艾烟对SAMP8小鼠嗅球形态和嗅球内谷氨酸、γ 氨基丁酸和乙酰胆碱酯酶的影响〖JZ)〗〖HS)〗

目的：观察艾烟干预对快速老化SAMP8小鼠嗅球形态和嗅球内谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GaBa）和乙酰胆碱酯酶（AChE）表达的影响,探讨艾烟的可能效应途径。方法：选取6月龄雄性快速老化模型SAMP8小鼠48只并随机分为艾烟组、模型组、嗅觉障碍组和嗅觉障碍艾烟组,以12只SAMR1作为空白对照组对照。3-甲基吲哚（3-MI）腹腔注射制作嗅觉障碍模型。艾烟组和嗅觉障碍艾烟组每日予以艾烟吸嗅30 min,其余组正常空气吸嗅。干预6周后通过苏木精-伊红（HE）染色观察各组嗅球形态,并利用酶联免疫吸附试验法比较嗅球内Glu、GaBa及AChE表达情况。结果：各组嗅球结构未见明显差异,艾烟组颗粒细胞密度略高于模型组、嗅觉障碍组和嗅障艾烟组。艾烟组Glu、AChE较模型组显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）,且AChE含量低于嗅觉障碍组,差异有统计学意义（P<0.05）。嗅障艾烟组Glu含量介于模型组和艾烟组之间,3组差异有统计学意义（P<0.05）。结论：一定浓度的艾烟干预可以良性调节嗅球内神经递质含量,并通过嗅觉通路的神经投射干预脑内神经递质的表达,改善氧化应激。     

艾烟对快速老化模型小鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响?

目的观察艾烟对快速老化模型小鼠(SAMP8)脑内氨基酸类神经递质的影响,探讨艾烟的抗衰老作用效应及机制。方法将70只SAMP8随机分为模型组和6个艾烟干预组。另外选取10只正常老化小鼠(SAMR1)作为正常组。艾烟干预分为低、中、高3个浓度,干预时间分别为15 min和30 min,每日干预1次,共28 d。采用高效液相色谱法测定各组小鼠脑内谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果模型组小鼠脑内Asp和Glu含量高于正常组,GABA低于正常组。艾烟干预各组小鼠脑内Asp和Glu含量均低于模型组,GABA含量高于模型组,或与模型组相当。不同浓度、时间艾烟干预对Asp和Glu的影响无差异。中浓度30 min的艾烟干预可最大程度提高SAMP8脑内GABA。结论艾烟干预可降低SAMP8脑内过高的Glu、Asp含量,升高过低的GABA含量,通过调整脑内氨基酸的异常代谢达到抗衰老的效应。     

电针迎香穴对嗅觉障碍大鼠嗅粘膜Ki-67、IGF-1R及嗅球IGF-1表达的影响

目的:观察电针迎香穴干预嗅觉障碍大鼠嗅粘膜Ki-67、IGF-1R及嗅球IGF-1表达的影响。方法:取SD雄性大鼠40只,随机分为空白组,嗅觉障碍组,嗅觉障碍+电针迎香穴组,嗅觉障碍+眶下神经切断+电针迎香穴组,每组10只。除空白组外,其余各组均用灌注Triton X-100的方法建立嗅觉障碍,造模成功后进行电针干预10d,用免疫组织化学法及Western blot法测定组织中Ki-67、IGF-1和IGF-1R的表达水平。结果:嗅觉障碍模型中嗅黏膜Ki-67、IGF-1R和嗅球IGF-1表达减少(P0.05),电针迎香穴可以显著增加嗅黏膜Ki-67、IGF-1R和嗅球IGF-1的表达水平(P0.05),而电针迎香穴+眶下神经切断组则无显著干预效应。结论 :电针迎香穴干预可以改善TritonX-100诱导的大鼠嗅觉功能障碍,其机制可能与提高嗅觉神经相关细胞因子Ki-67和IGF-1、IGF-1R在嗅黏膜及嗅球的表达有关,且迎香穴的干预效应与三叉神经通路的完整性密切相关。     

