具抗氧化活性的中药有效组分的配伍研究

目的:以4种中药有效组分配伍的抗氧化活性为研究对象,探索适合中药多组分多指标"组效关系"的研究方法。方法:基于LARS回归算法和综合权重分析方法,按照均匀试验设计-药效试验-数学建模(模型验证)-综合药效评价程序,进行甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷4个中药组分不同配伍剂量体外清除DPPH和多环芳烃的研究。结果:采用改进最小角回归分析和综合权重法,评价清除DPPH和多环芳烃的最优综合药效,中药组分配伍最佳剂量组合为甘草总黄酮-银杏叶提取物-淫羊藿总黄酮-黄芪总苷(1∶0.254 5∶0.007 6∶0.011 5)。结论:上述中药组分配伍能有效清除多环芳烃和DPPH,具有良好的抗氧化作用。本实验采用的均匀设计结合综合权重法,适合"非线性、小样本"生物实验数据分析,是进行中药组分配伍筛选评价的适合研究方法。     

清除致癌物多环芳烃的中药组分复方配伍研究

目的:基于均匀设计方法研究多种中药有效组分体外清除致癌物多环芳烃的最佳配伍作用.方法:采用改进最小角(least angle regression,LABS)回归分析,通过荧光光谱法进行甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷4个中药组分不同配比清除多环芳烃的作用研究.结果:通过LRAS回归分析获得了中药组分配伍清除多环芳烃的回归方程,优化组合后进行药效学验证,结果显示该中药组分配伍最佳剂量组合为甘草总黄酮3.144 g·L-1、银杏叶提取物0.8g·L-1、淫羊藿总黄酮0.024 g·L-1和黄芪总苷0.036 g·L-1.结论:上述中药组分配伍后能有效清除致癌有害物质多环芳烃;本实验采用的均匀设计结合荧光光谱检测方法,为筛选评价中药组分配伍清除致癌物多环芳烃的作用提供了合适的研究方法.     

5种中药组分配伍体外清除多环芳烃和自由基的研究

目的:研究中药方剂组分配伍体外清除多环芳烃(PAHs)和自由基等致癌物质的作用.方法:按照均匀试验设计-药效试验-数学建模(模型验证)药效评价程序进行银杏叶提取物、甘草总黄酮、淫羊藿总黄酮、黄芪总苷和麦冬总皂苷5个中药组分不同配伍剂量体外清除PAHs和自由基的研究.结果:以清除1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)、PAHs、羟自由基和超氧阴离子自由基的综合作用为指标,5味中药组分配伍后药效作用要强于单味药组分,其最佳配比剂量为甘草总黄酮0.8g·L-1、银杏叶提取物3.144 g·L-l、淫羊藿总黄酮0.024 g·L-l、黄芪总苷0.036 g·L-l和麦冬总皂苷0.024 g·L-l.配伍最佳比例约为33∶ 131∶1∶1.5∶1.结论:中药组分配伍可进一步提高特定中药组分体外清除多环芳烃和自由基等致癌物质的作用,可使中药组分在减少此类物质对人群的危害方面发挥更好的作用.     

中药组分清除烟气有害物质及降低细胞毒性的研究

目的:研究中药组分体外清除多环芳烃、亚硝胺和自由基等烟气有害物质以及降低烟气细胞毒性的作用,为中药组分用于减少烟气危害发挥保健作用提供研究依据。方法:采用分光光度法检测中药组分对DPPH自由基、超氧阴离子和羟自由基的清除作用;以荧光光谱法测定各组分对多环芳烃的清除作用;以紫外分光光度法测定各组分对挥发性亚硝胺形成的抑制作用;并与抗坏血酸的作用进行比较;采用MTT法检测中药组分影响烟气造成的BEP2D细胞毒性作用。结果:所有中药组分均表现出一定的清除上述多种有害物质的作用,其综合清除能力以银杏叶提取物、甘草总黄酮、原花青素、麦冬总皂苷、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷为好。以上6种中药组分可显著降低烟气造成的BEP2D细胞的细胞毒性,表现为细胞活存率(SF)显著上升,细胞平均致死剂量(DML)显著增加。结论:上述中药组分有良好的清除多环芳烃、亚硝胺和自由基等烟气有害致癌物质的作用,在减少烟气对人群的危害和预防烟草引起的各种疾病的发生中可发挥重要保健作用。     

