基于均匀设计的中药有效组分复方配伍研究

目的探索基于均匀设计的中药抗氧化有效组分复方的研究分析方法。方法采用均匀设计和改进最小角回归分析,对甘草总黄酮、银杏叶提取物、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷组成的中药组分复方不同配比体外清除DPPH自由基的作用进行研究。结果通过分析获得了中药组分配伍清除DPPH的回归方程,优化组合后进行药效学验证,结果显示该中药组分配伍最佳剂量组合为甘草总黄酮0.8mg/ml、银杏叶提取物3.144mg/ml、淫羊藿总黄酮0.024mg/ml和黄芪总苷0.036mg/ml。结论上述中药组分配伍后能有效清除DPPH自由基;本实验采用的均匀设计结合改进最小角回归分析适合"非线性、小样本"生物实验数据数据分析,为筛选评价抗氧化中药有效组分复方提供了合适的研究方法。     

人细小病毒——博卡病毒的研究进展

2005年8月22日瑞典学者Tobias Allander[1]在世界首次报道从呼吸道感染患者病理标本中分离出一种新型的人细小病毒,并命名为人博卡病毒(Human Bocavirus,HSoV).随后在全球相继有该型病毒感染的报道,初步判断人博卡病毒是引起急性呼吸道感染的一种新型重要病原.本文将对该型病毒的临床感染情况和分子生物学研究方面作一综述.     

仙台病毒高滴度病毒制备方法的建立

目的：建立使用传代细胞稳定大量地制备高滴度的仙台病毒（SeV）的方法,取代成本高、周期长、操作繁琐、易污染的鸡胚制备仙台病毒的方法,用于实验研究。方法：首先观测不同细胞感染仙台病毒后发生病变的时间、程度以及产毒量,确定仙台病毒敏感细胞株并确定病毒产量高峰期,连续在细胞中传3代测量上述指标。其次观测染毒时病毒吸附时间不同对病毒滴度的影响。综合分析后建立制备高滴度仙台病毒的方法。结果：大鼠脑胶质瘤细胞C6株对仙台病毒高度敏感,细胞出现病变所需时间短且明显,病毒产量最高。仙台病毒滴度与染毒时的吸附时间呈正相关,病毒最佳吸附时间为90min。接种病毒后72h收获的病毒滴度最高,平均为11 TCID50,并且病毒可以在细胞内连续稳定传代。结论：确认大鼠脑胶质瘤细胞C6株为仙台病毒的敏感细胞。且病变快、明显,病毒产量高。为在体外深入研究仙台病毒和大量繁殖高滴度仙台病毒提供了实验方法。     

芦荟大黄素促进皮肤创伤修复作用机理研究

目的:研究芦荟大黄素对皮肤创伤的修复作用及作用机理。方法:(1)MTS法测定含芦荟大黄素100、200、300、400μg/ml的培养液对大鼠成纤维细胞增殖的作用;(2)使用含芦荟大黄素100、200、300、400μg/ml的药液治疗大鼠皮肤创伤模型,检测创缘组织bFGF、EGF、vEGF表达量及羟脯氨酸含量。结果:(1)含400μg/ml芦荟大黄素的培养液使细胞成活率最高;(2)含300μg/ml芦荟大黄素的药液对大鼠创伤的疗效最佳。结论:芦荟大黄素可有效促进创伤愈合,其促进创伤愈合的机理之一为增强皮肤及皮肤血管相关的生长因子的表达,从而促进创面的修复愈合。     

维生素E对红细胞保存液保存效果改善的研究

目的 探索生物试验用红细胞体外保存时间延长的方法.方法 将健康成人的新鲜血液保存在已成熟应用的血液保存液CPDA和Alserve's中,并在两种保存液中均添加维生素E.在56天实验期间,每7天检测一次红细胞SOD、红细胞ATP、游离血红蛋白.结果 添加了维生素E10 mg/ml的红细胞保存液CPDA和Alserve's对红细胞的保护作用增强.在4"C保存条件下,准备应用于生物试验的红细胞的保存期限由28天提高到42天(CPDA)和由7天提高到21天(Alserve's).在最初7天保存期内两种保存液的效果近似.结论维生素E可以明显增强已成熟应用的血液保存液CPDA和Alserve's对红细胞的保护作用.珍贵血液样本在短期内使用建议选用配方简单的Alserve's+维生素E保存液.珍贵血液样本长期保存建议选用配方全面均衡的CPDA+维生素E保存液.     

