寿胎丸对去势大鼠骨组织内BMP和TGF-β表达的影响

目的观察寿胎丸对去势大鼠骨组织内骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Protein,BMP)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的影响。方法 40只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、寿胎丸组和戊酸雌二醇组,行双侧卵巢切除术,寿胎丸组予寿胎丸13.4 g/kg/d灌胃,戊酸雌二醇组予补佳乐0.104 mg/kg/d灌胃,假手术组与模型组予等量生理盐水灌胃。于术后12周处死动物,切取大鼠股骨标本分别检测股骨近端骨组织形态学、骨组织中BMP和TGF-β含量及相关调控基因的表达。结果寿胎丸可明显改善卵巢切除所引起的骨组织微观结构的破坏。模型组骨组织中BMP2、BMP4和TGF-β含量明显低于假手术组(P0.05);与模型组相比,寿胎丸组BMP2、BMP4和TGF-β,戊酸雌二醇组BMP2的含量均明显增加(P0.05)。同时,模型组骨组织中,BMP2、BMP4和TGF-β的基因表达明显降低(P0.05);与模型组相比寿胎丸组BMP2、BMP4和TGF-β,戊酸雌二醇组BMP2相关调控基因的表达均明显增加(P0.05)。结论寿胎丸可明显改善卵巢切除引起的骨组织微观结构的破化,这可能与寿胎丸提高骨组织内BMP2、BMP4和TGF-β蛋白含量和相关调控基因的表达有关。     

补肾化痰方影响去势骨质疏松大鼠Leptin及β2-AR表达的实验研究

[目的]探讨补肾化痰方影响瘦素(Leptin)及β2肾上腺素能受体(β2-AR)的表达水平来防治绝经后骨质疏松症的机制。[方法]将75只大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾化痰组、利维爱组、阿托伐他汀组,采用双侧卵巢摘除建立去势骨质疏松模型,假手术组只切除卵巢周围同等质量的脂肪组织。使用微计算机断层扫描技术(Micro-CT)检测大鼠右侧股骨的骨密度(BMD),酶联免疫吸附(ELISA)检测大鼠血清Leptin、雌二醇(E2),全自动生化仪检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),聚合酶链反应(PCR)检测骨组织中Leptin mRNA、β2-AR mRNA相对表达量。[结果]模型组相对于假手术组BMD、血清Leptin、E2水平明显降低;治疗后,补肾化痰组相对于模型组的BMD、血清Leptin、E2、HDL-C含量及骨组织Leptin mRNA表达水平明显提高,血清TC、TG、LDL-L含量及骨组织β2-AR mRNA表达水平明显降低,与利维爱组及阿托伐他汀组比较无明显差异。[结论]补肾化痰方可以有效提高绝经后骨质疏松大鼠的BMD,补充雌激素水平,通过调节Leptin水平来介导交感神经的活性,起到防治绝经后骨质疏松和改善脂代谢的作用。     

补肾健脾活血方对去卵巢大鼠BMP2/Smad信号通路的影响

目的:研究补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨形态发生蛋白2(BMP2)/Smad信号通路的影响。方法:72只6月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组(24只),手术组(48只),双侧卵巢切除法造模,术后3个月两组各随机选取12只检测骨密度验证造模成功。手术组剩余的36只大鼠随机分为双侧卵巢切除模型组(OVX),补肾健脾活血方组(BSJPHX,给药剂量2.979 g·kg~(-1)),阿仑膦酸钠维D3片(Ⅱ)组(ALN,给药剂量1.02 mg·kg~(-1)),假手术组,OVX组给与等体积生理盐水灌胃。12周后处死各组大鼠,双能X射线法检测大鼠全身骨密度,生物力学试验进行胫骨三点弯曲试验,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测BMP2,Smad1,Runt相关转录因子2(Runx2),骨保护素(OPG)基因的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BMP2,p-Smad1,Runx2,OPG蛋白的表达。结果:造模3个月后,与假手术组比较,OVX组大鼠骨密度明显降低,最大载荷及刚度均降低,BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平显著降低(P0.05);给药3个月后,与OVX组比较,BSJPHX组,ALN组骨密度均明显增高,最大载荷及刚度均增加,能显著提高BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平(P0.05)。结论:补肾健脾活血方既能通过调控BMP2/Smad通路的信号转导,又能上调OPG的表达,这可能是补肾健脾活血方防治绝经后骨质疏松症的机制之一。     

