绿色木霉Tv04—2的筛选及其对人参立枯病菌拮抗机制的研究

用对峙培养法,筛选出1株对人参立枯病Rhizoctonia solani Kuhn具有较强拮抗作用的木霉菌株Tv04-2。显微观察发现,该菌株产生的大量较细的螺旋状菌丝对立枯茵具有缠绕作用,两种菌丝结合位点伴有细胞壁溶解现象。进一步研究发现,木霉菌孢子悬浮液、代谢液、难挥发性物质对人参立枯菌均有较高的抑制作用,而易挥发性物质对人参立枯菌的影响不显著。研究结果表明,木霉菌Tv04-2对人参立枯病菌的拮抗作用是营养、空间竞争、重寄生作用及代谢产物抗生作用的综合体现。     

绿色木霉Tv04—2的筛选及其对人参立枯病菌拮抗机制的研究

用对峙培养法，筛选出1株对人参立枯病Rhizoctonia solani Kuhn具有较强拮抗作用的木霉菌株Tv04—2。显微观察发现，该菌株产生的大量较细的螺旋状菌丝对立枯菌具有缠绕作用，两种菌丝结合位点伴有细胞壁溶解现象。进一步研究发现，木霉菌孢子悬浮液、代谢液、难挥发性物质对人参立枯菌均有较高的抑制作用，而易挥发性物质对人参立枯菌的影响不显著。研究结果表明，木霉菌Tv04—2对人参立枯病菌的拮抗作用是营养、空间竞争、重寄生作用及代谢产物抗生作用的综合体现。     

木霉菌剂对人参根部病害防治效果评价

目的研究木霉菌剂对人参根部病害的田间防治效果,以进一步推广使用。方法调查两种木霉菌剂的3种使用方法及不同使用浓度对人参生长及发病的影响,评价木霉菌剂推广使用的可能性,筛选木霉菌剂的合理使用方法。结果两种木霉菌剂不仅将人参种苗成活率和人参种子出苗率分别提高30%和16%以上,而且能有效控制人参根部病害的发生。结论两种木霉菌剂适宜大面积推广使用。蘸根法使用时,用Tv04-2制剂稀释5000倍,Th3080制剂稀释10000倍。浸种法使用木霉菌剂时,可用Tv04-2制剂和Th3080制剂均稀释5000倍。     

木霉菌对荆芥茎枯病菌的拮抗机制

目的:研究绿色木霉M3,Tv04-2菌株和哈茨木霉ThB菌株对荆芥茎枯病菌Phytophthora nicotianae的拮抗作用机制。方法:通过对峙培养、水解酶活性测定、抑菌物质检测等研究发现,3株木霉对荆芥茎枯病菌的拮抗机制包括竞争作用、重寄生作用和抗生作用。结果与结论:水解酶活性测定结果表明,3株木霉均能分泌葡聚糖酶和蛋白酶,其中M3菌株分泌的β-1,3葡-聚糖酶活性最高,ThB菌株分泌的蛋白酶活性最高;3株木霉菌均产生难、易挥发性抑菌物质。     

木霉菌对荒漠肉苁蓉茎腐病菌的拮抗作用

目的：初步研究康氏木梅（Trichodema koningii）、绿色木霉（T.virid）、哈茨木霉（T.harzianum）分别对荒漠肉苁蓉茎腐病菌（Fusarium sambucinum Fuckel）的拮抗作用。方法：进行了平皿对峙培养和载玻片对峙培养；并研究了3种木霉菌产生的挥发性和非挥发性代谢物对病原菌的抑制作用。结果：3种木霉菌均能抑制病原菌的生长，3者抑制能力大小依次为康氏木霉、绿色木霉、哈茨木霉；3种木霉菌产生的挥发性和非挥发性代谢物对病原菌生长有抑制作用。结论：为田间生物防治试验提供了理论依据。     

木霉菌对荒漠肉苁蓉茎腐病菌的拮抗作用

目的:初步研究康氏木霉(Trichodema koningii)、绿色木霉(T. virid)、哈茨木霉(T.harzianum)分别对荒漠肉苁蓉茎腐病菌(Fusarium sambucinum Fuckel)的拮抗作用.方法:进行了平皿对峙培养和载玻片对峙培养;并研究了3种木霉菌产生的挥发性和非挥发性代谢物对病原菌的抑制作用.结果:3种木霉菌均能抑制病原菌的生长,3者抑制能力大小依次为康氏木霉、绿色木霉、哈茨木霉;3种木霉菌产生的挥发性和非挥发性代谢物对病原菌生长有抑制作用.结论:为田间生物防治试验提供了理论依据.     

