IgA肾病患者血清aIgA1对系膜细胞增殖的影响

目的观察IgA肾病（IgAN）患者与正常人的血清热聚合IgA1（aIgA1）对系膜细胞（MC）增殖的影响。方法收集原发性IgAN患者及健康人的血清标本,利用Jacalin-agarose亲和层析联合Sephacryl S-200HR分子筛层析法分离获得血清单体IgA1（mIgA1）,将mIgA1热聚合为aIgA1。利用患者及正常人的aIgA1分别刺激小鼠MSC-1097系膜细胞株,利用MTT法检测aIgA1对系膜细胞增殖的影响。结果aIgA1刺激48h组的吸光度是24h组的1.59倍（P=0.000）。不同浓度aIgA1刺激组间MTT吸光度的差异有统计学意义（P=0.000）,相比于阴性对照组（SFM）,0.25mg/mL组、0.5mg/mL组、1mg/mL组的吸光度分别为SFM的1.67、1.74、1.77倍（P=0.000）;2mg/mL组的吸光度是SFM的1.15倍（P=0.086）。在刺激24h时患者0.25mg/mL组的aIgA1就可促进系膜细胞增殖了,其吸光度是SFM的1.34倍（P〈0.05）,而正常对照组则要在浓度达到1mg/mL时才引起系膜细胞增殖,其吸光度为SFM的1.33倍（P〈0.05）。结论研究结果提示患者及正常人的aIgA1均可促进系膜细胞增殖,这种增殖表现为时间依赖性及一定的剂量依赖性,在高浓度时aIgA1促系膜细胞增殖的作用消失了;患者的aIgA1可能更易与系膜细胞结合,刺激相同时间时患者低浓度aIgA1既可引起MC增殖。     

IgA肾病患者血清aIgA1对足细胞及系膜细胞增殖的影响

目的观察IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者与正常人的血清热聚合IgA1(aggregated IgA1,aIgA1)对足细胞及系膜细胞增殖的影响。方法利用层析法获得IgAN患者与健康人的血清单体IgA1(monom eric IgA1,m IgA1),将m IgA1热聚合为aIgA1,分别刺激小鼠MPC5足细胞及MSC-1097系膜细胞株,利用MTT法检测细胞增殖。结果①不同浓度aIgA1刺激组间足细胞MTT吸光度差异有统计学意义。相比于阴性对照组(SFM),1 mg/m l、2 mg/m l组吸光度分别为0.456(P=0.033)、1.663(P=0.010)。②不同浓度aIgA1刺激组间系膜细胞MTT吸光度差异有统计学意义。相比于阴性对照组(SFM),0.25 mg/m l、0.5 mg/m l、1 mg/m l组吸光度分别为1.667,1.736,1.772(P=0.000),2 mg/m l组吸光度为1.148(P=0.086)。结论足细胞可能会直接对IgA1产生反应;aIgA1可以影响足细胞及系膜细胞增殖,且对两种细胞增殖的影响存在不同。     

IgA肾病患者血清algAl对足细胞及系膜细胞增殖的影响

目的观察IgA肾病（IgA nephropathy,IgAN）患者与正常人的血清热聚合IgA1（aggregated IgA1,aIgA1）对足细胞及系膜细胞增殖的影响。方法利用层析法获得IgAN患者与健康人的血清单体IgA1（monom eric IgA1,m IgA1）,将m IgA1热聚合为aIgA1,分别刺激小鼠MPC5足细胞及MSC-1097系膜细胞株,利用MTT法检测细胞增殖。结果①不同浓度aIgA1刺激组间足细胞MTT吸光度差异有统计学意义。相比于阴性对照组（SFM）,1 mg/m l、2 mg/m l组吸光度分别为0.456（P=0.033）、1.663（P=0.010）。②不同浓度aIgA1刺激组间系膜细胞MTT吸光度差异有统计学意义。相比于阴性对照组（SFM）,0.25 mg/m l、0.5 mg/m l、1 mg/m l组吸光度分别为1.667,1.736,1.772（P=0.000）,2 mg/m l组吸光度为1.148（P=0.086）。结论足细胞可能会直接对IgA1产生反应;aIgA1可以影响足细胞及系膜细胞增殖,且对两种细胞增殖的影响存在不同     