电针肾俞、足三里联合滋肾强骨汤对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织和血清GH/IGF-1系统的影响

目的:观察电针肾俞、足三里联合滋肾强骨汤对去卵巢所致骨质疏松大鼠骨密度的影响,并通过其对骨组织和血清GH/IGF-1系统的影响来探讨其作用机制。方法:30只Wistar雌性大鼠按照体重区组化随机分为3组,即假手术组、模型组和治疗组,每组10只。模型组和治疗组大鼠手术摘除双侧卵巢复制绝经后骨质疏松模型。治疗组每日2次电针肾俞、足三里,同时灌胃给药滋肾强骨汤(浓度0.4 g/m L,给药剂量1.25 m L/100 g体重),假手术组、模型组灌胃等体积的生理盐水,连续12周。采用双能X射线测定各组大鼠胫骨骨密度,采用ELISA法测定骨组织、血清中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和IGF-1受体(IGF-1R)蛋白含量。结果:与假手术组相比,模型组大鼠胫骨骨密度、骨组织中GHR、IGF-1、IGF-1R含量均明显降低(P 0.05),血清中IGF-1、IGF-1R显著下降(P 0.05),GHR虽有下降的趋势,但差异无统计学意义(P 0.05);与模型组相比,治疗组大鼠胫骨骨密度、骨组织中GHR、IGF-1、IGF-1R和血清中IGF-1R水平均显著提高(P 0.05),血清中GHR和IGF-1水平变化不明显(P 0.05)。结论:电针肾俞、足三里联合滋肾强骨汤可以增加去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度,其作用机制与调节骨组织和血清中GH/IGF-1系统密切相关。     

补肾化痰方对去势SD大鼠子宫形态、性激素和脂代谢的影响

目的研究补肾化痰方对去势SD大鼠子宫形态、性激素和脂代谢的影响。方法选取SPF级雌性SD大鼠60只,随机分为空白组、假手术组、模型组、补肾化痰组、阿托伐他汀组、利维爱组,每组10只。空白组不造模,假手术组切除卵巢周围与双侧卵巢重量等同的脂肪组织,另4组摘除双侧卵巢。术后第7天开始,空白组、假手术组和模型组灌胃0.9%氯化钠溶液1 mL,补肾化痰组灌胃0.94 g/mL补肾化痰中药药液,利维爱组灌胃0.023 mg/mL利维爱混悬液,阿托伐他汀组灌胃20 mg/kg阿托伐他汀,均1次/d,连续灌胃12周。HE染色观察各组大鼠子宫形态,ELISA法检测血清雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。结果补肾化痰组大鼠子宫体积增大、内膜增厚,肌层排列规则,浆膜层光滑。假手术组大鼠子宫壁厚度、子宫内膜厚度及血清E_2、FSH、LH、TC、TG、HDL-C、LDL-C水平与空白组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。模型组大鼠子宫壁厚度、子宫内膜厚度及血清E_2、HDL-C水平均明显低于空白组(P均0.05),血清FSH、LH、TC、TG、LDL-C水平均明显高于空白组(P均0.05)。补肾化痰组和利维爱组大鼠子宫壁厚度、子宫内膜厚度均明显高于模型组(P均0.05),阿托伐他汀组与模型组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。补肾化痰组、阿托伐他汀组、利维爱组大鼠血清E_2、HDL-C水平均明显高于模型组(P均0.05),血清FSH、LH、TC、TG、LDL-C水平均明显低于模型组(P均0.05)。补肾化痰组、阿托伐他汀组、利维爱组各指标比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论补肾化痰方可明显增加去势SD大鼠子宫体积和子宫内膜厚度,有效调节性激素和血脂水平。     

