异常黑胆质清除剂对线粒体氧化损伤的保护作用

目的：观察异常黑胆质清除剂对线粒体氧化损伤的保护作用，以探讨其细胞保护机制。方法：在分离鼠肝线粒体的基础上，采用FeSO4/抗坏血酸羟自由基发生系统直接损伤线粒体，电镜观察线粒体结构完整性，同时测定线粒体超氧化物歧化酶（SOD）活性、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量和Ca^2 -Mg^2 -ATPase活性的变化。结果：羟自由基损伤后线粒体结构的完整性受到一定程度的影响，线粒体SOD和Ca^2 -Mg^2 -APTase活性降低（P＜0．01），MDA含量增加（P＜0．01）。在体系中预先加入不同浓度的异常黑胆质清除剂后，上述变化趋势以剂量依赖性得到明显抑制。结论：异常黑胆质清除剂可以减轻羟自由基引发的线粒体氧化损伤，保护线粒体结构和功能。     

酮对大鼠心肌线粒体氧化损伤的保护作用

目的　研究 3种穿心草 口山酮 (xanthone ,Xan)对心肌线粒体氧化损伤的保护作用。方法　采用抗坏血酸和硫酸亚铁为线粒体损伤诱导剂 ,探讨Xan对线粒体的膨胀、脂质过氧化及膜流动性的影响。结果　 3种Xan不同程度地减少受伤线粒体的膨胀作用及阻止脂质过氧化的形成 ,增加膜脂质流动性 ,维护线粒体结构和功能的完整 ,作用强度依次为Xan Ⅰ >Xan Ⅲ >Xan Ⅱ。结论　 3种Xan对心肌线粒体氧化损伤均有不同程度的保护作用 ,作用机制可能与其清除自由基、抗脂质过氧化作用有关 ,而 口山酮活性强弱可能与其苯环上酚羟基和甲氧基的数量及位置相关     

左（口）右（山）酮对大鼠心肌线粒体氧化损伤的保护作用

 目的 研究3种穿心草左（口）右（山）酮(xanthone,Xan)对心肌线粒体氧化损伤的保护作用。方法 采用抗坏血酸和硫酸亚铁为线粒体损伤诱导剂,探讨Xan对线粒体的膨胀、脂质过氧化及膜流动性的影响。结果 3种Xan不同程度地减少受伤线粒体的膨胀作用及阻止脂质过氧化的形成,增加膜脂质流动性,维护线粒体结构和功能的完整,作用强度依次为Xan-Ⅰ＞Xan-Ⅲ＞Xan-Ⅱ。结论 3种Xan对心肌线粒体氧化损伤均有不同程度的保护作用,作用机制可能与其清除自由基、抗脂质过氧化作用有关,而左（口）右（山）酮活性强弱可能与其苯环上酚羟基和甲氧基的数量及位置相关。     

益心康胶囊含药血清对氧应激所致线粒体损伤的保护作用

目的和方法：应用羟自由基损伤体系（Fe2 /H2O2)在体外与大鼠心肌线粒体共同孵育30min,观察了氧应激对心肌线粒体的影响,探讨益心康胶囊（H303）含药血清对氧应激损伤的保护机制,结果：不同浓度Fe2 /H2O2可使反应体系中脂质过氧化产物明显升高,线粒体超微结构发生明显改变;线粒体肿胀度增加;线粒体GSH含量明显降低,H303含药血清可明显减轻上述损伤,表现为显著抑制线粒体脂质过氧化和GSH含量的降低,改善线粒体超微结构,减轻线粒体肿胀度,结论：氧应激可造成心肌线粒体结构和功能损伤,H303抗心肌缺血损伤的作用机制是通过防止线粒体脂质过氧化,保护内源性抗氧化物,改善线粒体结构等作用而实现的。     

