中晚期大肠癌患者外周血单核细胞释放TNF的动态观察

用生物活性测定法观察了ＬＰＳ、ＩＦＮ－γ及ＬＰＳ＋ＩＦＮ－γ诱导正常人和中晚期大肠癌患者（ＰＢＭ）释放ＴＶＦ的动态变化．结果；在上述诱生剂诱导下正常人ＰＢＭ均可释放ＴＮＬ并且存在明显的时间效价关系，以ＬＰＳ＋ＩＦＮ－γ所诱生的ＴＮＦ活性最高。在中晚期大肠癌患者中单独应用ＬＰＳ或ＩＦＮ－γ均不能诱导ＰＢＭ释放ＴＮＦ，而ＬＰＳ和ＩＦＮ－γ联合作用ＰＢＭ后可使其分泌较高水平的ＴＮ；但其ＴＮＦ的动态变化与正常人有明显的不同。上述结果提示：中晚期大肠场患者ＰＢＭ释放ＴＮＦ的能力受到抑制或损害，经适当的诱导可在一定程度上改善和提高ＴＮＦ产量。     

不同激活剂对巨噬细胞肿瘤坏死因子－α产量及其基因表达的作用

研究γ－干扰素（ＩＦＮ－γ），ＴＮＦ－α和脂多糖（ＬＰＳ）或它们的联合应用诱导巨噬细胞产生ＴＮＦ－α及其ｍＲＮＡ表达的作用。ＬＰＳ和ＴＮＦ－α均能诱导巨噬细胞ＴＮＦ－α合成并伴随着ｍＲＮＡ表达。ＩＦＮ－γ虽能诱导ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达，却未能检测到其蛋白质合成．．ＩＦＮ－γ能协同ＴＮＦ－α增加ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达水平，而不能增加其蛋白质合成。ＩＦＮ－γ能协同ＬＰＳ增加ＴＮＦ－γｍＲＮＡ表达水平和蛋白质合成。     

中晚期大肠癌患者外周血单核细胞免疫活性的实验研究

探讨了中晚期大肠癌患者外周血单核细胞分泌、膜受体的表达及信使传递介质的变化及ＰＢＭ对ＮＤＶ修饰的大肠癌细胞株镣伤活性。结果表明：（Ⅰ）正常人单核细胞经诱导后均可释放和表达不同水平的ＴＮＦ和ＩＬ－２Ｒ，有明显的时间效价关系，其中以ＬＰＳ＋ＩＮＦ－γ联合作用效果最是有。（２）ＬＰＳ或ＩＮＦ－γ均不能诱导中晚期大肠者ＰＢＭ释放ＴＮＦ，也不能使其胞内游离Ｃａ＾２＋水平发生改变，同时亦不受Ａ２３１８７的影响     

细胞因子对人胃癌细胞胃癌相关抗原MG7Ag表达的调节

探讨细胞因子对人胃癌细胞胃癌相关抗原ＭＧ７Ａｇ表达的调节作用。用基因重组干扰素α（ＩＦＮ－α），干扰素γ（ＩＦＮ－γ），白细胞介素２（ＩＬ－２）和肿瘤坏死因子γ（ＴＮＦ－γ）体外诱导三株人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１，ＭＧＣ８０３和ＭＫＮ４５胃癌相关抗原ＭＧ７Ａｇ表达。ＩＦＮ－α和ＩＦＮ－γ对胃癌细胞ＭＧ７Ａｇ有促表达作用。ＩＬ－２对三株细胞ＭＧ７Ａｇ无调节作用；ＴＦＮ－α对细胞ＭＧ７Ａｇ表达调节是随     

人γ干扰素基因真核表达载体pZip—γ干扰素的构建

为构建逆转录病毒载介导的人γ干扰素（ＩＮＦ－γ基因真核细胞表达载体，将质粒ｐＧＥＭ－１－ＩＦＮ－γ用ＢａｍＨＩ酶切，分离回收入ＩＦＮ－γｃＤＮＡ片段，再定向克隆入逆转录病毒载体ｐＺｉｐ、Ｎｅｏ、ＳＶ（Ｘ）１。经酶切鉴定证实该片段已被正确克隆入ｐＺｉｐ．Ｎｅｏ．ＳＶ（Ｘ）１的ＢａｍＨＩ酶切位点，构建成ＩＦＮ－γ基因真核表达载体ｐＺｉｐ－ＩＦＮ－γ。ｐＺｉｐ－ＩＤＮ－γ的构建成功。为开展ＩＦＮ－γ基因     

人B7—1,IFN—γ双顺反子逆转录病毒载体的构建和表达

目的：制备免疫基因修饰的卵巢癌肿瘤疫苗。方法：利用口蹄疫病毒的内在性核糖体插入位点（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｒｉｂｏｓｏｍｅ ｅｎｔｒｙ ｓｉｔｅｓ,ＩＲＥＳ）,通过基因克隆技术构建人Ｂ７－１、ＩＦＮ－γ双顺反子逆转录病毒载体ＰＬＸＳＮ／Ｂ７－１ ＩＦＮ－γ。结果：将ＰＬＸＳＮ／Ｂ７－１ ＩＦＮ－γ转染逆转录病毒包装细胞,包装成病毒,经滴度测定后,转导卵巢上皮癌细胞系３Ａ０,筛选稳定表达克隆,ＲＴ－ＰＣＲ和免疫流式细胞测定均可证实Ｂ７－１、ＩＦＮ－γ在同一转导细胞的共表达。结论：口蹄疫病的ＩＲＥＳ可提供Ｂ７－１、ＩＦＮ－γ的共表达。     

