六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸对大鼠BMSCs向脂肪细胞分化相关基因表达的影响

目的:研究补肾益气功效的六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂分化的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,补肾阴、补肾阳和补肾健骨方药(代表方分别为六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸)含药血清干预BMSCs成脂分化过程,采用反转录-实时荧光定量技术(RT-q real-time PCR),观察成脂分化相关基因Lpl、Fabp4和PparγmRNA表达水平的变化。结果:与10%正常大鼠血清相比较,Fabp4 mRNA在补肾阴组、补肾阳组(10%含药血清)表达水平均下降33%,但无统计学意义;Lpl mRNA在补肾阳组和补肾健骨组(10%含药血清)表达水平下降,其中补肾阳组具有统计学意义。PparγmRNA在其它各组表达无显著性变化。结论:六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸对转录因子表达水平无显著改变,但对其下游靶基因表达水平有显著下调作用,金匮肾气丸对成脂分化过程中成脂相关基因下调作用最为明显,推测其抑制骨髓间充质干细胞成脂分化能力较其它功效的方药更强。     

金匮肾气丸治疗糖尿病肾病疗效Meta分析

目的采用Meta分析的方法系统评价金匮肾气丸治疗糖尿病肾病的临床疗效。方法通过检索CNKI、万方数据库、VIP、CBM及Pub Med数据库,收集金匮肾气丸治疗糖尿病肾病的随机对照试验,根据纳入、排除文献标准和结局指标对所有文献进行筛选,采用Rev Man5.3软件进行Meta分析。结果共纳入文献10篇,累计患者716例。Meta分析结果显示,金匮肾气丸治疗糖尿病肾病,与对照组相比,可显著提高临床疗效[OR=3.53,95%CI(2.37,5.25),P 0.000 01]并降低24 h尿蛋白[MD=-0.29,95%CI(-0.48,-0.11),P=0.002]、血肌酐[MD=-26.31,95%CI(-43.43,-9.19),P=0.003]、尿素氮[MD=-1.06,95%CI(-2.07,-0.04),P=0.04]和餐前血糖水平[MD=-0.50,95%CI(-0.85,0.14),P=0.006]。结论金匮肾气丸治疗糖尿病肾病疗效确切。     

补肾健骨类中成药治疗骨质疏松症的Meta分析

目的系统评价三组补肾健骨类中成药治疗骨质疏松症的临床疗效。方法计算机检索SCI、中国期刊全文数据库(CNKI)、Cochrane图书馆、EMbase、万方等各类中、英文数据库,检索年限截止至2017年12月。检索有关补肾健骨中药的中成药治疗骨质疏松症的随机对照文献(RCTs)。采用Rev Man 5.3软件进行对数据的Meta分析。结果纳入24项RCT(每组8项),涉及受试者2423例。Meta分析结果显示,对比3组中成药,在骨密度(BMD)和有效率方面,以淫羊藿和补骨脂为主的中成药(仙灵骨葆胶囊),治疗组优于对照组最为明显(MD=0.09,95%CI为0.05~0.14,P0.0001;RR=1.41,95%CI为1.24~1.61,P0.00001);在免疫指标(血ALP)方面,3组差异均无统计学意义。结论以淫羊藿和补骨脂为主的中成药(仙灵骨葆胶囊)在治疗骨质疏松症的临床疗效在3组中最具有积极意义。     

补肾方剂对绝经后骨质疏松症大鼠的影响及其作用机制研究

目的考察补肾方剂六味地黄丸和金匮肾气丸对绝经后骨质疏松症(POMP)大鼠的治疗效果及其潜在的作用机制。方法采用双侧卵巢切除术构建POMP模型大鼠后,连续3个月灌胃给药治疗,通过双能X线骨密度仪和雌激素酶联免疫分析试剂盒分别检测大鼠股骨骨密度和血清雌激素水平。同时,体外分离培养大鼠原代成骨细胞,10,50,100 ng·μL~(-1)不同浓度补肾方剂处理后,通过CCK-8试剂盒和碱性磷酸酶(ALP)试剂盒分别检测成骨细胞活性和ALP活性;通过RT-PCR和WB检测成骨细胞内雌激素受体ERs(ERα,ERβ,ERRα)Collagen I和p-AMPK表达变化。结果金匮肾气丸可显著改善POMP大鼠股骨骨密度和血清雌激素水平(P0.05),但六味地黄丸作用不明显。成骨细胞经不同浓度补肾方剂处理后,浓度为50,100 ng·μL~(-1)的金匮肾气丸可有效提高成骨细胞活力、ALP活性和Collagen I蛋白表达,且金匮肾气丸浓度越高,作用效果越明显,而六味地黄丸对成骨细胞作用不显著。此外,金匮肾气丸可显著增加ERα的表达(P0.05,P0.01),抑制p-AMPK蛋白表达,但对ERβ、ERRα表达影响不明显。结论金匮肾气丸可通过促进ERα表达,抑制p-AMPK有效治疗POMP,明显促进成骨细胞增殖分化,改善成骨细胞功能,但六味地黄丸作用效果不显著。     