黄芪注射液在逆转心肌细胞肥大过程中对心肌细胞线粒体结构和功能的影响

目的:通过大鼠原代心肌细胞培养,探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体改变的病理和治疗问题。方法:分离和培养大鼠原代心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共培养72,96 h。通过BCA法检测细胞总蛋白含量;倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;通过荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位(ΔΨm);酶标仪检测线粒体单胺氧化酶(MAO)活性;分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶(COX)活性和线粒体外膜损伤百分率;高效液相色谱法检测心肌细胞内ATP,ADP,AMP含量,反映心肌细胞线粒结构和功能在与AngⅡ共培养中的损伤和能量代谢情况。在此基础上给予黄芪注射液和缬沙坦,观察它们对心肌细胞重构中线粒体结构、功能的药理作用。结果:在72,96 h 2个时间点,模型组较空白组心肌细胞总蛋白含量和心肌细胞直径均显著性增加。在该增殖过程中,心肌细胞线粒体MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高,线粒体COX活性和线粒体ΔΨm均显著减低,ATP,ADP含量减少,AMP含量增加。黄芪注射液和缬沙坦能抑制AngⅡ引起的心肌细胞蛋白质合成增加和细胞直径增大、改善线粒体外膜损伤和内膜膜电位及COX,MAO活性,增加ATP,ADP含量、降低AMP含量。结论:在心肌肥大过程中,存在线粒体的结构和功能的损害,心肌细胞能量代谢损伤变化是继心肌细胞线粒体结构损伤后发生的。黄芪注射液和缬沙坦在逆转血管紧张素Ⅱ所引起的心肌细胞肥大的过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用,逆转心肌细胞肥大、纠正心肌重构有利于心肌细胞能量的改善。     

补肾益气类方药延缓骨骼肌线粒体功能退化的研究概况

采用文献综述法,分析线粒体结构、膜通透性、氧化损伤、呼吸功能、酶活性及线粒体生物合成与骨骼肌衰老的关系,探讨补肾益气类方药对衰老骨骼肌线粒体结构和功能的影响,为采取合适中药延缓骨骼肌衰老提供理论依据。研究发现随着机体逐渐衰老,骨骼肌线粒体呈现出结构退化、膜通透性改变、氧化损伤、呼吸功能、酶活性及线粒体生物合成能力下降等改变,补肾益气类方药可通过改善衰老骨骼肌线粒体的结构和功能,延缓骨骼肌的衰老,但其深层作用机制及作用途径尚不明晰。在中医药理论体系指导下,结合现代实验技术,多角度、多层次地探明补肾益气类方药在延缓骨骼肌衰退中的作用机制及构效关系,是开发此类方药过程中亟待解决的问题。     

益心康胶囊对大鼠心肌线粒体结构及功能损伤的保护作用

目的 :观察了异丙肾上腺素 (ISO)对大鼠心肌线粒体结构和功能的损伤 ,评价益心康胶囊 (H303)对损伤的保护作用。方法 :ISO损伤 ,分离心肌线粒体 ,测定磷脂酶A₂(PLA₂ )活性、膜磷脂 (PL)含量、膜脂流动性(LFU) ,Ca²⁺ ATPase活性、线粒体呼吸功能及心肌组织高能磷酸化合物。结果 :ISO可导致线粒体产生严重损伤 ,表现为PLA2 激活 ,PL含量减少 ;LFU降低 ;Ca²⁺ ATPase活性降低 ;线粒体呼吸功能降低 ;心肌组织高能磷酸化合物明显降低。H303预先口服给药可明显改善线粒体的损伤。表现为PLA₂ 活性降低 ,PL含量增加 ;明显改善LFU ;保护线粒体Ca²⁺ ATPase活性 ;通过加快Ⅲ态呼吸速率、改善ADP/O比值、恢复降低的呼吸控制率而保护线粒体呼吸功能。结论 :H303对ISO所致的线粒体结构和功能损伤具有明显的保护作用。     