温肾益髓生血方对RA大鼠肝脏BMP/Smad信号通路的影响

目的:探讨温肾益髓生血方对RA大鼠贫血的改善作用及其骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)/Smad信号通路的影响。方法:42只雄性SPF级Wister大鼠,根据体质量分层随机分组2次,即正常组、假手术组、模型组、尿毒清(2.33 g·kg-1)组、温肾益髓生血(3.5 g·kg-1)组。模型组和治疗组上午180 mg·kg-1·d-1腺嘌呤灌胃,下午治疗组给予相应的治疗药物,正常组、假手术组和模型组给予等体积的去离子水灌胃,每周称量大鼠体质量,治疗12周后,各组大鼠麻醉后取血,分离血清,检测肌酐(SCr),尿素氮(BUN),尿酸(UA);全血测红细胞(RBC),血红蛋白(HGB);取材固定肾组织、肝脏组织,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏病理,免疫组化及原位杂交技术检测大鼠肝脏BMP6,Smad4,Smad1/5/8,p-Smad1/5/8,铁调素(hepcidin)mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组及假手术组比较,模型组体质量明显降低(P0.01),血清BUN,SCr水平明显升高(P0.01),肾脏病理损害明显;与模型组比较,温肾益髓生血组大鼠一般状态明显改善,血RBC,HGB水平升高(P0.01),与正常组和假手术组比较,模型组大鼠肝脏高表达BMP6,Smad4,Smad1/5/8,hepcidin(P0.01);与模型组比较,温肾益髓生血组BMP6,Smad4,Smad1/5/8,p-Smad1/5/8,hepcidin蛋白表达水平显著降低(P0.01)。结论:温肾益髓生血方对RA大鼠贫血具有一定的改善作用,可能是通过干预肝脏BMP/Smad信号通路实现的。     

左归丸防治去卵巢骨质疏松模型大鼠骨流失的实验研究

目的基于中医"肾主骨,生髓"理论,探讨滋阴补肾代表方左归丸对去卵巢骨质疏松模型大鼠的防治作用。方法40只雌性未生育SD大鼠,随机分为正常组(Control)、假手术组(Sham)、去卵巢模型组(OVX)、阳性对照补佳乐组(BJL)、左归丸组(ZGW),每组8只。造模7 d后给药12周,取材检测。双能X线检测大鼠股骨近端、远端1/3骨密度,ELISA法检测大鼠血清β-CTX含量,比色法检验大鼠血清ALP,Ca,Pi含量,HE染色观察大鼠骨组织结构变化。RTPCR和Western blotting法检测大鼠股骨RUNX2,Col-Ⅰ,BGP基因和蛋白表达。结果与正常组相比,模型组大鼠骨密度,血清钙含量,RUNX2、Col-Ⅰ、BGP基因和蛋白表达明显下降,(P0.05);血清β-CTX、ALP、Pi含量上升(P0.05);骨小梁间距增大,数量减少,结构紊乱。与模型组相比,左归丸组和补佳乐组能明显提高骨密度,血清钙含量,RUNX2,Col-Ⅰ,BGP基因和蛋白表达,(P0.05);降低血清β-CTX,ALP,Pi含量,(P0.05);同时防止骨小梁退化和成骨细胞数量减少。结论左归丸能有效预防卵巢切除后骨质疏松症模型大鼠的骨流失,促进骨形成。     

补肾活血化痰方对脑出血大鼠脑组织MMP-9表达及血清NSE的影响

目的观察补肾活血化痰方对大鼠脑出血后脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的影响。方法采用自体不凝血注入尾状核法制备脑出血模型。将大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血化痰方组,假手术组和模型组每日给予生理盐水灌胃,补肾活血化痰方组给予补肾活血化痰方煎剂。各组分别在脑出血术后24、48、72、120 h各个时点取血,留取脑组织标本。于各时点观测大鼠脑含水量,用免疫组化法检测大鼠脑组织MMP-9的表达水平,用酶联免疫吸附法测定血清中NSE的含量。结果补肾活血化痰方组各时点脑含水量明显低于模型组(P0.05),各时点脑组织MMP-9阳性表达较模型组明显减少(P0.01),血清NSE水平在48、72、120 h时较模型组显著降低(P0.01)。结论补肾活血化痰方能减轻脑水肿,减轻脑组织损伤,其作用可能和有效抑制脑出血大鼠脑组织MMP-9表达,降低血清NSE水平有关。     