木霉菌对山豆根根腐病菌的拮抗作用

目的:研究木霉菌对山豆根根腐病菌茄腐镰孢S9(Fusarium solani)的拮抗作用,探讨生物防治菌在防治中药材土传病害上的应用前景。方法:采用生长速度法、对峙培养法研究哈茨木霉H2(Trichoderma harsianum)、绿色木霉M6(Trichoderma viride)和康宁木霉K1(Trichoderma koningii)对山豆根根腐病菌S9的拮抗作用,并讨论了其作用机理。结果:发现H2、M6竞争优势显著,生长速度分别是S9的1.43~2.72倍和1.43~1.95倍;K1的空间竞争优势较弱,生长速度不如S9。3种木霉菌对S9均有不同程度的拮抗作用,其中,M6和H2对S9的拮抗作用较强,即使在提前3 d接入病原菌的情况下,M6和H2对S9的抑制率仍能分别达100%和82.35%,拮抗系数均达Ⅰ级;K1对S9的抑制率为46.36%,拮抗系数为Ⅳ级。在显微镜下观察到木霉菌通过缠绕、寄生等方式使S9发生菌丝断裂、缢缩、消解等现象。结论:哈茨木霉和绿色木霉作为生防菌在防治中药材土传病害上具有深入开发的前景。     

人参病害生防微生物菌剂的抑菌活性评价

目的:明确12种市售微生物菌剂产品中分离菌株对人参黑斑病菌和人参灰霉菌的抑菌效果,为人参病害绿色防控提供参考依据。方法:采用稀释平板法从微生物菌剂中分离活体菌株;对峙培养法评价分离菌株的抑菌活性;十字交叉法测量菌落直径。结果:5种木霉菌剂产品中仅有1种分离到活体菌株,尽管该菌株对人参黑斑菌和人参灰霉菌的抑菌活性较高(抑菌率分别为65. 18%和76. 82%),但菌剂中活菌的分离数偏低。7种芽孢杆菌菌剂中均能分离到活体菌株,除微囊粒剂和水剂外,其他菌剂产品中活体菌株分离数均较高;上述分离菌株对人参黑斑菌和人参灰霉菌的抑菌活性低于木霉菌,抑菌率分别为27. 21%～33. 04%和10. 74%～29. 40%。结论:芽孢杆菌和木霉杀菌剂均具有防治人参病害的生防潜力,考虑菌剂产品的稳定性和环境耐受力,芽孢杆菌类微生物菌剂更适合人参病害的田间防控。     

应用木霉制剂防治几种药用植物病害的研究

目的 :应用木霉制剂防治几种药用植物病害。方法 :木霉菌对药用植物病原菌室内抑菌效果及木霉制剂温室和田间防治试验。结果 :拮抗作用测定中 ,木霉菌对黄芪根腐病菌、北沙参菌核病菌、西洋参立枯病菌、丹参根腐病菌及款冬花菌核病菌有较强的拮抗作用。温室盆栽及田间防治试验结果表明 ,木霉制剂对北沙参菌核病的防治效果分别为 83 .6 %和 72 .5 % ;对黄芪根腐病菌和西洋参立枯病菌的田间防治效果分别达到 80 %和 6 0 %。结论 :木霉制剂防治上述病害的田间施用量以 10 g·m^-2为宜 ,可以替代多菌灵等常用农药。应用木霉制剂防治药用植物病害中药材的规范化种植提供了技术保证。     

甘肃乌拉尔甘草野生与栽培品内生菌的分离及鉴定

目的：通过对甘肃乌拉尔甘草野生与栽培品内生菌的分离,对甘草同属不同品种内生菌的优势菌种进行初步鉴定,比较二者的生理活性差异。方法：采用NA、PDA培养基对甘草野生与栽培品内生菌进行分离和纯化,并以分离频率比较判断各自优势菌种。结果：野生甘草分离到内生细菌65株,内生真菌7株,优势菌种为青霉菌属和曲霉属;栽培甘草分离到内生细菌54株,内生真菌6株,优势菌种为青霉菌属;野生与栽培甘草的内生真菌分属于6个属,相同的有5个属,不同的2个属为丝核菌属和木霉属。结论：野生与栽培甘草具有相趋同数量和种类的内生细菌与内生真菌,但二者内生真菌的菌属及优势菌种存在明显差异。     

