白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍对H22肝癌小鼠抑瘤作用的实验研究

目的：观察白花蛇舌草和半枝莲微粉1∶1配伍对小鼠H22肝癌的抑瘤作用,初步明确作用机理。方法：昆明系小鼠60只,接种H22细胞24h后,随机分为模型对照组、白花蛇舌草和半枝莲普通粉组,以及白花蛇舌草和半枝莲微粉低、中、高剂量组,另设正常对照组。分别给药10d后,取瘤,计算抑瘤率、胸腺和脾脏指数,检测白细胞数,免疫组化法观察肝癌细胞Bax表达,比较微粉与普通粉药效的差异。结果：与模型对照组相比,白花蛇舌草和半枝莲微粉高剂量组H22肿瘤明显减小,白细胞数、胸腺、脾脏指数明显增高,Bax表达显著上升,且药效显著优于普通粉组。结论：白花蛇舌草和半枝莲微粉1∶1配伍能显著抑制小鼠H22肝癌移植瘤的生长,其机制可能与升高白细胞数和保护免疫器官,促进肿瘤细胞的凋亡有关。     

白花蛇舌草和半枝莲配伍微粉对移植性小鼠肝癌肿瘤组织Bcl-2,Bax表达的影响

目的:观察白花蛇舌草和半枝莲微粉对移植性小鼠肝癌H22生长抑制作用及其对肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达的影响。方法:建立移植性H22动物模型,并将模型动物随机分为模型对照、软坚口服液7.8 mL.kg-1、白花蛇舌草和半枝莲普通粉15.6 g.kg-1、白花蛇舌草和半枝莲微粉高、中、低剂量(15.6,11.7,7.8 g.kg-1)6组,给药10 d后处死模型小鼠分离肿瘤,检测肿瘤大小、称质量,计算肿瘤抑制率,并将肿瘤组织切片,免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因。结果:白花蛇舌草和半枝莲微粉高剂量组肿瘤抑瘤率达47.55%,与软坚口服液结果相近;白花蛇舌草和半枝莲微粉高、中、低剂量可降低肿瘤组织中Bcl-2蛋白基因表达,高、中剂量可升高Bax蛋白基因表达;与白花蛇舌草和半枝莲普通粉组相比,白花蛇舌草和半枝莲微粉高剂量组Bcl-2蛋白基因表达明显降低,Bax蛋白基因表达明显升高。结论:白花蛇舌草和半枝莲微粉可抑制H22瘤体生长,且下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达。     

白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍对小鼠H22肝癌细胞周期及凋亡的影响

目的:通过研究白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍对小鼠H22肝癌细胞周期及凋亡的影响,初步探讨其抗H22肝癌的作用机制。方法:昆明种小鼠50只,接种H22细胞24 h后,随机分为模型对照组,白花蛇舌草和半枝莲普通粉15.6 g·kg-1组,白花蛇舌草和半枝莲微粉低、中、高剂量(7.8,11.7,15.6 g·kg-1)组5组。ig,模型组给予生理盐水ig,10 d后,流式细胞术观察药物对小鼠移植性肿瘤H22肝癌细胞周期、凋亡率、细胞增殖指数(PI)的影响。结果:白花蛇舌草和半枝莲微粉15.6 g·kg-1剂量组G0/G1细胞百分比,细胞增殖指数(PI)及凋亡指数(AI)分别为(58.72±6.62)%,(41.28±6.62)%,(36.11±4.83)%(n=10),与模型对照组(27.48±1.75)%,(72.52±1.75)%,(13.72±4.56)%(n=10)相比,有显著差异;与普通粉组(43.24±4.30)%,(56.76±4.30)%,(25.41±4.00)%(n=10)相比,也有统计学差异(P<0.05)。结论:白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍能够抑制小鼠H22肝癌移植瘤的生长,其机制可能与阻滞细胞于G1→S期,促进肿瘤细胞凋亡,减少增殖有关。     