益气通阳方对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的观察益气通阳方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化及TGF-β1/Smad7信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组和西药组各10只。除假手术组外,其余各组建立UUO模型。西药组予依那普利溶液0.18mg/mL灌胃,中药组予益气通阳方浓缩液1.188g/mL灌胃,假手术组和模型组予等量生理盐水灌胃,每日1次。14d后心脏取血检测大鼠血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平,处死大鼠取其肾组织行HE和Masson染色,免疫组化检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)的表达,Western blot和RT-PCR分别检测Smad7蛋白和m RNA的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清SCr、BUN明显升高(P0.01),病理改变明显,TGF-β1、FN蛋白表达明显升高(P0.01),Smad7蛋白和m RNA表达明显降低(P0.01);与模型组比较,中药组和西药组大鼠血清SCr、BUN明显降低(P0.05),病理改变减轻,TGF-β1、FN蛋白表达明显降低(P0.05),Smad7蛋白和m RNA表达明显升高(P0.05)。结论益气通阳方可能通过上调Smad7表达,抑制UUO大鼠肾组织TGF-β1的高表达,进而延缓肾间质纤维化进展。     

补肾健骨汤对PMOP大鼠骨密度及血清E_2、IL-6、BGP的影响

目的:观察补肾健骨汤对绝经后骨质疏松(PMOP)模型大鼠股骨颈骨密度及血清雌二醇(E_2)、白介素-6(IL-6)、骨钙素(BGP)影响。方法:选择4月龄SPF级未经交配健康的雌性大鼠,取12只为正常组(A组);采用去卵巢骨质疏松造模法,将造模成功的大鼠随机分为模型组(B组)、补肾健骨汤组(C组)及雷洛昔芬组(D组)各12只,假手术组(E组)12只大鼠只切开皮肤肌肉,取等同体积的脂肪组织,不去卵巢;灌胃8周后完成大鼠骨密度检测,处死取标本检测。结果:(1)骨密度:干预12周后,模型组大鼠骨密度低于假手术组(P0.05);补肾健骨汤组及雷洛昔芬组骨密度高于模型组(P0.05)。(2)BGP:模型组大鼠组低于假手术组(P0.05),补肾健骨汤组及雷洛昔芬组血清BGP均高于模型组(P0.05)。(3)雌激素:模型组雌激素水平显著低于正常组、假手术组(P0.05);补肾健骨汤组、雷洛昔芬组雌激素水平均高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);雷洛昔芬组骨与补肾健骨汤组之间差异无统计学意义(P0.05)。(4)IL-6:模型组IL-6水平明显高于正常组、假手术组,差异有统计学意义(P0.05);补肾健骨汤组、雷洛昔芬组IL-6水平均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);雷洛昔芬组骨与补肾健骨汤组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论:补肾健骨汤能改善去卵巢大鼠骨密度,升高雌激素及骨钙素水平,促进骨生成,并降低IL-6水平,提示这可能是补肾健骨汤防治绝经后骨质疏松症的机理之一。     

补肾通络方促进骨质疏松症大鼠骨形成机制

目的探讨补肾通络方干预绝经后骨质疏松症骨形成机制。方法将72只大鼠采用去卵巢方式制备骨质疏松症动物模型,随机分为模型组、阿仑膦酸钠组、氟化钠组、补肾组、通络组、补肾通络组等6组,另设假手术组,每组12只,分别予生理盐水(5 mL/kg)、阿仑膦酸钠(1 mg/kg)、氟化钠(5 mg/kg)、补肾方(5.4 g/kg)、通络方(0.9 g/kg)、补肾通络方(6.3 g/kg)灌胃70天,1次/日,假手术组干预同模型组。采用ELISA法检测血清碱性磷酸酶(TALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP);双能X线吸收法测定股骨颈骨密度(BMD);Micro-CT观察骨微结构;RT-PCR、Western Blot分别检测骨组织β-catenin mRNA及蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组TALP水平、BMD、β-catenin mRNA及蛋白表达降低(P0.01,P0.05),TRAP水平升高(P0.05)。与模型组比较,阿仑膦酸钠组、补肾组、补肾通络组TALP升高(P0.01,P0.05);补肾组、通络组及补肾通络组血清TRAP水平降低(P0.05);各给药组BMD、β-catenin mRNA及蛋白表达升高(P0.01,P0.05)。与通络组比较,补肾通络组血清TALP水平升高(P0.05),血清TRAP水平降低(P0.05)。与补肾组、通络组比较,补肾通络组BMD、β-catenin蛋白表达升高(P0.05)。结论补肾通络方增加β-catenin表达,促进骨形成,逆转绝经后骨质疏松症骨量丢失,方中两类中药配伍具有协同效应。     