不同浓度艾烟吸入对大鼠嗅黏膜上皮细胞凋亡与再生的影响

目的:通过观察长时间艾烟吸入对大鼠嗅黏膜上皮细胞的影响,探讨艾烟的安全性。方法:健康成年SD大鼠,雌雄各半,随机分为正常组、低浓度艾烟组(低烟组)、中浓度艾烟组(中烟组)和高浓度艾烟组(高烟组),每组8只。正常组常规饲养,不同浓度艾烟组分别置于不同浓度的艾烟环境中进行艾烟熏灸,4 h/次,2次/d,共持续90 d。对各组大鼠进行持续90 d的一般状态观察;通过找寻食物小球实验比较各组大鼠找寻食物的时间;用TUNEL法观察各组大鼠嗅黏膜上皮细胞凋亡情况;用免疫组织化学法检测大鼠鼻黏膜基底细胞增殖情况。结果:与正常组、低烟组比较,中烟组、高烟组大鼠行为活动减弱,且对刺激反应强烈,精神状态较差,寻找食物小球时间明显延长(P0.01)。与正常组比较,低、中、高烟组大鼠鼻黏膜嗅上皮凋亡细胞、基底增殖细胞增多(P0.01,P0.05);中、高烟组大鼠鼻黏膜嗅上皮凋亡细胞、基底增殖细胞较低烟组明显增多(P0.01);高烟组大鼠鼻黏膜嗅上皮凋亡细胞、基底增殖细胞较中烟组明显增多(P0.01)。结论:(1)长时间的中、高浓度艾烟吸入会对嗅觉功能产生损害,降低大鼠嗅觉灵敏度;低浓度艾烟对嗅觉功能没有显著影响。(2)长时间的艾烟吸入可诱导嗅黏膜上皮细胞的凋亡,并促进基底细胞增殖。     

不同浓度艾烟环境对大鼠鼻黏膜损伤及血清IL-1、IL-6和TNF-α表达的影响

目的:观察长时间不同浓度艾烟环境对大鼠嗅觉功能的影响,为艾灸过程产生的艾烟安全性研究提供实验依据。方法:将40只SD大鼠随机分为正常对照组、低浓度艾烟组(低烟组)、中浓度艾烟组(中烟组)和高浓度艾烟组(高烟组),每组10只。艾烟组大鼠分别放入3个不同艾烟浓度有机玻璃艾灸箱内进行每日2次、每次4 h的艾烟烟熏干预,持续90 d。实验前及实验中对大鼠一般状态进行评估;干预结束后,通过双瓶实验(TBE)对大鼠进行嗅觉评估,采用HE染色观察大鼠鼻黏膜组织形态、TUNEL法检测大鼠鼻黏膜嗅上皮细胞凋亡情况,采用ELISA法检测大鼠血清白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:艾烟烟熏后期(干预45～90 d),中烟组、高烟组大鼠行为活动较正常对照组大鼠减弱,且对刺激反应强烈,精神状态较差;干预结束后,中烟组、高烟组大鼠醋水混合液饮用率均高于正常对照组、低烟组(P0.01);中烟组、高烟组大鼠鼻黏膜层次结构不清、排列紊乱,有坏死,炎性细胞浸润严重;中烟组、高烟组大鼠鼻黏膜嗅上皮凋亡细胞数多于正常对照组、低烟组(P0.01),高烟组多于中烟组(P0.01);低烟组、中烟组、高烟组大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α含量高于正常对照组(P0.01),且中烟组、高烟组高于低烟组(P0.01),高烟组高于中烟组(P0.01)。结论:长期暴露在低、中、高浓度艾烟环境中均会引起大鼠鼻黏膜组织病理改变,导致血清IL-1、IL-6、TNF-α含量升高,并且中、高浓度艾烟环境会对嗅觉功能产生一系列损害,降低大鼠嗅觉灵敏度。     