清咽滴丸抗常见呼吸道病毒的实验研究

 目的 研究清咽滴丸对呼吸道常见病毒的抑制作用。方法 应用MTT方法，检测清咽滴丸对单纯疱疹病毒（HSV-1）和腺病毒（ADV11）的直接抑制作用、侵入细胞的抑制作用。应用鸡胚培养法，检测清咽滴丸体外灭活流感病毒的作用。建立ICR小鼠感染流感病毒模型，观察并记录小鼠的死亡情况，检测肺指数、肺脏病理改变及T、B淋巴细胞增殖情况和脾指数。结果 ①清咽滴丸对HSV-1和ADV11有直接抑制作用并且可抑制其侵入细胞。②鸡胚实验结果显示，清咽滴丸具有明显体外灭活病毒的作用。③动物实验结果显示，清咽滴丸不能降低动物的死亡率，但却可明显延长其平均存活时间；对肺脏有较好的抗炎作用；有刺激免疫细胞增殖，调节机体免疫功能的作用。结论 清咽滴丸有明确的体外灭活病毒和一定的抗流感病毒鼠肺适应株（FM1）和调节机体免疫力的作用。在抗HSV-1和ADV11实验中，表现出确切的直接抑制作用和阻断病毒侵入细胞的作用。     

加味归脾汤对乳腺癌细胞抑制作用的研究

目的:研究加味归脾汤对人类乳腺癌细胞的抑制机制。方法:不同浓度的加味归脾汤作用于人类乳腺癌ER+代表株MCF-7和ER-代表株MDA-MB-435,阳性对照药为多西紫杉醇(Docetaxel),通过MTS、细胞凋亡分析和Caspase-8检测等方法评价各药物浓度组的抑制效果。结果:MCF-7和MDA-MB-435的加味归脾汤高浓度组细胞抑制率在48h时均高于其Docetaxel组(P0.05),72h时MCF-7较其Docetaxel组略低(P0.05),MDA-MB-435与其Docetaxel组相近。流式细胞仪72h检测结果显示MCF-7和MDA-MB-435的加味归脾汤高浓度组和Docetaxel组凋亡程度相近。加味归脾汤中、低浓度组效果低于Docetaxel组。Caspase-8检测显示MCF-7和MDA-MB-435的加味归脾汤高浓度组检测结果接近或超过Docetaxel组(P0.05),加味归脾汤中、低浓度组均低于Docetaxel组。结论:加味归脾汤高浓度药液对ER+、ER-乳腺癌细胞抑制效果均可达到或超过阳性对照药。初步确定Caspase途径为其机制之一。     

兔骨髓间充质干细胞的制备及诱导成骨的实验研究

目的:在体外原代培养兔骨髓间充质干细胞,观察兔骨髓间充质干细胞的体外生长特性,为用于组织工程学的种子细胞培养提供实验基础。方法:自兔股骨、胫骨取骨髓,分离骨髓间充质干细胞,分别采用常规培养液及含矿化液的培养液两组进行培养,对第3代细胞进行酶动力学法碱性磷酸酶(ALP)活性检测及钙结节茜素红染色,观察细胞在体外长期培养时钙结节形成情况。结果:两组细胞其培养液中的ALP含量不断升高,经过两独立样本t检验,矿化液诱导组第2,6,10天的ALP水平较正常对照组均明显升高(P<0.05)。细胞表现出成骨细胞特性,在体外长期不传代培养时可形成钙结节。结论:兔骨髓间充质干细胞在体外适当的培养条件下,增殖能力很强,可以向成骨细胞方向分化,可作为组织工程学的种子细胞。     

中药组分清除烟气有害物质及降低细胞毒性的研究

目的:研究中药组分体外清除多环芳烃、亚硝胺和自由基等烟气有害物质以及降低烟气细胞毒性的作用,为中药组分用于减少烟气危害发挥保健作用提供研究依据。方法:采用分光光度法检测中药组分对DPPH自由基、超氧阴离子和羟自由基的清除作用;以荧光光谱法测定各组分对多环芳烃的清除作用;以紫外分光光度法测定各组分对挥发性亚硝胺形成的抑制作用;并与抗坏血酸的作用进行比较;采用MTT法检测中药组分影响烟气造成的BEP2D细胞毒性作用。结果:所有中药组分均表现出一定的清除上述多种有害物质的作用,其综合清除能力以银杏叶提取物、甘草总黄酮、原花青素、麦冬总皂苷、淫羊藿总黄酮和黄芪总苷为好。以上6种中药组分可显著降低烟气造成的BEP2D细胞的细胞毒性,表现为细胞活存率(SF)显著上升,细胞平均致死剂量(DML)显著增加。结论:上述中药组分有良好的清除多环芳烃、亚硝胺和自由基等烟气有害致癌物质的作用,在减少烟气对人群的危害和预防烟草引起的各种疾病的发生中可发挥重要保健作用。