川芎嗪在逆转心肌细胞肥大过程中对心肌细胞线粒体结构和功能的影响

目的探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体结构和功能的改变,以及川芎嗪的保护作用。方法提取和培养乳鼠心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共培养72、96h。通过BCA法检测细胞总蛋白含量,倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;通过荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位,酶标仪检测线粒体单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性,分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶(cytochromec oxidase,COX)活性和线粒体损伤百分率等反映心肌细胞线粒外膜结构和内外膜功能的损伤。在此基础上给予川芎嗪与对照药缬沙坦,分析其对心肌细胞重构中线粒体结构和功能的药理作用。结果在72、96h时,模型组较空白组心肌细胞总蛋白含量均增加(P<0.01),心肌细胞直径均增大(P<0.01)。在该增殖过程中,心肌细胞MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高(P<0.01),COX线粒体细胞活性和线粒体膜电位均显著减低(P<0.01)。与模型组同期比较,川芎嗪在72、96h时能显著减少心肌细胞总蛋白质含量及心肌细胞直径,并显著降低心肌细胞MAO活性,提高线粒体COX活性,改善线粒体外膜损伤百分率和内膜膜电位,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论在心肌肥大过程中,存在线粒体的结构和功能的损害;川芎嗪在逆转AngⅡ所引起的心肌细胞肥大的过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用。     

线粒体损伤介导的药源性脏器损伤评价模型研究进展

线粒体是细胞的能量工厂,同时线粒体还参与细胞分化、维持细胞内环境平衡、细胞信息传递和调节细胞凋亡等过程。线粒体受到核DNA和线粒体DNA的双重调控,使得线粒体对于各种外源及内源性毒性物质更加敏感。药物破坏线粒体结构与功能可导致细胞坏死或凋亡。近年来研究发现多种脏器细胞线粒体是药物毒性作用的主要靶标之一,药物可通过多种途径致线粒体毒性,线粒体损伤是许多药物器官毒性反应早期的重要特征。本文主要综述常见的诱导不同器官线粒体毒性的临床药物并简要探讨药物介导线粒体毒性的机制。此外,我们还将重点讨论目前常用的线粒体毒性评价模型和评价技术,以期为预防和诊断药源性器官损伤提供思路。     

基于线粒体功能障碍探讨中医药治疗心肌缺血再灌注的研究思路

线粒体功能障碍可引起线粒体ATP生成减少、Ca2+超载、线粒体跨膜电位下降、活性氧(ROS)生成及线粒体膜通透性增加,最终导致细胞凋亡,从而加重MIRI损伤。因此,在治疗中通过保护线粒体结构及功能的完整性,增加ATP生成,提高线粒体膜电位,降低线粒体膜通透性转化,防止钙超载等对减轻MIRI损伤具有重要意义。中医药具有多组分、多靶点及整体调节的优势特点,其能够抑制钙超载,减少ROS产生及降低膜电位水平等多重治疗,从而减轻线粒体膜结构的破坏,为MIRI损伤后线粒体的整体保护及寻找更有效的治疗策略提供新的方向和新的靶点。笔者拟对心肌缺血再灌注损伤后线粒体结构的改变及中医药对其调节作用机制进行综述。     

高效液相方法和络合显色方法测定银杏黄酮含量的比较

目的:考察在银杏黄酮含量的测定中能否用络合显色方法代替高效液相方法来进行。方法:将银杏黄酮粉溶液过大孔吸附树脂,用络合显色方法和效液相方法分别检测流出液中黄酮浓度,计算大孔吸附树脂的吸附量和吸附率并进行比较。结果:用络合显色方法测得的实验结果比高效液相方法的结果平均大36.4%,但计算得到的吸附率结果相比没有显著性差异。结论:络合显色方法可以在一些特定实验中代替高效液相方法,在数值的检测中不能代替。     

The effect of Ginkgo biloba extract on mitochondrial oxidative phosphorylation in the normal and ischemic rat heart

