鲍曼不动杆菌TEM-1型ESBLs基因及其多重耐药的研究

目的分析产TEM-1型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）鲍曼不动杆菌的耐药性及其基因序列。方法用聚合酶链式反应（PCR）扩增产ESBLs鲍曼不动杆菌的TEM-1型耐药基因，用克隆测序方法分析质粒上TEM-1型ESBLs基因。结果15株产ESBLs鲍曼不动杆菌中，TEM-1型ESBLs阳性菌株有12株，TA克隆后测序表明，与鲍曼不动杆菌（AY560328．1）bla TEM-1基因序列99％源。结论质粒上带产TEM-1型ESBLs的鲍曼不动杆菌，bla TEM-1基因与鲍曼不动杆菌多重耐药密切相关。     

三维试验检测高产AmpCβ内酰胺酶和ESBLs的方法探讨

目的探讨三维试验检测鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌AmpCβ内酰胺酶和ESBLs的方法：方法采用冻融法破碎细菌释放菌体内的B内酰胺酶，用头孢西丁和头孢噻肟为水解底物，氯唑西林和克拉维酸为其抑制剂进行检测。结果19株鲍曼不动杆菌中1株产生ESBL，5株产生AmpC酶，1株同时产生ESBL和AmpC酶；14株铜绿假单胞菌中2株产生AmpC酶。结论成功改良了三维试验检测AmpCβ内酰胺酶和ESBLs方法，适用于临床常规检验。     

西安地区鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶基因研究

目的 明确西安地区临床分离的鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型,研究多重耐药菌株的耐药机制.方法 采用K-B法测定鲍曼不动杆菌对15种抗菌药物的敏感性,利用改良三维试验进行表型确认,对表型检测阳性及阴性菌株采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析β-内酰胺酶基因型.结果 共有84株产ESBLs,其中有45株产PER-1型ESBLs,58株产TEM-1型ESBLs,19株同时产PER和TEM两型ESBLs,未扩增出SHV型ESBLs.改良三维试验阳性菌株有4株未扩增出ESBLs,改良三维试验阴性菌株有13株扩增出ESBLs.结论 西安地区临床分离的鲍曼不动杆菌至少存在2种不同类型的ESBLs,基因型分别为PER-1、TEM-1,且同一质粒携带2种或2种以上ESBLs编码基因在西安地区有流行的趋势.     

多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因型研究

目的:了解我院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因分布情况。方法:用三维试验检测15株多重耐药鲍曼不动杆菌ESBLs、AmpC、MBL(金属β-内酰胺酶)产酶情况;用PCR方法检测各种β-内酰胺酶基因。结果:三维试验检出2株菌产ESBLs;9株菌产AmpC;3株菌合产ESBLs和AmpC酶;3株菌产MBL(均同时产AmpC)。PCR检出15株菌均携带blaTEM基因;2株菌携带blaPER-1基因;14株菌携带AmpC基因;未检出产金属β-内酰胺酶基因。结论:我院多重耐药的鲍曼不动杆菌多含有blaTEM基因和AmpC基因,也首次发现部分产PER型ES-BLs鲍曼不动杆菌。     

ICU铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的：了解本院ICU铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药情况，以指导临床抗生素的合理使用。方法：回顾性分析本院2006年1月至2007年1月ICU分离的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的药敏结果，剔除重复菌株，药敏试验采用K-B纸片扩散法。结果：102株铜绿假单胞菌对常用抗菌药物有不同程度的耐药，其中对美罗培南、亚胺培南、头孢他啶、头孢哌酮／舒巴坦、派拉西林／他唑巴坦、环丙沙星和丁胺卡那的敏感性分别为76．3％、75．1％、75．9％、72．7％、83．2％、72．3％和71．1％。252株鲍曼不动杆菌除对头孢哌酮／舒巴坦和氨苄西林／舒巴坦的敏感率为63．5％和43．7％，其余均≤20％。结论：ICU的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药现象十分严重，必须加强耐药监测，根据药敏结果合理用药。     