金匮肾气丸加减干预高血压病系统评价

目的系统评价金匮肾气丸加减干预高血压病的临床疗效与安全性。方法计算机检索中国知识资源总库(CNKI)、中国学术期刊数据库(万方数据)、中文科技期刊数据库(重庆维普)、Cochrane Library、Pub Med、Embase中金匮肾气丸加减干预高血压病临床随机对照试验文献。检索范围均从建库至2016年6月。按照Cochrane系统评价手册偏倚风险评估方法进行文献质量评价,采用Rev Man5.3软件进行Meta分析。结果共纳入9篇文献,共计受试者776例。Meta分析显示:与西药常规治疗比较,采用金匮肾气丸加减总有效率更优[OR=2.67,95%CI(1.73,4.11),P0.000 01],其中联合用药优于单纯西药常规治疗[OR=3.27,95%CI(1.99,5.39),P0.000 01],而单纯采用金匮肾气丸加减与单纯西药常规治疗疗效相当[OR=1.16,95%CI(0.43,3.09),P=0.77]。结论金匮肾气丸加减可改善高血压病患者的临床症状,联合用药可提高降压效果,安全性较好。但纳入研究文献质量偏低,尚需更多大样本、多中心、高质量的临床随机对照试验进一步验证。     

补肾方剂对绝经后骨质疏松症的影响及其作用机制研究

目的：考察补肾方剂六味地黄丸和金匮肾气丸对绝经后骨质疏松症（POMP）的影响及其相关作用机制。 方法：通过双侧卵巢切除术建立POMP模型大鼠,连续3个月补肾方剂六味地黄丸和金匮肾气丸给药后,通过双能X线骨密度仪测定大鼠股骨骨密度,通过雌激素酶联免疫分析试剂盒测定血清雌激素水平。体外原代培养成骨细胞,不同浓度（10-100 ng·μL-1）六味地黄丸和金匮肾气丸处理后,通过CCK-8试剂盒检测成骨细胞活力,通过碱性磷酸酶试剂盒检测成骨细胞ALP活性,通过RT-PCR实验及免疫印迹法检测成骨细胞雌激素受体ERs（ERα,ERβ,ERRα）Collagen I和p-AMPK表达,通过检测表达。 结果：金匮肾气丸可显著改善POMP大鼠股骨骨密度和血清雌激素水平（P<0.05）,但六味地黄丸作用不明显。此外,成骨细胞经不同浓度补肾方剂处理后,浓度为50 ng·μL-1和100 ng·μL-1的金匮肾气丸可有效提高成骨细胞活力,ALP活性和Collagen I蛋白表达,且随着金匮肾气丸浓度越高,作用效果越明显,而六味地黄丸对成骨细胞作用不显著。此外,金匮肾气丸可显著提高ERα的mRNA表达（P<0.01）及ERα蛋白表达,明显抑制p-AMPK蛋白表达,但对ERβ,ERRα表达影响不明显。 结论：金匮肾气丸可通过促进ERα表达,抑制p-AMPK有效治疗POMP,明显促进成骨细胞增殖分化,改善成骨细胞功能,但六味地黄丸作用效果不显著。     

金匮肾气丸治疗2型糖尿病疗效的Meta分析

目的:运用循证医学的方法,对金匮肾气丸治疗糖尿病的疗效进行评价。方法:通过检索相关文献,对符合标准的试验进行质量评价和Meta分析。结果:选取的8个试验符合标准,纳入人数共计450例。Meta分析结果提示,4个评价指标除空腹血糖外,临床疗效上肾气丸中药复方组均优于对照组。结论:纳入的8个研究存在同质性(chi2=2.02,P=0.96),故使用固定效应模型,Z=5.64(P0.100 001),OR值=4.175,95%CI为(3.100,7.151)。结果表明,金匮肾气丸组与纯西医组在临床疗效上存在显著性差异,所以金匮肾气丸治疗糖尿病可能比单纯西药治疗效果好,提示金匮肾气丸中药复方在改善糖尿病方面可能存在一定的优势,但尚需更多高质量的研究以使证据强度更高。     

