绞股蓝总皂苷-γ-环糊精包合物的制备工艺研究

目的:研究绞股蓝总皂苷-γ-环糊精包合物的最佳制备工艺,以提高绞股蓝总皂苷的利用率。方法:采用饱和水溶液法制备绞股蓝总皂苷-γ-环糊精包合物,通过正交试验,以得率和包封率为指标综合评价制备工艺,筛选最佳工艺条件。结果:优选后的绞股蓝总皂苷-γ-环糊精包合物的最佳制备工艺为:绞股蓝总皂苷与γ-环糊精(γ-CD)的质量比为1∶2,包合温度为40℃,包合时间为2.0 h,γ-CD与水的用量比为1∶30(g/m L)。通过该工艺制备的包合物胶囊中绞股蓝总皂苷在60 min时累积溶出百分率达65.1%。结论:绞股蓝总皂苷-γ-环糊精包合物的工艺稳定可靠,重现性良好,为工业化生产绞股蓝总皂苷包合物提供理论依据。     

基于UPLC-Q-Trap-MS技术的热处理前后绞股蓝中9种皂苷成分同时定量分析

热处理绞股蓝具有更强的生物活性,其主要成分为皂苷类化合物。为进一步探究热处理前后绞股蓝皂苷成分的变化,该研究对福建漳州、广西金秀2个产地绞股蓝中的9种皂苷成分进行含量测定,超高效液相色谱-四极杆离子阱质谱联用(UPLC-Q-Trap-MS)技术,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm, 1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.3 mL·min~(-1),柱温30℃。采用电喷雾离子源(ESI)及多反应监测模式(MRM)进行定量分析。结果显示,福建漳州产绞股蓝热处理后的皂苷活性成分gypenoside L、gypenoside LI、damulin A、damulin B及人参皂苷Rg_3(S)、人参皂苷Rg_3(R)的质量分数分别增加了7.369、8.289、12.155、7.587、0.929、1.068μg·g~(-1),原药材中含量较多的人参皂苷Rd、gypenoside LVI、gypenoside XLVI有所下降,分别减少了0.779、19.37、9.19μg·g~(-1);广西金秀产绞股蓝热处理后的gypenoside L、gypenoside LI、damulin A、damulin B及人参皂苷Rg_3(S)、人参皂苷Rg_3(R)的质量分数分别增加了0.100、0.161、0.317、0.228、3.280、3.395μg·g~(-1),原药材中的人参皂苷Rd、gypenoside LVI、gypenoside XLVI分别减少了1.661、0.014、0.010μg·g~(-1)。提示热处理方法是绞股蓝稀有皂苷转化的有效途径,同时发现不同产区绞股蓝皂苷含量存在较大差异。     

药用绞股蓝主产区药材的定性分析

绞股蓝资源分布较广,秦巴山区为药用绞股蓝的主产区,选取其中陕西平利和四川青川2个区域的16份野生全草样本,利用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS^E)得到的精确相对分子质量、碎片信息,结合对照品的质谱、色谱规律及相关文献,鉴定陕西平利产绞股蓝药材中主要成分的结构。共鉴定了45个化学成分,包括43个达玛烷型三萜皂苷和2个黄酮,并发现绞股蓝中一类含量相对较高的糖基丙二酰基化的原生三萜皂苷。全面表征了药用绞股蓝中三萜皂苷成分的组成,并显示秦巴山区2个区域的野生绞股蓝药材成分组成较为相似,且共同含有绞股蓝皂苷ⅩLⅨ、绞股蓝皂苷A及其糖基丙二酰化产物等主要三萜皂苷,表明药用绞股蓝药材质量趋于一致,与文献报道的其他产区的绞股蓝药材成分差异较大。     

