一种优化的大鼠视网膜组织石蜡切片制作方法

目的针对大鼠视网膜石蜡切片过程中易出现标本脱离及断裂分离的问题,寻找并优化大鼠视网膜石蜡切片的制作方法并评估效果．方法分别用10％多聚甲醛固定液;4％多聚甲醛固定液;单独固定及使用4％多聚甲醛、95％酒精、冰醋酸混合固定液（FAA固定液）;预处理后再使用10％多聚甲醛分别固定等4种方法对大鼠视网膜组织进行固定,HE染色后显微镜下进行观察．结果单独使用10％多聚甲醛以及4％多聚甲醛固定均出现视网膜脱离及各层结构断裂分离现象,但经FAA固定液预处理的视网膜切片HE染色后颜色鲜明均匀,虽部分区域视网膜偶有脱离,但不易脱片,各层结构完整,未出现断裂分离．结论经FAA固定液及多聚甲醛处理过的视网膜石蜡切片固定效果明显优于单独使用多聚甲醛,甲醛浓度对HE染色结果无明显影响．     

用于免疫荧光染色的大鼠视网膜冰冻切片的制作体会

目的：探索适合免疫荧光染色的大鼠视网膜冰冻切片的制作方法与技巧.方法：将SD大鼠麻醉后灌注或不灌注取眼球,根据标本处理差异分别进行固定及脱水处理,制作不同厚度视网膜冰冻切片60例,进行免疫荧光抗体标记,利用荧光显微镜观察其细胞排列及标记状况.结果：完整眼球视网膜结构形态可保持相对规则,但偶尔发生组织牵拉;玻璃体去除的视杯标本免疫荧光染色结果相对理想.标本厚度介于10～12 μm冰冻切片视网膜血管免疫荧光染色结果优于其他厚度者.结论：用于免疫荧光的组织标本应尽量保持其完整的固有形态,通过对目标结构的定性、定位以及定量,再现视网膜各成分的状态.实验者可根据需要选择最适合的眼组织取材方法、切片厚度等以便得到满意的观察效果.     

临床眼球标本切片制作方法改良

目的:改进常规的眼球标本制作方法,并且制作、诊断了15例眼球摘除的病例.方法:眼球的固定,手术摘除后的眼球标本放置于体积大于眼球数倍的容器中,眼球的取材,眼球的脱水、包埋及制片.结果:所有切片效果良好.眼球不变形,外观收缩变形不明显,剖切眼球时肉眼观察未见有固定液性视网膜剥离.结论:本方法省时、操作简单、易于掌握;切片完整,各层结构清楚,细胞排列整齐,染色鲜艳,制作眼球切片选择本方法为佳.     

石蜡包埋制作猫眼球切片方法的改良

目的 探讨和改良石蜡包埋制作猫眼球切片方法.方法 取健康猫眼球10只,AFA(甲醛-乙醇-冰醋酸)固定液固定,乙醇梯度脱水,氯仿透明,石蜡包埋制作眼球切片,厚度7 μm,HE染色,观察并记录.结果 ①石蜡包埋的猫眼球不变形,外观无明显收缩,结构完整,可获得整个眼球;②HE染色切片观察,眼球壁各层结构清晰,角膜、角膜缘、巩膜静脉窦、睫状肌等组织结构完整,视网膜无明显剥离,层次清楚,各层细胞排列整齐、容易辨认.结论 采用此方法对猫眼球进行石蜡包埋,可获得较满意的眼球组织切片.     

