CDK9与肾透明细胞癌临床病理特征及肿瘤侵袭的关系

目的探讨肾透明细胞癌组织CDK9的表达水平,分析其与肾透明细胞癌临床特征的关系,研究CDK9对肾细胞癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法选取2013年1月至2016年12月在河南科技大学第一附属医院接受手术切除治疗的肾透明细胞癌患者组织标本102例和癌旁组织标本30例作为研究对象,应用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测CDK9的表达水平,收集102例患者性别、年龄、病理分级等临床病理资料,并分析其与CDK9表达的关系。体外应用肾细胞癌细胞(ACHN、786-O和OSRC-2)研究CDK9对肾细胞癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果与癌旁组织比较,CDK9 mRNA和蛋白在肾透明细胞癌组织中表达显著上调(P<0.01)。CDK9 mRNA表达水平以中位数为界分为低表达组和高表达组,两组患者的病理T分期、TNM分期和远隔转移比较,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤细胞系中CDK9表达显著高于人正常肾小管上皮细胞HK-2,其中786-O及ACHN细胞中CDK9表达显著升高(P均<0.01)。体外沉默CDK9显著抑制786-O及ACHN的细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.01)。结论 CDK9表达与肾透明细胞癌的恶性特征、癌细胞增殖、迁移和侵袭能力密切相关,有望成为肾透明细胞癌的潜在治疗靶点。     

携载G250单克隆抗体的纳米微泡靶向于肾细胞癌的体内外实验研究

目的 本研究拟制备携载G250单克隆抗体的纳米微泡,在体内和体外研究其对肾细胞癌的靶向性.方法 机械振荡法制备空白脂质纳米微泡并观察其稳定性,生物素-亲和素连接技术将纳米微泡与G250单克隆抗体相连,采用免疫荧光进行验证.细胞免疫荧光实验鉴定所使用的两种肾细胞癌细胞(786-O和ACHN细胞)中G250的表达情况,靶向结合实验鉴别靶向纳米微泡对786-O和ACHN两种肾细胞癌细胞的体外寻靶能力.在肾细胞癌的裸鼠皮下移植瘤模型中,使用纳米微泡进行超声造影,并将采集到的动态图像在定量分析软件Qlab 8.1中进行数据分析.结果 成功制备了平均粒径为404.9 nm空白纳米微泡和平均粒径为611.4 nm靶向纳米微泡,稳定性能好,同时免疫荧光证实了靶向纳米微泡构建成功,能够与FITC标记的二抗结合,从而显示出绿色荧光;细胞免疫荧光证实G250抗原在786-O细胞中呈膜表达,而ACHN细胞中不表达.在细胞结合实验中发现靶向纳米微泡能够特异性的结合786-O细胞,但不能结合于ACHN细胞.体内超声造影显像从平均值和最大值分析,靶向纳米微泡和空白微泡在786-O肾细胞癌细胞的裸鼠模型的显影效果存在显著差异[平均值:(11.74±0.52) vs (16.34±0.40),P=0.001;最大值:(13.07±0.94) vs (18.09±0.82),P=0.003].结论 G250靶向的纳米微泡可在体外能够特异性的结合G250表达阳性的肾细胞癌细胞,在动物体内能够明显的增强移植瘤的超声显影效果.     

SOX7在肾细胞癌中的表达及其对肾癌细胞生物学行为的影响

目的:研究Y性别决定基因7(sex determining region Y-box7,SOX7)在肾细胞癌的表达以及对肾癌细胞生物学行为的影响.方法:qRT-PCR和甲基化特异性PCR(MSP)检测SOX7在肾细胞癌组织和肾癌细胞(A498、ACHN、786-O)中的mRNA表达及甲基化状态;免疫组织化学法(immu...     