HPLC梯度洗脱法同时测定通脉降糖胶囊中7种成分含量

目的:建立HPLC梯度洗脱法同时测定通脉降糖胶囊中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、芒柄花素、太子参环肽B、绞股蓝皂苷XLIX、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ含量的含量。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃;流动相:乙腈-0.3%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min~(-1);检测波长分别为260 nm(检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷和芒柄花素)和203 nm(检测太子参环肽B、绞股蓝皂苷XLIX、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ)。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、芒柄花素、太子参环肽B、绞股蓝皂苷XLIX、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ分别在3.76～94.00、2.19～54.75、5.12～128.00、0.86～21.50、7.98～199.50、8.59～214.75、11.96～299.00μg·mL~(-1)线性关系良好(r≥0.999 2),平均加样回收率分别为99.50%、97.97%、98.87%、96.93%、100.00%、99.03%和98.94%,RSD分别为0.87%、1.55%、1.04%、1.18%、0.73%、1.49%和0.90%。结论:该方法操作便捷、重复性好,可用于通脉降糖胶囊中多指标性成分的质量控制。     

湖南省不同产地绞股蓝药材中总皂苷含量测定

目的:采用紫外分光光度法对湖南省4个产地绞股蓝中皂苷含量进行测定。方法:超声提取绞股蓝总皂苷,采用紫外分光光度法,以人参皂苷Re为对照品,在波长550nm处对不同产地绞股蓝中总皂苷进行含量测定。结果:人参皂苷Re在7.61～45.68μg范围呈良好的线性关系,r=0.9991;人参皂苷Re回收率为96.97%,RSD为1.43%。结论:不同产地绞蓝中总皂苷的含量存在差异,以湖南绥宁产绞股蓝中总皂苷含量(2.43%)最高。     

7个不同产地绞股蓝皂苷含量测定

目的:采用分光光度法对云南、广西等7个产地绞股蓝中皂苷含量进行研究。方法:超声法提取绞股蓝总皂苷,采用紫外分光光度法,以人参皂苷Rb1为对照品,在波长550nm处对不同产地绞股蓝中总皂苷进行含量测定。结果:总皂苷在0.102～0.357mg有良好线性关系,回归方程Y=24.79X-0.0732,R2=0.9992,平均回收率为95.9%。结论:不同产地绞股蓝中总皂苷的含量存在差异,以广西产绞股蓝为最高(39.70mg/g),浙江省仙居产次之为(31.51mg/g)。     

不同产地、不同品种间绞股蓝总皂苷和总多糖含量比较研究

目的:建立绞股蓝中总皂苷、总多糖含量测定方法,比较不同产地、不同品种绞股蓝中总皂苷、总多糖含量差异,为考察药材内在质量提供依据。方法:采用紫外-可见分光光度法,以人参皂苷Re为对照品,于550nm波长处对绞股蓝总皂苷吸光度进行测定;以D-无水葡萄糖为对照品,于490nm波长处对绞股蓝总多糖吸光度进行测定。结果:人参皂苷Re在0.097 8~0.489mg范围内与其吸光度呈良好的线性关系(R2=0.999 8),平均回收率为97.79%,RSD为1.44%(n=6);D-无水葡萄糖在0.0198~0.099mg范围内与其吸光度呈良好的线性关系(R2=0.999 4),平均回收率为99.58%,RSD为1.35%(n=6)。结论:该方法简便可行、重复性好,适用于绞股蓝中总皂苷、总多糖含量测定。不同产地绞股蓝中总皂苷和总多糖含量差异较大,且不同品种间绞股蓝总皂苷含量存在显著性差异,但绞股蓝总多糖含量与绞股蓝品种无相关性。该结果可为绞股蓝的质量控制和相关产品的开发研究提供参考依据。     

