三种肿瘤耐药基因在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨肺耐药蛋白（Lung resistance protein，LRP），多药耐药蛋白（Multldrug resistance—associated protein，MRP）和多药耐药基因（Multidrug resistance，MDR1）的mRNA在非小细胞肺癌（Non-small cell cancer，NSCLC）中共表达及临床意义。方法RT—PCR检测NSCLc冰冻组织中上述耐药基因的mRNA水平。结果LRP、MRP、MDR1mRNA阳性率分别为71．2％、81．8％和37．9％；MRP与、MDR1、MRP与LRP、LRPYUMDR1及MRP、LRPYUMDR1共表达者分别为16．7％（11／66）、53．0％（35／66）、19．7％（13／66）及12．1％（8／66）。LRP与MRP阳性相关（t=0．47，P=0．001），LRP、MRP与MDR1无相关性（r=0．98，P=0．0r77；r=0．25，P=0．053）．3种耐药基因表达在NSCLC各期、各分化组中差异无显著性（P≥0．05）。肺腺癌换了有效组LRP、MBPmRNA（0．53±0．08；0．41±0．01）及鳞癌化疗有效组LRPmRNA表达（0．42±0．03）明显低于换了无效组（1．14±0．3，0．82±0．04，0．97±0．01，P〈0．05）；LRP与MRP、LRP、MRP与MDR1共表达者，中位生存期明显缩短（P〈0．05）。多变量Cox回归分析，仅LRP＋MRP、LRP＋MRP＋MDR1共表达有预后意义。结论非小细胞肺癌原发耐药与LRP、MRP、MDR1共同作用有关。     

非小细胞肺癌病人外周血MUC1基因定量表达及意义

目的探讨Mucin-1（MUC1）mRNA在非小细胞肺癌（NSCLC）病人外周血中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量RT—PCR方法检测MUC1 mRNA在NSCLC病人外周血中的表达。结果NSCLC病人外周血中MUC1 mRNA表达显著高于正常人（t=2．01,P〈0．05）;鳞癌与腺癌病人MUC1基因的表达无明显差异（P〉0．05）。NSCLC病人外周血中MUC1 mRNA表达与NSCLC的病理分级、TNM分期及淋巴结转移密切相关（F=25．62、34．61,t=2．05,P〈0．05）。结论NSCLC病人外周血中MUC1 mRNA表达与NSCLC发生、发展、侵袭、转移及恶性程度密切相关,对判断NSCLC恶性程度及预后有重要参考价值。     

非小细胞肺癌中肺耐药蛋白mRNA的表达及临床意义

目的:探讨肺耐药蛋白(LRP)基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义。方法:应用RT-PCR半定量法检测60例NSCLC患者癌组织及癌旁组织中LRP mRNA的表达。用t检验、方差分析,Kaplan-Meier生存曲线和Log-rank检验进行统计分析。结果:NSCLC患者的癌组织中LRP mRNA表达量显著高于癌旁组织(P=0.000),LRP mRNA表达量在肺腺癌中高于鳞癌(P=0.02),中高分化组高于低分化组(P=0.033),但LRP mRNA的表达量与其他临床病理相关因素及生存期无相关性。结论:LRP在NSCLC的原发性多药耐药(MDR)中可能起重要作用,检测LRP对于预测NSCLC患者化疗效果、协助临床选择化疗方案可能具有一定的意义。     

浸润性乳腺癌组织中P-糖蛋白以及肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白表达的临床意义

目的探讨浸润性乳腺癌组织中P-糖蛋白（P—gp）、肺耐药蛋白（LRP）和多药耐药相关蛋白（MRP）表达的临床意义。方法应用流式细胞术（FCM）定量分析68例原发浸润性乳腺癌患者癌组织、相应癌旁组织中上述蛋白的表达。结果浸润性乳腺癌组织P-gp、LRP和MRP表达的相对荧光强度（RFI）以中位数（M）表示分别为0．58、0．51和0．56,而相应癌旁组织分别为0．26、0．33和0．30,癌组织耐药相关蛋白表达与相应癌旁组织比较差异有统计学意义（P〈0．05）。3种耐药相关蛋白的表达与患者的年龄、肿瘤大小、病理类型、临床分期和雌、孕激素受体均无相关性（P〉0．05）。有淋巴结转移组患者P—gp和MRP的表达分别为0．61和0．69,无淋巴结转移组患者分别为0．54和0．45,两者比较差异无统计学意义（P〉0．05）。但LRP表达在有淋巴结转移组患者（M=1．49）显著高于无淋巴结转移组患者（M=0．50,P〈0．05）。相关分析显示,乳腺癌组织LRP与MRP表达间存在正相关性（P〈0．05）。结论3种耐药相关蛋白在浸润性乳腺癌组织中表达的临床意义存在差别。LRP表达与淋巴结转移状况有关且与MRP表达呈正相关,可作为预测乳腺癌预后的指标。     