艾燃烧生成物对ApoE基因敲除小鼠脑内神经递质5-HT、GABA的影响

目的:观察艾燃烧生成物即艾烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠(Apo E~(-/-))大脑内神经递质5羟色胺(5-HT)和γ-氨基丁酸(GABA)含量变化的影响。方法:本实验选用8周龄载脂蛋白E基因敲除小鼠(Apo E~(-/-)小鼠)21只,7只同龄相同遗传背景非转基因小鼠C57BL/6作为空白对照组。Apo E~(-/-)小鼠随机平均分为艾烟组、模型对照组、氯吡格雷组。艾烟组小鼠5~15 mg/m~3浓度艾烟干预,空白对照组和模型对照组小鼠空白抓取,氯吡格雷组口服给予氯吡格雷溶液14 mg/kg(1次/d),各组干预6 d/周,16周后牺牲动物,使用LC-MS/MS同时测定脑组织中神经递质GABA、5-HT含量。结果:艾烟组其脑内5-HT、GABA的含量显著高于模型组(P0.05),氯吡格雷组脑内5-HT与模型组无明显差异,GABA的含量显著高于模型组(P0.05),3组间均具有统计学意义(P0.05)。结论:适当施灸时,一定浓度范围之内的艾燃烧生成物可以治疗性提高Apo E~(-/-)小鼠脑内5-HT及GABA的含量。     

不同处理方式艾燃烧生成物对动脉粥样硬化小鼠炎症及斑块稳定性的影响

目的观察不同处理方式艾燃烧生成物对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠血清炎症因子及斑块稳定性的影响。方法40只雄性8周龄ApoE-/-小鼠随机均分为5组:艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组、艾叶精油组、模型组。8只同龄雄性C57BL/6小鼠为空白对照。艾烟组置于遮光率为2%的艾烟环境;滤过艾烟组置于艾烟滤过后的环境;艾绒挥发组置于150℃加热艾绒挥发环境;艾叶精油组置于精油雾化环境。干预14周后,ELISA测定血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)含量,HE染色观察主动脉病理改变。结果与模型组相比,艾烟组与滤过艾烟组小鼠血清INF-γ、MMP-9显著降低(P>0.05),IL-10、TIMP-1显著升高(P>0.05),主动脉病变显著减轻,两组间无显著差异(P<0.05)。结论艾烟与滤过艾烟可抑制血管内炎症反应及稳定斑块,有效缓解动脉粥样硬化病变。     

艾燃烧生成物对快速老化模型小鼠SAMP8血清抗氧化酶的影响

目的:探讨艾燃烧生成物(即艾烟)的抗衰老作用及其适宜干预参数。方法:采用析因设计,将70只快速老化小鼠(SAMP8)随机分为模型组(M组)和6个艾烟干预组:低浓度15min组(A1组)、低浓度30min组(A2组)、中浓度15min组(B1组)、中浓度30min组(B2)、高浓度15min组(C1组)、高浓度30min组(C2组),每组10只;10只正常老化小鼠(SAMR1)为正常组(Z组)。6个艾烟干预组分别用相应浓度和时间的艾烟进行熏灸。观察小鼠血清丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化。结果:模型组MDA的含量高于正常组(P<0.05),SOD和GSH-Px的活性则低于正常组(均P<0.05);艾烟干预各组各项指标或与模型组相当,或优于模型组。MDA含量和GSH-Px活性以B1组为优,SOD活性以B2组为优。时间因素无意义,浓度因素有意义,两因素对SOD和GSH-Px的影响存在交互作用。结论:一定浓度和时间的艾烟可通过提高机体抗氧化能力、减少自由基代谢产物而起到显著的抗衰老作用。艾烟干预以中浓度30min为宜。     

嗅三针对阿尔茨海默病小鼠学习能力和海马IL1-β、IL-6表达的影响

目的:观察"嗅三针"对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习和海马IL1-β和IL-6表达的影响,以阐明其基于嗅觉通路治疗AD的作用机制。方法:采用APP/PS1转基因小鼠作为AD小鼠模型,小鼠嗅觉通路阻断模型采用嗅神经切断术建立,将40只AD小鼠随机分为模型对照组、嗅神经切断嗅三针组、嗅三针组、盐酸多奈哌齐组,每组10只,另取10只同窝的阴性小鼠作为正常对照组。通过"嗅三针"对印堂穴和双侧迎香穴行电针刺激,每次10分钟,以3mg/kg/d的剂量对盐酸多奈哌齐组AD小鼠进行灌胃,每周干预5次,间歇2天,共干预4周。小鼠学习能力采用Morris水迷宫进行监测,应用Western blot技术检测海马IL1-β和IL-6表达水平。结果:嗅三针刺激和盐酸多奈哌齐灌胃能够显著缩短AD小鼠平均逃避潜伏期,并能显著降低海马IL1-β和IL-6的表达,与AD模型组比较,差异具有显著性(P0. 05);嗅神经切断嗅三针组对AD小鼠平均逃避潜伏期以及海马IL1-β和IL-6的表达均无明显影响,与AD模型组比较,差异无显著性(P0. 05),嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较无显著性差异(P0. 05)。结论:"嗅三针"具有改善AD小鼠学习能力,降低海马水平IL1-β和IL-6表达的作用,嗅觉通路的完整性可能是其发挥干预效应的核心机制。     

艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠自主行为与海马GFAP表达的影响

目的观察艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠自主行为能力与海马中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法将13只8周龄C57BL/6小鼠作为空白对照组,27只同龄Apo E-/-小鼠随机分为Apo E-/-模型组、艾烟组、香烟组。香烟组与艾烟组中小鼠暴露于5~15 mg/m3烟气环境。各组小鼠每天干预20 min,每星期6 d,共干预12星期。于第13星期进行行为学测试,之后处死动物、取材,对脑组织海马中GFAP进行免疫组化法检测。结果空白组小鼠自主活动明显高于模型组小鼠自主活动(P0.05);香烟组没有表现出与模型组、艾烟组的明显差异(P0.05),但低于空白组(P0.05)。艾烟组移动距离高于模型组(P0.05),站立次数低于空白组。模型组小鼠海马中GFAP免疫反应产物积分光密度明显高于空白组与艾烟组(P0.05)。香烟组小鼠海马GFAP表达高于艾烟组与空白组(P0.05)。结论艾烟可能增强小鼠中枢神经系统的兴奋性,减低阿茨海默病模型小鼠海马中GFAP的表达。     

艾燃烧生成物对SAMP8小鼠血清Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察艾燃烧生成物对SAMP8小鼠血清Th1/Th2细胞因子的影响。方法:选用6月龄SAMP8小鼠70只,采用2×3析因设计,随机分为模型组和6个艾烟干预组,每组10只;另以10只同月龄SAMR1作为正常组。6个艾烟干预组分别用相应浓度和时间的艾烟进行熏灸。以血清γ扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)含量作为检测指标。结果:模型组小鼠血清IFN-γ水平显著高于正常组,而IL-4水平则显著低于正常组(P<0.05);艾烟干预各组小鼠血清IFN-γ和IL-4水平或与模型组相当,或优于模型组;析因分析显示,时间和浓度两因素对血清IFN-γ和IL-4含量的影响不存在交互作用。时间因素对血清IFN-γ和IL-4的含量无影响,但浓度因素对两者含量有显著影响(P<0.05)。结论:一定浓度的艾烟可以通过对Th1/Th2细胞因子平衡的调节而起到显著的抗衰老作用。     

益智健脑颗粒水提浓缩液对P8系快速老化小鼠内嗅区组织差异蛋白质表达的影响

目的分析益智健脑颗粒水提浓缩液(Yizhi Jiannao Granule Concentration Fluid,YJGCF)干预前后P8系快速老化小鼠(senescence accelerated mouse P8,SAMP8)内嗅区组织的差异蛋白质表达,从蛋白质组学水平探讨中药益智健脑颗粒水提浓缩液治疗阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的作用机制。方法 6月龄SAMP8随机分为治疗组、模型组和对照组,每组10只。模型组不予处理,让其自由饮水,治疗组以YJGCF灌胃(0.3g/d),对照组以等剂量双蒸水灌胃。8周后、应用双向凝胶电泳技术分别分离3组SAMP8内嗅区组织总蛋白,得到差异蛋白质点,通过质谱分析得到相应肽质量指纹图谱,经蛋白质数据库查询,鉴定差异蛋白质点。结果治疗组与模型组存在32个差异点,初步鉴定了NADH脱氢酶铁硫蛋白6、Rho-GDP解离抑制因子α、β2珠蛋白、磷酸甘油酸激酶等14个差异蛋白质,其功能涉及线粒体能量代谢、氧化应激、神经元功能等方面。结论 YJGCF可调节SAMP8内嗅区组织的多种蛋白质表达,提示该药具有多靶点治疗的作用,且可能通过改善线粒体功能障碍、抗氧化应激、抑制神经细胞凋亡、保护神经元等途径来实现其治疗AD的作用。     