六味地黄丸合金匮肾气丸加减治疗较小肾结石100例临床观察

目的 观察六味地黄丸合金匮肾气丸加减治疗不适合手术的较小肾结石(直径<1.0cm)的临床疗效.方法 将200例肾结石患者随机分为两组,治疗组100例辨证分为肾阴虚组(治疗A组)、肾阳虚组(治疗B组)各50例,分别采用六味地黄丸加减与金匮肾气丸加减治疗;对照组100例采用排石冲剂治疗.结果 治疗A组治愈率为60%、有效率为86%;治疗B组治愈率为62%、有效率为88%.对照组治愈率为7%、总有效率为35%.两治疗组的治愈率、总有效率均较对照组有显著性差异(P<0.01).结论 六味地黄丸合金匮肾气丸加减治疗较小肾结石有效.     

六味地黄丸应为滋阴利水剂

六味地黄丸世人都谓其为滋阴补肾之方,而忽视了其利水渗湿之功。 首先,从组方机理看,方中是以熟地滋补肾阴为主药;辅以山萸肉、怀山药健脾补肝肾养阴而涩精;又以泽泻去肾之湿浊,茯苓淡渗脾湿,丹皮清泄虚火,共为佐使。用药以滋阴药为主辅,化湿祛浊药为佐使,则其功效应是以滋阴补肾为主,兼有利水化湿作用。 六味地黄丸由金匮肾气丸衍变而来。金匮肾气丸的温阳利水作用已为人们所公认,六味地黄丸是在金匮肾气丸原方中减去了温补肾阳的桂枝、附子而保留了滋阴补肾、化浊利水之药。因此可以认为:金匮肾气丸是用于肾脏阴阳两虚、     

六味地黄丸、金匮肾气丸及健骨二仙丸含药血清对BMSCs成脂、成骨细胞分化相关基因的影响

目的研究补肾方药对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的前脂肪细胞向成骨分化的影响。方法采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,用经典化学方法诱导BMSCs为前脂肪细胞,用六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸含药血清(含量浓度均为10%,分别代表补肾阴、补肾阳和补肾填精方药),干预前脂肪细胞成骨分化过程;采用反转录-实时荧光定量PCR技术(RT-real time qPCR),分别于第6、12和18天,检测成骨分化相关基因RUNX2、ALP、BGP、BMP2、BMP4、SPP1和IGF1 mRNA,及成脂分化相关基因LPL、FABP4和PPARγ mRNA表达水平。结果对于成骨分化相关基因,与对照组比较,第6天各组基因表达无显著变化(2.0>Ratio>0.5);第12天,金匮肾气丸组IGF1和RUNX2 mRNA表达升高较为显著,相对表达量(Ratio)分别为2.97和1.81;第18天,各组IGF1 mRNA表达均显著上升,六味地黄丸组、金匮肾气丸组和健骨二仙丸组Ratio值分别为3.74、12.60和8.35;各组SPP1 mRNA表达也显著升高,Ratio值分别为2.94、3.18和2.62。对于成脂分化相关基因,第6天,六味地黄丸组和金匮肾气丸组FABP4mRNA表达显著下降(Ratio分别为0.47和0.40),其他基因表达均下调,但不显著;第12天和第18天,成脂分化基因表达变化均无显著变化(2.0>Ratio>0.5)。结论成骨分化相关基因在补肾方药作用较晚时间出现表达上调的变化,而成脂分化相关基因在补肾方药作用较早时间即出现表达下调的改变,并且提示补肾阳法促进成骨分化、抑制成脂分化作用更为显著。     