TUNEL法检测白花蛇舌草-半枝莲抑制S_(180)荷瘤小鼠肿瘤生长的实验研究

目的探讨白花蛇舌草-半枝莲对S_(180)荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法采用体外造模的方法,称取瘤重、胸腺、脾脏重量观察白花蛇舌草-半枝莲对S_(180)实体瘤生长抑制及免疫功能的影响;采用TUNEL细胞凋亡显色法,检测白花蛇舌草-半枝莲对S_(180)肿瘤组织凋亡的影响。结果白花蛇舌草-半枝莲高剂量组平均抑瘤率达到49.00%,肿瘤组织细胞凋亡指数达到70.42%;白花蛇舌草-半枝莲给药组脾指数与阴性对照组比较(P0.05),与阳性对照组(环磷酰胺)比较(P0.01)。结论白花蛇舌草-半枝莲能抑制S_(180)荷瘤小鼠肿瘤的生长,肿瘤组织中细胞的死亡可能与药物的细胞毒作用有关,而药物本身对机体免疫器官的应答反应具有提高作用。     

白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤细胞凋亡的影响

目的 观察白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤小鼠瘤组织细胞凋亡的影响.方法 以经过白花蛇舌草和党参处理后的小鼠活体腹水H22肝癌细胞免疫小鼠,用HSP70单抗封闭后分为白花蛇舌草未封闭组与封闭组、党参未封闭组与封闭组以及空白对照组,共5组,每组10只,然后再以培养的H22肝癌细胞攻击小鼠形成移植瘤;采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法原位检测移植瘤小鼠瘤组织细胞凋亡的情况.结果 白花蛇舌草组移植瘤小鼠瘤组织细胞核中可见较多棕褐色阳性颗粒,与党参组相比,细胞凋亡数及染色强度明显增多、增强;白花蛇舌草及党参组细胞凋亡的情况与空白对照组比较,差异均具有显著性,尤以白花蛇舌草组更为明显.尽管白花蛇舌草和党参未封闭组与封闭组组间细胞凋亡的差异并无显著性,但白花蛇舌草未封闭组较封闭组具有凋亡数增多和染色强度增强的趋势.结论 白花蛇舌草可能通过诱导H22肝癌细胞移植瘤小鼠瘤组织HSP70表达,在一定程度上促进肝癌细胞凋亡而达到抗肿瘤的作用.     

白花蛇舌草对肝癌细胞移植瘤HSP70及P16表达的影响

目的 观察白花蛇舌草对H22肝癌细胞移植瘤组织HSP70及P16抑癌基因蛋白表达的影响.方法 将经中药处理后的H22肝癌细胞免疫小鼠,以HSP70单抗封闭后分为白花蛇舌草未封闭、封闭组,党参未封闭、封闭组及RPMI-1640空白对照组,共5组,然后再以培养的H22肝癌细胞攻击小鼠形成移植瘤.免疫组化标记法检测各组小鼠移植瘤组织HSP70及P16抑癌基因蛋白的表达.结果 白花蛇舌草及党参未封闭组HSP70蛋白的表达上调,尤以白花蛇舌草组上调较为明显,与两药封闭组及空白对照组之间比较,具有显著性差异.白花蛇舌草及党参未封闭组、封闭组P16抑癌基因蛋白的表达均上调,与空白对照组比较,差异均具有显著性;白花蛇舌草上调P16抑癌基因蛋白的作用强于党参,但两药未封闭与封闭组之间比较,并无显著性差异.结论 白花蛇舌草可能是通过诱导H22肝癌细胞移植瘤组织HSP70的表达,提高其免疫原性而达到抗肿瘤的作用.白花蛇舌草及党参上调P16抑癌基因蛋白表达的作用似乎与HSP70的诱导没有直接联系.     