农田栽参模式中人参根腐病原菌鉴定与防治

根腐病是东北农田栽培人参的主要病害之一。该研究为明确引起该病害的病原菌类型,验证苏子粗提物对病原菌的抑制作用,为人参根腐病的防治提供依据。采用组织分离法从人参根腐病株中分离得到单菌株;形态学结果表明,该病原菌的分生孢子有2种形态,小型分生孢子呈镰刀形或长柱形,大型分生孢子呈卵圆形,且有明显分隔;分子生物学鉴定结果表明,通过Blast比对,该菌株18s r DNA扩增产物与Fusarium oxysporum已知序列(JF807402.1)的同源性为100%,确定该病原菌为尖孢镰刀菌F.oxysporum。利用牛津杯法评价苏子粗提物对尖孢镰刀菌的抑制作用,结果表明,当提取物质量浓度为0.50 g·L-1时抑菌效果较好,抑菌直径为11.75 mm。该研究确定农田栽参中根腐病的病原菌类型,为根腐病植物源农药的开发提供材料,保障农田栽参的顺利开展。     

Stem Blight Control of Schizonepeta tenuifolia Caused by Phytophthora nicotianae Using Trichoderma spp.

Objective To control stem blight disease of Schizonepeta tenuifolia caused by Phytophthora nicotianae. Methods The antagonist effect of 13 Trichoderma strains (including T. viride and T. harzianum) was evaluated upon mycelia growth of P. nicotianae. Trichoderma strains with high antagonistic activities against the pathogen were used to control stem blight of S. tenuifolia in the field. Results Of 13 Trichoderma strains tested, T. viride strain M3 showed maximum mycelia growth inhibition (83.2%) to the patho...     

不同生长时期人参根中3种氧化还原同工酶分析

目的 研究不同生长时期人参根中3种氧化还原同工酶的变化规律.方法 以5年生人参根为供试材料,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法得到人参根超氧化物歧化酶(SOD)同工酶、过氧化氢酶(CAT)同工酶和细胞色素氧化酶(CYT)同工酶的电泳胶片,并生成指纹图谱叠加图,对不同生长时期人参根中上述3种氧化还原同工酶图谱进行分析.结果 不同生长时期人参根中SOD同工酶和CYT同工酶的酶带条数存在明显差别,而CAT同工酶的酶带条数无明显变化,3种同工酶均具有各自的主要特征酶带.结论 SOD同工酶和CYT同工酶在人参果后参根生长期和枯萎期活性升高,CAT同工酶在人参生长发育的各个时期活性相对稳定.     

人参毛状根合成人参皂苷培养条件的优化

目的：对影响人参(Panax ginseng)状根生长及人参皂苷合成的培养条件进行了研究。方法：比较了不同培养基上人参毛状根和人参皂苷的含量变化。结果：人参毛状根在MS IBA0．5mg／l的培养液里预培养72h后，再转入MS基本培养液培养，经过6周的培养，人参总皂苷含量达到5．190％，人参皂苷(Re Rg)含量达到了0．3271％，人参毛状根干重增加98．74倍。结论：确定了最佳的培养基和培养条件，为工业化再生产提供了基础。     

镰形棘豆生物碱对临床9种致病菌的抑制作用研究

目的观察镰形棘豆生物碱提取物对9种常见致病菌的抗菌作用。方法以镰形棘豆为原料,提取生物碱,选择临床常见的4种革兰氏阳性菌和5种革兰氏阴性菌,采用琼脂扩散法对其体外抑菌活性进行评价,试管二倍稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果镰形棘豆生物碱提取物对9个菌种均有抑菌效果,抑菌作用敏感度与浓度呈良好的量效关系,其中对枯草杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌的抑菌效果优于其他各菌,MIC和MBC分别为0.95 mg/mL和1.91 mg/mL,而其他各菌种的MIC和MBC范围在1.91~7.63 mg/mL之间。结论镰形棘豆生物碱提取物具有较为广谱的抑菌作用,对革兰氏阳性菌的抑制作用比革兰氏阴性菌强。     

人参Ri质粒转化及代谢产物对HepG2细胞的作用

目的:发状根生产的次生代谢产物含量比植物自身合成的含量高几倍甚至几十倍,利用人参发状根可以生产大量人参皂苷,并有效的抑制癌细胞的增值。方法:通过正交试验设计筛选人参发状根诱导的条件,通过发状根生物积累量和皂苷含量的测定确定培养条件,然后利用MTT法测定了人参皂苷对HepG2细胞的影响。结果:本实验优化了人参发状根的最佳诱导条件,吸光度A 0.6,侵染时间为10 min,预培养时间为3 d,筛选出发状根的最佳培养条件,MS培养基,pH 6.1,24℃培养时,发状根的生物积累量和皂苷含量均较高,采用人参总皂苷对肝癌细胞HepG2的抑制效果进行研究,证实人参总皂苷对HepG2的抑制率与给药浓度呈正相关。结论:筛选出最适的人参发状根诱导及培养条件,不同部位的总皂苷对肝癌细胞HepG2的增殖均具有抑制作用。