angiopep-2修饰的脑靶向制剂研究进展

脑部疾病化学药物治疗的关键是穿透血脑屏障(BBB).受体介导的胞吞转运是目前递送药物入脑应用广泛且较成熟的策略.在BBB和脑胶质瘤细胞上低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)高表达,angiopep-2(ANG)可与LRP-1特异性结合实现脑靶向性,对脑肿瘤具有双级靶向效应,且靶向效率高于乳铁蛋白和转铁蛋白等靶向分子.本文介绍了ANG的结构与功能,及其在脑靶向制剂中的应用,为脑靶向制剂的研发提供依据,为脑部疾病的治疗提供参考.     

胶质瘤化疗现状与展望

神经胶质瘤是中枢神经系统最常见原发性肿瘤,占颅内肿瘤的40%以上. 在15 岁以下儿童和15~34岁成年人群的癌症死亡患者中,脑胶质瘤是第二大原因. 脑胶质瘤,特别是高级别胶质瘤( WHO分类Ⅲ~Ⅳ级肿瘤,也称恶性胶质瘤)发病多在青壮年,治疗困难,预后差. 目前,恶性胶质瘤的治疗方法 是以手术为主,辅以放疗以及药物化疗在内的综合治疗. 虽然与手术、放疗相比,化疗属于相对比较新兴的学科,只有短短六十余年的历史.并且,由于过去缺乏有效的化疗药物以及存在血脑屏障的限制,化疗在脑胶质瘤治疗中的地位和作用并未引起足够的重视.     

纳米载药系统靶向治疗脑胶质瘤的策略

脑胶质瘤是一类恶性程度非常高的肿瘤,常规治疗仅对患者肿瘤进展和总生存期略有改善,急需寻找新的治疗方法.近年来随着纳米技术的不断发展,纳米载体促使药物跨越血脑屏障和脑内转运成为可能,结合迅速发展的靶向治疗策略,通过纳米载药系统靶向脑胶质瘤上的具体靶点,可提高治疗药物的抗胶质瘤效果.本文主要综述几种纳米载体策略在靶向治疗脑胶质瘤中的研究进展.     

人脑胶质瘤血瘤屏障与侵袭特征及其相关机制的系列研究

脑胶质瘤是最常见的原发性脑肿瘤,占全部颅内肿瘤的35%～60%。由于恶性胶质瘤的侵袭性生长,加之脑组织固有的血脑屏障(肿瘤中亦称之为血瘤屏障)的存在,尽管临床上采用手术、放疗、化疗等综合治疗方法,但治疗后仍易复发。生存率低、预后差(一般是6～8个月),故脑胶质瘤是人类疗效最差的肿瘤之一。深入了解脑胶质瘤的侵袭特征和血脑屏障/血瘤屏障的变化规律对提高其临床疗效具有举足轻重的作用。但是目前国内外对其的侵袭特征和血脑屏障     

紧密连接蛋白Claudins及其在脑胶质瘤中作用的研究进展

紧密连接蛋白Claudins是构成血脑屏障的主要成分,血脑屏障中紧密连接蛋白Claudins表达的改变与肿瘤的侵袭性以及恶性程度有关。但是,对于Claudins家族不同成员结构和功能的特异性、表达的调节机制、成员间相互作用的关系还未完全明了,有关Clauidns在脑胶质瘤的发生发展过程中的具体作用也不甚清楚。现就Claudins在脑胶质瘤的研究进展予以综述。     

TRAIL受体在脑胶质瘤中的表达

目的：研究TRAIL受体（TRAILR）在脑胶质瘤中的表达情况。方法：应用RT－PCR方法对43例脑胶质瘤及6例正常脑组织的TRAILR1－R4的mRNA表达进行检测。结果：43例脑胶质瘤中35例表达TRAILR1，41例表达TRAILR2，37例表达TRAILR3，其中有32例同时表达TRAILR1－R3，未检测到TRAILR4的表达。结论：脑胶质瘤中TRAILR1－R3普遍表达，“诱骗”受体模式可能受其它因素的影响与调控，TRAILR4在脑胶质瘤的细胞凋亡调控中可能不起重要作用。     

