HPLC法研究当归-红花单煎及共煎液中有效成分含量的变化

目的 研究和探讨当归-红花单煎及共煎液中有效成分阿魏酸和羟基红花黄色素A含量的变化,初步探索两味中药配伍应用的变化规律.方法 采用Phenomenex C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.05%磷酸水溶液(pH=2.45,25:75)为流动相;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样温度:5℃;检测波长分别为320 nm、403 nm.测定追踪当归-红花共煎液与单煎液中主要有效成分阿魏酸和羟基红花黄色素A含量的变化.结果 阿魏酸回归方程为Y=3.837 2X+0.0219(r=0.999 8),在0.5～10.0μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率为92.68～101.13%,RSD小于3.2%;羟基红花黄色素A回归方程为Y=1.364 7X-0.371 4(r=0.999 9),在5.0～100.0 μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率为100.17～102.97%,RSD小于2.8%;当归红花共煎液中阿魏酸含量比当归单煎液中平均升高142.64%,羟基红花黄色素A含量比红花单煎液中平均升高145.37%.结论 当归-红花共煎液中阿魏酸和羟基红花黄色素A的含量高于各单煎液中含量,两者配伍具有一定的合理性.该法快速、简便、准确,可为评价提取物中阿魏酸和羟基红花黄色素A的质量提供依据.     

反相高效液相色谱法测定不同溶媒川芎提取物中阿魏酸的含量

目的测定川芎在不同溶媒提取下活性成分阿魏酸的含量。方法色谱柱为Cosmosil-C18(125 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-3%醋酸(32∶68,v/v),流速为0.8 ml/min,波长为323 nm,柱温为室温。结果3种溶媒川芎提取物中以乙醇提取物中阿魏酸的含量最高达到0.56 mg/ml。结论3种溶媒川芎提取物中阿魏酸的含量各不相同,且以乙醇提取物中FA的含量较高。     

芎归红花液的质量标准研究

目的建立芎归红花液的质量控制方法。方法采用TLC法对处方中当归、川芎、陈皮、赤芍进行定性鉴别;建立HPLC法测定芎归红花液中羟基红花黄色素A含量,采用色谱柱为Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26∶2∶72),检测波长为403nm。结果 TLC鉴别分离度良好,专属性强;羟基红花黄色素A含量在6.375~102μg/ml范围内,线性关系良好,R2=0.999 9,平均加样回收率为100.37%,RSD为1.79%。结论该方法简便、准确、重复性好,可有效控制芎归红花液的质量。     

痹痛膏灸质量标准研究

目的:建立痹痛膏灸的质量标准。方法:薄层色谱法定性鉴别痹痛膏灸制剂中的川芎、当归;采用高效液相色谱法测定该制剂中阿魏酸含量,C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-0.5%冰醋酸(22∶78);流速:1.0mL/min;检测波长:323nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果:痹痛膏灸的TLC图斑点清晰,分离度好,与川芎、当归对照药材TLC图相应位置上,显相同荧光斑点;阿魏酸在2μg/mL～10μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.999 2),平均回收率为99.61%(n=6),相对标准偏差RSD为1.18%。结论:该方法操作便捷,准确度高,重复性好,可用于痹痛膏灸的质量控制。     

RP-HPLC法同时测定新生化颗粒中羟基红花黄色素A、阿魏酸和甘草酸铵

目的建立同时测定新生化颗粒(当归、川芎、桃仁等)中羟基红花黄色素A、阿魏酸和甘草酸铵的RPHPLC方法。方法采用反相高效液相色谱法。Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长237 nm,体积流量1.0 mL/min。结果羟基红花黄色素A、阿魏酸和甘草酸铵的线性范围分别为5.302 4¹06.047 4μg/mL(r=0.999 9),4.689 2106.047 4μg/mL(r=0.999 9),4.689 2⁹3.783 4μg/mL(r=0.999 9),3.593.783 4μg/mL(r=0.999 9),3.5⁷0μg/mL(r=0.999 9);平均回收率分别为99.60%(RSD为0.96%),99.32%(RSD为1.24%),99.83%(RSD为1.49%)。结论本方法能够准确测定新生化颗粒中羟基红花黄色素A、阿魏酸和甘草酸铵的量。     

川芎药材质量标准研究

目的探讨川芎药材的鉴别方法,完善川芎药材的质量标准。方法用薄层色谱法鉴别川芎药材;以高效液相色谱法测定阿魏酸的含量。选用Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸溶液(21∶79),流速为1.0mL/min,检测波长为320nm。结果薄层色谱中斑点清晰,易于识别。高效液相色谱法精密度、重现性良好;阿魏酸在0.0425～0.3825μg范围内有较好的线性关系,平均回收率为97.10%(RSD=1.31%)。结论本法可有效控制川芎药材的质量。     