Survivin在肾癌组织和肾癌细胞系中的表达及意义

目的探讨存活蛋白(Survivin)在肾癌和肾癌细胞系中的表达情况及其与肾癌发生发展的关系。方法应用免疫组化方法检测66例肾癌患者和20例正常肾组织中Survivin的表达情况,应用Western blot和RT-PCR检测10例肾癌组织,正常肾组织及两种肾癌细胞系786-0和ACHN中Survivin的表达情况。结果肾癌组织和正常肾组织吸光度分别为0.031±0.002和0.875±0.124,差异具有显著性意义(P<0.01)。透明细胞癌,嗜色细胞癌和嫌色细胞癌吸光度值分别为0.873±0.091,0.904±0.103和0.813±0.126,各类型间差异无显著性意义。临床分期Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ、Ⅳ吸光度值分别为0.864±0.121,0.884±0.093和0.853±0.106,各期间比较差异无显著性意义。肾癌组织G1,G2,G3和G4吸光度值分别为0.693±0.092,0.762±0113,0.876±0.106和0.903±0.092,各级间比较,差异具有显著性意义(P<0.05)。Western blot和RT-PCR检测结果显示,正常肾组织表达阴性,肾癌组织和两种肾癌细胞系786-0和ACHN均有不同程度的Survivin蛋白和mRNA表达,统计学表明差异有显著性意义。结论Survivin和肾癌的分期,分型无关,和肾癌的分级有关,可以作为判断预后的标志物。     

BTG1在肾透明细胞癌组织中的表达及对786-O细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在肾透明细胞癌组织中的表达及对肾透明细胞癌细胞株786-O增殖和凋亡的影响.方法:采用免疫组化法检测20例肾透明细胞癌及其癌旁组织中BTG1蛋白的表达.构建BTG1表达质粒及合成BTG1的干扰RNA分别转染786-O细胞,通过MTT法实验观察BTG1对786-O细胞体外增殖的影响,...     

乳酸脱氢酶A在肾细胞癌中的表达及意义

【目的】分析乳酸脱氢酶A(LDHA)在肾细胞癌组织及细胞系中的表达情况并探讨其影响肾细胞癌细胞进展的方式。【方法】收集自2018年6月至2022年6月在我院通过手术方式获取的肾细胞癌组织标本52例及癌旁组织标本49例,免疫组织化学法比较LDHA的表达差异。通过qRT-PCR及Western blot实验检测LDHA在正常人近端肾小管上皮细胞系（HK-2）及肾细胞癌细胞系（A498, Caki-2, ACHN, 786-O）中的表达水平。构建LDHAshRNA重组质粒,转染至786-O以敲低LDHA表达,利用CCK-8、克隆形成实验及EdU染色法检测敲低LDHA表达对癌细胞增殖活性的影响。利用细胞葡萄糖摄取试验及乳酸分泌试验检测细胞糖摄取水平和乳酸分泌水平的变化。利用糖酵解压力测试实验检测细胞糖酵解能力的变化。【结果】免疫组化结果可见LDHA在肾细胞癌组织中表达明显高于癌旁组织,并且临床TNM分期越高的肾癌组织,LDHA的表达水平越高（P<0.05）。qRT-PCR和Western blot结果可见,LDHA在各肾细胞癌细胞系中的表达均较HK-2有明显升高（P<0.05）。在...     

BTG1在HK-2和786-O细胞株中的表达及其对细胞周期和细胞凋亡的影响

目的：探讨B细胞易位基因1（ BTG1）在人肾小管上皮细胞株（ HK-2）和肾透明细胞腺癌细胞株（786-O）中的表达及BTG1基因对HK-2和786-O细胞周期、细胞凋亡的影响。方法：采用Western blotting方法检测BTG1蛋白在HK-2、786-O细胞株中的表达,构建BTG1表达质粒转染786-O细胞,合成BTG1干扰RNA转染HK-2细胞,通过流式细胞仪（ FACS）观察BTG1对HK-2、786-O细胞周期和细胞凋亡的影响。结果：Western blotting检测显示,BTG1蛋白在HK-2中的表达高于786-O。786-O中高表达BTG1蛋白能够促进其凋亡,增加其G0/G1期比率;HK-2中低表达BTG1蛋白能够抑制其凋亡,减少其G0/G1期比率。结论：BTG1可能通过对细胞凋亡及细胞周期的调控抑制肾细胞癌的生长。     