非小细胞肺癌血管内皮生长因子-C和Survivin蛋白的表达及其对患者预后的影响

【目的】研究血管内皮生长因子-C（VEGF-C）和survivin蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与肺癌生物学行为的关系。【方法】应用免疫组化方法检测77例NSCLC组织中VEGF—C和survivin蛋白的表达，分析其与肿瘤大小、肿瘤淋巴管密度（LVD）、组织类型、分化程度、淋巴结转移、临床复发情况和患者术后生存时间的关系。【结果】77例NSCLC组织中，有45例VEGF-C蛋白表达呈阳性（58．4％1；有41例survivin蛋白表达呈阳性（53．2％）。VEGF-C蛋白的阳性表达组肿瘤大小和LVD均高于阴性组（P〈0．05），VEGF-C蛋白的表达与患者术后生存时间呈负相关（P〈0．05）。Survivin蛋白的阳性表达组的LVD高于阴性组（P〈0．05）．survivin蛋白的表达与NSCLC淋巴结转移（r=0．324，P〈0．05）和临床复发呈正相关（r=0．233，P〈0．05），与患者术后生存时间呈负相关（P〈0．05）。VEGF-C和survivin蛋白在NSCLC组织中的表达之间呈正相关性f，=0．266．P〈0．05）。【结论】VEGF—C和survivin蛋白的表达与非小细胞肺癌的生物学行为具有相关性．它们的高表达提示非小细胞肺癌患者预后不良。     

肺腺癌组织中的耐药相关基因蛋白的表达及意义

目的检测P-gp，LRP。MRP在肺腺癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法采用S-P免疫组织化学方法，检测46例术前未做化疗的肺腺癌组织中P-gp、LRP、MRP的表达水平。结果肺腺癌组织中P-gp、LRP、MRP表达阳性率分别为78．26g，89．13％，43．48％，均显著高于正常肺组织（P〈0．005）。三种耐药基因相关蛋白在肺腺癌中可协同表达，二种耐药基因蛋白及二种以上程度耐药表达率为89．13％。P-gp、LRP、MRP的表达与年龄、分化程度及淋巴结转移无密切相关性（P〉0．05）。结论肺腺癌对转运蛋白类耐药基因有较强的耐药性，检测P-gp、LRP、MRP的协同表达对于指导临床化疗方案的实施有重要意义。     

缺氧诱导因子1α及凋亡相关蛋白Survivin、Bax在肺非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）在肺非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及与凋亡相关蛋白Survivin、Bax表达的关系。方法采用免疫组织化学方法检测52例NSCLC组织中HIF-1α和Survivin、Bax的表达。结果NSCLC组织中HIF-1α、Survivin、Bax的阳性表达率分别为38．5％（20／52）、48．1％（25／52）和42．3％（22／52）。HIF-1α的表达与肿瘤临床分期（x^2=8．271,P〈0．05）及淋巴结转移（x^2=6．370,P〈0．05）相关,与肿瘤病理类型（x^2=0．561,P〉0．05）及分化程度（x^2=0．326,P〉0．05）无明显相关性。HIF-1α的表达与Survivin表达（1=0．496,P〈0．05）和Bax表达（γ=0．681,P〈0．05）正相关。结论HIF-1α表达与NSCLC的浸润性发展、转移及凋亡发生密切相关。     