淫羊藿多糖抗氧化性研究

目的:观察比较不同种淫羊藿多糖的抗氧化活性。方法:测定不同品种淫羊藿多糖的羟基自由基的清除能力、DPPH自由基的清除能力、金属离子螯合能力和还原能力。结果:朝鲜淫羊藿多糖清除羟基自由基能力最好;DPPH法中在0.4mg/mL时清除率达最高,巫山淫羊藿多糖清除率最高;巫山淫羊藿多糖的金属离子螯合能力最高;巫山、朝鲜、湖南、川鄂淫羊藿多糖的FRAP值分别为0.166、0.411、0.237、0.236。结论:体外抗氧化实验结果表明,不同品种淫羊藿多糖均具有较好的抗氧化活性,其中朝鲜淫羊藿多糖抗氧化能力最好,巫山淫羊藿多糖的抗氧化能力次之。     

枳实提取物的体外抗氧化作用研究

目的研究枳实提取物的体外抗氧化作用.方法采用羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的生成体系,研究枳实提取物及以柚皮苷为对照,对自由基的清除能力和对小鼠肝、肾、心组织匀浆的脂质过氧化抑制作用.结果枳实提取物对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的清除分别为IC50＝2.71 mg/ml,SC50＝5.02 mg/ml,DC50＝0.54 mg/ml;柚皮苷分别为IC50＝45.94 mg/ml,SC50＝10.16 mg/ml,DC50＝9.62 mg/ml.枳实提取物对小鼠肝、肾、心组织匀浆的脂质过氧化抑制作用分别为0.58、1.03、0.69 mg/ml;柚皮苷EC50分别为9.87、11.04、10.40 mg/ml.研究表明枳实提取物较柚皮苷具有强的清除自由基及抑制脂质过氧化的能力.结论枳实提取物能有效清除羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基,抑制脂质过氧化作用,具有进一步研究和开发价值.     

不同干燥方式对淫羊藿黄酮类成分含量及抗氧化活性影响

目的比较不同干燥方式对淫羊藿黄酮类成分含量及抗氧化活性的影响,优选淫羊藿的最佳干燥方式。方法分别采用冷冻干燥、阴干、微波干燥、炒干、蒸制后阴干以及不同温度(50、75、100、125、150、175、200℃)烘干的方式,制得12个样品。以淫羊藿黄酮类成分含量、醇浸出物含量、指纹图谱中共有峰峰面积与称样量的比值和(比值和)及自由基清除能力为指标进行评价。结果不同干燥方式对5种黄酮朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷I的含量影响较大,微波干燥样品(S10)中5种黄酮总量最高;冷冻干燥样品(S8)的总黄酮含量和醇浸出物含量最高;175℃烘干样品(S6)的比值和最高;以上述4个指标进行综合评分,发现微波干燥样品(S10)的综合得分最高。自由基清除实验表明微波干燥样品(S10)的稀乙醇提取物对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除能力最强,高温烘干样品(S5～S7)对羟自由基的清除能力较强。结论综合考虑黄酮类成分含量和抗氧化活性,建议淫羊藿最佳的干燥方式为微波干燥,但是微波干燥是否能用于淫羊藿工业生产的干燥步骤,有待进一步研究。     

