人参皂苷对K562细胞增殖与分化相关基因表达的影响

目的 探讨人参皂苷影响K562细胞增殖、分化的可能分子机制.方法 采用real-time PCR技术和SYBR Green染料法检测人参皂苷(20 μg/mL)作用于K562细胞36 h时间点Lif、Ccnd1、Mdm2、Erbb2、p53和myc等6个基因mRNA相对表达水平.结果 人参皂苷能显著促进K562细胞Li...     

难治性Gitelman综合征1例及临床诊疗体会

目的  分析1例难治性Gitelman综合征的临床特点并总结其诊疗体会。方法  以1例Gitelman综合征患者为研究对象,完善相关检验检查以及肾脏病理、SLC12A3基因分析。结果  该患者青年起病,临床表现为反复心悸、发作性四肢抽搐、乏力,检查提示低钾、低镁、代谢性碱中毒,肾穿病理提示肾小球旁器增生,基因分析提示SLC12A3的复合杂合突变。治疗上予补钾、补镁及保钾,病情可缓解但易反复。结论  本例患者低钾更难纠正,极易复发,临床症状明显,值得长期关注。

     

四君子汤对UC模型大鼠的治疗作用及其对紧密连接蛋白Occludin表达的影响

目的:观察四君子汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠治疗作用及其对黏膜上皮细胞紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)表达的影响。方法:SD大鼠实验分为正常组,模型组,阳性药组(柳氮磺胺吡啶肠溶片,SASP,0.4 g·kg~(-1)),四君子汤高、中、低剂量给药组(生药5.6,2.8,1.4 g·kg~(-1)),每组8只。除正常组外,其余各组采用TNBS灌肠法制作溃疡性结肠炎模型,造模24 h后各组分别按设计剂量连续ig给药10 d。观察大鼠饮食、精神状态、疾病活动指数、大便次数与质量等情况,末次给药24 h后,处死动物取结肠,肉眼观察结肠黏膜的病变并进行结肠大体形态损伤评分,取病变部位进行HE染色,光镜下评价黏膜病理损伤指数,免疫组织化学法检测大鼠结肠Occludin蛋白的表达。结果:模型组大鼠DAI评分、结肠形态与组织学损伤评分等均比正常组高,Occludin蛋白表达较正常组低(P0.05),四君子汤与SASP治疗能不同程度减轻TNBS诱导的UC模型对黏膜的破坏,使紧密连接蛋白Occludin表达升高,抑制结肠通透性的增加,保护结肠黏膜屏障功能(P0.05)。结论:四君子汤能有效增加Occludin蛋白表达,促进实验性UC大鼠结肠黏膜屏障功能修复,这可能是其治疗结肠炎的机制之一。     

提高临床型研究生科研能力的思考与探索

目前中医院校临床型研究生普遍存在缺乏创新、技术水平低等缺陷,这些都说明临床型研究生科研能力较低,如何提高研究生的科研能力是目前中医院校研究生教育中急需解决的重要问题.积极参与课题研究、参加标书撰写、参加实验室轮训以及进行学术报告等将有可能提升研究生的科研能力,并最终提高中医药科研工作者的研究能力.     

现代化中药发展模式之探讨

从医与药的密切关系着手 ,提出医与药无论研究还是应用均是不可分割的观点。首先论述了中医整体观的合理性与优势 ,是朴素的系统论 ,尚需借助现代科学上升到科学系统论。指出了现代化中药研究过程中的一些问题 ,提出了现代化中药研究应该回归中医整体性 ,不能急于求成 ,要重视中医药基础性理论研究 ,中药的基础性研究必须与中医基础理论、中医药临床疗效客观评价的现代研究同步进行。     

SARS患者急性期病情严重程度与康复期免疫功能的关系

目的考察SARS患者发病期病情轻重程度与康复期机体免疫功能受损的关系。方法将患者分为未使用呼吸机组（A）和使用过呼吸机组（B），通过回顾性分析SAILS患者住院期间和康复期的病例资料，比较两组患者肺部病灶阴影范围和吸收时间、WBC总数及其分类、康复期淋巴T细胞亚群与活化分子等。结果B组的肺部病灶范围在第2周内显著性大于A组，吸收时间也长于A组；A组的WBC总数，中性（N）、淋巴细胞（L）计数和百分数均在正常参考值范围，B组WBC总数、N计数与百分数高于A组，L百分数低于A组；第1次随访B组CD8^＋、CD8^＋／CD28^-、CD3^＋／HLA-DR^＋T细胞显著性高于A组，CD3^-／HLA—DR^＋细胞显著低于A组；第2次随访仅B组CD3^-／HIA—DR^＋细胞仍显著低于A组，其余免疫细胞无统计学差异。结论SAILS患者未使用呼吸机组较使用过呼吸机组肺部病理性损害小，免疫功能基本正常或受损程度很小。     

银屑灵片对银屑病肥胖患者血清瘦素动态表达的干预作用

目的:观察银屑灵片对寻常型银屑病肥胖患者血清瘦素动态表达的干预作用。方法:选取2017年3月至2017年6月广东省中医院收治的男性银屑病患者60例,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组患者外用复方丙酸氯倍他索软膏,观察组患者在对照组的基础上同时口服银屑灵片,连续用药2个月。观察2组临床治疗有效率,治疗后1、2个月评价中医证候积分、皮损程度及体重指数(BMI),以及血清瘦素的动态表达情况。结果:观察组有效率93. 3%,较对照组的73. 3%明显升高(P 0. 05);治疗后1、2个月2组患者中医证候积分、BMI与皮损PASI评分均较治疗前明显下降(均P 0. 05),且治疗2个月的中医证候积分、BMI与皮损PASI评分显著低于治疗后1个月(P 0. 05),组间比较以观察组的下降程度更显著(P 0. 05);治疗2个月后,2组患者血清瘦素水平均较治疗前有所下降(P 0. 05),且显著低于治疗后1个月(P 0. 05),组间比较以观察组的下降程度更显著(P 0. 05)。结论:银屑灵片可改善患者的临床症状,降低BMI,减轻银屑病皮损斑块的严重程度,其机制可能是通过调控瘦素水平以调节机体的代谢状态,通过调节瘦素水平从而降低IFN-γ水平,达到治疗银屑病的目的。     