NPTX2基因在透明细胞性肾细胞癌中的表达及其临床意义

目的检测并分析神经元正五聚体蛋白2(neuronal pentraxin 2,NPTX2)基因在透明细胞性肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达情况及其临床意义。方法运用q PCR、western blot或免疫组织化学法分别从mRNA水平和蛋白质水平上对ccRCC细胞系和组织中NPTX2基因的表达情况进行检测。对体外培养细胞系(人肾小管正常上皮细胞系HK-2、人肾透明细胞癌原发灶细胞系786-O和胸水转移灶细胞系ACHN):采用q PCR和western blot法检测NPTX2在细胞系中的mRNA及蛋白的表达情况,并分析其在正常与癌细胞系中的表达差异。对组织标本:(1)c DNA芯片(15例ccRCC癌及对应癌旁正常组织):采用q PCR法检测并分析NPTX2 mRNA在两者中的表达情况及差异;(2)新鲜组织(4例ccRCC癌及对应癌旁正常组织):采用western blot法检测并分析NPTX2蛋白在两者中的表达情况及差异;(3)组织蜡块(70例ccRCC癌及对应癌旁正常组织):采用免疫组化En Vision法进一步验证NPTX2蛋白在两者中的表达情况及差异,并分析NPTX2蛋白表达与ccRCC患者的重要临床参数及预后之间的关系。结果在ccRCC细胞系及癌组织中,NPTX2的mRNA水平和蛋白质水平均明显高于正常细胞系及癌旁正常组织,其差异有统计学意义(P<0. 05)。NPTX2蛋白表达水平与ccRCC肿瘤WHO/ISUP病理分级相关(P<0. 05),与患者的性别、年龄、TNM分期和肿瘤大小尚不能认为相关(P>0. 05)。Kaplan-Meier单因素分析及log-rank检验显示NPTX2蛋白表达水平高低与患者的生存相关(P=0. 04):高表达组患者同期生存率低于低表达组,预后较差。结论 NPTX2在ccRCC癌组织中异常高表达,与ccRCC肿瘤WHO/ISUP病理分级及患者的预后相关,可作为潜在的ccRCC诊断及判断预后的生物标志物。     

NOV基因与Ki-67、VEGF、p27和COX-2在肾透明细胞癌中的相关性

目的 研究肾母细胞瘤过表达基因(NOV/CCN3)在肾透明细胞癌（ccRCC）中与增殖细胞核抗原Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期依赖性激酶抑制因子p27、环氧合酶2(COX-2)的相关性。方法 用过表达NOV质粒pEGFP-C1-NOV转染人肾透明细胞癌细胞株786-O, 实时定量PCR（RT-PCR）技术测定转染了过表达NOV质粒的细胞(实验组)、转染了空载体的细胞（空载组）及未行质粒转染的786-O细胞（空白组）中Ki-67、p27、VEGF和COX-2 mRNA表达的差异。应用免疫组化染色法对组织芯片行NOV及Ki-67、VEGF、p27、COX-2染色,得到量化资料并行相关性分析。结果 RT-PCR结果显示,实验组细胞与空白组细胞比较NOV mRNA水平增高(P<0.05),同时Ki-67、VEGF在mRNA水平降低(P<0.05),p27、COX-2 mRNA水平显著升高(P<0.05)。空白组与空载组相比较均无明显差异。免疫组化染色结果显示,肾透明细胞癌组织中NOV的表达与Ki-67、VEGF的表达呈负相关（r分别为-0.686、-0.646,P＜0.05）,而与p27、COX-2的表达呈正相关 (r分别为0.491、0.762,P<0.05)。结论 NOV在肾透明细胞癌中对增殖和进展的作用可能与影响Ki-67、VEGF、p27、COX-2的表达相关。     