脑胶质瘤细胞中TRAIL受体的表达

目的:研究TRAIL受体（TRAIL-R）在脑胶质瘤细胞中的表达。方法:应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法对43例脑胶质瘤组织标本、6例正常脑组织及U251胶质瘤细胞株的TRAIL-RI-R4的mRNA表达进行检测。结果:43例脑胶质瘤中有32例同时表达TRAIL-R1-B3（74.4％）,未检测到TRAIL-R4的表达;U251细胞株中仅检测到TRAIL-R2、TRAIL-R3的表达。结论:脑胶质瘤细胞中TRAIL-R1～R3普遍表达,“诱骗”受体模式可能受其它因素的影响与调控,TRAIL-R4在脑胶质瘤的细胞凋亡调控中可能不起重要作用。     

人脑胶质瘤血瘤屏障与侵袭特征及其相关机制的系列研究

脑胶质瘤是最常见的原发性脑肿瘤，占全部颅内肿瘤的35％～60％。由于恶性胶质瘤的侵袭性生长，加之脑组织固有的血脑屏障（肿瘤中亦称之为血瘤屏障）的存在，尽管临床上采用手术、放疗、化疗等综合治疗方法，但治疗后仍易复发。生存率低、预后差（一般是6～8个月），故脑胶质瘤是人类疗效最差的肿瘤之一。深入了解脑胶质瘤的侵袭特征和血脑屏障／血瘤屏障的变化规律对提高其临床疗效具有举足轻重的作用。但是目前国内外对其的侵袭特征和血脑屏障/血瘤屏障的变化规律缺乏深入的了解。     

SF/HGF受体c-Met在人脑胶质瘤中的表达与肿瘤恶性表型及预后的关系

目的研究扩散因子(SF/HGF)的受体c-Met在胶质瘤中的表达及其与临床表现的关系,从蛋白、基因水平进一步揭示胶质瘤的生物学行为.方法应用免疫组化方法检测60例星形胶质细胞瘤中c-Met受体的表达情况,结合临床随访资料,用统计学方法分析其表达与临床因素的相关性及意义.结果 c-Met在正常脑组织及Ⅰ级星形胶质细胞瘤中无明显表达,随着胶质瘤恶性程度的增高其表达增强,其表达水平与胶质瘤恶性程度呈正相关;c-Met表达水平与胶质瘤患者预后呈负相关.结论在人脑胶质瘤中存在c-Met的表达,其恶性表型及侵袭特性与c-Met的表达水平密切相关,此表达水平随着胶质瘤恶性程度的增高而上调.c-Met的表达水平与胶质瘤患者预后之间存在负相关关系,是胶质细胞瘤患者预后的一个独立预测因素.     

水通道蛋白1和肿瘤坏死因子受体相关蛋白1在人脑胶质瘤中的表达及相关性*

目的 研究水通道蛋白1（AQP1）和肿瘤坏死因子受体相关蛋白1（TRAP1）在脑胶质瘤中的表达及其之间的相关性。方法 选取66例人脑胶质瘤和15例正常脑组织标本,经Western blotting及逆转录聚合酶反应（RT-PCR）对其AQP1、TRAP1 mRNA及蛋白表达进行检测分析。结果 ①在人脑胶质瘤中AQP1、TRAP1 mRNA及蛋白表达水平较对照组上调（P?<0.05）;②在高级别胶质瘤（Ⅲ、Ⅳ级）中AQP1、TRAP1 mRNA及蛋白表达与低级别胶质瘤（Ⅰ、Ⅱ级）比较,前者表达水平上调（P?<0.05）;③AQP1、TRAP1 mRNA及蛋白在脑胶质瘤的表达无相关性（rs?=0.074和0.058,P?=0.065和0.080）。结论 AQP1和TRAP1表达与脑胶质瘤的肿瘤分期有关,恶性程度越高其表达量也越高,但两者与脑胶质瘤的病理进展无协同性。     