重症监护病房鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的分布及耐药性研究

目的探讨重症监护病房（ICU）鲍曼不动杆菌以及铜绿假单胞菌的分布情况以及耐药性。方法收集2012年1月-2014年1月,我院ICU感染患者的送检标本160份,鉴定感染菌株种类,并对鲍曼不动杆菌以及铜绿假单胞菌进行耐药性分析。结果 ICU鲍曼不动杆菌以及铜绿假单胞菌均存在不同程度的耐药性,其中,鲍曼不动杆菌对于亚胺培南敏感性最高（88.0%）,其次为头孢哌酮/舒巴坦（81.3%）,其余均在70%以下;铜绿假单胞菌对亚胺培南以及头孢他啶的敏感性最高,均为82.4%,其次为头孢哌酮/舒巴坦（81.2%）。结论 ICU鲍曼不动杆菌以及铜绿假单胞菌均存在严重抗菌药物耐药性,强化ICU耐药监测对于预防医院感染的发生和流行具有重要意义。     

临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子与ISCR1研究

目的 了解临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单保菌Ⅰ类整合子与插入序列共同区1(ISCR1)的分布情况.方法 2010年1月至2013年12月共收集我院126株多重耐药鲍曼不动杆菌和89株多重耐药铜绿假单胞菌,采用PCR法扩增Ⅰ类整合酶、Ⅰ类整合子基因盒、ISCR1、ISCR1可变区.Ⅰ类整合基因盒和ISCR1可变区的PCR产物分别用HinfⅠ、RasⅠ进行酶切,相同类型酶切图谱的PCR产物随机挑取一例进行测序,测序结果在GenBank中用BlastN进行核酸序列同源性搜索.结果 在多重耐药鲍曼不动杆菌中,检出79例Ⅰ类整合酶,67例Ⅰ类整合子基因盒阳性,含有6种类型;59例ISCR1阳性,其中9例ISCR1可变区阳性.在89株多重耐药铜绿中,检出41例Ⅰ类整合酶,36例Ⅰ类整合子基因盒阳性,含有10种类型;9例ISCR1阳性,其中4例ISCR1可变区阳性.有8株鲍曼不动杆菌和2株铜绿假单胞菌同时携带Ⅰ类整合子和ISCR1可变区结构.结论 在多重耐药铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中,Ⅰ类整合子和ISCR1分布较广.     

鲍曼不动杆菌SHV-12型超广谱β内酰胺酶基因研究

目的：分析自临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌SHV型β-内酰胺酶耐药基因序列，并确定其所产ESBLs亚型。方法：从住院病人的送检标本中分离的60株鲍曼不动杆菌中，经药敏试验、ESBLs表型确证试验和SHV型β内酰胺酶耐药基因的聚合酶链反应(PCR)检测，筛选出1株具有多重耐药特性、ESBLs表型和SHV基因型均阳性的分离株(HZ02株)，对其耐药基因进行序列分析。结果：HZ02株基因片段长825个核苷酸，与Nuesch-Inderbinen等从肠杆菌中发现的SHV—12型ESBLs编码基因序列(GenBank注册号：X98105)完全相同。结论：HZ02株鲍曼不动杆菌可产生SHV—12型ESBLs，从而证实了我国临床分离的鲍曼不动杆菌中存在产SHV—12亚型ESBLs菌株。其序列已在美国核酸数据库(GenBank)登录(注册号：AY29163)。     

泛耐药的铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌感染的防治策略

鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌是医院感染中最常见的条件致病菌,近年来临床上出现了泛耐药菌株日趋增多,给临床治疗带来了极大困难,笔者就泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的流行病学、耐药机制、基因分型、防治对策及病原治疗等作了综述.     

