染料木素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的研究染料木素（Gen）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并进一步阐明其机制。方法 40只SD大鼠,随机分为模型组、阴性对照组和Gen高剂量组（10 mg/kg）、Gen中剂量组（5 mg/kg）、Gen低剂量组（2.5mg/kg）。持续观察各组标准Ⅱ导联心电图（ECG）T波幅度变化情况,测定血清中乳酸脱氢酶（LDH）,磷酸肌酸激酶（CK）,丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）含量,确定心肌损伤程度。免疫组化法检测Bc l-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达。结果 Gen能降低大鼠心肌冠脉结扎后T波幅度抬高,降低LDH、CK和MDA水平,升高SOD水平,抑制Bax、Caspase-3的表达而增强Bc l-2的表达,减少心肌细胞凋亡。结论 Gen对冠脉结扎诱发的大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与抑制脂质过氧化,减少自由基损伤,上调Bc l-2蛋白表达,下调Bax、Caspase-3蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡有关。     

RP-HPLC测定细梗胡枝子中3种黄酮类有效成分

目的:建立一种高效液相色谱测定细梗胡枝子中槲皮素、芦丁、山柰酚含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Agilent 1100 ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),二极管阵列检测器(DAD),甲醇-0.2%磷酸溶液(60∶40)为流动相,检测波长251 nm,流速1.0 mL.min-1,柱温35℃。结果:槲皮素在0.210～4.19μg,芦丁在0.084～1.68μg,山奈酚在0.066～1.33μg,峰面积与进样量呈良好的线性关系;芦丁、槲皮素和山奈酚的加样回收率分别为99.48%,98.53%,99.33%,RSD分别为0.51%,1.35%,2.13%(n=5)。结论:该方法精密度高、重复性和分离效果较好,分析快速准确,适合于该药材及提取物中槲皮素、芦丁和山奈酚3种黄酮类含量的测定,可作为该药材质量控制的参考依据。     

荒漠肉苁蓉茎腐病的初步研究

目的分离和鉴定肉苁蓉茎腐病病原菌,研究其生物学特性,并室内筛选对该病原菌有效的杀菌剂。方法组织分离法和菌丝尖端纯化法得到主要病原菌,通过测量不同营养条件下菌落生长直径研究其生物学特性,平皿菌丝生长抑制法进行杀菌剂的生物测定。结果接骨木镰刀菌Fusariumsambucinum是肉苁蓉茎腐病的主要病原菌,为首次记录;适合其生长的培养基为PSA培养基,对碳和氮的吸收主要以蔗糖和蛋白胨为主,适宜生长温度为10～30℃,适宜生长pH为6～8;多菌灵、菌线威、绿享二号在室内可以有效地抑制病原菌。结论该病原菌的分离鉴定可以为该病害原的防治提供理论依据。     

铁苋菜提取物对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎结肠组织的保护作用

目的研究铁苋菜提取物对大鼠结肠炎组织损伤的修复保护作用及其机制。方法建立Wistar大鼠结肠炎模型,灌胃用药2周后,评价大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI),检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和细胞肿瘤因子(TNF)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)水平。结果不同剂量铁苋菜提取物(200、400、600mg.kg-1)灌胃均能不同程度降低模型大鼠CMDI、MPO活性,减少MDA含量,提高SOD活性,降低TNF、IL-8、IL-10水平,且与用药剂量呈一定量效关系。结论铁苋菜提取物通过拮抗氧化、免疫调节、损伤修复作用缓解结肠炎大鼠炎症反应,减轻结肠损伤。     

冷冻干燥法制备莪术油脂质体

采用叔丁醇-水共溶剂、冷冻干燥法制备莪术油脂质体,用单因素试验优化处方,并进行体外释放试验。结果表明,莪术油脂质体呈球形,包封率为(92.2±3.4)%,平均粒径为(457.3±7.8)nm,ζ电位为-23.6mV,体外48h累积释放率为94.1%。     