STAG2基因在肾癌的表达及功能研究

目的 研究骨髓基质抗原2(STAG2)基因在人肾癌组织和肾癌细胞中的表达水平并研究STAG2基因对肾癌细胞生物学表型的影响.方法 使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测STAG2基因在5株肾癌细胞、1株正常肾细胞和68对肾癌及其对应的癌旁组织中的表达水平;使用 Western blot法分析STAG2蛋白在5株肾癌细胞、1株正常肾细胞的表达特点;使用慢病毒包装感染ACHN、786-0细胞并使用qRT-PCR检测感染效率;CCK8试剂盒检测STAG2过表达后对肾癌细胞增殖的影响;Transwell法检测STAG2过表达后对肾癌细胞侵袭的影响;流式细胞术检测STAG2过表达后对肾癌细胞凋亡的影响.结果 ①qRT-PCR结果显示,与正常肾细胞相比,STAG2基因在5株肾癌细胞的表达显著下降,差异有统计学意义(P＜ 0.01);②Western blot结果显示在5株肾癌细胞中STAG2蛋白表达明显低于正常肾细胞;③qRT-PCR检测肾癌及其癌旁组织的STAG2表达水平结果显示与其对应癌旁组织相比,72. 06％(49/68)肾癌组织中STAG2表达水平下降(P＜0. 01);肾癌组织中STAG2表达水平与肿瘤的临床病理分期相关(P=0.029),与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级无明显相关性;④慢病毒感染 ACHN、786-O细胞后STAG2表达水平明显升高(P＜0. 01); ⑤体外实验中,过表达STAG2基因明显抑制肾癌细胞的增殖和迁移能力,促进肾癌细胞的早期凋亡(P＜0. 05,P＜ 0.01).结论 ①在肾癌细胞和肾癌组织中STAG2的表达水平均有明显的下降,提示STAG2可能参与肾癌的发生和发展的过程,STAG2低表达对肾癌的早期诊断可能提供一些帮助;②上调STAG2基因的表达明显抑制肾癌细胞的增殖和迁移能力、促进肾癌细胞的凋亡,提示STAG2可能成为治疗肾癌的一个潜在靶点.     

基于公共数据库分析TNFAIP2在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白2 (TNFAIP2)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达情况及其临床意义。方法 通过TIMER2.0、癌症基因组图谱(TCGA)、ONCOMINE和UALCAN数据库,分析TNFAIP2 mRNA在正常肾脏和ccRCC组织中的表达差异,及其与临床指标和免疫细胞丰度的相关性;利用Kaplan-Meier曲线数据库分析预后情况。采用Western blotting检测人肾脏正常细胞系HK-2和人肾癌细胞系786-O、ACHN中TNFAIP2的表达,并应用实时PCR在24个配对的肾癌组织与癌旁肾脏正常组织样本中检测TNFAIP2的表达量。结果 公共数据库分析结果显示,TNFAIP2在ccRCC组织中异常高表达(P <0.001),且TNFAIP2的高表达与肿瘤的分期、分级、淋巴结转移、免疫细胞Th1和Treg丰度密切相关(P <0.001); Kaplan-Meier曲线分析表明TNFAIP2表达与患者的预后有关,其高表达提示病情恶化及总生存期缩短(P <0.001);受试者操作特征曲线显示TNFAIP2表达可用于评估患者的诊断预测效率(曲...     

SPOP上调c-Jun蛋白表达并促进肾癌细胞的增殖和侵袭

目的 探讨SPOP对肾癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等的影响及潜在的作用机制。方法 体外培养肾癌细胞株786-O、 A704、Caki-2,对照组（EV）和过表达组（SPOP）质粒采用脂质体法转染至上述肾癌细胞株;分别利用克隆形成实验及MTT法检测SPOP基因对肾癌细胞株增殖的影响;采用TUNEL法检测SPOP基因对肾癌细胞株凋亡的影响;利用创伤愈合实验和Transwell实验检测SPOP基因对肾癌细胞株迁移和侵袭能力的作用;运用Real-time PCR和Western blotting技术检测转染后肾癌细胞株SPOP和c-Jun的 mRNA水平以及相关蛋白的表达情况。结果 在786-O、A704、Caki-2细胞上调 SPOP的表达能促进肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.05）;与对照组相比,SPOP组的肾癌细胞株786-O、Caki-2的凋亡率较对照组相对减少（P< 0.05）;Real-time PCR结果显示,c-Jun mRNA的表达水平未发生改变,但Western blotting结果显示,SPOP组肾癌细胞株786-O、Caki-2的SPOP蛋白表达明显高于对照组（P<0.05）,c-Jun蛋白的表达也明显高于对照组（P<0.05）。结论 SPOP能促进肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肾癌细胞的凋亡,潜在的机制可能为促进c-Jun的表达。     