多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶分析

目的分析临床分离的4株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的同源性及β-内酰胺酶.方法采用浓度梯度法(E test)测定亚胺培南等12种抗菌药物对4株菌株的最低抑菌浓度(MIC),脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性,等电点聚焦电泳(IEF)、三维试验、2-巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应(PCR)及克隆测序等方法分析β-内酰胺酶.结果4株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌来自同一克隆株,耐药谱基本一致,仅1株对头孢吡肟、头孢哌酮舒巴坦中度敏感,对其余抗菌药物均高度耐药.三维试验显示4株细菌存在能水解亚胺培南的酶.3株细菌有pI 5.4、5.8、6.6、7.2条带,另1株少pI 5.8条带,pI 5.4、5.8条带均能被克拉维酸抑制.PCR扩增产物经克隆测序证实同时存在OXA-23、PER-1基因.结论存在同时产OXA-23型碳青霉烯酶和PER-1型超广谱β-内酰胺酶的鲍曼不动杆菌引起的医院感染.     

阜外心血管医院5年G-致病菌的耐药监测

目的通过对该院2001-2005年临床分离的G^-杆菌致病菌流行病学分布及其耐药特征，为临床更合理应用抗生素提供部分的依据。方法采用纸片扩散法（K—B法）对该院住院患者中分离的902株革兰阴性杆菌进行药敏试验及ESBL的检测，并用WHONET5．3进行数据分析。结果902株革兰阴性杆菌中常见的菌种依次为铜绿假单胞菌（22．9％）、肺炎克雷伯菌（20．1％）、不动杆菌（17．4％）、嗜麦芽窄食单胞菌（11．6％）、大肠埃希菌（10．2％）和阴沟肠杆菌（9．8％）。大肠埃希菌ESBL的检出率为62％，肺炎克雷伯菌中ESBL的检出率为47．5％；肠杆菌科细菌未发现对碳青霉烯类耐药，铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌亚胺配南的敏感率分别为68.3％和91.3％，阿米卡星对除嗜麦芽窄食单胞菌外的其他细菌的敏感率均较高，头孢哌酮／舒巴坦对治疗非发酵菌具有较广的抗菌谱和较高的敏感率。结论通过对细菌的耐药监测和分析了解不同医院各种细菌的耐药特点和趋势，可指导临床合理经验性用药。     

亚胺培南耐药鲍氏不动杆菌AmpC酶、ESBLs及金属酶检测和耐药分析

目的 分析我院亚胺培南耐药鲍氏不动杆菌(IRABA)临床分离株头孢菌素酶(AmpC酶)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和金属β-内酰胺酶(MBLs)的产生情况及其耐药特点.方法 应用VITEK-2全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,采用改良三维试验方法同时检测2008年1月-2009年9月我院临床分离的63株IRABA的ESBLs和AmpC酶,2-巯基丙酸协同试验检测MBLs.结果 63株IRABA中,45株(71.4 %)AmpC酶阳性,13株(20.6 %)ESBLs阳性,其中8株(12.7 %)同时产AmpC酶和ESBLs,未检出产MBLs 菌株.AmpC酶阳性菌对12种抗生素的耐药率明显高于AmpC酶阴性菌,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 本组IRABA主要产AmpC酶,且多重耐药现象严重.     

临床分离531株革兰阴性杆菌的分布与耐药性分析

【目的】了解从临床患者分离的革兰阴性杆菌的分布及其耐药性特征,指导临床合理使用抗菌药物。【方法】用药敏纸片法对我院2005年1月-2005年12月各类感染标本中分离的革兰阴性杆菌共531株进行药敏试验和用表型确证试验进行ESBLs的检测。【结果】我院分离的革兰阴性杆菌主要为大肠埃希菌(36.3%)、铜绿假单胞菌(23.0%)、肺炎克雷伯菌(14.7%)。这些菌株对12种抗生素的敏感率各不相同,亚胺培南仍是对革兰阴性杆菌抗菌作用最强的一类抗生素,头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦也有较好的抗菌活性。大肠埃希菌和肺炎克雷菌ESBLs的检出率分别为26.9%和38.5%。产酶菌株对抗菌药物的敏感率显著降低。【结论】我院分离的革兰阴性杆菌耐药性强且多重耐药,临床实验室应加强对ESBLs的检测,了解各菌种的耐药特点,指导临床合理使用抗菌药物并严密监控新的耐药菌的产生。     