重组干扰素γ及肿瘤坏死因子增强噬细胞产生超氧阴离子的初…

本文报道重组人博互（ＩＦＮ－γ），肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－ａ）及细菌内毒素（ＬＰＳ）刺激小鼠巨噬细胞，激发其产生超氧阴离子的能力。结果表明这两种细胞因子均可直接激发超氧阴离子的产生并呈剂量－时间依赖性；但内毒素无此作用。当肿瘤坏死因子或干扰素γ预激２４ｈ后再次激发可增强超氧阴离子产生；提示在炎症过程中，细胞因子诱导产生的超氧阴离子可能对胞内寄居病原菌及肿瘤细胞杀伤中起重要作用。     

γ—干扰素原核高效表达体系的建立

用基因重组的方法,将γ－ＩＦＮｃＤＮＡ 片段用ＥｃｏＲＩ单酶插入到原核表达载体ｐＢＶ２２０ 中,筛选得到带有正向串联了２个γＩＦＮｃＤＮＡ 片段的阳性重组质粒,转化大肠杆菌ＤＨ５α后,建立了γ－ ＩＦＮ 的原核表达体系。经温度诱导培养,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎ－ ｂｌｏｔ、ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ 光密度扫描检测证实：该体系可高效表达γ－ ＩＦＮ 蛋白,表达量占菌体可溶性蛋白的４０ ％以上。病变抑制法测活表明：表达产物具有γ－ ＩＦＮ 的抗病毒活性。这一体系的建立为大规模发酵生产γ－ ＩＦＮ 提供了可靠的工程菌株,为进一步研究其分离纯化工艺提供了重要的实验模型。     

结核性与肿瘤性胸腔积液IFN—γ活性的比较研究

用γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）单克隆抗体经ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测结核性与肿瘤性胸膜炎胸腔积液２６例ＩＦＮ－γ含量。结果显示：结核性显著高于肿瘤性（Ｐ〈０．０１）。     

细胞因子对内毒素刺激的原代培养大鼠肝细胞一氧化氮生成的 …

目的：观察细胞因子（ＩＬ－１β，ＩＦＮ－γ，ＴＮＦ－α）及细菌内毒素（ＬＰＳ）对原代培养大鼠肝细胞一氧化氮（ＮＯ）生成的影响。方法：用Ｇｒｉｅｓｓ反应法检测细胞培养上清ＮＯ含量，放射免疫分析法检测细胞内环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）水平。结果：３种细胞因子与ＬＰＳ单独或任意两种并不刺激肝细胞ＮＯ生成，但在上述３种细胞因子共同存在下，ＬＰＳ剂量依赖性（１～１００ｍｇ／Ｌ）及时间依赖性地（１２－４８ｈ）增加细     

IL—12对新生IFN—γ产生的影响

白细胞介素１２（ＩＬ－１２）是一种重要的细胞因子，由单核／巨噬细胞，Ｂ细胞产生，诱导Ｔ细胞和ＮＫ细胞产生γ干扰素（ＩＦＮ－γ）在细胞免疫反应发挥多种作用，新生儿产生ＩＬ－１２的能力鲜见报道，本用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测８例新生儿脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）ＩＬ－１２Ｐ４０ｍＲＮＡ和ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达，及ＥＬＩＳＡ法新生儿ＣＢＭＣ培养上清ＩＦＮ－γ浓度；并观察重组ＩＬ－１２     

乙型病毒性肝炎患者血清IFN—γ和TNF—α的检测及意义

探讨ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α在乙型病毒性肝炎发病中的作用。方法：采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法对９６例乙型肝炎患者和３０例健康献血员血清中ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α进行检测用ｔ检验进行统计学分析和相关性分析。     

IFN—γ和M—CSF对U937细胞表面分子表达的影响

为了研究Ｍ－ＣＳＦ（巨噬细胞集落刺激因子）和ＩＦＮ－γ（γ干扰素）对人原单核细胞系Ｕ９３７细胞表达ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡⅠ类和Ⅱ类抗原的影响，采用ＡＰＡＡＰ法半定量检测。结果表明：ＩＦＮ－γ和Ｍ－ＣＳＦ都能不同程度地提高４种表面分子的表达，且随刺激培养时间的延长而更加明显。两种细胞因子相比，ＩＦＮ－γ比Ｍ－ＣＳＦ刺激作用强     