白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤的干预作用

目的观察白花蛇舌草诱导HSP7。表达对H22肝癌细胞移植瘤小鼠病理改变及T细胞亚群的影响。方法将中药处理后的H22肝癌细胞免疫小鼠采用HSP70单抗封闭技术分为白花蛇舌草未封闭、封闭，党参未封闭、封闭及RPMI-1640空白对照共5组，观察各组移植瘤小鼠瘤组织、胸腺及脾脏的病理改变及外周血CD4^＋、CD8^＋表达情况。结果白花蛇舌草未封闭组肿瘤组织坏死较为明显，胸腺皮质及脾脏白髓增厚，可见大量巨噬细胞；白花蛇舌草封闭组，党参未封闭及封闭组肿瘤组织的坏死、胸腺及脾脏的病理改变与空白对照组比较除脾脏可见少量巨噬细胞外，未见其他明显不同。白花蛇舌草未封闭、封闭和党参未封闭、封闭组CD3^＋的表达均较空白对照组增高；与空白对照组比较，白花蛇舌草未封闭组CD8^＋、封闭组CD4^＋表达明显上调。党参未封闭及封闭组CD4^＋、CD8^＋表达与空白对照组比较也有所增高，但差异无显著性意义。结论经白花蛇舌草处理的H22肝癌细胞能一定程度提高小鼠对同种移植瘤的主动免疫抗瘤作用，其机理可能与诱导肝癌细胞HSP7。表达，增强其免疫原性有关。     

白花蛇舌草对肝癌H_(22)荷瘤小鼠抑瘤作用的研究

目的:探讨不同剂量白花蛇舌草对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用.方法:观察不同剂量白花蛇舌草对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后体重变化等指标的影响.结果:不同剂量白花蛇舌草的抑瘤作用与模型组比较具有显著性差异(P<0.05);白花蛇舌草与DDP合用组与单用DDP组比较有显著性差异(P<0.05).结论:白花蛇舌草能有效地抑制H22肿瘤生长,并能显著加强化疗药DDP的抑瘤效果.     

白花蛇舌草、半枝莲及其药对配伍对人胰腺癌Panc28细胞及人肝癌Bel7402细胞葡萄糖摄取能力及乳酸水平的影响

目的探讨白花蛇舌草、半枝莲及其药对组合抗肿瘤作用及可能机制。方法将人胰腺癌Panc28细胞接种于BALB/c雌性小鼠腋部皮下,当皮下移植瘤长到约100mm~3后开始给药,以注射用环磷酰胺(50mg/kg)为阳性对照,白花蛇舌草、半枝莲、白花蛇舌草-半枝莲药对浓缩液各200mg/kg腹腔注射,隔日1次,共8次,隔日测量小鼠肿瘤体积及体重。取对数生长期的Panc28和人肝癌Bel7402细胞培养,分为对照组、白花蛇舌草组、半枝莲组、药对组,除对照组外,其余各组分别加入不同浓度(400、200、 100、50、25μg/ml)的白花蛇舌草单煎浓缩液、半枝莲单煎浓缩液、白花蛇舌草-半枝莲混煎浓缩液作用48h,检测不同浓度干预下细胞抑制率并计算半数抑制浓度(IC_(50))。观察终浓度为50μg/ml白花蛇舌草单煎浓缩液、半枝莲单煎浓缩液、白花蛇舌草-半枝莲混煎浓缩液处理24h后上清液中相对葡萄糖含量和乳酸含量;培养48h后丙酮酸激酶1(PKM1)、丙酮酸激酶2(PKM2)蛋白表达。结果药对组和阳性对照组小鼠移植瘤体积均小于白花蛇舌草、半枝莲组(P0.05);各药物对小鼠体重无影响(P0.05)。与白花蛇舌草组和半枝莲组比较,药对组Panc28细胞及Bel7402细胞的IC_(50)降低,相对葡萄糖摄取量和乳酸水平明显降低(P0.05),药对组Panc28细胞及Bel7402细胞中PKM1蛋白表达升高,PKM2蛋白表达降低(P0. 05)。结论白花蛇舌草-半枝莲药对可抑制肿瘤生长,其机制可能与抑制肿瘤细胞糖酵解有关。     

白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤T淋巴细胞的影响

目的观察白花蛇舌草对H22肝癌细胞移植瘤鼠瘤体T淋巴细胞亚群的影响。方法将中药处理后的H22肝癌细胞,采用HSP70单抗封闭技术分为白花蛇舌草和党参未封闭、封闭及RPMI-1640空白对照共5组;观察各组CD4+、CD8+T淋巴细胞表达情况。结果与空白对照组比较,白花蛇舌草未封闭组CD8+、封闭组CD4+表达明显上调;党参封闭组CD4+表达也明显上调;与白花蛇舌草封闭组比较,白花蛇舌草未封闭组CD8+T淋巴细胞表达明显上调。结论白花蛇舌草诱导恶性肿瘤瘤体HSP70的高表达,增强机体对肿瘤的免疫作用,其机理可能与提高瘤体CD4+、CD8+CTL表达有关。     