Free radical‐induced myocardial damage and impairment of vascular endothelium‐dependent relaxation are amongst the most important mechanisms responsible for ischemic heart injury. Ginkgo biloba leaf extract (GE) has been reported to improve blood circulation in the brain and have a beneficial impact on the cardiovascular system but its cardioprotective effects have not been elucidated yet. Therefore, this study investigated the influence of GE in 70% ethanol (1:5) administered orally to rats on the functions of isolated heart mitochondria under normal and ischemic conditions. Wistar rats were given GE or ethanol (solvent control) at a dosage of 0.32 mL/kg in drinking water for 10 and 18 days, while the control animals received untreated drinking water. Mitochondrial respiration rates were determined oxygraphically. Pyruvate and malate, succinate or palmitoyl‐l ‐carnitine and malate were used as substrates. The GE treatment partially uncoupled mitochondrial oxidation from phosphorylation, reduced the generation of free radicals in the mitochondria, diminished the ischemia‐induced V₃ decrease and the degree of respiration stimulation by exogenous cytochrome c. Thus, these results indicate that GE exerts cardioprotective effects reducing ischemia‐caused impairment of the functions of heart mitochondria. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.     

银杏叶片剂中银杏黄酮的HPLC指纹图谱研究

 目的　建立评价银杏叶片剂质量优劣的指纹图谱分析方法。方法　采用高效液相色谱法,HypersilODS (4.6mm× 250mm ,5μm)色谱分析柱,检测波长为360nm,乙腈、异丙醇和0.4 9%枸橼酸为流动相,1mL·min^-1的流速梯度洗脱对银杏叶片剂中银杏黄酮进行指纹图谱测定。并采用原国家药品监督管理局推荐的中药指纹图谱计算软件进行计算,建立银杏叶片剂中银杏黄酮的共有指纹图谱。结果　HPLC研究银杏叶片剂中银杏黄酮指纹图谱的方法有较好的重现性、精密度和稳定性(RSD均小于3%)。结论　本研究将有助于加强银杏叶片剂的质量控制。     

银杏叶提取物(EGb761)拮抗阿霉素引起的心脏毒性不影响其抗肿瘤活性

 目的：研究银杏叶提取物（EGb761）对阿霉素心脏毒性以及抗肿瘤活性的影响。方法：采用阿霉素体外损伤大鼠心脏线粒体和体内小鼠心脏毒性两种模型,应用生化方法和电镜观察药物作用。结果：阿霉素体外引起大鼠心脏线粒体丙二醛生成、腺苷三磷酸酶活性丧失、膜流动性降低、膜线粒体肿胀、溶解等,EGb761对上述毒性损伤均有明显的保护作用。体内实验表明,EGb761能剂量依赖性地抑制阿霉素引起的小鼠心肌脂质过氧化和血清肌酸磷酸激酶活性升高。荷瘤鼠存活期实验表明,EGb761对阿霉素抗肿瘤活性无明显影响。结论：EGb761拮抗阿霉素引起的心脏毒性但不影响其抗肿瘤活性,这对临床应用EGb761以减轻阿霉素对心脏毒性的可能性提供了实验依据。     

HPLC测定银杏叶茶中总黄酮的含量

目的采用RP-HPLC法测定低酚酸银杏叶保健茶中总黄酮的含量。方法采用Agilent C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50),流速为1.0mL/min,检测波长为360nm,柱温为30℃。结果银杏叶保健茶中槲皮素、山奈素、异鼠李素的线性范围分别为含量的线性范围为0.05～0.4μg、0.05～0.4μg、0.05～0.4μg;槲皮素、山奈素、异鼠李素加样回收率分别为101.08%(RSD为1.22%,n=9)、102.01%(RSD为2.62%,n=9),101.08%(RSD为1.22%,n=9)、99.18%(RSD为1.11%,n=9)。结论本方法简便、准确、分离效果好,适合于银杏叶茶总黄酮的含量测定。     

Photoprotective effects of topical formulations containing a combination of Ginkgo biloba and green tea extracts

The beneficial photoprotective effects of topical formulations containing combined extracts of Ginkgo biloba (GB) and green tea (GT) have not been investigated. The present study aims to assess the photoprotective effects of topical formulations containing GB and GT combined or not by applications on the dorsal skin of hairless mice prior to UVA/B irradiation. After 20 h, skin barrier damage (TEWL), erythema, histological alterations and sunburn cell formation were evaluated. The results showed that only extract supplemented formulations protected the skin against the UV‐induced damage. Formulations containing GB provided total protection of the skin barrier function avoiding UV radiation damage such as TEWL and erythema and were more effective than those containing GT. However, it is suggested that formulations containing combined GB and GT may provide substantial photoprotective effects since different aspects of skin damage were influenced by each extract. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.     