可逆性开放血脑屏障在脑胶质瘤动脉化疗中的应用

目的：探讨可逆性开放血脑屏障在动脉介入治疗脑胶质瘤中的应用价值。方法：在SD大鼠脑尾状核头部种植C6大鼠胶质瘤细胞后,在加或不加20％甘露醇（5ml)的情况下,对荷瘤大鼠进行动脉介入化疗,并与静脉化疗对比,化疗药物为替尼泊苷（VM－26）和甲氨蝶呤（MTX）。使用超导磁共振成像系统检查肿瘤种植后14d及化疗后20d的肿瘤大小,以判断疗效。结果：VM－26动脉化疗组在使用和不使用甘露醇之间无显性差异。MTX动脉化疗组在使用和不使用甘露醇之间疗效有显性差异（P＜0．05）。VM－26与MTX的甘露醇动脉化疗组之间疗效无显性差异。单纯VM－26动脉化疗组疗效明显优于静脉化疗组。结论：甘露醇对脂溶性化疗物疗物疗效的影响不大;但大用于溶性化疗物药进行化疗前,应用开放血脑屏障的技术有利于增其疗效。     

IDH1、ERCC1和MGMT在脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的研究IDH1、ERCC1和MGMT在脑胶质瘤组织中的表达及其相关性。方法运用免疫组织化学法观察84例胶质瘤IDH1、ERCC1和MGMT的表达。结果 IDH1和ERCC1在胶质瘤细胞中表达随病理级别增加而升高,差异有统计学意义,IDH1在胶质瘤样本中的表达分别与ERCC1和MGMT有相关性,而ERCC1和MGMT之间无相关性。结论IDH1、ERCC1的检测可判断胶质瘤恶性程度,并可以将其作为判断预后的重要指标,检测ERCC1和MGMT可针对性选用化疗药物,对制定个性化化疗方案有重要参考价值。     

Angiopep-2与转铁蛋白共修饰脂质体跨血脑屏障的研究

【摘要】目的：构建angiopep-2与转铁蛋白共修饰脂质体,并对其理化性质和跨血脑屏障能力进行评价。方法 采用薄膜分散法制备转铁蛋白（TF）与angiopep-2共修饰载脂质体（ANG/TF-LPs）,考察其粒径,电位,血清稳定性等理化特征。通过定量细胞摄取实验考察脑内皮bEnd.3细胞对ANG/TF-LPs的摄取效率。构建血脑屏障体外模型,考察不同脂质体的跨血脑屏障能力。结果 所制备的ANG/TF-LPs粒径为93±13.5 nm, Zeta 电位为7.55±1.85 mV。在24 h内具有良好的血清稳定性。体外细胞摄取实验表明,bEnd.3细胞对ANG/TF-LPs的摄取效率分别是TF-LPs、ANG-LPs和LPs的2.9倍、2.4倍和4.8倍,差异具有统计学意义（P<0.01）;ANG/TF-LPs的跨血脑屏障效率分别是TF-LPs、ANG-LPs和LPs的3.1倍、2.9倍和6.8倍,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论 ANG/TF-LPs制备工艺简单,经过angiopep-2与转铁蛋白修饰后,脂质体的跨血脑屏障能力显著增强,是一种潜在高效的脑部靶向给药系统。     