肺炎克雷伯杆菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

[目的 ]了解大连市肺炎克雷伯杆菌产超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)菌的发生率及耐药特点。[方法 ]收集并分离临床标本 ,按美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)推荐的纸片扩散初筛法及确证法测定ESBLs[1] 。采用二倍琼脂稀释法 ,测定 1 3种抗生素对所有菌株的MIC ,将产ESBLs和不产ESBLs肺炎克雷伯杆菌的耐药性进行对比分析。 [结果 ]临床共分离出肺炎克雷伯杆菌 1 2 5株 ,从中筛选出产ESBLs菌 34株 ,检出率为 2 7.2 %。二倍琼脂稀释法测定结果表明 ,所有产ES BLs的肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南及美罗培南敏感 ,敏感率达 1 0 0 %。头孢哌酮 /舒巴坦和头孢吡肟对产ESBLs菌株的体外敏感性也很好。产ESBLs的肺炎克雷伯杆菌对阿米卡星 (4 4.1 % )和环丙沙星 (4 4.1 % )耐药率较高。ESBLs产生株对除了碳青霉烯类抗生素、头孢哌酮 /舒巴坦外的其余抗菌药物的耐药率显著高于非ESBLs产生株 (P <0 .0 1 )。 [结论 ]大连市肺炎克雷伯杆菌产ESBLs的情况比较严重 ,应采取积极有效措施来迎接ESBLs的挑战     

非发酵菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶及碳青霉烯酶分析

目的了解非发酵菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和碳青霉烯酶的情况,以期为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法应用VITEK-2全白动微生物分析系统对临床分离非发酵菌进行鉴定。按照美同临床实验室标准化委员会（CLSL／NCCLS2010版）推荐的纸片扩散法检测156株非发酵菌对常见的15种抗生素耐药情况：按照NCCLS推荐的确认试验（双纸片增效试验）检测菌株产ESBLs情况;采用两种改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型确证。结果临床分离的156株非发酵菌前3位为鲍曼不动杆菌、铜绿似单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌．均呈现高耐药率。鲍曼不动杆菌产ESBLs牢为27．6％,铜绿似单胞菌产ESBLs率为37．5％。鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶牢为50．0％,铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶率为13.3％。两种改良Hodge试验检测鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的一致性较好,检测铜绿似单胞菌碳青霉烯酶的一致性一般,但是无不确定结果。结论非发酵菌耐药率较高．产ESBLs和碳青霉烯酶情况已相当严重,检测碳青霉烯酶阳性的铜绿假单胞菌时,PAE—MHT（以肺炎克雷伯菌ATCC700603作为指示菌的改良Hodge试验）优于MHT（以大肠埃希菌ATCC25922作为指示菌的改良Hodge试验）。     

下呼吸道感染肺炎克雷伯菌耐药性及产ESBLs株危险因素分析

目的:研究下呼吸道感染肺炎克雷伯菌的耐药性及产ESBLs株感染的危险因素。方法:回顾分析本院2012年分离的257株肺炎克雷伯菌下呼吸道感染患者的流行病学资料,比较产ESBLs和不产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性。采用病例对照的研究方法,以不产ESBLs肺炎克雷伯菌做为对照组,分析产ESBLs肺炎克雷伯菌感染的危险因素。结果:257株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌136株,检出率为52.92%。产ESBLs的肺炎克雷伯菌对测试抗生素的耐药率明显高于不产ESBLs组。20个与产ESBLs感染可能相关的危险因素中,经单因素及多因素Logistic回归分析显示3个为产ESBLs株感染的独立危险因素,即β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂类(OR=4.117,95%CI=1.763⁹.613)、喹诺酮类抗生素(OR=4.132,95%CI=1.9429.613)、喹诺酮类抗生素(OR=4.132,95%CI=1.942⁸.789)和ICU入住>7 d(OR=4.297,95%CI=1.8998.789)和ICU入住>7 d(OR=4.297,95%CI=1.899⁹.726),而碳青霉烯类抗生素使用是其保护性因素(OR=0.074,95%CI=0.0239.726),而碳青霉烯类抗生素使用是其保护性因素(OR=0.074,95%CI=0.023⁰.235)。结论:下呼吸道分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs株的检出率高、耐药性强,感染患者病死率高,住院时间长。产ESBLs肺炎克雷伯菌感染具有多个独立危险因素,加强对这些危险因素的控制有助于预防产ESBLs株感染的扩散。     