黄芩苷提取工艺中提取溶剂的研究

目的探讨黄芩中黄芩苷提取工艺的提取溶剂。方法采用高效液相色谱法,测定不同类型提取溶剂和不同浓度溶剂对黄芩中黄芩苷产率的影响。结果用30%乙醇提取黄芩中黄芩苷产率较高。结论该研究可以为生产中制定合理的工序时间提供实验依据,对生产具有一定的指导意义。     

红车轴草总异黄酮粉剂中总异黄酮含量测定研究

目的建立红车轴草总异黄酮粉剂中总异黄酮含量的测定方法，从而对该品进行质量控制。方法采用紫外分光光度法直接测定粉剂中总异黄酮含量，测定波长为250nm。结果回归方程为：Y=0．1312X＋0．0095，相关系数r=0．9997，平均回收率为98．3％，RSD为2．06％，线性范围为1．0040～5．0200mg／ml。结论紫外分光光度法测定该粉剂中总异黄酮含量结果准确、方便、快捷、重现性好。     

山绿茶中RA对HepG2肿瘤细胞抑制作用的实验研究

目的探讨中药山绿茶中乌苏烷三萜类化合物3β,19α-二羟基乌苏-12-烯-23,28-二羧酸(Rotundioic acid,RA)对肝癌细胞株HepG2细胞周期、凋亡的影响及其作用机制。方法人肝癌细胞株HepG2以RA(15,30,60,90mg.ml-1)作用不同的时间后,分别使用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT),吖啶橙(AO)荧光染色法,免疫细胞化学SP法,流式细胞术等实验方法检测HepG2细胞的增殖抑制情况、细胞周期和凋亡的形态学变化,以及细胞内半胱天冬酶-3(Caspase-3)、半胱天冬酶-9(Caspase-9)两个重要的细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果 RA对HepG2细胞有增殖抑制作用,其作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强。RA作用24 h后HepG2细胞周期的主要特点是大量细胞累积于G1期,进入S期的细胞减少,RA能够诱导HepG2细胞凋亡,RA(30,60,90 mg.ml-1)经过24 h作用后,细胞凋亡率为8.19%,8.67%,9.81%,细胞内Caspase-3蛋白的表达随着药物浓度增加逐渐增加;Caspase-9的表达随着药物浓度增加无明显变化。结论 RA能够抑制HepG2细胞的增殖,并使细胞大量累积于G1期,进入S期的细胞减少;Caspase-3蛋白的表达增加来诱导细胞凋亡。     

藤梨根中乌苏烷三萜化合物A对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

目的:从赣南藤梨根中提取分离得到乌苏烷三萜化合物A(2β,3β,23-三羟基~(-1)2-烯-28-乌苏酸,ursolic compound A),研究其对人宫颈癌He La细胞株的增殖抑制作用。方法:应用E-MEM培养基建立宫颈癌He La细胞体外培养体系,将4种不同浓度(0.5,1.0,2.0,4.0μmol·L~(-1))的ursolic compound A作用后的宫颈癌细胞(每孔含2 000细胞)在96孔细胞培养板上培养24,48 h;细胞活力采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测,乳酸脱氢酶(LDH)活性用噻唑蓝(MTT)法测定,肿瘤细胞增殖情况采用免疫比色法检测。结果:与对照组相比,用0.5~4.0μmol·L~(-1)ursolic compound A处理过的He La细胞,其乳酸脱氢酶释放率随着剂量增大和时间延长而增加(P0.05,P0.01);CCK-8和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)检测结果表明,化合物A比对照药物抗宫颈癌活性相对较强,作用效果呈浓度与时间依赖性,宫颈癌细胞的活性也相应不断下降,同时该化合物对宫颈癌细胞株的增殖抑制作用也较明显(P0.05,P0.01)。结论:Ursolic compound A对HeLa细胞增殖有一定抑制作用。