六味地黄丸干预绝经后骨质疏松症患者基因表达谱分析

目的探讨中药六味地黄丸干预绝经后骨质疏松患者的分子机制并分析预测其靶标和药物作用通路。方法检索并下载GEO中与采用六味地黄丸干预绝经后骨质疏松症的微阵列基因表达数据集。通过获取的基因表达数据集,分析六味地黄丸干预前后绝经后骨质疏松症患者血液中差异表达基因变化,并将这部分差异表达基因与在绝经后骨质疏松症患者和正常绝经女性血液中差异表达的基因取交集,获得两对比组中共同差异表达的基因。通过基因本体论数据库(GO)对获得的共同差异表达基因分别从生物过程(BP)、分子功能(MF)和细胞组分(CC)三方面进行功能富集分析;利用京都基因和基因组百科全书数据库(KEGG)进行通路富集分析。利用生物通用交互数据集库(BioGRID)分析获得与共同差异表达基因产物互作的蛋白质,并构建蛋白质-蛋白质互作关系(PPI)网络,采用Cytoscape软件实现蛋白质-蛋白质互作关系网络的可视化。应用中医药数据库(BATMAN-TCM)对六味地黄丸主要中药成分的靶标基因进行预测。结果六味地黄丸干预后,得到1 350个差异表达基因,其中上调表达基因322个,下调表达基因1 027个。58个共同差异表达基因与六味地黄丸干预绝经后骨质疏松的分子机制相关,六味地黄丸干预后43个基因下调,15个基因上调。六味地黄丸主要中药成分的10个共同差异表达基因靶标为ESR1, FGFR2, MED1, PGR, PRKCB, PTGS1, PTGS2, TRIM24, VDR, WNT4。与六味地黄丸干预组差异表达基因对比分析,ATF2, FBXW7以及RDX基因在干预后呈现显著差异表达。结论 ATF2, FBXW7和RDX基因为参与六味地黄丸干预绝经后骨质疏松分子调控机制的关键基因。六味地黄丸主要中药成分的10个共同靶标基因中,ESR1, FGFR2, MED1, WNT4为六味地黄丸干预治疗绝经后骨质疏松等相关内分泌疾病的潜在调控基因。     

六味地黄丸含药血清减弱高糖环境下肾系膜细胞的增殖和炎性因子表达

目的:观察六味地黄丸含药血清对高糖环境下培养的大鼠系膜细胞增殖和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:制备不同剂量大鼠六味地黄丸含药血清,并培养高糖诱导的大鼠系膜细胞。分别给予以下分组处理:空白(NG)组,高糖(HG)组,HG+对照血清组(10%对照血清),HG+低剂量组(2.5%六味地黄丸血清+7.5%对照血清),HG+中剂量组(5%六味地黄丸血清+5%对照血清),HG+高剂量组(10%六味地黄丸血清)。六味地黄丸含药血清处理24,48 h后,采用四甲基偶氮唑盐法和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)掺入法观察系膜细胞活性和增殖的变化,使用ELISA检测细胞培养上清液中MCP-1和ICAM-1分泌量,RT-PCR法检测系膜细胞MCP-1和ICAM-1 mRNA表达。结果:与空白组比较,高糖组在培养的24,48 h内系膜细胞的增殖活性、上清液中MCP-1和ICAM-1的含量,MCP-1和ICAM-1 mRNA的表达显著上调(P0.01)。与高糖组比较,5%和10%六味地黄丸含药血清均能逆转上述变化(P0.05),且抑制作用呈一定的时间、剂量依赖关系。结论:高糖可致系膜细胞增殖活性和MCP-1和ICAM-1的表达上调,六味地黄丸可降低增殖活性,减少MCP-1和ICAM-1分泌,下调MCP-1和ICAM-1 mRNA表达,从而有利于延缓糖尿病肾病肾小球硬化的进展。     

六味地黄丸对自发乳腺癌小鼠瘤块中血管内皮生长因子和周期蛋白D3基因表达的影响

目的:探讨六味地黄丸对小鼠自发乳腺癌的影响。方法:以清洁级昆明小鼠雌性种鼠自发乳腺癌为模型,用六味地黄丸治疗直至濒死期,瘤块病理分析用HE染色,血管内皮生长因子(VEGF)和周期蛋白D3(cyclin D3)基因表达的产物用RT-PCR及Western bloting方法。结果:六味地黄丸组的瘤组织分化优于对照组,瘤重明显低于对照组(P0.05),瘤块中VEGF和cyclin D3基因表达产物也明显低于对照组(P0.05)。结论:六味地黄丸抑制乳腺癌的生长,促进细胞分化,可能的机制是抑制VEGF和cyclin D3基因表达。ds     

补益方抗环磷酰胺造模小鼠脾细胞凋亡作用的研究

目的:研究六味地黄丸等5种补益方对环磷酰胺(CPP)造模小鼠脾细胞凋亡及细胞周期的影响.方法:选择ICR小鼠,采用流式细胞术检测脾细胞凋亡率及细胞周期等.结果:5种补益方中,四君子汤、六味地黄丸、生脉散、金匮肾气丸能拮抗CPP引起的脾细胞增殖抑制;六味地黄丸、四君子汤能拮抗CPP引起的脾细胞凋亡;5种补益方均能拮抗CPP所致的脾脏萎缩.结论:5种补益方均有不同程度的改善CPP所致脾脏损害的作用,其中以四君子汤、六味地黄丸效果较佳.     

