抗弯强度比对照组均有明显增加，在TGF-β剂量1～10μg/d范围内，随TGF-β剂量增加而增大，而当剂量为20μg/d时，无明显增加。在极限应力、抗弯刚度、极限负荷时能量吸收、骨矿物含量、骨皮质厚度和哈佛氏管直径方面，TGF-β治疗各组与对照组之间无明显差别。结论 局部应用外源性TGF-β可促进骨痂形成，增加抗弯强度，并呈一定剂量依赖关系，从而促进兔骨折愈合。     

降钙素对骨质疏松性骨折骨痂血管内皮生长因子表达的作用

目的：观察降钙素对去卵巢大鼠股骨骨折愈合过程中骨痂组织血管内皮生长因子表达的作用。方法选择3月龄雌性SD大鼠80只,随机分为假手术组（n＝10）、卵巢切除组（n＝10）、对照组（n＝30）和用药组（n＝30）。卵巢切除后4周处死假手术组和卵巢切除组大鼠,测量右股骨骨密度。卵巢切除4周后,对照组和用药组行右股骨中段骨折,分别皮下注射生理盐水和降钙素（16 IU/kg）,隔日1次,于骨折后3、6、9周处死大鼠取右股骨测骨密度,行苏木精-伊红染色（HE染色）,血管内皮生长因子免疫组化染色。结果与假手术组比较,卵巢切除组大鼠体重显著增加（P＜0．05）,股骨骨密度显著降低（P＜0．05）。 HE染色：骨折后3周,两组骨折愈合以软骨内成骨过程为主,骨密度无显著性差异（P＞0．05）;骨折后6周,两组骨小梁排列较有序,用药组股骨骨密度较对照组升高（P＜0．05）;骨折后9周,两组均以骨性骨痂为主,骨小梁排列紧密,骨密度在两组间具有显著性差异（P＜0．05）。对照组与用药组在骨折后3、6、9周骨痂组织的血管内皮生长因子（VEGF）免疫组化染色结果无显著性差异（P＞0．05）。结论降钙素治疗能增加骨质疏松性骨折骨密度,对骨痂组织VEGF的表达无明显影响。     

间歇性低剂量应用重组人甲状旁腺素(1-34)对兔骨折愈合的影响

目的 研究间歇性低剂量应用重组人甲状旁腺素[rhPTH(1-34)]对兔胫骨小范围骨缺损的治疗作用.方法 50只新西兰大白兔于右侧胫骨中段造成3 mm缺损,术后予石膏外固定,随机分成A、B两组.术后第2天,A组按rhPTH 30μg(kg·d)行腹部皮下注射,每周3次,共4周;B组按同样方法注射等量生理盐水.术后1、2、3、4周每组随机抽取兔4只处死取材,摄X线片,骨密度(BMD)、骨矿物含量(BMC)测试,骨形态发生蛋白-2(BMP-2)免疫组化染色并观察并且第4周行HE切片染色观察.结果 A组的骨痂面积、成骨细胞含量同期均高于B组.治疗后2组间和组内比较差异均有显著性,2组BMD和BMC在术后随时间延长而增加,1、2、3、4周时A组BMD和BMC均高于B组(P＜0.05,P＜0.01),A组在1、2、3、4周BMP-2的表达均高于对照组,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01).结论 间歇性低剂量应用rhPTH1-34能够促进成骨细胞分化,加速骨矿物沉积,同时诱导BMP-2表达从而加速骨折的愈合.     