Survivin蛋白在非小细胞肺癌组织表达及与COX-2蛋白的关系

目的研究Survivin和COX-2蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）组织表达及与NSCLC生物学行为的关系。方法应用免疫组化方法检测77例NSCLC组织中survivin和COX-2蛋白的表达情况，分析其与肿瘤大小、肿瘤淋巴管密度（LVD）、组织类型、分化程度、淋巴结转移、临床复发情况和术后生存时间的关系。结果77例NSCLC组织中，Survivin蛋白表达呈阳性41例，阳性率为53．2％。Survivin蛋白的表达与NSCLC的LVD、淋巴结转移、临床复发呈正相关（P〈0．05），与患者术后生存期呈负相关（P〈0．05）。COX-2蛋白表达阳性29例，阳性率为37．7％；COX-2蛋白的表达与LVD呈正相关（P〈0．05），与患者术后生存时间呈负相关（P〈0．05）。Survivin和COX-2蛋白在肿瘤中的表达之间呈正相关（r=0．438，P〈0．001）。结论Survivin和COX-2蛋白的表达与NSCLC患者的预后密切相关；二者在NSCLC中的抑制癌细胞凋亡方面可能存在共同的激活机制。     

TLR4与NF-kB在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的检测TLR4与NF—kB在非小细胞肺癌（NSCLC）组织和正常肺组织中的表达情况，探讨其临床意义。方法采用免疫组化方法检测TLR4与NF—kB在49例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中的表达，分析TLR4和NF—kB与非小细胞肺癌病理分级。临床分期、淋巴结转移等的相关性以及TLR4和NF—kB之间的相关性。结果TLR4和NF—kB在NSCLC组织中的表达阳性率分别为55．1％和69．4％，均显著高于正常肺组织中的15％和10％（P〈0．05）。同时还发现TLR4的表达与肿瘤的分化程度密切相关（P〈0．05），NF—kB在腺癌中的表达明显高于鳞癌（P〈0．05），TLR4和NF—kB的表达呈正相关（P〈0．05）。结论TLR4与NF—kB可能在NSCLC的发生、发展过程中起重要作用。     

VEGF-C和MMP-2蛋白表达对非小细胞肺癌预后的影响

目的研究血管内皮生长因子-C（VEGF—C）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与肺癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化方法检测42例NSCLC组织中VEGF—C和MMP-2蛋白的表达情况．分析其与肿瘤大小、肿瘤淋巴管密度、组织类型、分化程度、临床分期、临床复发、淋巴结转移情况和术后生存时间的关系。结果42例NSCLC组织中．有23例VEGF—C蛋白表达呈阳性，阳性表达率为54．8％；有26例MMP-2蛋白表达呈阳性．阳性表达率为61．9％。VEGF-C蛋白的表达与淋巴管密度、淋巴结转移呈正相关（P〈0．05），与组织分化程度、患者术后生存时间呈负相关（P〈0．05）。MMP-2蛋白的表达与NSCLC的淋巴结转移正相关（P〈0．05），与患者术后生存时间呈负相关（P〈0．05）。VEGF—C和MMP-2蛋白的表达之间呈正相关（r=0．469，P〈0．05）。结论VEGF—C和MMP-2蛋白的表达与NSCLC的生物学行为具有相关性，它们的高表达提示NSCLC患者容易出现淋巴结转移和预后不良。     

非小细胞肺癌Bcl-2及Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

①目的探讨非小细胞肺癌Bcl-2、Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系。②方法采用SABC免疫组化法检测43例非小细胞肺癌及20例癌旁正常肺组织Bcl-2、Bax蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平；用TUNEL法检测细胞凋亡情况。③结果肺癌组织Bcl-2蛋白的表达显著高于癌旁肺组织（x^2=4．74，P〈0．05）；肺癌组织Bax蛋白的表达显著低于癌旁肺组织（x^2=5．65，P〈0．05）；肺癌组织中细胞凋亡指数（AI）和增殖指数（MI）均明显高于癌旁正常肺组织（t=8．28、9．62，P〈0．01）；Bcl-2蛋白表达阳性的肺癌组织AI明显低于表达阴性组（t=2．41，P〈0．05）；Bax蛋白表达阳性的肺癌组织AI明显高于表达阴性组（t=2．62，P〈0．05）；Bcl-2、Bax蛋白的表达均与MI无关（t=0．70、0．22，P〉0．05）。④结论Bcl-2蛋白具有抑制肺癌细胞凋亡作用，而Bax蛋白具有促进肺癌细胞凋亡作用，因肺癌组织存在Bcl-2蛋白表达上调，Bax蛋白表达下调，导致细胞增殖和凋亡失衡，在肺癌发生、发展过程中可能具有重要作用。     