六味地黄丸对肾虚型老年痴呆动物模型的改善作用

目的:研究六味地黄丸对肾虚型老年痴呆动物模型的改善作用.方法:48只小鼠随机分为对照组、模型组、六味地黄丸组、塞络通组;各试验组按照15 mg·kg-1连续sc氢化可的松40 d,第20天时侧脑室注射β-淀粉样蛋白(25-35)(Aβ25-35)6μg建立肾虚型老年痴呆动物模型,对照组给予等量生理盐水.从第21天开始,六味地黄丸组小鼠按8 g·kg-1 ig六味地黄浓缩丸,塞络通组小鼠按32 mg· kg -1 ig塞络通,对照组和模型组以相同体积每日ig蒸馏水.从第31天开始观察、检测各组小鼠的体重及状态、学习记忆能力、自主活动、抗疲劳能力、血清皮质酮含量、免疫学指标及脑组织病理学变化.结果:与对照组相比,模型组小鼠出现体重增长缓慢,自主活动受到抑制,水迷宫学习记忆能力受损,跑步力竭时间缩短,胸腺和脾指数降低,脾细胞刺激指数降低,血清皮质酮值降低.与模型组比较,六味地黄丸组小鼠的体重增长、自主活动、水迷宫上台潜伏期及游出率、跑步力竭时间、胸腺和脾指数、脾细胞刺激指数、血清皮质酮值等得到明显改善(P＜0.05,P＜0.01),而塞络通组小鼠各项指标改善不明显.结论:六味地黄丸对肾虚型老年痴呆症状具有显著改善作用,而塞络通不适合用于改善肾虚症状.     

清肺调血汤合金匮肾气丸治疗COPD稳定期20例临床观察

目的观察清肺调血汤合金匮肾气丸治疗慢性阻塞性肺疾病（COPD）稳定期的临床疗效。方法将40例COPD稳定期患者随机分为治疗组和对照组,治疗组20例给予清肺调血汤合金匮肾气丸治疗,对照组20例给予安慰剂治疗,两组疗程均为30天。结果治疗组治疗后中医证候明显改善（P〈0.05）,与对照组治疗后比较有显著性差异（P〈0.05）。结论清肺调血汤合金匮肾气丸可显著改善患者COPD稳定期临床症状。     

近距离放射损伤对大鼠脊髓神经细胞降钙素基因相关肽的影响及金匮肾气丸的干预作用

目的:观察192Ir近距离放射后对大鼠脊髓神经细胞降钙素基因相关肽(CGRP)的影响及金匮肾气丸的干预作用。方法:将120只SD大鼠随机分为模型组、金匮肾气组、强的松组和正常对照组,各组每日给予相应的药物,连续给药14d后,除正常对照组外,其它各组均采用后装技术在大鼠脊髓进行192Ir近距离照射,照射剂量均为22Gy,试验大鼠分别在照射后8h,24h,4周时取损伤节段脊髓,应用免疫组化方法检测CGRP的变化。结果:与正常组比较,近距离照射后大鼠脊髓组织CGRP阳性细胞数明显增多、强度明显增加(P&lt;0.01);金匮肾气丸和强的松组照射后8h,24h时阳性细胞数较模型组明显减少、强度明显变浅(P&lt;0.01);而照射后4周时阳性细胞数及强度与模型组照射后4周比无显著差异。结论:CGRP参与了大鼠脊髓损伤的发生、发展和愈合的过程,起到调控作用;金匮肾气丸对大鼠近距离放射性损伤具有保护作用。     

高效液相色谱法测定六味地黄丸的溶出度

目的：测定六味地黄丸中丹皮酚和马钱苷的溶出度。方法：采用溶出度第三法（小杯法）测定六味地黄丸的溶出度,以高效液相色谱法测定其浓度。结果：马钱苷24 h的平均累积溶出百分率为94.42%,丹皮酚24 h平均累积溶出百分率为68.75%。结论：该方法准确、可靠,可同时用于测定六味地黄丸中的两种成分的溶出情况。     

金匮肾气丸对正常高值血压的干预作用

目的观察金匮肾气丸治疗正常高值血压临床疗效及对颈动脉内膜中层厚度（intima-media thickness,IMT）的影响。方法将正常高值血压患者60例随机分为两组,治疗组30例在生活方式干预的基础上再给予金匮肾气丸口服,观察组30例仅进行生活方式干预,疗程均为15周,治疗前后检测颈动脉IMT的变化。结果治疗组总有效率73.3%,观察组总有效率53.3%,两组疗效比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗后两组颈动脉IMT均有所下降,仅治疗组前、后比较和两组治疗后比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论金匮肾气丸能有效治疗正常高值血压,并改善颈动脉IMT。