补肾调经方对PCOS模型大鼠性激素、卵巢形态及TGF-β_1/smad通路的影响

目的探讨补肾调经方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠性激素、卵巢形态及转化生长因子-β_1(TGF-β_1)/smad通路的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肾调经方低剂量组、补肾调经方中剂量组、补肾调经方高剂量组与炔雌醇环丙孕酮组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠采用丙酸睾酮+注射用绒促性素建立PCOS模型。造模成功后,补肾调经方低、中、高剂量组给予0.264 g/(kg·d)、0.528 g/(kg·d)、1.056 g/(kg·d)的补肾调经方溶液灌胃,炔雌醇环丙孕酮组给予临床剂量1倍的炔雌醇环丙孕酮溶液灌胃,空白组、模型组给予等体积蒸馏水灌胃,均1次/d,连续12 d。末次灌胃结束后次日,采用放射免疫法测定各组大鼠血清黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、促卵泡成熟激素(FSH)、雌二醇(E_2)水平;光镜下观察各组大鼠卵巢组织形态学变化,并计算卵泡数目;蛋白免疫印迹法检测各组大鼠卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4和Smad 7蛋白表达情况。结果与模型组比较,补肾调经方中、高剂量组与炔雌醇环丙孕酮组大鼠血清LH、T水平及卵巢组织中Smad 7蛋白表达量均明显降低,血清FSH、E_2水平及卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4蛋白表达量均明显升高,卵巢质量减轻,卵泡数目减少,差异均有统计学意义(P均0.05);与炔雌醇环丙孕酮组比较,补肾调经方高剂量组大鼠血清LH、T水平及卵巢组织中Smad 7蛋白表达量更低,血清FSH、E_2水平及卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4蛋白表达量更高,卵巢质量更轻,卵泡数目更少,差异均有统计学意义(P均0.05)。补肾调经方各剂量组与炔雌醇环丙孕酮组大鼠卵巢病理性改变均呈不同程度改善,以补肾调经方高剂量组改善最为明显。结论补肾调经方可有效调节PCOS大鼠性激素分泌,促进卵泡发育和排卵,能够改善卵巢形态,机制可能与调控TGF-β_1/Smad信号通路的激活有关。     

补肾活血方对去卵巢大鼠骨代谢及骨密度的影响

目的:观察补肾活血方对去卵巢大鼠骨代谢和骨密度的影响。方法:将40只SD雌性大鼠随机分成假手术组、模型组、补肾活血方组和尼尔雌醇组,每组10只。假手术组行开腹术但不摘除卵巢,其他3组行双侧卵巢切除术。术后假手术组和模型组大鼠以蒸馏水灌胃(每次3 m L,每天1次),补肾活血方组大鼠以补肾活血方汤剂灌胃(每次15 g·kg~(-1),每天1次),尼尔雌醇组大鼠以研细的尼尔雌醇片和生理盐水配制成的混悬液灌胃(每次0.6 g·kg~(-1),每周1次)。灌胃12周后从大鼠心脏取血,离心后吸取上层血清,置入冰箱保存待检。处死大鼠后,切取右侧股骨中段做标本,同时取大鼠腰椎,置入冰箱保存待检。