滋肾化瘀泻浊方对实验性IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞的影响

探讨滋肾化瘀泻浊方对IgA肾病 (IgAN)肾小球系膜细胞 (MC)增殖的影响。方法　以牛血清白蛋白 (BSA)的葡萄球菌肠毒素B (SEB)诱导制作大白鼠IgAN模型 ,采用血清药理学方法 ,提取各组大鼠的血清作用于体外培养的MC体系 ,观察其对MC增殖情况的水平。结果　滋肾化瘀泻浊方具有抑制MC增殖的作用 ,与正常组和模型组比较有显著性差异 (P <0 0 1 )。结论　滋肾化瘀泻浊方对MC增殖有明显抑制作用 ,这可能是该方防止IgAN的机制之一。     

肾小球内IgA沉积量对IgA肾病患者系膜病变的影响研究

目的探讨肾小球内IgA沉积量与IgA肾病（IgAN）系膜病变的关系。方法将70例原发性IgAN患者根据系膜细胞增生情况分为无系膜细胞增生（M0）组和有系膜细胞增生（M1）组各35例,两组患者的肾活检组织切片行免疫组织化学IgA染色,采用图像分析软件定量分析肾小球内IgA沉积物面积（Area）、平均光密度（Densitymean）、累计光密度（IOD）和IgA沉积面积占肾小球面积比值（PerArea）,并比较两组患者的临床参数。结果两组患者性别、年龄、血肌酐、估算的肾小球滤过率、血尿酸、血IgA、血C3、血C4水平及低eGFR、高尿酸血症、高血IgA、低血C3、低血C4、伴有肾小球内皮细胞增生和节段性硬化的发生率比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与M0组相比,M1组患者24h尿蛋白定量较高而血白蛋白水平较低,低白蛋白血症和伴有肾小管间质病变的发生率较高（均P＜0.05）。M1组患者IgA沉积物Area、Densitymean、PerArea和IOD均高于M0组（均P＜0.05）。结论IgAN患者系膜病变的严重程度可能受肾小球内IgA沉积量的影响。     

IgA肾病患者血清IgA1活化细胞外信号调节激酶并诱发肾小球系膜细胞增殖的作用

目的探讨IgA肾病(IgAN)患者血清IgA1对体外培养的正常人肾小球系膜细胞(HMC)细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化及细胞增殖的刺激作用,并比较其与正常人血清IgA1作用力的异同.方法亲和层析提取正常人及患者血清IgA1,加热聚合(aIgA1),原代培养正常人HMC,Western 杂交测定ERK 蛋白磷酸化,DNA荧光标记技术结合流式细胞仪观察HMC细胞周期变化,直接计数检测HMC增殖.结果 (1)患者及正常人aIgA1均呈时间依赖性诱发HMC ERK信号蛋白磷酸化、DNA 合成和细胞增殖,二者作用趋势相似,作用高峰时间分别为孵育15 min、24～36 h和48～72 h;(2)患者aIgA1刺激强度显著高于正常人aIgA1,在作用高峰时间,患者组和正常人组磷酸化ERK/总ERK 的比值分别为49.5%±10.1%和30.7%±4.4%,S-G2-M期细胞数所占的比例分别为(33.0%±0.3%和30.7%±0.7%,HMC计数分别为(57.78±2.45)×104/ml和(50±1.51)×104/ml,差异均有显著意义(P<0.05);(3)阻断ERK通路只能部分抑制患者aIgA1对HMC增殖的诱导作用. 结论 IgAN患者血清IgA1可以诱导正常人HMC ERK信号蛋白磷酸化并刺激细胞增殖,其作用强于正常人血清IgA1.     