白花蛇舌草抑制肝癌H22小鼠淋巴管转移的实验研究

目的:观察白花蛇舌草对小鼠肝癌淋巴管转移的影响。方法:在小鼠右下肢爪垫内侧皮下注射接种腹水型肝癌H22瘤株,复制淋巴管转移模型。将模型小鼠随机分为5组,空白组每天灌生理盐水,大、中、小剂量组每天灌白花蛇舌草水煎液,对照组给予环磷酰胺腹腔注射。观察小鼠体质量、免疫器官、肺部转移率、爪垫移植瘤、淋巴结转移瘤等指标变化。结果:白花蛇舌草作用组的小鼠,体质量和免疫器官胸腺质量明显增长,肺部瘤结节数和肺部转移瘤生长指数均下降,且淋巴结转移数明显减少。结论:白花蛇舌草对H22肝癌淋巴管转移有一定抑制作用。     

抑癌丸抑制小鼠移植性肿瘤肝癌H22生长及对PCNA的表达影响

目的:探讨抑癌丸对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的作用机制.方法:将带有H22小鼠分成4组,给药几天后,根据瘤重计算抑瘤率,用免疫组化SP法计算PCNA阳性细胞数.结果:以对照组为基数,大剂量组对小鼠移植性肿瘤H22有较明显抑制率(P＜0.05),程度不同的PCNA阳性细胞数的表达均低于对照组.结论:抑癌丸对小鼠移植性肿瘤肝癌H22的生长具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制增殖细胞核抗原PCNA的表达有关.     

白花蛇舌草对5-Fu的增效减毒作用研究

目的 探讨白花蛇舌草对化疗药物5-Fu抗小鼠H22肝癌的增效减毒作用.方法 建立小鼠体内移植性肝癌模型,24 h后随机分成荷瘤对照组、5-Fu组、白花蛇舌草高、中剂量联合5-Fu组.给药10 d,进行抑瘤率计算,脾脏、胸腺重量、NK细胞活性、T淋巴细胞增殖能力,小肠组织超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力和丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)含量等的检测.结果 白花蛇舌草可提高5-Fu对小鼠肝癌H22的抑瘤率,对抗化疗药物所致脾脏、胸腺萎缩,降低化疗小鼠小肠MDA的含量,升高小肠SOD的活力,同时还能增强化疗荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力和自然杀伤细胞(NK)活性(P＜0.01或P＜0.05).结论 白花蛇舌草对化疗药物5-Fu抗小鼠H22肝癌具有增效减毒的作用.     

白花蛇舌草抗肝癌H22小鼠血道转移的实验研究

目的 观察白花蛇舌草对小鼠肝癌血道转移的影响.方法 在小鼠尾静脉接种腹水型肝癌H22瘤株,复制血道转移模型,观察小鼠体质量、免疫器官、肺部转移率等指标变化.结果 白花蛇舌草作用组的小鼠,肺重量和肺部转移结节数较造模组明显减少,体质量和免疫器官重量有较明显增加.结论 白花蛇舌草对H22肝癌血道转移有一定的抑制作用.     

中药白花蛇舌草提取物对人体癌细胞及小鼠实体瘤的抑制作用研究

目的探讨中药白花蛇舌草提取物(HD-1)对人体癌细胞及小鼠实体瘤的抑制作用。方法对人体癌细胞采用MTT法进行体外实验,检测白花蛇舌草提取物HD-1对人肝癌细胞HepG2和人直结肠癌细胞株HCTI 16生长的抑制作用;对S180实体瘤小鼠模型进行体内实验,对比高、低剂量的白花蛇舌草提取物HD-1对荷瘤小鼠体质量、抑瘤率、胸腺指数、脾指数等指标的影响。结果体外实验显示,中药白花蛇舌草提取物对HepG2和HCTI16的抑制率和给药浓度、药物作用时间相关。体内实验显示,与模型对照组相比,高HD-1组、低HD-1组瘤质量均减轻,抑制率分别为13.28%,26.47%,脾脏指数明显升高(P0.05)。CTX组与CTX+HD-1组比较,小鼠胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数、肺脏指数均有显著性差异(P均0.05)。结论中药白花蛇舌草提取物体外能够明显抑制人肝癌细胞HepG2和人直结肠癌细胞株HCTI 16的生长,能够明显抑制小鼠体内实体瘤的生长。     