绞股蓝总皂苷对高糖培养条件下小鼠足细胞nephrin、VEGF mRNA表达的影响

目的:观察绞股蓝总皂苷对高糖培养条件下小鼠永生足细胞nephrin、VEGF(vascular endothelial growth factor,血管内皮生长因子)mRNA表达的影响。方法:利用体外培养条件性永生小鼠足细胞,高糖干预24小时,模拟糖尿病肾病足细胞损伤,分为正常组、高糖模型组、高渗对照组、绞股蓝治疗组(绞股蓝总皂苷高、中、低剂量组)及缬沙坦对照组,Real Time PCR法检测足细胞nephrin、VEGF mRNA的表达。结果:绞股蓝总皂苷干预组nephrin mRNA含量显著升高,VEGF mRNA表达有一定程度提高,与模型对照组比较,差异有显著统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:绞股蓝总皂苷可有效调节肾脏足细胞nephrin、VEGF mRNA表达。     

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS和LTQ-MSn联用技术快速鉴定绞股蓝皂苷类化学成分

目的 建立超高液相色谱-飞行时间高分辨质谱(UHPLC-Q-TOF MS/MS)和超高液相线性离子阱质谱(LTQ-MSⁿ)联用技术对绞股蓝中皂苷类成分快速鉴定的方法。方法 采用Thermo Syncronis C₁₈(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色谱柱,以纯水-乙腈为流动相梯度洗脱,质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在负离子模式下采集数据对绞股蓝皂苷类进行成分鉴定。结果 初步鉴定了81种绞股蓝皂苷,其中包括58种已知皂苷和23种可能的未知皂苷结构。结论 UHPLC-Q-TOF-MS/MS可以提供化合物的准确相对分子质量及二级碎片信息,LTQ-MSⁿ可以提供化合物多级质谱信息,该联用技术可以简单、快速鉴定绞股蓝皂苷类成分,并为其质量控制、药效物质基础研究及进一步临床应用提供理论依据和科学研究思路。     

基于静电场轨道阱质谱技术对绞股蓝总皂苷提取物化学成分的分析

目的:通过UPLC-ESI-Orbitrap-MS技术对绞股蓝总皂苷提取物的主要化学成分进行分析。方法:采用Thermo Q Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱-色谱联用系统分析,以Hypersil Gold C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.9μm)为固定相,流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~2 min,5%B;2~15 min,5%~95%B;15~17 min,95%B),流速0.3 mL·min~(-1),柱温40℃;质谱条件采用电喷雾离子化(ESI)方式,在负离子模式下,以Full Scan/Targeted-dd MS2扫描模式检测,研究绞股蓝总皂苷提取物的主要皂苷类化学成分。结果:通过与对照品比对、结合参考文献,分析多级质谱数据,根据化学成分的质谱碎片,推测色谱峰对应的化学结构,共归属8种具有原人参二醇型母核结构的绞股蓝皂苷,分别是绞股蓝皂苷Ⅲ,Ⅳ,Ⅷ,Ⅻ,Rg_3,Rb_2,Rc,Rf。结论:该研究采用的方法简单、快速、灵敏,对绞股蓝总皂苷提取物中具有原人参二醇型母核结构的主要皂苷类进行了高分辨质谱分析,这一方法可以从定性分析的角度,对市售绞股蓝总皂苷提取物的质量进行初步快速鉴别。     

三七绞股蓝药对及其总皂苷配伍对兔动脉粥样 硬化模型主动脉的影响

目的 :观察三七绞股蓝药对及其总皂苷配伍对兔动脉粥样硬化模型血脂及主动脉的影响。 方法 :取40只雄性新西兰兔,随机分为5组:正常对照组、三七绞股蓝饮片组、三七绞股蓝皂苷组、阳性药物组、模型对照组。除正常组给予普通兔饲料,其余各组给予高胆固醇饲料并注射牛血清白蛋白,在造模的同时预防给药。12周后测定血脂,用计算机图象分析系统观察动脉损伤后血管重构相关指标的变化。 结果 :三七绞股蓝饮片可降低平滑肌细胞核密度百分数(VSMC)水平,减小中膜面积(P<0.01);三七绞股蓝皂苷组可减小中膜面积(P<0.05);三七绞股蓝饮片组、三七绞股蓝皂苷组均能增大管腔面积(P<0.01),减小内膜面积(P<0.01),减少内膜厚度(P<0.01)。 结论 :三七绞股蓝药对及其总皂苷配伍具有抗血管重构的作用。     