“嗅三针”干预对帕金森病模型小鼠嗅球超微结构及胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的:观察"嗅三针"干预对脂多糖(LPS)经鼻诱导的帕金森病小鼠嗅球超微结构和中脑黑质胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响,为帕金森病的早期诊治提供思路及证据。方法:选用C57BL/6雄性小鼠40只,随机分为空白组、模型组、电针组、药物组,每组10只。除空白组外,其余各组均用经鼻灌注LPS 30 d建立帕金森模型。电针组自造模结束第1天起取双侧"迎香""印堂"穴进行电针干预,留针20 min,每日1次,5 d为一疗程,疗程间休息2 d,共进行4个疗程。药物组腹腔注射左旋多巴注射液10 mg/m L,每日1次,5 d为一疗程,疗程间休息2 d,共进行4个疗程。空白组与模型组不进行干预。各组小鼠于干预结束后第1天采用足迹分析及游泳试验评分法进行行为学测试,并采用透射电镜观察嗅球超微结构变化,免疫印迹法测定中脑黑质GFAP蛋白表达的变化。结果:(1)造模后,模型组、电针组、药物组小鼠震颤、怕冷等症状显著,且体质量较空白组显著下降(均P0.01);行为学测试结果显示,模型组、电针组、药物组小鼠步长及游泳时间均较空白组小鼠显著减少(均P0.01),确认造模成功。(2)第1个疗程后,电针组未见震颤、怕冷、立毛等症状。经4个疗程干预后,电针组小鼠体质量较模型组显著升高(P0.05),药物组未见震颤、怕冷、立毛等症状,但体质量较模型组未发生明显变化(P0.05)。(3)干预后,与空白组比较,模型组小鼠步长及游泳时间均显著减少(均P0.01);与模型组比较,电针组和药物组小鼠步长和游泳时间明显增加(均P0.01)。(4)干预后,与空白组比较,模型组嗅球组织细胞器及超微结构病理改变明显,与模型组比较,电针组改善了嗅球超微结构。(5)干预后,与空白组比较,模型组小鼠黑质中GFAP蛋白的表达显著升高(P0.05);与模型组比较,电针组与药物组黑质中GFAP表达均下降(均P0.05)。结论:"嗅三针"早期干预可以改善LPS经鼻诱导的帕金森病模型小鼠行为学障碍,其机制可能与"嗅三针"改善嗅球超微结构及降底黑质GFAP的表达有关。     

艾灸及艾烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠血清MDA、SOD水平的影响

目的:观察艾灸及艾烟对载脂蛋白E基因敲除(Apolipoprotein E-deficient,Apo E~(-/-))小鼠氧化应激相关指标的影响。方法:38只8周龄Apo E~(-/-)小鼠随机分为5组:模型组(n=6)、假艾灸组(n=6)、香烟组(n=8)、艾烟组(n=9)、艾灸组(n=9),13只同龄C57BL/6小鼠作为正常对照,正常组与模型组小鼠暴露于玻璃缸中,艾灸与假艾灸组均对小鼠关元穴进行艾灸,假艾灸组艾条不点燃,艾烟组小鼠暴露于10~15 mg/m3的艾烟环境,香烟组小鼠暴露于10~15 mg/m3的香烟环境,各组小鼠每天干预20 min,连续干预12周,每周干预6 d,于12周末检测小鼠血清氧化应激指标丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的表达水平。结果:艾灸组及艾烟组血清MDA含量较模型组显著降低(P0.05),且艾灸组显著低于假艾灸组(P0.05),艾烟组显著低于香烟组(P0.05)。艾灸组及艾烟组血清SOD含量较模型组显著升高(P0.05),艾灸组显著高于假艾灸组(P0.05),艾烟组显著高于香烟组(P0.05)。结论:艾灸和艾烟是通过调节机体MDA、SOD水平,发挥抗氧化作用,保护血管内皮改善AS。     