MMP-9、VEGF在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 检测、评价MMP-9、VEGF在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义.方法 采用免疫组化染色技术检测46例NSCLC手术患者肿瘤组织中的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)阳性表达率,与同一病例组来源正常肺组织中的相关因子阳性表达率进行统计学分析;采用酶联免疫吸附方法检测患者术前、术后第1、3、7、10、14天的MMP-9、VEGF血清浓度,并进行统计学分析.结果 NSCLC组织中MMP-9、VEGF的阳性表达率较正常肺组织阳性率高,差异有统计学意义(P＜0.01);NSCLC组织中MMP-9、VEGF阳性表达者年龄、性别差异无统计学意义(P＞0.05);NSCLC组织中MMP-9在腺癌的阳性表达高于鳞癌,两者差异有统计学意义(P＜0.05),VEGF在腺癌的阳性表达略高于鳞癌,但差异无统计学意义(P＞0.05);TNM分期中Ⅰ期与Ⅱ、Ⅲ期MMP-9、VEGF在肿瘤组织中阳性表达组间差异有统计学意义(P＜0.01或0.05);不同分化程度的NSCLC组织中MMP-9、VEGF的阳性表达高分化与中、低分化组间差异有统计学意义(P＜0.01);有淋巴结转移的NSCLC,其MMP-9、VEGF在肿瘤组织中阳性表达较无淋巴结转移的高,组间差异有统计学意义(P＜0.05);术前、术后1、3、7、10、14天MMP-9、VEGF血清浓度除MMP-9术后第10与14天比较(P＞0.05)以外,其他各组间比较均有统计学意义(P＜0.01).结论 NSCLC组织中MMP-9、VEGF出现较高表达,并与NSCLC组织学分型、分期、分化程度、侵袭转移情况密切相关,可作为评估NSCLC侵袭、转移和预后的参考指标.但NSCLC原发肿瘤切除术后血清VEGF、MMP-9表达水平较术前显著升高,不能直接作为NSCLC原发肿瘤切除术后的围手术期判定指标.     

非小细胞肺癌GRIM-19和STAT3的表达及临床意义

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）GRIM-19和STAT3蛋白的表达及与临床病理因素的关系。方法：应用免疫组化ABC法检测GRIM-19和STAT3在49例NSCLC及20例正常肺组织中的表达。结果：NSCLC中GRIM-19和STAT3的阳性率分别为55.1%（27/49）和65.3%（32/49）,正常肺组织中表达阳性率分别为95%（19/20）和0%（0/20）,NSCLC与正常肺组织比较差异有显著性（P〈0.01）。GRIM-19的阳性表达与肿瘤组织的临床分期有关,Ⅰ-Ⅱ期的表达明显高于Ⅲ＋Ⅳ期（P〈0.05）;STAT3的阳性表达与肿瘤组织的临床分期及是否有淋巴结转移有关,Ⅰ期、无淋巴结转移分别低于Ⅱ期、Ⅲ＋Ⅳ期和有淋巴结转移者（P〈0.05）。NSCLC中GRIM-19和STAT3的表达呈显著负相关（r=-0.647,P〈0.05）。结论：NSCLC中GRIM-19低表达与STAT3高表达共存,通过提高GRIM-19的表达抑制或阻断STAT3信号转导通路或能成为治疗肺癌的新途径。     

非小细胞肺癌中BRCA1、ERCC1和EGFR的表达及临床病理意义

目的研究BRCA1、ERCC1和EGFR在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及预后意义。方法用免疫组化ElivisionTM plus法,检测77例非小细胞肺癌和6例癌旁组织中BRCA1、ERCC1和EGFR的表达情况。结果非小细肺癌中BRCA1、ERCC1、EGFR在癌中的表达显著高于癌旁组织,且在癌中的表达具有正相关性;BRCA1、ERCC1在不同病理类型和分期中表达均无差异;BRCA1高表达组的生存期明显小于低表达组;EGFR有淋巴结转移组阳性表达率明显高于无淋巴结转移组;应用铂类药物化疗ERCC1低表达组的生存期明显明显长于高表达组。结论在NSCLC中BRCA1、ERCC1、EGFR在肺癌中的表达显著高于癌旁组织,BRCA1高表达组的生存期明显小于低表达组,EGFR高表达可能促进肿瘤的侵袭和转移,ERCC1是铂类治疗独立的预后因素,三项抗体的检测与预后和临床用药密切相关。     