绞股蓝总皂苷水解产物中稀有抗肿瘤活性成分的化学研究

目的:研究绞股蓝总皂苷(Gynostemma pentaphfllum(Thunb)Makino.)水解产物的化学成分。方法:采用盐酸水解法制备水解产物,通过硅胶柱层析法进行分离、重结晶纯化,理化常数和波谱数据分析测定。结果:从绞股蓝水解产物中分离得5种化合物,分别鉴定为20(R)-原人参二醇(Ⅰ),20(S)-人参二醇(Ⅱ),拟人参皂苷元-F11(Ⅲ),20(R)-达玛烷-3β,12β,20,25-四醇(Ⅳ)和20(R)-达玛烷-3β,6α,12β,20,25-五醇(Ⅴ)。结论:化合物Ⅰ～Ⅴ均为首次在绞股蓝总皂苷水解产物中发现。化合物Ⅳ为本课题组从人参果皂苷中首次发现和报道的具有显著抗肿瘤活性的原人参二醇型皂苷元衍生物。     

绞股蓝总皂苷对阿霉素致急性心衰大鼠心功能的影响

目的 观察绞股蓝总皂苷(gypenosides,GP)对阿霉素(adriamycin,ADR)致急性心衰大鼠心功能的影响.方法 取SD大鼠随机分成5组,即正常对照组、阿霉素(ADR)组,绞股蓝总皂苷(GP)低、中、高剂量组.GP低、中、高剂量组分别给予绞股蓝总皂苷100、200和400 mg·kg-1·d-1,正常对照组给予等容量纯净水.第6天,除正常对照组外,其余各组腹腔注射ADR 10 mg·kg-1.注射阿霉素24 h后,采集并分析左室收缩压(LVSP)、在室内压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)等心功能指标;测定心肌组织ATP酶,琥珀酸脱氢酶(SDH)和肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)活性.结果 绞股蓝总皂苷中、高剂量组可改善阿霉素致急性心衰大鼠心脏的收缩和舒张功能,提高心肌组织ATP酶、琥珀酸脱氢酶和肌浆网Ca2+-ATP酶活性(P<0.05).结论 绞股蓝总皂苷可以拮抗阿霉素致大鼠心功能下降,其机制可能与提高心肌组织ATPase、SDH和SERCA2a酶活性有关.     

绞股蓝总皂苷含药血清对皮肤光老化HaCaT细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6的影响

目的:研究绞股蓝总皂苷含药血清对皮肤光老化HaCaT细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6表达的影响.方法:选取20只大鼠,随机分为四组,每组5只,分别设为空白血清组、低剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、中剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清组,采用UVB照射人工模拟光老化HaCaT细胞模型,照射后用含不同浓度绞股蓝总皂苷的大鼠血清进行干预,12h后采用ELISA方法检测各组细胞分泌IL-1β、IL-6的表达水平.结果:与空白对照组比较,UVB模型组细胞IL-1β、IL-6表达显著上调;与UVB模型组比较,低剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、中剂量绞股蓝总皂苷含药血清组、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6表达显著下调(P＜0.01).结论:绞股蓝总皂苷含药血清可能通过抑制UVB辐射人皮肤角质细胞诱导炎症信号分子防护皮肤光老化.     