艾灸及艾烟对ApoE~(-/-)小鼠血脂、肝脏病理形态及肝脏CD36、ABCA1表达的影响

目的观察艾灸及艾烟干预对动脉粥样硬化模型血脂、肝脏病理改变和肝细胞内胆固醇代谢相关分子的影响,分析艾灸和艾烟对胆固醇代谢的调节作用,探讨艾灸及艾烟的作用机制。方法将51只8周龄ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、艾烟组、艾灸组,每组17只,20只C57BL/6小鼠作为空白对照。正常组、模型组小鼠常规抓取和固定;艾烟组小鼠暴露于10 mg/m~3~15 mg/m~3艾烟环境;艾灸组小鼠艾灸关元穴。所有干预每日20 min,每星期6次,连续干预12星期。全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);HE染色观察肝脏病理形态;免疫组化法检测肝脏CD36、ABCA1的表达。结果模型组小鼠血清TG、LDL-C含量显著高于正常组(P=0.003,P=0.001),HDL-C含量显著低于正常组(P=0.007),TC含量与正常组无显著差异(P0.05);艾灸组小鼠血清TG、LDL-C含量显著低于模型组(P=0.03,P=0.001),HDL-C、TC含量与模型组无显著差异(P=0.11,P=0.11);艾烟组小鼠血清TG、LDL-C含量显著低于模型组(P=0.01,P=0.008),HDL-C含量与模型组无显著差异(P0.05);艾灸组与艾烟组各项血脂指标均无显著性差异(P0.05)。模型组小鼠肝细胞索、肝窦排列紊乱,肝细胞肿胀变性明显。艾烟组、艾灸组小鼠肝细胞肿胀程度明显减轻,炎细胞浸润程度较模型组减轻。模型组CD36表达显著高于正常组(P=0.004),ABCA1表达显著低于正常组(P0.001);艾灸组CD36表达与模型组无显著性差异(P=0.09),ABCA1表达显著高于模型组(P=0.03);艾烟组CD36表达显著低于模型组(P=0.02),ABCA1表达显著高于模型组(P=0.002);艾灸组与艾烟组CD36、ABCA1表达均无显著差异(P0.05)。结论早期艾灸关元穴可以一定程度调整动脉粥样硬化模型ApoE~(-/-)小鼠血脂代谢紊乱的状态,减缓肝脏病变发生,减少肝脏内胆固醇的蓄积,这可能是艾灸疗法预防动脉粥样硬化的作用机制之一。艾烟作为艾灸生成物,是艾灸发挥治疗作用的有效因素。     

不同针刺法对P15在SAMP8不同脑区星型胶质细胞表达的影响

[目的]了解细胞周期相关因子细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(P15)在老年性痴呆(AD)模型快速老化模型小白鼠(SAMP8)不同脑区星型胶质细胞中的表达规律及不同针刺组方(醒脑组和补虚组)对其表达的影响。[方法]用免疫组化双标记法分别标记SAMP8脑组织星型胶质细胞(AS)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(P15),用病理图像分析技术测定皮质、海马、纹状体、嗅球4个脑区中同时标记为胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和P15阳性细胞数。[结果]与正常组比较,AD模型组海马区同时表达GFAP和P15的阳性细胞数减少(P<0.05),其他3个脑区的表达差异无统计学意义。"醒脑组"可同时提高其在AD模型海马和嗅球中的表达,而"补髓组"只提高海马区的表达(P<0.05)。[结论]8月龄SAMP8海马区表达P15的星形胶质细胞减少,可能是AD重要的病理机制;针刺可促进不同脑区星型胶质细胞P15的表达,并有针刺组方特异性。增加海马、嗅球区星形胶质细胞P15的表达,可能是"醒脑开窍"针刺法干预AD的潜在机制。     

损毁嗅球对血管性痴呆大鼠学习记忆功能的影响

目的 探索损毁嗅球对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆功能的影响.方法 制作VD及其损毁嗅球大鼠模型,测试大鼠水迷宫学习记忆能力.结果 定位航行试验显示,6 d平均逃避潜伏期比较,嗅球损毁模型明显短于VD模型组(P<0.01),嗅球损毁后VD造模组显著长于VD模型组(P<0.01),VD造模后嗅球损毁组略长于VD模型组(P<0.05).空间探索试验显示,原平台象限跨越相应平台的次数比较,VD模型组、VD造模后嗅球损毁组、嗅球损毁后VD造模组均明显少于嗅球损毁模型组(P<0.01);VD模型组与VD造模后嗅球损毁组之差异无显著性意义(P>0.05);而VD模型组与嗅球损毁后VD造模组之差异有显著性意义(P<0.05).结论 单纯损毁嗅球能够降低正常大鼠的学习记忆功能,但尚不能达到痴呆程度.如果损毁嗅球后再附加脑缺血因素,则显著降低大鼠学习记忆功能,由此加重了痴呆的程度;如果在脑缺血后再行损毁嗅球,则未见明显降低大鼠学习记忆功能.     