当归药材的质量标准研究

目的:进行当归药材的质量标准研究,着重建立当归药材的TLC鉴别和阿魏酸的含量测定方法.方法:采用TLC法定性鉴别当归药材;采用HPLC法建立当归药材中阿魏酸的含量测定方法.色谱条件:①HPLC色谱条件:色谱柱:Zorbax Eclipse XDB-C18(4.6×150mm,5μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(30:70:0.2);流速1.0mL/min;检测波长:320nm;柱温25℃.②TLC条件:采用硅胶GF254板,以正己烷-氯仿-冰醋酸(6:4:1)为展开剂,CAMAGⅢ型薄层扫描仪紫外365nm数码摄像.结果:HPLC法阿魏酸在20ng～200ng范围内,线性关系良好,回归方程为Y=5649.0267X 0.0000(r=1.000);平均加样回收率为100.21%,RSD=1.80%(n=6),十批当归药材阿魏酸的含量在0.09～0.33mg/g.TLC鉴别结果满意.结论:建立了当归药材的TLC鉴别方法和阿魏酸的含量测定方法,并制定了阿魏酸的含量限度,方法操作简便、准确快速、重现性好,可完善现行2000年版中国药典,有效控制当归药材的质量.     

HPLC测定川芎药材和饮片中游离阿魏酸和总阿魏酸的含量及其质量评价指标

目的:建立HPLC测定川芎药材和饮片中游离阿魏酸和总阿魏酸的方法,测定不同来源的川芎样品,以期研究其质量评价指标.方法:用甲醇-甲酸(95:5)和甲醇-0.24 mol·L~(-1)碳酸氢钠水溶液(95:5)分别提取川芎样品中的游离阿魏酸和总阿魏酸.HPLC采用Alltima C_(18)(4.6 mm×250mm,5 μm)色谱柱,保护柱为C_(18)(4.6 mm×7.5 mm,5 μm);以乙腈和1%冰醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min~(-1);柱温为30℃;测定波长为320 nm;进样量为10μL;以外标法测定样品中游离阿魏酸和总阿魏酸的含量.结果:游离阿魏酸和总阿魏酸分别在0.01～0.20μg和0.05～0.46μg呈线性关系,回收率分别为95.7和98.5%(n=6).32份川芎药材和饮片中总阿魏酸与游离阿魏酸的含量之比为1.03～4.98,平均值为2.38(n=32);1份川芎栽培苓子中二者之比值达19.6.15份从川芎主产区收集的根茎药材中总阿魏酸的平均质量分数为1.42 mg·g~(-1),按平均值的80%和药材含水量10%计算,则川芎药材中总阿魏酸的含量以干燥品计为1.25 mg·g~(-1).结论:本方法可测定稳定、具有可比性的阿魏酸含量,操作简便,适合于川芎药材和饮片中游离阿魏酸和总阿魏酸的含量测定.阿魏酸在川芎样品中以游离和结合型共同存在,但以后者为主,并以总阿魏酸的量发挥药效,故应以总阿魏酸为川芎药材和饮片质量评价的指标.     

高效液相色谱法测定当归中阿魏酸的含量

目的:建立当归中阿魏酸的含量测定方法。方法:采用HPLC法,Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水-冰醋酸(32∶68∶0.5)为流动相,流速为1mL/min,检测波长为320nm。结果:阿魏酸在0.0618~0.3708μg范围内,线性关系良好(r=0.9999)。平均回收率为104.1%(n=5),RSD为2.0%。结论:本法灵敏、准确,简便易行,重复性好,可用于中药当归药材及饮片的质量控制。     

复方当归注射液中羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量测定

目的 运用高效液相色谱法测定复方当归注射液中的羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量.方法 色谱柱为依利特Hypersic ODS2(4.6 mm×200 mm,5 μm),测定阿魏酸的流动相为甲醇-0.4%醋酸水(30∶70),其检测波长322 nm;测定羟基红花黄色素A所用流动相为甲醇-0.6%醋酸水(15∶85),其检测波长403 nm.柱温25℃,流速1 ml/min.结果 阿魏酸在4.44～ 266.4 μg/ml之间与峰面积呈线性关系;羟基红花黄色素A在4.508～ 360.64 μg/ml之间与峰面积呈线性关系;测得阿魏酸平均回收率为104.34%,RSD为2.77%;羟基红花黄色素A平均回收率为99.26%,RSD为2.20%.结论 该方法简便快捷,重复性好,可用于复方当归注射液中羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量测定.