益肝颗粒及淫羊藿中淫羊藿苷大鼠体内药动学研究

目的:利用反相高效液相色谱法,研究益肝颗粒与淫羊藿提取物中淫羊藿苷在大鼠体内的药代动力学差别,探讨配伍对药效成分代谢的影响.方法:大鼠分别灌胃益肝颗粒、淫羊藿提取物后,于不同时间点尾静脉采血,通过建立的反相高效液相色谱及样品处理法,检测大鼠血浆中淫羊藿苷的浓度.采用药动学程序3P87对所得浓度结果进行统计处理,确定药动学模型及相关药代动力学参数.结果:益肝颗粒及淫羊藿中淫羊藿苷在大鼠体内呈二室开放模型,益肝颗粒与淫羊藿提取物在Tmax、Cmax、AUC、t1/2(a)、CL指标上比较,差异均有统计学意义.结论:复方对淫羊藿苷的体内过程有显著的影响,益肝颗粒中淫羊藿苷在大鼠体内的吸收增加,分布及达峰时间延长,血浆清除减少,生物利用度较淫羊藿药材高,产生的原因可能与复方中其他成分的相互作用有关.     

淫羊藿提取物抗动脉粥样硬化作用研究进展

淫羊藿是我国传统中药,近年来研究表明,中药淫羊藿提取物如淫羊藿总黄酮、淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ等能够通过多种机制抑制动脉粥样硬化的发展,包括调节脂质代谢、保护血管内皮、抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移、抑制巨噬细胞源性泡沫细胞形成和炎症反应,本文综述淫羊藿提取物抗动脉粥样硬化作用的研究进展,为淫羊藿及其相关制剂的开发利用及临床运用提供参考。     

复方别敏中黄芩苷、淫羊藿苷和黄芪甲苷配伍比例的优化

目的:探讨复方"别敏"中黄芩苷、淫羊藿苷与黄芪甲苷3种成分合用的优化配伍比例。方法:采用卵清蛋白腹腔注射建立变应性鼻炎小鼠模型,以脾淋巴细胞增殖反应为指标,利用四唑氮氢氧化物法确定黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷各成分的有效剂量范围;选用U1*0(108)表组方设计所得的3种成分的10种组合进行干预,考察其对脾淋巴细胞增殖的抑制效应,经逐步回归统计分析,获得3种成分合用的最佳配比;通过淋巴细胞增殖反应和对淋巴细胞培养上清液中细胞因子含量检测,验证3种成分的最佳配伍效应是否优于各单一成分。结果:2～10μmol/L黄芩苷、2～10μmol/L淫羊藿苷和1～10μmol/L黄芪甲苷明显抑制致敏小鼠脾淋巴细胞增殖;当黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷以1:2.14:2.65比例配伍时,抑制细胞增殖的效应最明显;进一步的验证研究证实,该配伍对ConA刺激的淋巴细胞增殖的抑制效果及对淋巴细胞上清液中白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、IL-5和γ干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)的调节作用明显优于黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷单用的效果(P0.05,P0.01)。结论:复方"别敏"中主要有效成分黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷按优化比例合用可最有效地抑制致敏小鼠脾淋巴细胞增殖,调节因变态反应引起的Th1、Th2型细胞因子失衡。     

峨参总黄酮体内外抗氧化作用的研究

目的：研究峨参有效部位总黄酮清除羟基自由基和抑制超氧阴离子的作用,以及对D-半乳糖致衰老模型脾脏和肾脏的影响。方法：采用Fenton法产生羟基自由基模型和邻苯三酚自氧化体系,分别测定峨参总黄酮对羟基自由基的清除能力和超氧阴离子的抑制能力;颈部皮下注射D-半乳糖造小鼠衰老模型,研究总黄酮的体内抗氧化作用。结果：峨参总黄酮在27.5-800μg/mL浓度内,清除羟基自由基和抑制超氧阴离子均有较好的量效关系,清除率和抑制率均随浓度的增加而增大,且最大清除率达32.88%,最大抑制率为24.87%;由D-半乳糖造成的小鼠衰老模型,与空白组相比,脾脏和肾脏的模型组MDA含量均升高,SOD活性均降低,有极显著差异（P〈0.05）。结论：峨参总黄酮具有较好的体外抗氧化能力;同时体内抗氧化效果也很显著。     