经外路途径行异种视网膜片移植的实验研究

目的：探讨经外路途径行视网膜下腔的全层异种视网膜移植的方法，并对移植结果进行初步观察。方法：用明胶包埋小鼠视网膜制成视网膜移植片，九只兔按外路手术方法将植片植入视网膜下腔。移植术后1-23天摘除动物眼球，石蜡包埋、切片、HE染色，光学显微镜观察。结果：明胶包埋的视网膜移植片可以被植入宿主视网膜下腔中，视网膜移植片平铺于宿主视网膜下腔中，植片外层与宿主视网膜色素上皮层相贴、存活，未见明显免疫排异反应。结论：视网膜下腔是较为理想的视网膜移植的受位；明胶包埋的异种视网膜植片可作为供体进行移植；移到视网膜下腔的异种视网膜能够存活，这一结果为今后异种视网膜移植研究奠定了基础。     

三种方法对大鼠视网膜固定效果的比较研究

目的研究三种不同方法对大鼠视网膜石蜡切片的固定效果。方法根据离体眼球的不同固定方法,将9只SD大鼠随机分为A组(改良固定液固定,n=3)、B组(4%多聚甲醛固定,n=3)和C组(4%多聚甲醛心脏灌注法固定,n=3)。24 h后制作标本进行苏木精-伊红染色,分析比较固定效果。结果 A组固定的眼杯不变形,B组固定的有少许变形,C组固定的基本不变形。显微镜观察显示A组眼球视网膜各层组织结构完整,B组和C组视网膜均有断层、分离和脱片等现象。结论改良固定液固定眼球的方法优于单纯4%多聚甲醛和4%多聚甲醛心脏灌注固定的方法,适用于视网膜石蜡切片的后期研究。     

用石蜡制片法制作眼球标本切片的体会

<正> 制作眼球标本切片,以火棉胶包埋法为最佳:但制作手续繁多,条件较严,需时较长,又难于制成较薄切片。我室几年来用石蜡包埋法制作眼球标本切片效果较满意。下面粗略介绍用此方法制作眼球标本的体会,供参考。眼球结构眼球结构特点:外形近似球体,外层球结膜为致密的结缔组织,内层有柔软视网膜,     

含有早胚的小鼠子宫石蜡切片制备

在胚胎学研究中常需制作含早胚的小鼠子宫石蜡切片。文献中对其制作方法的介绍比较简单，初学者难以掌握。我们以含早胚的孕6d小鼠子宫为例，对其石蜡切片的制作方法介绍如下。     

一种快速冷冻切片方法制作小鼠眼球切片

目的快速制作小鼠眼球切片。方法 OCT包埋,用液氮快速冷冻,切片后HE染色。结果制片时间较快,眼球壁结构完整,视网膜各层次清晰,无冰晶形成。结论快速冷冻切片方法能快速制作高质量的切片。     

氧诱导视网膜病模型中曲安奈德抑制新生血管生长的机制

目的观察氧诱导视网膜病模型(OIR)中曲安奈德(TA)对CD14+细胞聚集及VEGF表达的干预作用,初步探讨曲安奈德抑制视网膜新生血管生长的可能机制。方法清洁级C57BL/6哺乳期小鼠36只(共36个眼球),随机将其分为四组:①正常对照组(6个眼球),6只17日龄正常小鼠先行FFA眼底造影,然后每鼠随机摘取一个眼球,行眼球石蜡切片HE染色。②单纯高氧组(6个眼球),6只17日龄OIR模型小鼠处理同单纯对照组。③TA高氧组(12个眼球),12只12日龄OIR模型小鼠随机一眼注射TA 2μL,再于17日龄后行FFA眼底造影后摘除术眼,其中6个眼球行眼球石蜡切片HE染色及视网膜CD14和VEGF免疫组化染色,另6个眼球行视网膜VEGF mRNA的real-time PCR检测。④BSS高氧(12个眼球),12只12日龄OIR模型小鼠随机一眼注射BSS 2μL,余处理同TA高氧组。用t检验两两比较各组视网膜突破内界膜的内皮细胞核数,视网膜CD14与VEGF免疫组化染色的平均吸光度值(IOD/AOI),及VEGF mRNA的相对含量值(2-ΔCt×105)。结果与正常对照组相比,高氧诱导组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数...