银杏总黄酮胃肠吸收动力学研究

目的：研究银杏提取物中总黄酮在大鼠胃肠道中的吸收动力学特征。方法：采用大鼠在体胃肠循环装置,以银杏总黄酮为考察指标,采用UV法和HPLC法检测总黄酮和酚红在大鼠在体胃、肠循环的含量。结果：大鼠在体肠回流吸收实验3h后,供试品在小肠上部的吸收百分率和吸收速率实验结果显示,药物吸收较好的部位在中上部,但与全肠比亦较差。吸收百分率和吸收速率按照十二指肠、空肠、结肠、回肠依次降低;在总黄酮浓度1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL范围内药物的吸收量与浓度有良好的线性关系,没有吸收饱和现象发生。而吸收速度常数基本不变,表明银杏总黄酮的吸收是被动扩散。     

银杏叶中黄酮类成分的研究

 目的分离鉴定银杏叶中的黄酮类成分。方法95%乙醇提取,硅胶及Sephadex LH20柱层析分离,用UV,IR,NMR和MS等方法确定结构。结果分得7个黄酮类成分,分别为槲皮素(quercetin,Ⅰ)、山萘酚(kaempferol,Ⅱ)、异鼠李素(isorhamnetin,Ⅲ)、芫花素(ginkwanin,Ⅳ)、金松双黄酮(sciadopitysin,Ⅴ)、银杏素(ginkgetin-Ⅵ)、和异银杏素(isoginkgetin,Ⅶ),以及7个其它类型成分,分别为三十烷酸(triacontanoic acid,Ⅷ)、二十八醇(octacosanol,Ⅸ)、白果醇(ginnol,Ⅹ)、二十九烷(nonacosane,Ⅺ)、β谷甾醇(βsitosterol,Ⅻ)、棕榈酮(palmitone,ⅩⅢ)和胡萝卜苷(daucosterol,ⅩⅣ)。结论其中化合物Ⅳ,Ⅷ,Ⅸ,Ⅺ,ⅩⅢ,ⅩⅣ为首次从银杏叶中分离得到。     

HPLC法测定银杏叶提取物中总黄酮甙含量

目的 :采用 HPL C法测定银杏叶提取物中总黄酮甙含量。方法 :选用 ODS3柱 ,甲醇 - 0 .4%磷酸溶液 (5 0 :5 0 )为流动相 ,检测波长 370 nm。结果 :线性范围在 0 .6 45～ 2 .5 80μg(r=0 .9999) ,平均加样回收率为99.34 % ,RSD为 1.0 6 (n=5 ) ,所测定 3个厂家生产的 9批银杏叶提取物的含量在 2 4.1%～ 2 8.8%之间。结论 :方法简便快速 ,适合于银杏叶提取物的质量控制。     

银杏叶提取物对缺血心肌线粒体膜脂质过氧化与ATP酶活性的影响

目的：探讨银杏叶提取物（EGB）对缺血心肌的细胞保护机制。方法：用垂体后叶素（20u/kg,ip)复制小鼠急性心肌缺血模型,观察不同剂量（100、200mg/g)EGB对心肌缺血60min线粒体获得率,膜磷脂含量,Ca^2 -ATP酶、Mg^2 -ATP酶活性,MDA及胞浆SOD活性变化的影响。结果：预先给予EGB可有效抑制缺血所致线粒体膜磷脂含量减少,MDA水平增高,提高线粒体Ca^2 -ATP酶及胞浆SOD酶活性,其部分作用表现为剂量依赖性。结论：EGB对缺血心肌的保护作用可能与其增加胞液SOD活性,防止线粒体膜脂质过氧化,维持线粒体膜Ca^2 -ATP酶活性,改善缺血心肌细胞Ca^2 转运有关。