采用ELISA法测定血清Ⅰ型前胶原氨基端原肽(procollagen typeⅠN-terminal propeptide,PINP)、β-胶原降解产物(βisomer of C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX)含量,并用双能X线骨密度测量仪检测腰椎骨密度。将冰冻切片做HE染色后,在显微镜下观察骨组织病理学改变。结果:1血清PINP、β-CTX含量。药物干预后各组大鼠血清PINP含量比较,差异有统计学意义(F=914.448,P=0.000)。组间两两比较,假手术组血清PINP含量低于模型组[(0.109±0.008)μg·m L~(-1),(0.252±0.006)μg·m L~(-1),q=-51.807,P=0.000];假手术组血清PINP含量与补肾活血方组[(0.163±0.006)μg·m L~(-1)]、尼尔雌醇组[(0.169±0.005)μg·m L~(-1)]比较,差异均无统计学意义[q=0.559,P=0.208;q=0.850,P=0.253];模型组血清PINP含量高于补肾活血方组和尼尔雌醇组(q=32.248,P=0.000;q=29.957,P=0.000);补肾活血方组与尼尔雌醇组比较,差异无统计学意义(q=-0.290,P=0.317)。药物干预后各组大鼠血清β-CTX含量比较,差异有统计学意义(F=963.955,P=0.000)。组间两两比较,假手术组血清β-CTX含量低于模型组[(0.432±0.007)ng·m L~(-1),(0.766±0.005)ng·m L~(-1),q=-48.601,P=0.000];假手术组血清β-CTX含量与补肾活血方组[(0.482±0.006)ng·m L~(-1)]、尼尔雌醇组[(0.494±0.008)ng·m L~(-1)]比较,差异均无统计学意义(q=-0.172,P=0.215;q=0.980,P=0.322);模型组血清β-CTX含量高于补肾活血方组和尼尔雌醇组(q=41.429,P=0.000;q=39.622,P=0.000);补肾活血方组血清β-CTX含量与尼尔雌醇组比较,差异无统计学意义(q=-0.808,P=0.790)。2腰椎骨密度。药物干预后各组大鼠腰椎骨密度比较,差异有统计学意义(F=419.969,P=0.000)。组间两两比较,假手术组腰椎骨密度高于模型组[(0.170±0.004)g·cm-2,(0.097±0.005)g·cm-2,q=35.198,P=0.000];假手术组腰椎骨密度与补肾活血方组[(0.127±0.005)g·cm-2]、尼尔雌醇组[(0.126±0.004)g·cm-2]比较,差异均无统计学意义(q=2.444,P=0.157;q=1.167,P=0.230);模型组腰椎骨密度低于补肾活血方组和尼尔雌醇组(q=~(-1)4.754,P=0.000;q=~(-1)4.031,P=0.000);补肾活血方组腰椎骨密度与尼尔雌醇组比较,差异无统计学意义(q=0.723,P=0.474)。3骨组织形态。假手术组股骨骨小梁粗壮、饱满,壁厚,形态结构完整,排列紧密有序,呈网状,密度、面积正常,骨小梁间隙较小。模型组股骨骨小梁变细、变薄,有扭曲或断裂,骨小梁间隙增大。补肾活血方组和尼尔雌醇组股骨骨小梁较模型组明显增粗,排列尚整齐并连接成网,部分区域骨小梁间隙略增大。结论:补肾活血方能降低去卵巢大鼠血清PINP、β-CTX含量,提高骨密度,改善骨组织状况,但其具体作用机制尚不明确,有待进一步研究。     