山楂总黄酮对酒精诱导小鼠酒精性肝病的影响

目的 研究山楂总黄酮对酒精诱导小鼠酒精性肝病的影响.方法 以56％体积分数白酒（1.5ml·100g-1）体重造模6周后,随机分组,山楂黄酮低、中、高剂量组（5,10,20g·kg1）和联苯双酯组（0.6g·kg1）,在酒精继续灌胃的基础上,按剂量给药,1次·d-1,共12周.检测小鼠血清和肝组织中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、肝匀浆中肿瘤坏死因子（TNF-α）含量.结果 山楂总黄酮对酒精诱导小鼠酒精性肝病形成后SOD、GSH-PX的活性含量有回升作用,并能阻止与肝病相应的ALT、AST活性及降低MDA、NO、TNF-a含量.结论 山楂总黄酮对酒精诱导小鼠酒精性肝病有预防作用,可能与其抗氧化和免疫调节作用有关.     

银杏酮酯对离体心肌缺血再灌注损伤血流动力学的影响

目的 在离体大鼠心肌缺血再灌注模型上,观察银杏酮酯（GBE50）对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的血流动力学的影响,并探讨其机制.方法 建立改良的Langendorff离体大鼠心脏灌注模型,平衡灌注30 min,缺血30 min,再恢复常速灌注40 min,造成心肌缺血再灌注损伤.用3组不同浓度的银杏酮酯 （12.5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L）进行灌流,观察停灌前、再灌5 min、再灌10 min、再灌20 min、再灌40 min时,心率（HR）、左心室收缩峰压平均值（mLVSP）、左心室等容收缩和舒张期压力平均值（±dp/dtmax）的变化;冠脉流量（CF）、冠脉流出液超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）的变化.结果 用银杏酮酯灌流缺血的心脏后,与模型组比较,mLVSP、±dp/dtmax分别增加;平均冠脉流量增加,冠脉流出液中LDH含量均明显减少（P〈0.05或P〈0.01）,SOD含量显著升高（P〈0.05或P〈0.01）.结论 银杏酮酯对离体的缺血再灌注损伤心脏有保护作用,其作用可能与抗氧化机制有关.     

淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠氧化应激水平的相关研究

目的探讨淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠体内过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达水平和氧化应激水平的影响。方法将健康SD雄性大鼠35只随机分为普通饲料组9只和高脂饮食组26只。高脂饮食组给予高脂饲料喂养12周后复制高脂血症大鼠模型。造模成功后随机分为模型对照组8只、淫羊藿大剂量组(200 mg/d)9只及淫羊藿小剂量组(100 mg/d)9只,干预4周后观察各组大鼠血脂水平,检测各组大鼠的超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)水平及PPARγ的表达水平。结果模型对照组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平均明显高于普通饲料组(P<0.01)。淫羊藿总黄酮大、小剂量组TG、TC水平均明显低于模型对照组(P<0.05,P<0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组对TG、TC水平的改善较淫羊藿总黄酮小剂量组更为明显(P<0.05)。淫羊藿总黄酮大、小剂量组对高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的影响无统计学意义(P>0.05)。模型对照组大鼠干预后SOD活性较普通饲料组降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01)。淫羊藿总黄酮大、小剂量组SOD活性均较模型对照组升高(P<0.01),MDA水平降低(P<0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组较淫羊藿总黄酮小剂量组更能明显增加SOD活性(P<0.01)和降低MDA水平(P<0.01)。模型对照组大鼠干预后PPARγ表达水平较普通饲料组明显降低(P<0.05)。淫羊藿总黄酮大、小剂量组大鼠PPARγ表达水平均较模型对照组明显升高(P<0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组升高明显(P<0.01)。结论淫羊藿总黄酮能够提高高脂血症大鼠血清SOD水平,降低MDA水平,改善氧化应激,对内皮有保护作用,其机制可能是上调体内PPARγ的表达水平。     