儿童Graves病IFN—γ／IL—4水平失衡及意义

采用ＥＬＩＳＡ法对４２例Ｇｒａｖｅｓ病病儿细胞因子失衡及其与发病的关系进行研究。结果：（１）与正常组相比，初诊组ＩＦＮ－γ水平、ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显升高，ＩＬ－４水平明显降低（Ｐ〈０．００１或０．００２）；ＩＦＮ－γ抗体阳性组与阴性组相比，ＩＦＮ－γ水平、ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显降低（Ｐ〈０．０５），而ＩＬ－４水明显升高（Ｐ〈０．００１）；且ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值与血清Ｔ３和Ｔ４水平     

多发性硬化患者外周血单个核细胞IL—2,IFN—γ和TNF—αmRN…

应用逆转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）和狭缝印迹分子交发技术，研究１７例多发性硬化（ＭＳ）患者外周血单个核细胞ＩＬ－２，ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α的ｍＲＮＡ表达。结果发现存３种细胞因子的ｍＲＮＡ表达的高于健康对照组，治疗后病程处于稳定期的ＭＳ患者ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α的ｍＲＮＡ表达恢复正常水平，但ＩＬ－２ｍＲＮＡ仍保持高水平，此结果表明炎性细胞因子（ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α）参与ＭＳ发病过程，并可作为     

自然杀伤细胞的独立刺激信号——CD45分子交联

目的：探讨表面分子在自然杀伤（ＮＫ）细胞活化中的信号分子作用及其机制。方法：采用多种粘附分子单抗及配体刺激ＮＫ细胞，ＥＬＩＳＡ法定量检测刺激后ＮＫ细胞释放的γ干扰素（ＩＦＮ－γ）作为ＮＫ细胞活化指标，观察各种粘附分子在ＮＫ细胞释放ＩＦＮ－γ中的信号作用。结果：单一ＣＤ４５单抗刺激即可使ＮＫ细胞活化；两种分别为ＩｇＧ１，ＩｇＧ２ａ亚类的ＣＤ４５单抗及ＩｇＧ２ａ亚类ＣＤ４５单抗的Ｆ（ａｂ′）２均体现对     

ABC－ELISA法检测小儿哮喘γ－干扰素诱生水平及其意义

采用生物素－亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附分析技术（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）检测了哮喘患儿血浆和淋巴细胞诱生γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）水平。结果显示：患儿血浆ＩＦＮ－γ水平极低，外周血单个核细胞经植物血凝素（ＰＨＡ）刺激后，诱生ＩＦＮ－γ的水平仍明显低于正常对照组（Ｐ＜０．００１）。哮喘发作期血清总ＩｇＥ水平明显升高。提示患儿体内细胞因子产生失衡，ＩＦＮ－γ分泌减少与哮喘的发病、病程和易诱发病毒反复感染有一定关系，测定ＩＦＮ－γ水平可作为了解患儿免疫调节功能的一个有用指标。     

自身免疫病患者及肿瘤患者血清干扰素抗体的测定

用ｒＩＦＮ－α２ｂ和ｒＩＦＮ－γ作为抗原建立了检测血清中相应抗体的间接ＥＬＩＳＡ法。在１８８佝健康体检者中检出１例抗ｒＩＦＮ－α２ｂ阳性，２例抗ｒＩＦＮ－γ阳性。类风湿性关节炎患者。全身性红斑狼疮患者。混合性结缔组织病患者以及肿瘤物这二种ＩＦＮ抗体水平明显高于对照者。抗体检出率为２．９－６．３％。     

逆转录病毒介导IFN-γ基因对胆管癌细胞株的影响

目的：研究人ＩＦＮ－γ基因对胆管癌细胞株免疫原性的影响。方法：构建携带人ＩＦＮ－γ ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体ｐＺＩＰ－ＩＦＮ－γ,导入人胆管癌细胞系ＱＢＣ９３９,运用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ法分析ＭＨＣ Ｉ类分子的表达,体外混合淋巴细胞、肿瘤细胞培养（ＭＬＴＲ）和淋巴细胞杀伤试验研究导入ＩＦＮ－γ基因的ＱＢＣ９３９细胞免疫原性的变化。结果：Ｇ４１８阳性ＱＢＣ９３９－ＩＦＮ－γ细胞分泌ＩＦＮ－γ活性     

流式细胞术检测细胞内细胞因子方法的建立

目的建立流式细胞术检测细胞内细胞因子的方法。方法运用荧光标记的抗细胞表面抗原单抗及抗细胞因子单抗，结合固定、破膜处理技术，检测产生ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４的ＣＤ４＋、ＣＤ8＋细胞以及产生IＬ－１０的ＣＤ３＋细胞。同时以相应同种型ＩｇＧ染色细胞作为阴性对照，以确定细胞团于染色的特异性。结果产生ＩＦＮ－γ的ＣＤ４＋及ＣＤ８＋细胞明显多于产生ＩＬ－４的细胞，并且产生ＩＦＮ－γ的ＣＤ８＋细胞百分比较ＣＤ４＋细胞相对增多；同时产生ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４的ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞以及产生ＩＬ－１０的ＣＤ３＋细胞都较少。结论该方法可从单个细胞水平直接检测全血标本中Ｔ细胞亚群和单核细胞等细胞因子的分泌。