紫草素对肾透明细胞癌抗凋亡作用与机制研究

目的探究紫草素对肾透明细胞癌凋亡及抗失巢凋亡的作用及其机制。方法实验分为四组,对照组、紫草素低、中、高剂量组(1、2、4mg/mL),加入786-O人肾细胞腺癌细胞中,CCK8检测肾透明细胞癌细胞活力,细胞集落实验和poly-HEMA悬浮培养检测肾透明细胞癌失巢凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡能力;caspase-3试剂盒法检测肾透明细胞癌caspace-3活性,蛋白印迹(Western blot)检测细胞失巢凋亡相关信号FAK、Akt、Src、GSK3b活化情况以及下游靶基因表达情况。结果 CCK8检测细胞活力发现,与对照组比较,中、高剂量组紫草素对肾透明细胞癌细胞活力具有明显抑制作用,且随着紫草素剂量增加,细胞活力呈现剂量依赖性下降[(43.55±4.87)%、(24.64±5.45)%比(100.00±2.33)%,P0.01]。将肾透明细胞癌786-O在软琼脂上培养10天形成集落,结果显示,与对照组比较,紫草素低、中、高剂量组细胞集落数明显减少[(35.75±2.45)个、(19.48±1.37)个、(7.52±0.89)个比(50.23±4.21)个,P0.01],且呈剂量依赖性下降。poly-HEMA条件培养表明,紫草素能明显抑制细胞失巢悬浮后的聚团能力。流式细胞仪检测显示,与对照组比较,紫草素低、中、高剂量组细胞凋亡率上升[(8.04%±0.98)%、(19.35±1.22)%、(35.25±1.35%)比(0.40±0.52)%,P0.05或P0.01];caspase-3细胞活性检测显示,无论是贴壁生长还是非粘性生长的肾透明细胞癌经紫草素处理后caspase-3活性均明显下降(P0.05或P0.01);Western blot结果显示,紫草素能明显降低肾透明细胞癌细胞786-O中FAK、Akt、Src、GSK3b磷酸化激活,与对照组比较差异均有显著性统计学意义;RT-PCR结果显示,紫草素能明显诱导FasL、Bim等促凋亡分子mRNA表达。结论紫草素能明显促进肾透明细胞癌凋亡并降低其抗失巢凋亡能力,其机制可能与紫草素抑制抗凋亡信号的激活和促凋亡信号caspase-3活化,进一步促进促凋亡分子FasL、Bim表达有关。     

沉默CML66基因对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制研究

目的探讨应用siRNA(small interfering RNA)沉默慢性粒细胞白血病肿瘤抗原66基因(CML66)对人肾癌786-O细胞生物功能及对LIS1/Dynein信号通路的影响。方法将CML66-siRNA予以应用脂质体转染方法转染入人肾癌786-O细胞中,采用蛋白质印迹法检测转染CML66-siRNA后,检测786-O细胞CML66、LIS1和Dynein蛋白的表达。采用CCK8增殖法检测肾癌细胞的增殖水平;采用Transwell法及Matrigel法检测肾癌细胞的迁移、侵袭能力。结果与对照组比较,转染CML66-siRNA后,肾癌细胞中CML66、LIS1和Dynein蛋白表达下降(P0.01)。siRNA-CML66组转染2、3、4 d后细胞增殖能力较对照组显著降低(P0.05)。siRNA-CML66转染组中肾癌细胞侵袭及迁移能力较对照组亦明显减弱(P0.01)。结论 CML66在786-O细胞中高表达,沉默CML66能够降低肾癌细胞的迁移、侵袭及增殖能力,其机制可能与LIS1/Dynein信号通路有关。     