某医院多重耐药菌变迁及耐药性分析

目的 了解某医院多重耐药菌(MDRO)的种类、耐药情况及耐药菌变迁,为医院感染的防控及临床合理用药提供依据。方法 回顾性分析统计某医院2017—2019年住院患者送检标本中MDRO检测情况和药敏试验数据,分析MDRO的标本种类,耐药情况及其耐药菌变迁。结果 2017—2019年该医院共检出MDRO 933株,标本主要来源是痰液(30.12%),其次为尿液(30.01%)、分泌物(28.51%)、血液(10.40%)等。革兰氏阴性菌占83.49%,革兰氏阳性菌占16.51%,前5位共923株分别是产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、产ESBLs肺炎克雷伯菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌(CR-AB)、多重耐药铜绿假单胞菌(MDR-PA)。ESBLs阳性的MDRO对青霉素类、头孢曲松、头孢唑林耐药率超过90%,对碳青霉烯类、氨基糖苷类、头孢哌酮/舒巴坦敏感性都达到90%以上,尤其是对厄他培南敏感性较高(99.4%～100%)。铜绿假单胞菌对替卡西林/克拉维酸、亚胺培南、呋喃妥因耐药率均达到70%以上,但对妥布霉素敏感性达92.9%。鲍曼不动杆菌对头孢类、亚胺培南、氨基糖苷类、喹诺酮类等常见抗菌药物高度耐药,耐药率高达95%以上,仅对头孢哌酮/舒巴坦敏感性为90.2%。MRSA对青霉素类耐药率为100%。结论 近三年来该医院MDRO感染日益严重,革兰氏阴性菌中产ESBLs大肠杆菌呈逐年下降趋势,产ESBLs肺炎克雷伯菌呈先上升后下降趋势,革兰氏阳性菌MRSA呈逐年上升趋势。MDRO感染仍以革兰氏阴性菌为主,应该加强对MDRO的监控,合理选用抗菌药物治疗。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌肺炎临床及基因型分析

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药情况和基因型,探讨产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎（HAP）的危险因素。方法对140例大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌HAP患者（其中产ESBLs菌者88例为阳性组,非产ESBLs菌者52例为阴性组）细菌耐药情况进行分析。通过病例对照研究和多因素Logistic回归分析产ESBLs细菌HAP的危险因素。对保留的53株产ESBLs菌株以随机扩增多态性DNA（RAPD）分型法进行基因分型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药率明显高于非产ESBLs菌。Logistic多因素回归分析结果表明,入住ICU天数延长、使用三/四代头孢菌素是独立的危险因素。通过RAPD分型,37株产ESBLs大肠埃希菌分为27型,16株产ESBLs肺炎克雷伯菌分为13型。结论入住ICU时间、三/四代头孢菌素使用是产ESBLs细菌HAP的主要危险因素;RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速、可靠的基因分型方法。     

肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解肺炎克雷伯菌体外对抗生素的耐药情况，为临床诊治提供参考。方法采用纸片扩散法（K—B）法对临床分离的肺炎克雷伯菌进行药敏检测，并用双纸片法初筛、确证法检测产超广谱β-内酰胺酶（Extended spectrum beta-lactamases，ESBLs）菌。结果140株肺炎克雷伯菌的ESBLs阳性率为40．6％，对替卡西林＋棒酸（TCC）总的耐药率最高为97．9％，除阿米卡星（AMK）和亚胺培南（IMI）以外对其余10种药物的总耐药率均超过50％，对亚胺培南的总耐药率仅为3．6％。产ESBLs与非产ESBLs菌对TCC和亚胺培南的耐药率比较无显著性差异（P〉0．05），对其余10种药物的耐药率比较均有显著性差异（P〈0．01）。结论肺炎克雷伯菌是主要的产ESBLs条件致病菌之一，临床应加强对肺炎克雷伯菌耐药性的监测并预防耐药菌株的传播流行。