当归补血汤及不同提取部分含药血清对粒系-巨系造血祖细胞集落克隆的影响

目的：以CFU—GM细胞集落形成数目为指标，探讨当归补血汤全方发挥功效的有效部分或有效部位。方法：用极性由小到大的4种有机溶剂依次萃取全方水煎液，所得各供试部分灌胃及供试各部分组合灌胃，取血清，培养骨髓细胞(CFU—GM)。结果：未发现某一供试部位对CFU—GM细胞集落形成作用强度等同全方，其中氯仿、乙酸乙酯供试部分较强；各部分相互组合后作用增强，其中氯仿与正丁醇部分组合的血清、氯仿与乙酸乙酯组合的血清较强，但仍弱于全方。结论：能完全代表全方功效和物质基础的有效部分及组合部分可能不存在，但各部分组合后可增强刺激集落生长作用。     

四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的作用

背景:一些实验证明多糖在感染、炎症、细胞间黏附和信号传导、免疫识别、细胞增殖分化及维持细胞正常结构和功能生理、病理等方面均起重要作用。但植物多糖对胃肠道黏膜的保护作用有待进一步研究。目的:观察不同浓度的四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响。设计:观察对比实验。单位:广东省中医院中心实验室。材料:①细胞株:正常大鼠小肠上皮细胞株IEC-6(ATCCCatalogNo.RL-1592)由美国ATCC(AmericanTypeCultureCollection)购得,主要来源于小肠隐窝细胞。②试剂和药品:DMEM培养基,牛胰岛素,庆大霉素,胎牛血清,DPBS均为GIBCO公司产品;细胞增殖试剂盒(MTT)为Roche公司产品;消炎痛为Sigma公司产品。四君子汤总多糖按药典处方比例取党参,白术,茯苓和甘草适量,加水浸泡后,煮沸提取4h,重复1次,合并提取液,减压浓缩,高速离心除去不溶物,提取液置玻璃纸中逆向流水透析2h,再于提取液中加乙醇至浓度约80%,保存过夜后分取沉淀,合并所有沉淀,采用Sevag法除去粗多糖中的蛋白,冻干后得到的总多糖。方法:①将IEC-6细胞株于干冰中取出,迅速放入37℃水浴中解冻后,加入已装有DMEM培养液的T-150培养瓶后放入CO2培养箱中,于37℃,饱和湿度,体积分数为0.05的CO2环境下培养。细胞隔天换液1次,每5～7天进行传代,传代比例为1∶7。第15～20代细胞用于实验。②IEC-6细胞以1×104/孔的浓度接种于96孔细胞培养板上,接种后6h,各培养孔内依次加入浓度为50,100,200mg/L四君子汤总多糖,即为四君子汤总多糖3个剂量组。每天定时取出1板,按试剂盒说明书以MTT法进行细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组,在相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。③将IEC-6细胞按1×104/孔的浓度接种于96孔细胞培养板中,接种后次日更换以无血清培养液DMEM,24小时后,各培养板中分别加入消炎痛以及四君子汤总多糖,其中,消炎痛使用浓度为40mmol/L,即为消炎痛组。四君子汤总多糖使用3个剂量分别为50,100,200mg/L,即为四君子汤总多糖50,100,200mg/L组。药物作用20h后,按试剂盒使用说明书进行MTT法细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组,在各相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。主要观察指标:MTT法测定四君子汤总多糖不同作用时间对IEC-6细胞生长的影响结果;MTT法测定四君子汤总多糖对消炎痛所致的IEC-6细胞生长抑制的影响结果。结果:四君子汤总多糖不同剂量于不同的培养时间对IEC-6细胞的生长均有促进作用;IEC-6细胞在给予消炎痛40mmol/L作用24h后,细胞增殖的吸光度明显低于正常对照组(0.17±0.02,0.31±0.03;P<0.01)。当四君子汤总多糖使用浓度为100mg/L时,IEC-6细胞的吸光度明显高于消炎痛组(0.25±0.04,0.17±0.02;P<0.01),虽然未达到正常IEC-6细胞吸光度的水平,但与正常组无明显差异(P>0.05)。结论:四君子汤总糖具有促进IEC-6细胞增殖的作用,它可能通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。     

四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6基因表达谱影响的研究

目的:本研究主要观察四君子汤总多糖(TPSJ)对大鼠小肠上皮细胞株基因表达谱的影响,以进一步了解四君子汤总多糖的作用机制。方法:采用基因芯片技术观察给予四君子汤总多糖前后大鼠小肠上皮细胞株IEC-6基因表达谱的变化情况。结果:在给予TPSJ后,大鼠IEC-6细胞株共有123条基因表达出现明显差异,基中55条基因表达上调,68条基因表达下调,分别涉及包括细胞发育、细胞生长增殖、粘附以及信号转导和免疫应答等方面的基因。结论:TPSJ可通过多种途径影响小肠上皮细胞功能,并有可能通过对小肠上皮细胞的调节作用而实现对全身的免疫调节。