硫熏对中药饮片质量的影响研究

目的观察硫熏对中药饮片质量的影响。方法材料选取18kg药材（9kg当归及9kg党参）,设计L9（33）正交表,依表对样品进行硫熏,观察硫熏后所有样品的SO2平均残留量;观察不同量硫磺及不同熏制时间下,中药饮片的SO2平均残留量;硫熏前后有效成分含量比较。结果在整体设计表中,方案6的SO2平均残留量为716.55mg/kg;在不同硫磺水平中,采用C3水平熏制的中药饮片SO2平均残留量为682.64mg/kg;在不同硫磺熏制时间下采用B2水平熏制的中药饮片SO2平均残留量为817.87mg/kg;硫熏后两种成分的含量均显著减少。结论硫熏对中药饮片的质量具有一定影响,且严重程度与硫磺使用量呈正相关,中药饮片贮存应尽量控制SO2用量,或采用无硫贮存法。     

淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠血清NO、MPO的影响

目的探讨淫羊藿总黄酮降脂及改善氧化应激、炎症对内皮功能的损伤机制。方法 35只刚断乳的SD雄性大鼠经高脂喂养12周后,根据体重随机分为淫羊藿总黄酮大剂量组（9只）和淫羊藿总黄酮小剂量组（9只）和高脂组（8只）,干预4周后检测空腹总胆固醇（TG）、三酰甘油（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、一氧化氮（NO）、髓过氧化物酶（MPO）并设普食对照组（9只）。结果高脂组TG、TC、MPO较对照组明显升高（P〈0.01）;淫羊藿总黄酮组TG、TC明显下降;模型组血清NO明显低于对照组和淫羊藿总黄酮组（P〈0.05或P〈0.01）。血清MPO水平淫羊藿总黄酮组较模型组明显下降（P〈0.01）。淫羊藿总黄酮大剂量组较小剂量组下降明显（P〈0.05）。结论血清NO和MPO可能介入高脂饮食氧化应激损伤血管内皮。淫羊藿总黄酮能够从一定程度上改善高脂饮食造成的氧化应激增加所致的内皮损伤,该作用可能通过提高NO水平,降低MPO相关。     

黄连解毒汤有效部位对脑缺血大鼠神经元MAP-2、PGP9.5表达及星形胶质细胞活化的影响

目的：观察黄连解毒汤有效部位（总生物碱、总黄酮、总环烯醚萜）对局灶性脑缺血大鼠神经元MAP-2、PGP9.5表达及星形胶质细胞活化的影响,探讨其对神经元-胶质细胞网络的调控作用.方法：中动脉栓塞法建立局灶性脑缺血大鼠模型,SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄连解毒汤水提物组（800 mg/kg）、总生物碱组（44mg/kg）、总黄酮组（50mg/kg）、总环烯醚萜组（80mg/kg）,每天灌胃给药1次,连续给药7天.免疫荧光染色结合图像分析技术检测脑缺血大鼠梗死灶周围皮层MAP-2、PGP9.5及星形胶质细胞活化标志蛋白GFAP的表达.结果：脑缺血7天大鼠PGP9.5表达下调,GFAP表达增强,差异较假手术组明显（P＜0.01）;与模型组相比,黄连解毒汤水提取物组大鼠梗死灶周围神经元MAP-2表达明显上调,GFAP表达下调（P＜0.01或P＜0.05）;总生物碱、总黄酮、总环烯醚萜均可明显上调缺血大鼠梗死灶周围皮层MAP-2、PGP9.5表达,较模型组有统计学差异（P＜0.01或P＜0.05）.总生物碱还可明显下调GFAP表达,较模型组具有显著性差异（P＜0.01）.结论：黄连解毒汤有效部位总生物碱可减轻神经元轴突损伤,促进神经元树突重塑,抑制星形胶质细胞异常活化.