Survivin在肾透明细胞癌786-O细胞株中表达的实验研究

目的:检测抗凋亡基因survivin在肾透明细胞癌786-O细胞株中的表达并探讨其临床意义.方法:运用MTT(四唑盐比色)法检测细胞生长状态并绘制生长曲线,运用RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)法和免疫组化法检测786-O细胞株中survivinmRNA及survivin蛋白的表达情况.结果:检测出786-O细胞株中有survivin mRNA的表达,survivin蛋白的表达亦呈阳性,而正常肾细胞无阳性表达.结论:survivin mRNA及survivin蛋白在肾透明细胞癌中均有明显的表达,利用这一表达特异性,为以survivin基因为靶点的肾癌基因治疗研究提供了实验依据.     

WNT信号通路抑制因子-1和β连环蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨WNT信号通路抑制因子-1(WIF-1)和β连环蛋白(β-catenin)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与肾癌临床分期、病理分级的相关性。方法选取2010年2月—2015年6月中国医科大学附属盛京医院第二泌尿外科行根治性手术切除的ccRCC患者102例为研究对象,应用免疫组织化学SP法检测102例肾细胞癌组织及相对应的癌旁正常肾脏组织中WIF-1、β-catenin表达情况。结果 WIF-1在ccRCC组织及正常组织中的表达差异有统计学意义(59.7±19.6 vs.112.2±18.6,t=3.104,P<0.05);β-catenin在ccRCC组织及正常组织中的表达差异亦有统计学意义(157.1±17.2 vs.102.1±18.7,t=4.015,P<0.05)。WIF-1的表达与肾透明细胞癌的临床分期(r=-0.542,P<0.05)、病理分级(r=-0.476,P<0.05)呈负相关;β-catenin的表达与肾透明细胞癌的临床分期(r=0.511,P<0.05)、病理分级(r=0.562,P<0.05)呈正相关.;WIF-1与β-catenin在肾癌中的表达呈负相关(r=-0.425,P<0.01)。结论 WIF-1表达降低和β-catenin表达升高与肾癌的病理分级和临床分期有关,对ccRCC预后评价有一定参考意义,也可为其治疗提供一种可能的靶向治疗途径。     

成纤维细胞生长因子受体2在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的: 研究成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC;or kidney renal clear cell carcinoma,KIRC)中的表达情况,对FGFR2的表达与ccRCC临床病理特征及预后关系进行分析,并研究FGFR2的表达与其他分子之间作用关系,探讨其在ccRCC发生发展中的作用。方法: 从肿瘤基因图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库及基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中下载ccRCC患者的基因表达及临床信息资料,进行转化及整理,并收集北京大学第一医院泌尿外科104例临床ccRCC样本及癌旁正常组织样本,进行免疫组织化学染色(immunohistochemistry, IHC),对染色结果进行评分,从而比较ccRCC和癌旁正常组织中FGFR2的蛋白表达情况;采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantify real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测正常的肾上皮细胞系(293)和肾细胞癌细胞系(786-O、769-P、OSRC-2、Caki-1、ACHN、A498)中FGFR2的mRNA表达水平;对数据库中的ccRCC患者进行进一步分析,研究FGFR2表达与ccRCC患者临床病理特征(包括TNM分期和病理分级)以及生存预后的关系,分析ccRCC患者中FGFR2表达与B细胞、T细胞、自然杀伤(natural killer,NK)细胞及中性粒细胞浸润的关系,并使用生物交互数据集通用存储库(Biological General Repository for Interactionh Datasets,BioGRID)构建蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,利用网络研究与FGFR2蛋白相互作用的分子。结果: 在TCGA数据库中,相较于正常组织样本,FGFR2在ccRCC组织样本中表达下调,在GEO数据库中的表达也呈现出这一差异,并且FGFR2在ccRCC临床样本及ccRCC细胞系中表达下调,此外,FGFR2表达水平与ccRCC高分级分期相关,与ccRCC患者较好的预后相关,并且FGFR2表达与B细胞、T细胞、NK细胞及中性粒细胞浸润无明显相关关系。PPI网络显示FGFR2蛋白与某些分子间存在相互作用。结论: 本研究揭示了FGFR2与ccRCC发生发展的潜在作用关系,提示FGFR2可能作为ccRCC患者的预后标志物和潜在治疗靶点。     