绞股蓝抗糖尿病作用研究进展

绞股蓝[Gynostemma pentaphyJJurn（Thunb） Makino]又名七叶胆，为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物。绞股蓝的主要药效成分为绞股蓝皂苷（Gypenosides，GP），现已从绞股蓝中分离鉴定了80多种与人参皂苷有类似骨架的达玛烷型绞股蓝皂苷。研究表明，绞股蓝具有抑制肿瘤、防止衰老、降低血脂、增强免疫、防治糖皮质激素不良反应、     

绞股蓝生物学的研究进展

绞股蓝Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino为葫芦科绞股蓝属内分布最广、资源最丰富的主要药用植物种类。自20世纪70年代以来,从该种植物中分离出了84种绞股蓝皂苷,其中6种与人参皂苷的结构完全相同,具有调血脂、抗衰老、抗肿瘤等多种生理功效,由此引发了对绞股蓝植物的科研     

绞股蓝总皂苷的闪式提取和纯化工艺研究

目的 比较并优选绞股蓝总皂苷的粗提和精制工艺.方法 以绞股蓝总皂苷为测定指标,采用分光光度法测定,比较不同的提取方法所得绞股蓝总皂苷,并考察6种不同型号的树脂对绞股蓝总皂苷的静态和动态的吸附及解吸性能的比较.结果 闪式提取和乙醇回流提取所得绞股蓝总皂苷分别为32.69%、31.19%;HPD-700型树脂对绞股蓝总电苷的吸附量与解吸率均较高,洗脱率达到80.34%.结论 采用闪式提取和选择HPD-700树脂纯化是可行的绞股蓝总皂苷粗提及精制工艺.     

人参果中皂苷类化学成分研究

目的:研究人参果中的皂苷类化学成分。方法:采用大孔吸附树脂、MCI gel、硅胶等柱色谱及半制备高效液相色谱方法进行分离、纯化,NMR、MS等方法进行结构鉴定。结果:从人参果的提取物中共分离鉴定了22个化合物,分别为人参皂苷F2(1)、越南人参皂苷R8(2)、假人参皂苷Rc1(3)、人参皂苷Re(4)、三七皂苷R2(5)、人参皂苷F5(6)、人参皂苷F3(7)、人参皂苷Ia(8)、人参皂苷LM1(9)、20(S)-人参皂苷Rg2(10)、人参皂苷Rc(11)、人参皂苷F1(12)、竹节参皂苷Rd(13)、人参皂苷Rb2(14)、人参皂苷Rb1(15)、人参皂苷Rh6(16)、人参皂苷Rh4(17)、人参皂苷Rh5(18)、绞股蓝皂苷XⅦ(19)、绞股蓝皂苷IX(20)、三七皂苷Fe(21)和西洋参皂苷L10(22)。结论:化合物2、3、5、8、9、16、18~22为首次从人参果中分离得到。     

绞股蓝总皂苷干预光老化人皮肤角质形成细胞炎症分泌因子的研究

目的:研究绞股蓝总皂苷对光老化人皮肤角质形成细胞分泌炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。方法:选取10只大鼠,随机分为2组,每组5只,分别设为空白血清组、绞股蓝总皂苷含药血清组,分别用以制备空白大鼠血清和绞股蓝含药血清。应用UVB人工照射方法制备光老化人皮肤角质形成细胞模型,用含绞股蓝总皂苷的大鼠血清进行干预,12h后采用ELISA方法检测各组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。结果:与空白对照组比较,UV模型组细胞IL-1β、IL-6和TNF-α表达显著上调(P<0.01);与UV模型组比较,绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著下调(P<0.01);与空白血清组比较,绞股蓝总皂苷含药血清组细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著下调(P<0.01)。结论:绞股蓝总皂苷可抑制UV辐射人皮肤角质细胞分泌炎症因子,抑制皮肤光老化。     

长梗绞股蓝与绞股蓝最新研究进展

中药长梗绞股蓝是葫芦科绞股蓝属绞股蓝亚属的一种植物。所含主要化学成分为皂苷，而且其中有些皂苷结构和人参皂苷结构相同。目前已有绞股蓝总皂苷和绞股蓝总苷片两种制剂和多种保健品。临床上主要用于治疗血栓和动脉硬化等心脑血管的治疗。