IgA肾病患者血清对系膜细胞的作用

利用系膜细胞培养技术,我们观察了IgA肾病(IgAN)患者血清对系膜细胞的影响,同时探讨了系膜细胞增殖与IgAN病理改变的关系。材料及方法:①经肾活检诊断IgAN患者,男性24例,女性14例,平均年龄28岁(16～52岁),肾功能均正常,均未用免疫抑制剂治疗。健康志愿者男性12例,女性7例,平均年龄31岁(18～45岁)。②人胎肾系膜细胞培养,取新鲜人胎肾皮质经80目,     

昆仙胶囊对IgA肾病大鼠的肾保护作用及系膜细胞增殖的影响

目的本实验通过建立IgA肾病大鼠模型及大鼠肾小球系膜细胞体外实验,进行药物干预,探讨昆仙胶囊的肾保护作用和对系膜细胞增殖的影响。方法 48只雌性SD大鼠随机均分为正常组、IgAN模型组、缬沙坦组、昆仙胶囊组,每组12只,造模第5周开始灌胃给药,分别于第10周、16周每组每次随机挑选6只大鼠,检测24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮,观察大鼠肾脏IgA免疫荧光和病理学改变。同时,选择IgA1刺激大鼠系膜细胞,将系膜细胞分为正常组、模型组、缬沙坦高低剂量组和昆仙胶囊高中低剂量组,CCK8检测药物干预后细胞增殖及抑制情况。结果第10周、16周昆仙胶囊组IgAN大鼠24 h尿蛋白定量、肾功能指标较模型组有显著性差异(P0.05),与缬沙坦组比较无明显统计学差异(P0.05)。同时肾组织病理均提示昆仙胶囊组病变程度较模型组轻。细胞实验提示经IgA1刺激后可引起系膜细胞增殖,药物干预后昆仙胶囊能够明显抑制IgA1诱导的大鼠系膜细胞增殖。结论本实验说明昆仙胶囊能减少IgAN大鼠尿蛋白,延缓肾功能进展,减缓肾组织病理改变,其机制可能是通过抑制系膜细胞增殖而达到的。     

三七总皂苷在抗肾纤维化细胞模型中剂量的研究

目的 研究三七总皂苷(PNS)在抗肾纤维化细胞模型中剂量选择.方法 原代培养大鼠肾小球系膜细胞(MC)作为细胞模型,用含有或者不含有胎牛血清的各浓度(0.05,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.6,3.2 mg/mL)三七总皂苷细胞培养刺激大鼠MC,MTT比色法观察其对细胞的增殖及毒性作用.结果 PNS浓度在0.1～0.6 mg/mL抑制大鼠MC细胞增殖(P<0.05),但对大鼠MC不具有细胞毒性作用(P>0.05),而PNS浓度≥0.8 mg/mL时具有细胞毒性作用(P<0.05),<0.1 mg/mL时对MC没有抑制增殖的作用.PNS浓度在0.1～3.2 mg/mL与大鼠MC增殖呈负相关(r=-0.838,P<0.01).结论 浓度0.1～0.6 mg/mL是PNS在抗肾纤维化细胞模型中理想剂量范围;在该范围内PNS抑制MC增殖的作用不是通过细胞毒性实现的.     

人系膜细胞IgA_1受体及IgA_1分子铰链区糖基化改变的研究进展

IgA肾病是最常见的肾小球疾病 ,发病率占原发性肾小球肾炎的 2 5 %～ 33%。既往认为本病预后良好 ,但 10～ 2 0年长期随访证实 ,其中约 1/ 3的患者最终发展为终末期肾衰竭[1] 。IgA肾病的病理特点是肾小球系膜细胞 (MC)增殖及系膜区基质增加 ,并在系膜区和 (或 )肾小球毛细血管