“嗅三针”对帕金森病小鼠TH表达的影响

目的通过观察"嗅三针"干预对长期低剂量鼻饲脂多糖(LPS)帕金森(PD)模型小鼠行为学、嗅黏膜及黑质TH表达的影响,初步探讨针刺"嗅三针"调节PD早期的作用机制。方法选取C57BL/6雄性小鼠40只,随机分为空白组(Control),帕金森模型组(Model),嗅三针干预组(XSZ),西药左旋多巴组(L-DOPA),10只/组。除空白组外,其余各组均用经鼻灌注脂多糖(LPS)的方法建立PD模型,造模同时进行电针干预10 d,观察嗅黏膜病理变化及酪氨酸羟化酶(TH)表达水平。结果 PD模型组中嗅黏膜病理改变明显,TH在黑质的表达减少(P 0.05),经"嗅三针"干预后可以增加黑质TH表达,西药左旋多巴组对嗅觉改善无明显效应,但对可以增加PD模型小鼠黑质TH的表达(P 0.05)。结论针刺"嗅三针"可以改善PD早期小鼠的行为学功能障碍,其机制可能是通过改善嗅黏膜及增加TH在黑质的表达而实现的。     

嗅三针对阿尔茨海默病小鼠海马区磷酸化P38MAPK和TNF-α表达的影响

目的:观察嗅三针对阿尔茨海默病(AD)小鼠海马磷酸化P38MAPK和TNF-α表达的影响,以阐明其基于嗅觉通路治疗AD的作用机制。方法:将40只AD小鼠随机分为模型组、嗅神经切断嗅三针组、嗅三针组、盐酸多奈哌齐组,每组10只,另取10只同窝的阴性小鼠作为正常对照组。通过嗅三针对印堂穴和双侧迎香穴行电针刺激,每次10min,以3mg(kg·d)的剂量对盐酸多奈哌齐组AD小鼠进行灌胃,每周干预5次,间歇2d,共干预4周。应用Western blot技术检测海马p-p38MAPK蛋白,免疫组化法检测TNF-α表达水平。结果:嗅三针刺激和盐酸多奈哌齐灌胃能够显著降低海马p-p38MAPK蛋白和TNF-α的表达,与AD模型组比较,差异具有显著性(P<0.05)。嗅神经切断嗅三针组对AD小鼠海马p-p38MAPK蛋白和TNF-α的表达均无明显影响,与AD模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:嗅三针具有调控P38MAPK通路,降低AD小鼠海马炎症因子TNF-α表达的作用,嗅觉通路的完整性可能是其发挥干预效应的核心机制。     

不同含量艾烟浓度对大鼠免疫系统水平调节的影响

目的:观察密闭空间内不同浓度艾烟对大鼠免疫系统的影响,探讨吸入艾烟导致的免疫调节作用与其浓度的关系,为临床安全使用艾灸疗法提供理论依据。方法:将40只Wistar大鼠随机分为4组,分别暴露于无艾烟环境及低、中、高浓度的艾烟中(以艾绒不同重量为度量),每天2 h,持续30 d。运用ELISA法检测不同浓度组大鼠血清中IgG、IgM含量的变化。结果:(1)IgG指标各艾烟暴露组与对照组组间差异无统计学意义(P0.05),低、中浓度艾烟暴露组与高浓度艾烟暴露组组间差异具有统计学意义(P0.01)。(2)IgM指标各组间差异均无统计学意义(P0.05)。结论:不同浓度的艾烟对大鼠的免疫系统均有调节作用,低、中浓度的艾烟相比高浓度的艾烟能够更好地调节免疫水平,抑制机体过激的免疫反应。