Effects of photodynamic therapy on the ultrastructure of glioma cells

To study the change in ultrastructure of C6 glioma cells after photodynamic therapy （PDT）, to compare morphological differences in necrosis and apoptosis before and after PDT treatment, and to evaluate the effect of photodynamic therapy on the blood brain tumor barrier （BTB） of C6 glioma. Methods The model was produced by transplanting C6 glioma cells cultured in vitro using Peterson method into the caudate nuclei of Wister rats. The experiment group received PDT for two weeks after the operation. The sub-cellular structure, blood-brain-barrier （BBB） and BTB in both groups were observed under electron microscope. Results Apoptosis in different phases and necrosis could be observed in some C6 glioma cells. Swelling occurred on the ultrastructure of cellular organs such as mitochondria and endoplasmic reticulum in most of the cells. Damage to the BTB, reduction of the number of cellular organs in endothelial cells of the capillary blood vessels, stretch of the tight junction, and enlargement of the gaps between endothelial cells were also seen in the experiment group. Meanwhile, limited impact on the normal sub-ceUular structures and BBB was observed. Conclusion PDT could induce apoptosis and necrosis of C6 glioma cells due to the damage to the ultrastructure of mitochondria and endoplasmic reticulum. The weakened function of C6 glioma BTB initiated by PDT makes it possible to perform a combined therapy of PDT and chemotherapy for glioma.     

Effects of Photodynamic Therapy on the Ultrastructure of Glioma Cells

Objective To study the change in ultrastructure of C6 glioma cells after photodynamic therapy(PDT),to compare morphological differences in necrosis and apoptosis before and after PDT treatment,and to evaluate the effect of photodynamic therapy on the blood brain tumor barrier(BTB)of C6 glioma.Methods The model was produced by transplanting C6 glioma cells cultured in vitro using Peterson method into the caudate nuclei of Wister rats.The experiment group received PDT for two weeks after the operation.The sub-cellular structure,blood-brain-barrier(BBB)and BTB in both groups were observed under electron microscope.Results Apoptosis in different phases and necrosis could be observed in some C6 glioma cells.Swelling occurred on the ultrastructure of cellular organs such as mitochondria and endoplasmic reticulum in most of the cells.Damage to the BTB,reduction of the number of cellular organs in endothelial cells of the capillary blood vessels,stretch of the tight junction,and enlargement of the gaps between endothelial cells were also seen in the experiment group.Meanwhile,limited impact on the normal sub-cellular structures and BBB was observed.Conclusion PDT could induce apoptosis and necrosis of C6 glioma cells due to the damage to the ultrastructure of mitochondria and endoplasmic reticulum.The weakened function of C6 glioma BTB initiated by PDT makes it possible to perform a combined therapy of PDT and chemotherapy for glioma.     

Correlation of MR imaging and histopathology after partial resection of normal rabbit brain

方法：探讨正常脑组织部分切除术后早期的MR影像特点和病理学基础。方法：选取36只健康新西兰大白兔,3％戊巴比妥耳缘静脉注射麻醉,无菌状态下切除右顶枕部分脑组织,分为10组,分别在术后1-10天行MR检查,随后立即取材,电镜及普通光镜下观察组织病理改变。结果：（1）术后24小时术区边缘出现正常脑组织的反应性增强;（2）术后一直到5天反应性强化程度逐渐加重,5天之后变化不明显;（3）术后3天之内反应性增强为血脑屏障的破坏所致,3天之后新生小血管和破坏的血脑障碍共同起作用,主要机制是新生血管数量的增加。结论：正常脑组织在术后早期反应性强化特点表现出明显的时间过程,在不同时间,血脑屏障的破坏和新生血管的数量对反应性增强所起的作用是不同的。     

Opening blood-brain-barrier by intracarotid infusion of papaverine in treatment of malignant cerebral glioma

Ｔｏｆｉｎｄａｎｅｆｅｃｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｒｅａｔｉｎｇｍａｌｉｇｎａｎｔｃｅｒｅｂｒａｌｇｌｉｏｍａ,ｗｅｕｓｅｄｐａｐａｖｅｒｉｎｅｔｏｏｐｅｎｔｈｅｂｌｏｏｄｂｒａｉｎｂａｒｒｉｅｒ（ＢＢＢ）ｔｈｒｏｕｇｈｉｎｔｒａｃａｒｏｔ...