半枝莲抗肝癌H22小鼠淋巴道转移的实验研究

目的:观察半枝莲对小鼠肝癌淋巴道转移的影响。方法:在小鼠右下肢爪垫内侧皮下注射接种腹水型肝癌H22瘤株,复制淋巴道转移模型,观察小鼠实体瘤抑瘤率、肺部转移率、淋巴结转移情况等得指标变化。结果:半枝莲作用组的小鼠,肺部转移结节数较造模组明显减少,抑瘤率有较明显的增加,且淋巴结转移数有明显的减少。结论:半枝莲对H22肝癌淋巴道转移有一定的抑制作用。     

猕猴桃根多糖抗肿瘤注射剂小鼠体内抑瘤机制

目的:探寻猕猴桃根多糖抗肿瘤注射剂抑瘤作用机制。方法:采用配伍组实验设计研究方法,对采用不同剂量的用药组和对照组小鼠抑瘤率及增殖细胞核抗原(PCNA)表达进行统计分析,同时应用电镜对各组肿瘤细胞微结构进行观察。结果:猕猴桃根多糖抗肿瘤注射剂对H22肝癌细胞株呈现良好的抑制效果,中剂量组抑瘤率为68.5%,相应PCNA表达率51.20%,效果最佳。电镜显示猕猴桃根多糖抗肿瘤注射剂各实验组肿瘤细胞均出现凋亡现象,肿瘤细胞线粒体肿胀,并出现细胞胞浆内存在空泡等细胞中毒现象。结论:猕猴桃根多糖抗肿瘤注射剂对肝癌具有一定抑制作用,其机制可能是通过抑制PCNA来减缓肿瘤细胞增殖,同时对肿瘤细胞线粒体产生毒性作用。     

白花蛇舌草对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的：探讨不同剂量白花蛇舌草对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法：观察不同剂量白花蛇舌草对S180荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。结果：不同剂量白花蛇舌草与对照组比较,具有显著性差异（P〈0.05）;白花蛇舌草与CTX合用组与单用CTX组比较,有显著性差异（P〈0.05）。结论：白花蛇舌草能有效地抑制S180肿瘤生长,并能显著加强化疗药CTX的抑瘤效果。     

珍珠菜总黄酮苷的抗肿瘤作用及机制研究

目的研究珍珠菜总黄酮苷(ZTF)的抗肿瘤作用及其机制。方法通过体内抑瘤试验,考察了ZTF对小鼠肝癌H22的影响;通过体外抑瘤试验,考察了ZTF对人白血病HL-60、K562细胞增殖的影响。并同时考察了ZTF对H22小鼠实体肿瘤组织PCNA表达的影响。结果ZTF对HL-60及K562细胞有明显的增殖抑制作用,ZTF400mg/kg对肝癌H22实体瘤有明显的抑制作用,抑瘤率在30%以上。ZTF可明显下调小鼠肝癌H22肿瘤组织中PCNA的阳性表达,其抑制强度亦呈剂量依赖性趋势。结论ZTF为珍珠菜的抗肿瘤作用有效部位,在体内外均具有一定的抗肿瘤活性,其机制可能是通过下调肿瘤细胞PCNA的表达,干扰肿瘤细胞DNA的合成。     

白花蛇舌草抑制Lewis肺癌小鼠自发转移的实验研究

目的:观察白花蛇舌草对Lewis肺癌小鼠自发转移的影响.方法:在C57BL小鼠右侧腋下皮下注射接种肺癌Lewis瘤细胞悬液,复制自发转移模型,观察小鼠体重变化、实体瘤生长情况、肺转移瘤生长情况、免疫器官指数等指标变化.结果:白花蛇舌草作用组的小鼠,小鼠生活质量得到明显改善,免疫器官指数、抑瘤率明显增加,肺部转移结节数较空白组明显减少.结论:白花蛇舌草可抑制Lewis肺癌小鼠自发转移.