CD44蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的：研究CD44在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义,并探讨其表达的相关性。方法：应用S-P免疫组化方法,检测75例非小细胞肺癌组织和25例正常肺组织中CD44蛋白表达水平。结果：CD44蛋白在肺癌组织中阳性表达49例,阳性率为65.33（;正常组织中阳性表达5例,阳性率为20.00（,两者比较差异有显著性（P（0.01）。CD44与肿瘤的临床分期、淋巴结转移和患者的生存期有明显相关性（P（0.05）。结论：CD44在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中均异常表达,与NSCLC的发生发展密切相关,可作为NSCLC诊断的标志物。CD44在NSCLC的发生发展中起协同作用,联合检测CD44表达对于临床选择高危复发病例,给予积极治疗,提高预后水平具有重要意义,并可作为建立NSCLC预后模型的重要指标。     

非小细胞肺癌Bcl-2、PCNA表达的临床研究

目的：探讨Bcl-2(B细胞淋巴瘤／白血病－2）和PCNA（增殖细胞抗核抗原）在非小细胞肺癌中发生、发展中的作用以及Bcl-2表达＋PCNA过表达与淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组化方法检测40例非小细胞肺癌Bcl-2和PCNA的表达，并研究该表达和肿瘤组织学类型、分化程度、TNM分期、既往慢性支气管、肺病病史等病理学特征之间的关系，以及Bcl-2表达＋PCNA过表达复合出现与淋巴结转移的相关性。结果：①Bcl-2和PCNA在非小细胞肺癌中的阳性表达率分别为35％（14／40）和755（30／40），其阳性率因TNM分期和组织分化程度的不同而不同；②Bcl-2和PCNA表达与鳞癌TNM分期显著相关（P＜0.05)；③PCNA表达与组织学类型，既往病史（慢性支气管、肺病病史）相关（P＜0.05)。④中分化－高分化肿瘤与低分化肿瘤的Bcl-2与PCNA的阳性表达率差异无显著性。⑤Bcl-2表达＋PCNA过表达复合出现，与淋巴结转移无关。结论：评估非小细胞肺癌Bcl-2、PCNA的表达情况有助于判断病人的预后，为进一步研究该类肿瘤的发生和发展，提供必要的理论依据。     

Overexpression of glucosylceramide synthase and its significance in the clinical outcome of non-small cell lung cancer

Background Glucosylceramide synthase （GCS）,an enzyme responsible for ceramide glycosylation,plays an important role in multidrug resistance （MDR） in some tumors in vitro; however,its expression and clinicopathological significance in non-small cell lung cancer （NSCLC） remains unclear.Methods We evaluated GCS expression in 116 paired tumor and adjacent non-cancerous tissues and 50 frozen tissues from patients with NSCLC using immunohistochemistry and western blotting,and explored the correlation between GCS and NSCLC clinicopathological characteristics and prognosis.We observed the association between GCS and the MDR proteins P-glycoprotein （P-gp） and lung resistance-related protein （LRP） to determine the link between GCS and MDR at the histological level.Results GCS expression was significantly upregulated in NSCLC tumors compared with non-cancerous tissue.There was high GCS expression in 75/116 tumor specimens （64.7％） and 16/116 non-cancerous specimens （13.8％）.High GCS expression was significantly associated with poor differentiation （P=0.01）,lymph node metastasis （P=0.004）,recurrence/ distant metastasis （P=0.006）,and chemotherapy resistance （P=0.025）.Multivariate analysis demonstrated that GCS immunopositivity was an independent risk factor for survival （P=0.018）.P-gp was expressed in 80/116 tumors （69.0％） and in 12/116 non-cancerous tissue specimens （10.3％; P=0.001）; LRP was expressed in 85/116 tumors （73.3％） and 19/116 non-cancerous tissue specimens （16.4％; P=0.001）.Importantly,the results demonstrated that increased GCS expression in NSCLC cancer specimens correlated with increased expression of P-gp and LRP,molecules known to stimulate cancer cell MDR （r=0.612 and 0.503,P=0.01 and 0.035,respectively）.Conclusion GCS upregulation might contribute to the development of NSCLC and could be a useful prognostic indicator and chemoresistance predictor for NSCLC patients.