积雪草酸对小鼠骨折愈合的影响研究

目的：探讨高低2种剂量积雪草酸对小鼠骨折愈合的影响。方法：对36只12周龄C57小鼠麻醉后行右侧股骨骨折术。骨折术后实验分为3组,每组12只,分别是：空白对照组,给予生理盐水（0.2 mL）每周2次皮下注射;低剂量积雪草酸组,给予低剂量积雪草酸水溶液（5 μg/g,0.2 mL）每周2次皮下注射;高剂量积雪草酸组,给予高剂量积雪草酸水溶液（15 μg/g,0.2 mL）每周2次皮下注射。术后给药前和给药后8周行右下肢X线摄像。给药后8周进行取材,行微型计算机断层扫描分析、三点弯曲力学测试和脱钙骨组织形态学分析。结果：经过8周治疗后,各组均呈现不同程度愈合。X线影像结果提示,空白对照组和低剂量积雪草酸治疗组骨痂生长不完全,高剂量积雪草酸治疗组骨痂形成较完整,骨小梁密度均匀;微型计算机断层扫描分析定量结果显示,与空白对照组相比,低剂量积雪草酸治疗组骨组织体积百分数和骨密度分别升高13.0%（P=0.264）或7.6%（P=0.215）,而高剂量积雪草酸组骨组织体积百分数和骨密度分别升高28.3%（P=0.020）或15.8%（P=0.009）。股骨生物力学结果提示,与空白对照组相比,积雪草酸治疗有助于提高股骨生物力学性能,低剂量组最大载荷和杨氏模量分别增加26.37%（P=0.025）和10.00%（P=0.183）,高剂量组最大载荷和杨氏模量分别增加42.89%（P=0.007）和25.19%（P=0.035）。形态学结果提示,空白对照组骨折端未完全愈合且矿化不完全,接受高低2种剂量积雪草酸治疗的骨折区矿化完全,高剂量组骨组织修复效果较为理想。结论：高剂量积雪草酸有助于加速小鼠股骨骨折骨化和愈合,并提高其生物力学性能。     

低强度脉冲超声波辐照对泡沫TiC/Ti修复犬节段性骨缺损影响的研究

目的 探讨低强度脉冲超声波辐照对节段性骨缺损修复效果的影响。方法 将直径12mm长20mm泡沫TiC/Ti植入6只Beagle犬的左侧胫骨节段性骨缺损区。随机分为超声组和对照组,超声组采用低强度脉冲超声波辐照（频率1.5MHz、强度30mW/cm2、脉冲宽度200μs、脉冲周期1kHz、20min/次、1次/d）,对照组为不开功率源的假辐照,术后4w、8w后分别行X线检查及骨密度测定,观察及分析材料周围骨愈合情况。结果 6只beagle犬均进入结果分析。术后4w超声组骨早期成熟度优于对照组,表现在材料周围骨痂影密度增高,骨痂影由两端向中央生长;对照组仅见骨痂区密度低,还可见部分骨痂缺如。术后8w超声组新生骨痂面积优于对照组,骨干结构相对稳定;对照组骨缺损区未闭合,在骨干两侧看到少量骨痂,愈合较差。骨密度测定结果显示,4w时超声组高于对照组,两组间存在统计学差异;8w时超声组略高于对照组,但两组间没有统计学差异。结论 通过联合应用低强度脉冲超声波辐照与人工骨材料修复可提高新骨形成速度及骨组织密度,缩短节段性骨缺损的骨愈合时间。     

甲状旁腺激素对去卵巢大鼠骨折愈合的影响

目的探讨局部应用甲状旁腺激素（PTH）对去卵巢大鼠股骨骨折愈合的影响。方法将30只SD大鼠随机分成3组：假手术组＋骨折＋生理盐水组（Sham＋F＋NS）;卵巢切除＋骨折＋生理盐水组（OVX＋F＋NS）;卵巢切除＋骨折＋甲状旁腺激素组（OVX＋F＋PTH）,每组10只。实验组切除双侧卵巢,术后4周选取股骨中段制备开放性骨折模型,髓内钉固定,于骨折部位给予PTH（20μg/kg）,3次/周,间断骨折局部皮下注射4周后,处死动物并收集样本,采用X线摄片、骨密度检测、组织形态学及免疫组织化学方法评估骨折愈合情况。结果给予PTH干预后,骨痂骨量较OVX＋F＋NS明组显升高（P〈0.05）;X线观察显示OVX＋F＋PTH组得分明显高于OVX＋F＋NS组（P〈0.05）;HE染色可见OVX＋F＋PTH组骨小梁数量增多,板层骨排列整齐有序;同时,OVX＋F＋PTH组骨形态发生蛋白-2（BMP-2）免疫组化表达明显升高（P〈0.05）。结论 PTH能够刺激成骨细胞活性,有效改善骨质疏松性骨折大鼠骨痂愈合质量。