补肾化痰方对去卵巢大鼠骨组织TNF-α和IL-6的影响

目的： 观察补肾化痰方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）表达的影响, 探讨补肾化痰方对去卵巢大鼠骨代谢影响的可能机制。 方法： SD大鼠随机分为5组：模型组（A）、假手术组（B）、利维爱组（C）、补肾化痰方低剂量组（D）、补肾化痰方高剂量组（E）。行双侧卵巢切除术后3月,C,D,E组分别以利维爱0.23 mg·kg^-1、补肾化痰方9.4 g·kg^-1、补肾化痰方18.8 g·kg^-1灌胃给药,A,B组予以等体积的生理盐水。1次/d,给药时间为8周。术后5个月,双能X线骨密度测定仪检测大鼠股骨骨密度,免疫组化检测大鼠骨组织TNF-α和IL-6表达。 结果： 补肾化痰方低、高剂量组均能显著提高去卵巢骨质疏松症大鼠的骨密度,增加骨小梁数量和密度,降低骨组织TNF-α和IL-6表达水平。 结论： 补肾化痰方对去卵巢大鼠骨质疏松症有较好的治疗作用,其作用机制与降低骨组织中细胞因子TNF-α和IL-6水平有关。     

补肾活血化痰方对阿尔茨海默病模型大鼠海马细胞外调节蛋白激酶1、蛋白激酶2蛋白表达的影响

目的:观察补肾活血化痰方对阿尔茨海默病模型大鼠海马细胞外调节蛋白激酶1、蛋白激酶2蛋白表达的影响。方法:建立阿尔茨海默病大鼠模型,造模后第3 d开始用药,补肾活血化痰方配置成1.5g·m L-1的浓度,按12 mg·(kg·d)-1的剂量灌胃给药,盐酸多奈哌齐按0.52mg·(kg·d)-1的剂量灌胃,模型组及假手术组灌胃液为等体积的生理盐水,均每日两次,每天分上午8点和下午4点两次灌胃,共4周,用免疫组化方法观察AD大鼠海马神经元中细胞外调节蛋白激酶的表达变化。结果:模型组大鼠海马CA1区细胞外调节蛋白激酶1、蛋白激酶2阳性细胞的平均光密度明显少于假手术组,且大多细胞的胞浆染色较淡,差异具有显著性(P0.01);而盐酸多奈哌齐组和补肾活血化痰方组平均光密度较模型组显著增加,可见较多胞浆呈稍浅棕黄色颗粒状的阳性细胞,差异具有显著性(P0.01);但盐酸多奈哌齐组和补肾活血化痰方与假手术组相比,染色要淡,阳性细胞平均光密度明显减少,具有显性差异(P0.01);盐酸多奈哌齐组和补肾活血化痰组之间比较,差异不显著(P0.05)。结论:补肾活血化痰方治疗阿尔茨海默病有效,作用机制与其减少Aβ沉积,促进神经存活的信号传导途径有关。     

Study on the Effect and Mechanism of Bushen Huayu Recipe(补肾化瘀方)on Endometrial Fibrosis in Rats with Uterine Adhesion Based on TGF-β1/Smad Pathway

目的:观察补肾化瘀方对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜纤维化的改善作用,探究其作用机制.方法:采取机械+感染双重损伤法建立IUA大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组、补肾化瘀方组、补肾化瘀方+SRI-011381组、SRI-011381组,每组15只.另取15只大鼠作为假手术组.药物治疗21d后,观察大鼠子宫形态,HE染色观察子宫组织病理变化,计数子宫内膜腺体数量,Masson染色观察纤维化情况,ELISA试剂盒检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的水平,qRT-PCR检测子宫组织转化生长因子-β1(TGF-β1) mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA和Smad7 mRNA表达水平,Western blotting法测定TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、p-Smad3、p-Smad4、p-Smad7水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠子宫组织增粗,腺体数量减少,纤维化面积增加,血清炎症因子水平升高,TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA表达及Smad3、Smad4磷酸化增加,Smad7 mRNA表达及磷酸化减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,补肾化瘀方组大鼠子宫腺体数量增加,纤维化面积减少,血清炎症因子水平降低,TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA表达及Smad3、Smad4磷酸化减少,Smad7 mRNA表达及磷酸化增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).SRI-011381可抑制补肾化瘀方的作用,促进纤维化,进一步激活TGF-β1/Smad通路(P＜0.05).结论:补肾化瘀方对IUA大鼠子宫内膜纤维化有改善作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smad通路有关.     

补肾通络方对膝骨性关节炎大鼠血清中PGE-2、NO及iNOS的影响

目的:观察补肾通络方对膝骨性关节炎大鼠的血清中前列腺素E-2(prostaglandin E-2,PGE-2)、一氧化氮(nitric oxide,NO)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的影响。方法:随机选取6只大鼠为正常组,其余制备膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的模型。造模成功后,将造模成功的36只大鼠随机分为模型组、西药组、成药组、补肾通络方低剂量组、补肾通络方中剂量组和补肾通络方高剂量组,每组各6只。正常组及模型组大鼠均给予10 mL·kg~(-1)蒸馏水灌胃;根据大鼠与人的体表面积比值进行换算后,西药组大鼠给予0.875mg·kg~(-1)的美洛昔康制成的混悬液灌胃,成药组大鼠给予0.612 5 g·kg~(-1)的抗骨增生胶囊制成的混悬液灌胃,补肾通络方低剂量组、补肾通络方中剂量组和补肾通络方高剂量组分别予0.875 g·kg~(-1)、1.75 g·kg~(-1)、3.5 g·kg~(-1)的补肾通络颗粒方制成的混悬液灌胃。每天灌胃给药1次,连续4周。取大鼠腹主动脉血,离心取血清,测定其中PGE-2、NO和iNOS的含量水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中PGE-2,NO和iNOS含量明显升高,差异具有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,给药组中PGE-2,NO和iNOS含量降低,差异具有统计学意义(P0.05)。补肾通络方高剂量组PGE-2含量与模型组、西药组、成药组及补肾通络方低剂量组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。补肾通络方高剂量组NO含量与补肾通络方低剂量组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。补肾通络方高剂量组iNOS含量与补肾通络中剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:补肾通络方可以通过降低血清中NO、PGE-2和iNOS的含量水平,以减轻膝骨性关节炎大鼠的膝关节炎症表现,有利于改善膝关节炎的症状,提高患者的生存质量,从而达到治疗膝骨性关节炎的作用。