微小RNA-1180转染对肾癌细胞生长的影响

目的 探讨微小RNA-1180(miR-1180)转染对肾癌细胞系786-O和ACHN生长的影响.方法 肾癌细胞分为两组:dsControl组和miR-1180组.实时定量(qRT)-PCR检测p21 mRNA的表达变化.Western blot检测p21、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达变化.流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化,使用多靶扫描法(MTS)和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力.结果 qRT-PCR结果显示,与对照组相比,转染miR-1180后786-O和ACHN细胞中p21 mR-NA水平分别上调2.54倍(P＜0.01)和2.49倍(P＜0.01).p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符,CDK4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调.FCM结果显示,转染miR-1180后,位于G0/G1期的细胞比例明显增大,而位于S期和G2/M期的细胞比例明显下降,表明细胞周期被阻滞在Go/G1期.MTS结果显示,与dsControl组相比,转染miR-1180后,两种肾癌细胞活力明显降低.集落形成实验显示,miR-1180组的集落数数量明显较少,表明细胞增殖能力降低.结论 miR-1180能显著激活肾癌细胞中p21蛋白的表达,并抑制肾癌细胞786-O和ACHN的生长.     

腺病毒重组人白细胞介素24对肾癌细胞株786-O 细胞生长和凋亡的影响

目的探讨腺病毒重组人白细胞介素24(IL-24)对肾癌细胞株786-O细胞的生长和凋亡的影响。方法将培养的肾癌细胞株786-O细胞随机分为空白对照组、阴性对照组(转染腺病毒重组人IL-24对照组)及实验组(转染腺病毒重组人IL-24组)。取对数生长期肾癌细胞株786-O,构建腺病毒重组人IL-24及对照并转染至肾癌细胞株786-O实验组细胞及阴性对照组细胞。使用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测肾癌细胞株786-O生长能力;采用流式细胞术检测肾癌细胞株786-O凋亡情况;应用Western Blot检测肾癌细胞株786-O中MMP-9蛋白的表达水平。结果实验组肾癌细胞株786-O细胞增殖能力低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组肾癌细胞株786-O细胞表面磷脂酰丝氨酸表达水平高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组肾癌细胞株786-O细胞中MMP-9蛋白表达水平低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组与阴性对照组肾癌细胞株786-O细胞增殖能力、细胞膜表面磷脂酰丝氨酸表达水平、MMP-9蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论转染腺病毒重组人IL-24可抑制肾癌细胞株786-O细胞的生长并诱导细胞凋亡,腺病毒重组人IL-24可能通过下调MMP-9诱导肾癌细胞株786-O细胞的凋亡。     

KIF21B在肾细胞癌中的表达及其对肾癌细胞786-O凋亡的调控作用研究

目的 分析肌动蛋白家族成员21B(KIF21B)在肾细胞癌中的表达水平及意义,探讨KIF21B对肾癌细胞凋亡的影响及机制。方法 采用免疫组织化学、蛋白印迹法(Western blot)检测KIF21B在人肾细胞癌组织和癌旁组织中的表达差异,分析KIF21B改变与患者临床病理特征的相关性。采用Western blot检测KIF21B在人胚肾细胞和肾癌细胞株中的表达差异。以特异性慢病毒下调肾癌细胞786-O中KIF21B表达后,采用流式细胞术和Tunel检测KIF21B对786-O细胞凋亡的影响。采用Western blot检测低表达的KIF21B对PI3K/AKT通路蛋白的调控作用。结果 肾细胞癌组织中KIF21B阳性表达率明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),且阳性表达水平与患者Fuhrman分级、T分期、肿瘤转移存在相关关系。沉默慢病毒及空载体慢病毒作用786-O细胞72 h后,沉默组786-O细胞中KIF21B表达水平下调且细胞凋亡增加,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默KIF21B后,786-O细胞中PI3K/AKT关键蛋白表达水平被抑制。结论 KI...